REPUBLICA BOLIVARIANA DE VENEZUELA

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL SIMON RODRIGUEZ

DECANATO DE POSGRADO
NUCLEO REGIONAL DE EDUCACION AVANZADA
MAESTRIA EN BIOTECNOLOGIA ALIMENTARIA

EVALUACION DE LOS PARÁMETROS CINÉTICOS DE LA ECUACIÓN DE

MONOD

FACILITADOR: MAESTRANTES:

Dr. Sánchez Font Ing. Ortiz Daniel

Ing. Gutiérrez Barmen

Ing. Rodríguez Carlos

Ing. Ramírez Imeck

Abril, 2015
 El crecimiento celular es el resultado de numerosas interacciones entre
reacciones bioquímicas y fenómenos de transporte con múltiples fases y sistemas
multicomponentes. La mezcla heterogénea de células jóvenes y viejas
experimenta durante el proceso de crecimiento un cambio continuo mientras se
adapta a un medio ambiente cuyas condiciones físicas y químicas varían
permanentemente, a causa de la imposibilidad para modelar exactamente la
cinética de crecimiento, deben hacerse algunas suposiciones con el propósito de
obtener modelos simples útiles para el diseño y operación de bioreactores y la
predicción de su comportamiento. El más sencillo es un modelo no estructurado y
distribuido basado en las siguientes suposiciones:

 Las células pueden ser representadas por un componente simple tal como
masa celular, número de células, o la concentración de proteínas, ADN
(ácido desoxirribonucléico) o ARN (ácido ribonuc1éico).
 La población celular esta distribuida uniformemente. La suspensión de
células es homogénea, se ignora la naturaleza heterogénea de las células y
la concentración celular se expresa como masa de células secas por unidad
de volumen.
 El medio se formula de manera que solo un componente sea limitante de la
velocidad de reacción. Los demás componentes están presentes en
concentraciones lo suficientemente altas para evitar el efecto de cambios
pequeños sobre la velocidad de reacción.
 El biorreactor se controla para garantizar un nivel constante de condiciones
ambientales tales como pH, temperatura y concentración de oxígeno
disuelto.

El modelo de Monod describe la interacción entre el crecimiento de

microorganismos en un cultivo por lotes y la utilización del sustrato limitativo del
crecimiento en aquellos sistemas donde prácticamente todo el sustrato es
transformado en biomasa:

Donde, YX/S : factor de rendimiento de sustrato en producto, (g células).(g

sustrato )-1; S: concentración del sustrato limitante, g.litro -1; x: concentración de
biomasa, (g células secas / Iitr -1; µM: velocidad específica máxima de crecimiento,
(hora); KS: constante de saturación, g.litro-1; Ks: concentración del sustrato
correspondiente a una velocidad específica de crecimiento igual µM/2 .

dx µ M (S. X)
dt
= Ks+ S

dS dx
dt
= Y−1 .
X /S dt

Los parámetros cinéticos de la ecuación de Monod, no pueden estimarse

con la misma facilidad que los correspondientes al modelo de Michaelis-Menten en
una reacción enzimática. En el caso de una reacción enzimática, hay una
velocidad inicial de reacción medida en función de la concentración de sustrato a
partir de una serie de varios ensayos por lotes. En un cultivo de microorganismos,
la velocidad inicial de reacción siempre es cero por la necesidad de una fase
previa de adaptación durante la cual no se aplica la ecuación de Monod. Además,
estas ecuaciones, aunque similares, son diferentes:

Los valores de los parámetros µM y K s, son obtenidos a partir de las

siguientes relaciones lineales, deducidas de la ecuación de Monod, una vez
conocidos los valores de la velocidad de crecimiento de biomasa r x de la velocidad
de consumo de sustrato rs:

Lineweaver-Burk:

1
= 1 + Ks * 1S
µ µM µM
 La representación gráfica de 1/µ vs 1/S, en el caso de microorganismos que
se comportan de acuerdo con el modelo de Monod, corresponde a una línea recta,
cuyo intercepto es 1/ µM y cuya pendiente es KS /µM. La evaluación de µM y Ks,
por el método de Lineweaver-Burk depende las mediciones realizadas a bajas
concentraciones de sustrato. Si se considera que el valor de 1/µ tiende a infinito a
medida que la concentración de sustrato disminuye, los puntos correspondientes a
estos valores afectan la pendiente y el intercepto.

Tabla Nº 1. Resultados del Crecimiento de una población microbiana heterogénea

en efluente de excreta de cerdos: Consumo de sustrato (DQO) Y Producción de
biomasa en el tiempo:

Tiempo( Hrs) Biomasa DQO(mg/L)

( micromoles)
0 0,185 13,600
4 0,190 13,400
8 0,220 12,500
12 0,410 10,800
16 0,74 8,800
20 1,270 6,700
24 1,300 3,800
28 2,100 2,200
32 3,100 2,000
36 4,030 1,900
40 4,600 1,850
 Tabla Nº2.

Tiempo( Hrs) Concentración

de sustrato
( mg/L)
0 13,6
4 13,4
8 12,5
12 10,8
16 8,8
20 6,7
24 3,8
28 2,2
32 2,0
36 1,9
40 1,85

CRECIMIENTO DE UNA POBLACION MICROBIANA HETEROGENEA EN

EFLUENTE DE EXCRETA DE CERDOS
DQO VS TIEMPO

16

14

12

10
DQ0(mg/L)

0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45

t( h)

Grafico Nº 1. Representación de consumo de sustrato en función del tiempo de

una población microbiana heterogénea en efluente de excreta de cerdos.
 Tabla Nº 3.

Tiempo ( Hrs) Biomasa

( Micromoles)
0 0,185
4 0,19
8 0,22
12 0,41
16 0,74
20 1,27
24 1,3
28 2,1
32 3,1
36 4,03
40 4,6

CRECIMIENTO DE UNA POBLACION MICROBIANA HETEROGENEA EN

EFLUENTE DE EXCRETA DE CERDOS
Biomasa Vs Tiempo

5
4.5
4
Biomasa( micromoles)

3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45

t(h)

Grafico Nº 2. Representación de Producción de biomasa en función del tiempo

de una población microbiana heterogénea en efluente de excreta de cerdos.
Tabla Nº 4. Ajuste de los resultados según Cinética de Monod.

Tiempo Biomasa DQO(mg/L) dt dx µ 1/µ 1/S

( Hrs) ( micromoles) dt
0 0,185 13,600 4 1,25.10-3 6,75.10-3 148,1 0,0735
5
4 0,190 13,400 4 7,5.10-3 0,0395 25,32 0,0746
8 0,220 12,500 4 0,0475 0,216 4,63 0,08
12 0,410 10,800 4 0,0825 0,2012 4,97 0,093
16 0,74 8,800 4 0,1325 0,18 4,46 0,114
20 1,270 6,700 4 7,5.10-3 5,9.10-3 169,4 0,15
9
24 1,300 3,800 4 0,2 0,154 6,49 0,26
28 2,100 2,200 4 0,25 0,12 8,33 0,45
32 3,100 2,000 4 0,2325 0,075 13,33 0,5
36 4,030 1,900 4 0,1425 0,035 28,57 0,53
40 4,600 1,850 4

Velocida de produccion de biomasa( dx/dt) Vs concentracion de

sustrato(S)
0.25
Velocidad de produccion de biomasa

0.2 f(x) = 0.07 ln(x) + 0.03

R² = 0.82
0.15

0.1
( micromoles/h)

0.05

0
0 2 4 6 8 10 12
Concentracion de sustrato de sustrato ( mg/L)
 dx
Grafico Nº 3. Representación de velocidad de producción de biomas (
) en
dt
función de la concentración de sustrato(S) de una población microbiana
heterogénea en efluente de excreta de cerdos.

Tabla Nº5

Concentraci
ón de
sustrato(mg/l
µ )
0,216 12,5
0,2012 10,8
0,18 8,8
0,154 3,8
0,12 2,2

Velocidad de crecimiento vs concentracion de sustrato

0.25

0.2 f(x) = 0.05 ln(x) + 0.08

R² = 0.97
0.15
µ ( h-1)

0.1

0.05

0
0 2 4 6 8 10 12 14
S ( mg/L)

Grafico Nº4. Representación grafica de la velocidad de crecimiento en función de

la concentración de sustrato de una población microbiana heterogénea en efluente
de excreta de cerdos.
Tabla Nº 4. Datos seleccionados a partir de la tabla Nº 3 para el ajuste lineal de la
cinética de crecimiento.

1/S 1/µ
0,216 4,63
0,2012 4,97
0,114 4,46
0,26 6,49
0,45 8,33
0,5 13,33

Velocidad de crecimiento Vs Concentracion de

sustrato
14
12
10 f(x) = 20.53 x + 1.08
R² = 0.83 1/µ Max
8
1/µ

6
4
2
0
0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45 0.5 0.55
1/S

-1/KS = -0.45

Gráfico Nº 5. Representación de la velocidad de crecimiento en función de

la concentración de sustrato de una población microbiana heterogénea en efluente
de excreta de cerdos. Ajuste lineal según Lineweaver-Burk:
Según grafico:

Intercepto con eje Y = 1/µMax = 1,0762 , entonces µMax= 0,93 h-1

Intercepto con eje x = - 1/ Ks = -0,45 , entonces Ks= 2,22 mg/L