DETERMINACIÓN DE SALMONELLA EN MUESTRAS DE ALIMENTOS

1. ENRIQUECIMIENTO NO SELECTIVO

Dejar en reposo por

Pesar 25 g en Homogenizar la una hora a
condiciones de muestra con 225 temperatura
asepsia mL de Caldo ambiente e incubar
Lactosado o a 35°C por 24 ± 2 h
Agua Peptona
Bufferada

2. ENRIQUECIMIENTO SELECTIVO
Incube RV medium 24 ± 2 h at 42 ±
Transferir 0.1 ml del cultivo 0.2°C (Baño termostático). Incube
a 10 ml de caldo caldo TT 24 ± 2 h at 43 ± 0.2°C (Baño
Rappaport-Vassiliadis (RV) termostático).
y y 1 ml del cultivo a 10
mL de Caldo Tetrathionato En alimentos con baja carga
(TT) microbiana Incube TT broth 24 ± 2 h at
35 ± 2.0°C.

3. AISLAMIENTO EN AGARES SELECTIVOS

Siembre con asa bacteriológica de los cultivos de RV y TT en Agar Xilosa

Lisina Desoxicolato (XLD), Hektoen Enteric (HEA) y Bismuto Sulfito (BSA)
e incube por 24 ± 2 h a 35°C, si no hay crecimiento en BSA reincube por
24 h adicionales.

XLD HEA BSA XLD HEA BSA

XLD: Colonias rosadas con o sin centro negro o, totalmente negras

HEA: Colonias verde azuladas o verdes con o sin centro negro.
BSA: Colonias cafés, grises, pueden presentar brillo metálico. Medio
puede tornarse negro.

4. PRUEBAS BIOQUÍMICAS: SIEMBRA EN AGARES DIFERENCIALES

TSI, fondo amarillo, en la superficie del

Seleccionar al menos 2
colonias típicas por caja y
siembre por estría y picadura
en tubos con agar Hierro
Triple Azúcar (TSI) y agar
Lisina Hierro (LIA). Incube a
35°C por 24 ± 2 h.
medio color rojo más intenso. Puede
haber producción de gas y ácido
sulfhídrico.
LIA, se intensifica el color púrpura en
todo el tubo. Producción de ácido
sulfhídrico (ennegrecimiento a lo largo
de la punción).

2. PRUEBAS BIOQUIMICAS Y SEROLOGICAS