TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS

Ninfa Rosa Gámez Navarro

Universidad Popular del Cesar; asignatura bacteriología

El apoyo por el laboratorio para el diagnóstico de las enfermedades autoinmunes consiste en

un gran número de técnicas que permiten tanto identificar como confirmar el o los
antígenos(s) específicos reconocidos. Además, este tipo de técnicas han evolucionado de
manera importante en las últimas décadas, ya que se han desarrollado pruebas con mayor
especificidad y sensibilidad. Entre las técnicas utilizadas se encuentran: la
inmunofluorescencia, la inmunofluorescencia indirecta (IFI), la fluorescencia, el
microscopio de Epifluorescencia, el microscopio confocal.
La inmunofluorescencia es una técnica de inmunomarcación de antígenos o proteínas. Hace
uso de anticuerpos unidos a una sustancia fluorescente (fluorocromo) para demostrar la
presencia de una determinada molécula.
La inmunofluorescencia indirecta (IFI) es una de las técnicas más utilizadas en los estudios
de autoinmunidad debido a su fácil manejo y estandarización. La técnica se basa en el
reconocimiento de los anticuerpos que reconocen estructuras antigénicas celulares nativas.
La interacción se evidencia por medio de un anticuerpo antiinmunoglobulina humana,
producido en conejo, cabra o cobayo, dirigido contra las fracciones constantes (Fc) de las
inmunoglobulinas IgG, IgA y/o IgM. Este anticuerpo antiinmunoglobulina humano está
conjugado o acoplado a un fluoróforo.
La fluorescencia es un proceso de emisión en el cual las moléculas son excitadas por la
absorción de radiación electromagnética. El fenómeno de la fluorescencia se caracteriza por
un proceso de absorción de una radiación pasando la molécula a un estado excitado, el que
para relajarse puede transferir la energía como calor o bien emitiendo radiación a una mayor
longitud de onda.
El microscopio de Epifluorescencia utiliza una fuente de luz que comprende una longitud
de onda de entre 380 y 780 nm, esta luz pasa por filtros que permiten el paso de la luz
perteneciente a la longitud de onda que nos interesa, la luz incide mediante un espejo dicroico
que proyectara la luz hacia donde se encuentra la preparación para así lograr visualizar el
fluorocromo utilizado en la preparación.
El microscopio confocal emplea una técnica óptica de imagen para incrementar el contraste
y/o reconstruir imágenes tridimensionales utilizando un "pinhole" espacial para eliminar la
luz desenfocada o destellos de la lente en especímenes que son más gruesos que el plano
focal.
Referencia bibliográfica: Diego F. Hernández Ramírez y Javier Cabiedes. (2010). Técnicas
inmunológicas que apoyan el diagnóstico de las enfermedades autoinmunes.
Técnicas inmunológicas | Inmunofluorescencia. (2020).