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RADIOINMUNOANLISIS (RIA) > Marcadores: radioistopos (cuantificar en contador de centelleo) Ventajas: muy sensible, rpido y fcil > Desventajas:

instalaciones costosas, corta vida media de istopos. > > a) Radioinmunoanlisis directo o RIA competitivo: Se emplea Ag marcado que es desplazado por el Ag no marcado de la muestra. > > b) Radioinmunoanlisis indirecto o RIA no competitivo: Se utiliza un Ac anti- inmunoglobulina marcado con radiactividad. Ej. Se utiliza para medir IgE especficas de Ag en animales alrgicos. > > mtodo inmunologico muy sensible y especifico para cuantificar la concentracion. de un antigeno en una solucin, a partir de un anticuerpo especifico para el antigeno que esta marcado con radioactividad. > En general, se usan dos anticuerpos especificos frente al antgeno. El primero no se marca, pero va ligado a un soporte solido, donde une e inmoviliza el antigeno cuya cincentracion pretende determinarse. La cantidad del segundo anticuerpo ya marcado que se fije al antigeno inmovilizado, segun las mediciones ofrecidas por los detectores. la desintegracion radioactiva, es proporcional a la concentracion del antigeno en la solucion examinada. > > IFA Inmunofluorescencia > Tecnica en la que se detecta una molecula mediante el uso de un anticuerpo ligado a un marcador fluorescente. por ejemplo, en la microscopia de inmunofluorescencia, las celulas que expresan un antigeno de superficie concreto pueden teirse con un anticuerpo conjugado con fluoresceina que sea especifico para ese antigeno, y visualizarse a continuacion mediante un microscopio de fluorescencia. > > WESTERN BLOT > tecnica inmunologica para determinar la presencia de una proteina en una muestra biologica. El metodo entraa la separacion de las proteinas de la muestra biologica. El metodo entraa la separacion de la soroteinas en la muestra por electroforesis, la transferencia de esta serie de proteinas desde el gel de electroforesis a una membrana de sosten por accion de capilar y por ultimo la deteccion de la proteina mediante la union de un anticuerpo especifico para que est marcado con una enzima o con radioactividad. > > ENZIMAINMUNOANALISIS (elisa o eia) > metodo para cuantificar un antigeno inmovilizado sobre una superficie solida mediante el empleo de anticuerpo especifico ligado a una enzima de forma covalente. > la cantidad de anticuerpo que se une al antigeno es proporcional a la cantidad de antigeno presente, y queda determinada por medios espectofotometricos al medir la transformacion de un sustrato transparente en un producto de color a traves de la enzima enlazada.