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Rev. sci. tech. Off. int. Epiz., 1986, 5 (4), 939-958.

Fiebre catarral maligna


W. PLOWRIGHT*

Resumen

: Si bien la fiebre catarral maligna (FCM) suele ser una


enfermedad
espordica,
su incidencia entre los crvidos de cra probablemente
va en
aumento ; en los bovinos, la infeccin associada a los ovinos (FCM-AO)
ha
sin duda disminuido
recientemente.
La enfermedad
derivada del u (FCMD) constituye un problema en Africa en donde los bovinos utilizan los mismos pastos que los us ; en la actualidad tambin se la est registrando
con
mayor frecuencia
en los jardines zoolgicos y ranchos en donde se cran
rumiantes
exticos.
En primer lugar, el autor estudia las manifestaciones
clnicas y la patogenia
de la FCM y seguidamente
expone la epidemiologa
de sus dos formas.
Un
nmero creciente de especies de la familia de Bovidae, y especialmente
de las
subfamilias de Caprinae, Alcelaphinae e Hippotraginae, presentan una infeccin inaparente muy extendida provocada por herpesvirus emparentados
con
los prototipos AHV-1 y AHV-2. Se estudian las circunstancias en las que se
transmiten estos virus de los huspedes reservorios a los huspedes indicadores . El nmero de stos ltimos sigue
aumentando.
Los virus de los alcelafneos son unos gammaherpesvirus
que
presentan
algn parecido con H.saimiriy H. ateles. En los tejidos de animales
infectados por el virus de origen ovino se han puesto en evidencia lneas de clulas
linfoblastoides
que poseen las caractersticas de las clulas NK (clulas matadoras espontneas),
capaces a veces de reproducir la fiebre catarral maligna ;
an no se han identificado de modo inequvoco viriones o antgenos
vricos.
Se exponen brevemente
los mtodos de diagnstico
experimental
de la
FCM. El control de la enfermedad
sigue dependiendo
de la separacin
de
huspedes reservorios y huspedes
indicadores.

PALABRAS CLAVE : Antlope - Control - Diagnstico - Enfermedades de


animales salvajes - Enfermedades de bovinos - Epidemiologa - Herpesvirus
bovino - Lesiones - Patogenia - Sntomas - Virus de la fiebre catarral maligna.
INTRODUCCIN

De las infecciones provocadas por herpesvirus analizadas en este nmero, la fiebre catarral maligna (FCM) es sin duda la menos importante desde un punto de
vista econmico. Es poco frecuente que haya investigadores que publiquen trabajos
sobre una cantidad de casos suficiente como para considerar que se trata de una
epizootia . Es probable que la incidencia de la FCM haya disminuido en algunos
pases europeos a medida que caa en desuso la costumbre tradicional de alojar al
ganado vacuno y al ovino juntos en invierno ; no obstante tambin es probable que
su importancia haya aumentado en los jardines zoolgicos y en las explotaciones
que poseen rumiantes exticos o ciervos domsticos. En Nueva Zelanda, en particular, se ha observado un incremento considerable de la cra de ciervos colorados que

* Whitehill Lodge, Goring-on-Thames, Reading, RG8 OLL, Reino Unido.

940
eran aproximadamente 250 000 en 1983 y que se estima llegarn a alrededor de
750 000 en 1980 (86) ; slo en las propiedades de Texas se considera que hay
aproximadamente 300 000 rumiantes exticos (27). En Africa, los reservorios salvajes de FCM amenazan al ganado de los pastores nmadas o de los granjeros y pueden pertubar los hbitos del pastoreo e incrementar la presin sobre los animales
salvajes que constituyen atracciones tursticas o deportivas sumamente importantes.
Cientficamente, por otra parte, la FCM constituye un reto considerable para
las nuevas tecnologas, en particular cuando se trata de identificar el agente patgeno de la enfermedad asociada a las ovejas y de explicar su epidemiologa, su
patogenia y su inmunologa. Ms an, la evolucin de un grupo especfico de herpesvirus en los antlopes y en el ganado caprino domstico o salvaje en Africa debera constituir un tema fascinante para la investigacin en los prximos aos.
En los ltimos aos ha habido mltiples estudios de diferentes aspectos de la
FCM y no nos proponemos repetir aqu todos los detalles que pueden consultarse
en esos textos (24, 43, 60, 61, 66, 69, 75).
OBSERVACIONES

GENERALES

La fiebre catarral maligna es una entidad clnico-patolgica cuya presencia se ha


sealado en prcticamente todos los pases del mundo capaces de efectuar un diagnstico eficaz ; se debe destacar, por otra parte, que no se ha demostrado an que
sea causada por un agente etiolgico nico, aunque se siguen publicando trabajos
que parten de esa hiptesis (30, 39). Fuera de Africa puede estar asociada a menudo
con un contacto ms menos ntimo entre ovejas supuestamente portadoras y animales de especies sensibles. Muchos investigadores tambin han sealado en Africa
esta enfermedad asociada a las ovejas (AO) (12, 53, 54, 56) ; en ese continente,
sin embargo, se ha comprobado que la mayor parte de los casos se originan en contactos con dos especies de antlopes alcelafneos, el u azul o de barba blanca y
el u negro o de cola blanca {Connochaetes
taurinus y C. gnu respectivamente).
La utilizacin del trmino FCM africana puede as prestarse a equvocos, si
bien tiene la ventaja de ser sucinta ; desde que se aisl el herpesvirus causal en el u
(62) se puede considerar que su descripcin corno derivada del u (D) es correcta y ms informativa ; la expresin asociada al u parece demasiado prudente.
SIGNOS CLNICOS D E LA FCM

En Europa Central se han identificado los signos clsicos de la FCM desde hace
ms de un siglo ; a menudo se la design con el trmino de Kopfkrankheit ,
enfermadad espordica, no contagiosa, que se debe distinguir de la peste bovina o
tifus bovino (10, 87). La utilizacin de la expresin forma ceflica y ocular
para la mayor parte de los casos en vacunos se origina, al parecer, en un trabajo de
Gtze (15) que tambin describi formas hiperagudas, intestinales y atenuadas de la
enfermedad ; la aparicin de estas formas ha sido descrita a menudo, en particular
en observaciones recientes de la enfermedad en ciervos, as como tambin en el
ganado vacuno y en los rumiantes exticos.
La forma atenuada es una categora en relacin con la cual existen muchas
dudas, en tanto fenmeno natural ; se ha demostrado que unos pocos casos son

941
consecuencia de una infeccin experimental con virus africano (u) (vase 58, 63
por ejemplo). Podemos sealar, al pasar, que el primer buey de las series de transmisin descritas por Mettam (40) present fiebre durante slo un da, despus de la
inoculacin de sangre de u, pero su propia sangre tuvo efectos virulentos en otro
buey que, llamativamente, muri menos de 4 meses despus. Una encuesta limitada
no ofreci ninguna prueba serolgica de la presencia de la infeccin subclnica o
atenuada en el ganado vacuno del rea de Masai, Kenia, rea sta muy expuesta al
u (76).
Es difcil obtener cifras significativas en lo concerniente a la mortalidad en los
focos espontneos de la enfermedad, ya que a menudo se sacrifican algunos animales enfermos ; sin embargo, Pierson y col. (50) describieron un incidente notable en
el que se vieron afectadas y murieron 87 vacas sobre 231 en Colorado, Estados Unidos, mientras por su parte Mar (37) seal una mortalidad de 16,6% en un rebao
de 1000 vacas a lo largo de un perodo de tres meses en California. James y col. (31)
sealaron que la totalidad de las 28 vacas clnicamente afectadas de una granja de
Nueva Zelanda murieron ; conviene pus considerar que todo ndice considerable
de restablecimiento constituye una indicacin o bien de una infeccin concomitante
o bien de un diagnstico errneo. Durante la transmisin seriada de la FCM en el
ganado vacuno inoculado con el herpesvirus del u, el ndice de mortalidad oscil
entre el 94 y el 100% ; la cifra inferior (292 sobre 311) estuvo asociada con una anaplasmosis concomitante en algunos casos, la cual pudo disminuir el nmero de
muertes (56, 58). En lo concerniente al ganado vacuno norteamericano se han
comunicado cifras esencialmente similares, aunque incompletas (32).
En el Cuadro I se enumeran las manifestaciones clnicas ms importantes de la
FCM y se aaden comentarios. En diferentes publicaciones (29, 80, 81) se pueden
observar lminas en color muy claras de las lesiones visibles.
CUADRO I

Sntomas clnicos de la fiebre catarral maligna


a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
h)

Fiebre repentina y persistente


Congestin severa, necrosis y erosin de las mucosas nasal y bucal
Descargas serosas, luego mucopurulentas
Congestin de la conjuntiva y de la esclertica ;
opacidad centrpeta de la crnea ; hipopion
Hipertrofia generalizada de los ganglios linfticos, etc.
Temblores musculares (meningo-encefalomielitis)
Diarrea o disentera (especialmente en los ciervos)
Dermatitis e infosura

(a) (e) La fiebre y la linfadenopata en la F C M

En los casos tpicos de forma ceflica y ocular provocados por el virus D,


la pirexia se manifiesta rpidamente, llegando a un mximo de aproximadamente
40,5C a 41C (promedio 40,75C) al tercer o cuarto da de la enfermedad (56). Se
considera a menudo que su inicio constituye un ndice del fin del perodo de incubacin ; sin embargo, algunos observadores tambin consideran corno ndices a la
hipertrofia local o general de los ganglios linfticos o hemolinfticos, que ocasio-

942
nalmente pueden palparse de 1 a 4 das antes de la fiebre en la forma D (11, 53,
56). Sin embargo, otros autores observaron regularmente una hipertrofia de los
ganglios linfticos (52) hasta 5 a 10 das antes de la pirexia, y los signos clnicos prefebriles, incluyendo la linfadenopata, podan durar de 2 a 7 das en el ganado
vacuno norteamericano (32).
Una mnima parte del ganado vacuno experimentalmente infectado con el virus
D mostr una respuesta bifsica, que aparentemente no poda atribuirse a una
infeccin intercurrente ; la primera reaccin se produca habitualmente entre los
das 4 y 7, se prolongaba durante 2 3 das y llegaba a un lmite inferior, que no
superaba los 40C (Plowright, indito). Es probable que esas reacciones estuviesen
relacionadas con una fase de generalizacin an no descrita de la patogenia de la
enfermedad que recuerda, por otra parte, la distribucin bimodal de los tiempos de
reaccin (picos al 3 y al 11 da respectivamente) observada en los conejos utilizados en los Estados Unidos para las series de transmisin del virus AO (71).
e r

En la forma experimental AO se observ un lapso frecuente de 2 3 das antes


del inicio de la linfadenopata (51), mientras que Selman y col. (81) observaron una
hipertrofia de los ganglios de 6 terneros sobre 10 durante los 7 das posteriores a la
infeccin, pese a que el perodo de incubacin fue de por lo menos 20 das.
(b) (c) Congestin, necrosis y erosin de las mucosas superficiales y del hocico

Estos signos fueron observados en las mucosas bucal y nasal en la mayor parte
de los casos provocados por el virus D (32, 52, 56) ; en el Cuadro II figura el
momento de la deteccin inicial de la necrosis bucal y se observa un pico de prevalencia (100%) recin al 6 da de fiebre. En la forma AO natural, la necrosis de las
mucosas se observa con menor frecuencia, o es menos severa en algunos focos del
ganado vacuno (31) o en los ciervos (13, 67), si bien es constante en otros (80). En
la forma experimental AO, la rapidez del desarrollo de lesiones bucales vara en
forma considerable en el ganado vacuno, salvo en el caso de la congestin difusa
precoz (81). En general, el desarrollo de lesiones acentuadas del hocico o de la cavidad bucal o nasal depende de perodos ms prolongados de supervivencia; stas son
ms caractersticas de los casos D y menos evidentes en la enfermedad hiperaguda
o aguda. En forma similar, las descargas mucopurulentas nasales y oculares, juntamente con la salivacin excesiva, son casi invariables en los casos de forma ceflica y ocular , y en cambio tienden a desarrollarse con menor frecuencia en los
casos de menor duracin.
CUADRO I I

Frecuencia y perodo de aparicin de los sntomas clnicos de


FCM-D en ganado vacuno experimental*

Sntomas
clnicos

Opacidad de la
crnea
Necrosis y
erosin bucal
* Segn Plowright, 1964.

Cantidad de
animales

% cumulativo de los animales con lesiones en los


sucesivos das de la enfermedad
1
2
3
4
5
6 2 7

234

25

55

80

90

94

97

116

58

76

91

97

99

100

943
(d) Las lesiones oculares en la FCM

En la mayor parte de los casos de AO y D se observa una congestin de la conjuntiva y de la esclertica, acompaada por una opacidad centrpeta progresiva de
la crnea. La keratitis se acompaa con exudados celulares y fibrinosos en la
cmara anterior una iridociclitis con hipopion. El Cuadro I I muestra el
momento de aparicin de la opacidad de la crnea en ms de 200 casos de la forma
D observados cotidianamente ; la frecuencia no super el 50% hasta el 3 da de
pirexia.
(f) Los sntomas nerviosos de la FCM

En la mayor parte de las especies infectadas por los agentes de D o AO se han


sealado en diferentes momentos signos de afecciones del SNC, como por ejemplo
temblores musculares, incoordinacin, presin en la cabeza, nistagmus, contracciones de las orejas, torticolis e, incluso, un comportamiento agresivo. La meningoencefalomielitis subyacente es uno de los cambios histopatolgicos ms regulares.
Durante la transmisin seriada de los virus D, los sntomas nerviosos son aparentemente menos frecuentes (56).
(g) Diarrea o disentera

Ms recientemente, se han observado estas manifestaciones en el ganado


vacuno, en los ciervos y en los conejos infectados con el agente AO, que evolucionan rpidamente hacia la muerte (13, 37, 38, 46, 67). As, por ejemplo, en una serie
experimental de Colorado (Estados Unidos) se clasific a 8 sobre 16 casos experimentales como predominantemente intestinales , sumados a otros 3 que desarrollaron diarrea (52). Sin embargo, en los ciervos colorados experimentalmente
infectados, la diarrea apareci recin el segundo o tercer da de fiebre y la disentera
aproximadamente 24 horas ms tarde (46). En la enfermedad experimental D la
frecuencia es muy baja, menos del 1% en los casos sin complicaciones (56).
(h) Dermatitis e infosura en la FCM

La relativa frecuencia de lesiones de la piel, de las pezuas y de los cuernos en la


FCM en Europa fue una de las primeras razones que llevaron a considerarla corno
diferente de la snotsiekte sudafricana (40). En un foco de AO en los Estados
Unidos se observ una congestin severa, con exudacin y formacin de escaras
cutneas en la piel de la ubre (37). Sin duda alguna, la dermatitis es poco frecuente
en la forma D ; slo se observaron dos casos entre varios centenares de casos
experimentales en Africa oriental ; ambos eran terneros jvenes, y slo se detect
un caso de infosura (56). En la bibliografa europea ms antigua se seal con
cierta frecuencia tanto una exudacin en el ncleo de los cuernos seguida de la prdida de esos apndices como tambin la infosura. En la mayora de casos de FCMAO experimental y natural se ha observado histopatolgicamente la presencia de
artritis y sinovitis (36), pero generalmente no se sealan los sntomas clnicos asociados.
LA PATOGENIA DE LA FCM

Las tres caractersticas esenciales de la patogenia de la FCM (56, 61) son :


1. Una destruccin de los linfocitos ms pequeos, en particular los de los fol-

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culos germinales de los ganglios linfticos y hemolinfticos y los del timo (14). En
algunos casos se manifiestan reas difusas de necrosis y la cariorexis es acentuada,
juntamente con una activacin macrfaga. Es posible que la necrosis sea un fenmeno tardo, paralelo al inicio de la fiebre, como ocurre con los conejos infectados
de FCM-AO (65, 66).
2. Una proliferacin e infiltracin de grandes clulas linfoblsticas en muchos
tejidos, en particular alrededor de los vasos sanguneos y en las reas dominadas
por los linfocitos T, como las regiones interfoliculares y paracorticales de los ganglios linfticos o los revestimientos periarteriales del bazo. Esta proliferacin de los
linfocitos es progresiva a lo largo del perodo de incubacin, pero es posible, sin
embargo, que no constituya un elemento esencial de la patogenia de la FCM, ya
que su prevencin en los conejos mediante un tratamiento con ciclosporina A no
alter la evolucin fatal de la infeccin (65).
3. Una angiitis que afecta todos los elementos de las paredes de las arterias y
venas. Su distribucin es irregular, en segmentos ; se la observa sobre todo en las
arterias de medianas dimensiones como las que abundan en la cpsula de la glndula suprarrenal, en la red cartida y en las arterias arqueadas de la corteza renal.
A menudo existe una degeneracin fibrinoide de los elementos medianos, con
hipertrofia e infiltracin linfoide de la tnica interna. La oclusin parcial de la luz
vascular es habitual, mientras que la trombosis completa que conduce a un infarto
es relativamente poco habitual. Liggitt y col. (33, 34) proporcionan descripciones
particularmente buenas de las lesiones vasculares.
En la cpsula y en las trabculas de los ganglios linfticos y del bazo, en los tejidos conjuntivos perinodales o adiposos y en la capa muscular lisa de las visceras
huecas se observan modificaciones debidas a infiltraciones y degeneraciones similares a las de los vasos sanguneos. Se observan cambios de los tipos 2 y 3 en la
lamina propria y en las capas ms profundas de muchas superficies de las mucosas
y en la piel, donde estn asociados con la degeneracin y la necrosis de los epitelios
superficiales (35). A menudo estos cambios son predominantes en los tejidos de
soporte de los rganos parenquimatosos, corno el hgado, el rin y los pulmones,
cuyas clulas especializadas pueden presentar degeneracin y necrosis.
Existen cada vez ms pruebas de que estos cambios son fenmenos inmunopatolgicos de mediacin celular, lo cual sera compatible con un perodo de incubacin
prolongado aunque variable, con una viremia prepatente prolongada asociada con
linfocitos y con la ausencia virtual de citopatologa viral, de antgenos o de viriones
en todas esas lesiones.
Las hiptesis que plantean una posible implicacin de la hipersensibilidad ante
los antgenos virales, de reacciones autoinmunes (injerto-husped) o de inmunocomplejos (61, 75) no han sido an demostradas ; sin embargo, los trabajos de Reid
y sus colaboradores, que establecen que la sensibilidad ante la infeccin de la FCM
(AO y D) est asociada con los grandes linfocitos T granulosos que poseen una
actividad citoltica (NK), constituye una hiptesis novedosa y verosmil (65, 66).

EPIDEMIOLOGA

La epidemiologa de ambas formas de la FCM la de AO y la de D es


esencialmente la misma en todo el mundo. La mayor parte de los focos puede rela-

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cionarse con contactos ntimos entre las especies reservorio, ovejas o us, y los
huspedes reveladores. Los animales reservorio no muestran ningn signo clnicopatolgico de infeccin, aunque recientemente se ha sealado la presencia probable
de la FCM en las ovejas (79). Los huspedes reservorio no son capaces de transmitir
infecciones en cualquier momento ; si lo fuesen, la FCM constituira un problema
mucho ms serio. Tambin se puede afirmar con bastante certeza que no se produce
transmisin a travs del contacto entre huspedes reveladores.
a) Enfermedad asociada con las ovejas (FCM-AO)

Despus de prolongadas y a veces duras discusiones acerca del origen de la


FCM, durante la dcada de 1930, finalmente se acept, de manera general, que en
la abrumadora mayora de las granjas en las que se produjeron casos mltiples de
FCM desperdigados a lo largo del tiempo, haban existido contactos directos con
ovejas durante los seis meses anteriores. En esos casos el alejamiento de las ovejas
condujo habitualmente a una desaparicin de la FCM en un lapso de 3-4 meses
(Gtze (16a), con quien se asocia el refrn: ohne Schafe kein Katarrhalfieber ).
Tambin se demostr en forma convincente, al igual que, ms tarde, en otras ocasiones, que la mezcla de ovejas conocidas como portadoras con ganado vacuno
puede conducir a numerosos casos de FCM (12, 15, 17, 54, 83, 84). Otros autores,
como Wyssmann (87, 88) no pudieron demostrar la transmisin de ganado ovino a
ganado vacuno. Wyssmann comprob que en el 83% de las explotaciones afectadas
slo se sealaron casos aislados ; en el 20-25% de esas granjas era imposible que
hubiese habido contactos con ovejas. En Nueva Zelanda el 95% de los casos sealados entre 1974 y 1976 eran animales aislados, comprobndose la asociacin con las
ovejas en el 77% de los casos, y no disponindose de informacin en el 12% (22).
No se ha respondido an a los interrogantes bsicos acerca de la existencia de otros
huspedes adems de las ovejas y, ms an, no ha sido an posible producir casos
tpicos de FCM en el ganado vacuno inoculndolo con material proveniente de ovejas supuestamente portadoras o de otros reservorios caprinos potenciales.
Publicaciones ms recientes han reiterado que la infeccin del ganado vacuno o
de los ciervos se producira con mayor frecuencia durante la estacin de parto de las
ovejas (21, 65, 66, 69), lo cual concuerda con las numerosas observaciones que indican que la mayor incidencia para el ganado vacuno en las zonas templadas se sita
en general entre fines de invierno o principio de primavera y comienzos de verano
(por ej. 50). Otros autores han sealado ms casos en otoo e invierno, como por
ejemplo en Yugoslavia (80), mientras que en Finlandia la mayor parte de los 355
casos observados a lo largo de 5 aos hasta 1949 se produjeron en verano (84). En
Sudfrica la FCM-AO no parece depender de las estaciones (1), mientras que en
Nueva Zelanda la enfermedad en los ciervos es ms frecuente a mediados del
invierno, es decir junio-julio (38, 65), y en el ganado vacuno en septiembre-octubre
(22).
La existencia de numerosas referencias antiguas a casos de la FCM que no
podan relacionarse con contactos directos o indirectos con las ovejas (84, 87, 88)
plantean sin duda alguna una interrogacin acerca de la existencia posible de otros
reservorios ; esta posibilidad parece an ms plausible desde que se ha comprobado
serolgicamente la presencia de una infeccin de FCM en otras especies de la subfamilia Caprinae (64, 27). Las especies positivas ms frecuentes ( 2 0 % ) parecen ser
las variedades ibex (Capra ibex spp.), la oveja mufln (Ovis orientalis), la oveja
berberisca (Ammotragus lervia), markhor (Capra falconeri heptneri) y tahr Hima
laya (Hemitragus jemlahicus), todos de la subfamilia Caprinae, y la gamuza (Rupi-

946
rupicapra)
de la subfamilia Rupicaprinae.
Hasta tanto no se caractericen los
herpesvirus presentes en estas especies no es posible evaluar su significacin.

capra

Igualmente, es necesario aceptar que el contagio intermedio podra desempear


un papel en la transmisin de la FCM del ganado ovino al ganado vacuno o a los
ciervos (67) y existen tambin algunas pruebas de que, excepcionalmente, la infeccin puede transmitirse por contacto a los ciervos sumamente sensibles (38, 71) ; sin
embargo, no existen pruebas convincentes de que esto tambin sea as para el
ganado vacuno (37).
b) FCM derivada del nu (D)
Los ganaderos de Africa han considerado desde hace mucho tiempo a la FCMD (60, 61) como una amenaza. Probablemente, todas las cepas de los agentes
patgenos estudiadas en los antiguos trabajos importantes (11, 40, 53) derivaban
del u y, comparadas con los virus AO, posean la ventaja de ser fcilmente
transmisibles, tanto al ganado vacuno como a los conejos. Salvo en un caso (40) no
haba pruebas de la especie de origen. El aislamiento de un herpesvirus en 5 us
azules sobre un total de 35 en Kenia en 1959-60 demostr el papel de esta especie
como reservorio, confirm la fcil transmisibilidad del agente y mostr su citopatogenicidad limitada y su potencialidad infecciosa estrictamente asociada con las clulas en los cultivos celulares y en los huspedes sanos (62).
Aparentemente, virus similares existiran en todas las poblaciones de us azules
o negros, tanto en Africa (1, 19, 60, 61) como en los zoolgicos (9, 27). Probablemente pequeos grupos de animales ( >10) puedan mantener el virus en forma indefinida, puesto que persiste a largo plazo en por lo menos algunos individuos y que
se ha demostrado la transmisin transplacental (9, 28, 62). Si no estn congenitalmente infectados, los us jvenes adquieren el virus a travs de la transmisin horizontal en los partos anuales, pese a la presencia de anticuerpos maternos neutralizantes. Desarrollan una viremia asociada con leucocitos que es ms frecuente (40%
de positivos) en el segundo mes de vida, que disminuye a 2% hacia fines del primer
ao y que se vuelve muy poco frecuente despus (61). No existen pruebas concluyentes de signos clnicos o de una patologa asociada con virus en los us virmicos, aunque se sugiri que una vascularitis observada en animales de un ao o adultos era similar a la inducida por la FCM (8).
En la regin Masai, en Kenia, la incidencia mxima anual de la FCM-D en el
ganado vacuno es probablemente de 7%, concentrada en los meses de abril a julio,
despus del perodo de parto de los us, que se produce entre febrero y abril. En
Tanzania, el perodo es anterior, aunque comparable ; en cambio en Africa del Sur
no queda claro si la transmisin mxima al ganado vacuno (septiembre a diciembre)
est relacionada con el parto de los us (1). En los rebaos individuales la incidencia de los casos de FCM-D en una nica estacin puede llegar al 13 a 20% de los
animales (1, 56).
Cuando se aloj experimentalmente a terneros us virmicos con ganado
vacuno, desarrollaron FCM despus de perodos de incubacin mximos de 30 a 47
das en 4 casos sobre 5, y de 81 das en el quinto caso (61) : ello corresponde en
forma estrecha con los lapsos de 29, 68 y 82 das antes de la muerte provocada por
FCM de 3 de los 4 banteng (Bos javanicus)
que estuvieron en contacto con us
recin nacidos en el San Diego Wild Animal Park (18). El herpesvirus libre de clulas es excretado ya entre el 1 y 4 da (28, 43), tanto en las secreciones oculares
er

947
corno nasales, y fue recuperado en un caso de las heces (28), pero nunca en la orina
o en la saliva. El ttulo, en particular en los terneros de 6 a 8 semanas, puede ser
10 T C D / m l , probablemente derivado de sitios de replicacin en la crnea y
en la mucosa de los cornetes ; despus de los 3 meses de edad las secreciones contienen anticuerpos neutralizantes, predominantemente IgA, que influyen en la rpida
declinacin de la excrecin de virus y en el cese de la transmisin lateral (43, 61).
3,2

50

La excrecin y la transmisin del virus de la FCM al ganado vacuno por parte


de us adultos se ha producido en condiciones experimentales alojamiento conjunto y exposicin a altas temperaturas (Plowright, indito), pero los intentos de
reproducir el fenmeno fracasaron. Las secreciones orales y nasales del ganado
vacuno infectado poseen indudablemente un poder infeccioso, pero probablemente
en la forma asociada a las clulas (32, 44), y la transmisin por contacto no se produce en esta especie, o es muy poco frecuente (11, 12, 58). Tampoco se observ una
transmisin ciervo a ciervo de la FCM-D (85).
Aunque se suele considerar que el contacto ntimo , en particular en zonas
comunes de pastoreo o en los lugares de alojamiento, es necesario para la transmisin del virus D a partir del husped reservorio, se han sealado muchos casos de
transferencia aparente a travs de alambrados o, incluso, a distancias de hasta
varios centenares de metros, de lo que se deduce que el contacto directo no es esencial (1, 37, 89). La va de entrada del virus es probablemente la zona nasofarngea,
ya que la instilacin intranasal de suspensiones celulares infecciosas o de virus virulentos libres de clulas conduce rpidamente a la infeccin en el ganado vacuno y en
los conejos (61) ; los aerosoles tambin provocan ese resultado. Parece ser, entonces, que la transferencia a travs de corrientes de aire constituye un factor ms probable que el contagio intermedio y la ingestin oral de virus.
c) Otras fuentes potenciales de virus de la FCM

Diferentes trabajos realizados en Africa (61) permitieron comprobar que los


anticuerpos que neutralizan el virus de la FCM-D (herpesvirus 1 de los alcelafneos o AHV-1) no se limitan en absoluto a los us. Frecuentemente, los sueros de
bbalos (Alcelaphus buselaphus), de topis (Damaliscus korrigum) y de oryx beisa
(Oryx beisa callotis) resultaron positivos. Adems, en bbalos y topis que vivan en
libertad se aislaron cepas de herpesvirus serolgicamente aparentadas con AHV-1
(45). Se comprob que una de las cuatro cepas (AHV-2) aisladas en bbalos era
ligeramente diferente, ya que el ttulo de neutralizacin obtenido mediante los sueros de u era ms debil que el correspondiente a la cepa AHV-1. Los virus de bbalos provocaron 3 casos atpicos de FCM en ganado vacuno mientras que los agentes
patgenos aislados en los topis, tambin asociados a clulas, crecan slo en clulas
de topi y no eran infecciosos para los bovinos o los conejos (ver 61). Se han aislado
recientemente virus similares en bbalos del Cabo (Alcelaphus buselaphus caama) y
en topis Jimela (Damaliscus lunatus Jimela) en Estados Unidos (27).
El objetivo fundamental de los estudios africanos era obtener un virus emparentado con la FCM que pudiese inmunizar al ganado vacuno contra el AHV-1, del
mismo modo que el herpesvirus del pavo se utiliza como vacuna contra la enfermedad de Marek ; hasta el presente, sin embargo, no han tenido xito. Una de las consecuencias del inters creciente por la FCM en Estados Unidos, en particular en lo
que toca a los animales de los zoolgicos, ha sido el desarrollo de investigaciones
serolgicas realizadas en diversas especies (26, 27, 64). Los mtodos utilizados
incluan la inmunofluorescencia indirecta, que da una reaccin especfica de

948
grupo para los virus de la FCM pero tambin una reactividad cruzada con
algunos herpesvirus bovinos (25, 61, 75). Los anticuerpos neutralizantes del virus
son los ms discriminantes y los Cuadros III y IV presentan los principales resultados obtenidos mediante su deteccin. Las caractersticas del virus utilizado, las condiciones de exposicin de las mezclas virus-sueros y el sistema de cultivo utilizado
para la prueba varan considerablemente y pueden suscitar algunas anomalas. Sin
duda alguna, se debera estandarizar la metodologa lo antes posible.
El Cuadro III resume los resultados obtenidos hasta el presente para las especies
de la subfamilia de los Alcelaphinae. Dos virus, uno proveniente del u azul, el otro
de un bbalo, han sido designados provisionalmente corno herpesvirus de los alcelafneos 1 y 2 (72). La prueba de una infeccin con virus emparentados con la FCM
existe en por lo menos tres especies del gnero Damaliscus (topi, tsessebe,
blesbok) ; muchos topis posean anticuerpos neutralizantes, incluso cuando no
haban sido expuestos a los us.
CUADRO III

Anticuerpos contra el herpesvirus 1 de los alcelafneos


en la subfamilia de las Alcelaphinae

Especies

Nombre comn

Sueros positivos para los anticuerpos


(extensin del ttulo)

(1)

(2)

(3)

23/23*

111/120
(4-256)

33/54
(2-256)

Connochaetes
taurinus

u azul

Connochaetes
(gnu)

u de cola blanca

Alcelaphus
buselaphus

Bbalo

124/206

Damaliscus
korrigum

Topi

25/62

Damaliscus
lunatus
Damaliscus
dorcas

(4)

4/11
(12-256)

30/46

0/1

9/20
(4-256)

14/22

0/20

Tsessebe o tiang
(Antlope grande)

26/72
(4-16)

7/14
(2-128)

Blesbok

0/3

4/16
(2-6)

* N de positivos/N de animales examinados. Anticuerpos neutralizantes salvo para (4).


(1) Reid y col. (1975), Res. vet. Sci., 18, 269-273. Ver tambin Plowright (57) : 172/181 y Rossiter y col.
(77) : 131/133.
(2) Hamblin y Hedger (19).
(3) Heuschele y col. (27).
(4) Ramsay y col. (64). Resultados de pruebas de IFI solamente, realizadas con sueros diluidos al 1/20.

En la subfamilia de los Hippotraginae (Cuadro IV) existen muchas pruebas de


infeccin con herpesvirus emparentados con la FCM en el Addax y el Oryx spp.,
incluyendo el gemsbok de Africa austral (1) y el orix rabe. En los sueros de 50 orix
de orejas orladas de Kenia se han observado anticuerpos neutralizantes, pero no fue

949
CUADRO I V

Anticuerpos contra el herpesvirus 1 de los alcelafneos


en la subfamilia de las Hippotraginae
Sueros positivos para los anticuerpos
neutralizantes (extensin del ttulo)
Especies

Nombre comn

Oryx gazella
beisa

Beisa orix u
orejas orladas

O. gazella
gazella

Orix cuernos
en cimitarra

O.
O.

(1)

(2)

(3)

(4)

3/3*

1/5
(0-2)

55/102
(2-256)
12/19
(2-48)
30/46
(2-256)

13/16
(4-45)

0/18

leucoryx

Orix arbigo

gazella

Gemsbok

Hippotragus
equinus

Antlope ruano

3/14
(2-6)

0/14

Hippotragus
niger

Antlope negro

33/211
(4-32)

0/15

Addax
nasomaculatus

Addax

33/73
(2-166)

4/23

5/7

5/22
(8-16)

7/7
(128-708)

0/18

Redunca
redunca
(arundinum)
Kobus

defassa

Gamo rojo
Defassa
o gamo de agua

Kobus
ellipsiprymnus

Ringer
gamo de agua

Adenata

Kob ugands

kob

0 14

11/11
(45-1024)
0/12

6/19

* N de p o s i t i v o s / N de animales examinados. Anticuerpos neutralizantes salvo para (4).


(1) Reid y col. (1975), Res. vet. Sci., 18, 269-273.
(2) Heuschele y col. (27).
(3) Hamblin y Hedger (19).
(4) Ramsay y col. (64). Resultados de las pruebas IFI solamente, realizadas con sueros diluidos al 1/20.

posible aislar el virus (41) ; ms recientemente, Heuschele y col. (27) sealaron el


aislamiento de un agente patgeno emparentado con la FCM a partir de un orix
cuernos en cimitarra (O. gazella dammah) en San Diego. Existen pruebas contradictorias para el antlope ruano y el negro (Cuadro IV), pero se ha podido confirmar
recientemente la implicacin de este ltimo (1). Es posible tambin que las especies
de Waterbuck (gamo de agua), reedbuck (gamo rojo), kob, consideradas en algunos
casos corno una subfamilia diferente, los Reduncinae, ms que como una tribu,
sean tambin infectadas, pero algunos investigadores han tropezado con dificultades en lo referente a la citopatogenicidad de los sueros de estas especies. La aparicin de anticuerpos neutralizantes (ttulo bajo) en animales salvajes de familias

950
como Antelopinae et Hippopotamidae (19), como as tambin en muchos animales
de zoolgico (27) requiere investigaciones complementarias.
Debemos destacar que slo los us se los pueden considerarse actualmente corno
una fuente de FCM en los bovinos u otros ungulados exticos. Al parecer, los otros
portadores de virus emparentados con la FCM pueden pastar o incluso convivir con
especies reveladoras sin consecuencia alguna. Tambin se debe tener en cuenta que
toda enfermedad inducida por herpesvirus albergados por especies diferentes al u
puede ser atpica o poco frecuente y puede incluso pasar desapercibida. El problema epidemiolgico y virolgico ms interesante que se plantea es el de saber
como han evolucionado y divergido estos virus en la rica fauna de los bvidos de
Africa subtropical.
d) Las diferentes especies reveladoras del virus de la FCM

Todas las razas de ganado vacuno y de bfalos domsticos son sensibles a la


FCM, cualquiera sea su edad ; algunos datos parecen indicar en Nueva Zelanda
"una mayor incidencia en los bovinos de un ao de edad (22).
Basndose en las publicaciones cada vez ms numerosas, se comprueba que la
cantidad y diversidad de las especies que pueden desarrollar una FCM ms o menos
tpica en sentido clnico-patolgico, se incrementa en forma constante (24, 60, 65).
En el registro de los casos se debe diferenciar, siempre que sea posible, entre los que
derivan probable o seguramente de las especies alcelafneas y los que proceden de
caprinos, especie reservorio, ya que los huspedes reveladores de los agentes patgenos pueden diferir segn los virus. En la actualidad, es relativamente fcil confirmar en laboratorio la presencia de diferentes virus de FCM alcelafneos, mientras
que los virus de los caprinos son an prcticamente imposibles de identificar. En
segundo lugar, si una especie es un husped reservorio supuesto o seguro, parece
poco probable que desarrolle una FCM como respuesta a la infeccin. Por ejemplo,
se ha afirmado en ciertos casos que algunas ovejas haban desarrollado signos de la
enfermedad cuando haban sido infectadas por FCM-AO, y se sealaron casos
naturales (79). Las pruebas nunca fueron convincentes, salvo quizs en el caso de
cuatro corderos inoculados in utero (4). Se han publicado diferentes artculos sobre
la sensibilidad de las ovejas a AHV-1, pero es posible que las diferencias de raza
entre las ovejas o que las vas de inoculacin o de infeccin diferentes expliquen las
discrepancias sealadas, con lo cual su sensibilidad se torna ms plausible (61).
Tambin es sorprendente, por otra parte, que se haya sealado que un orix de Arabia muri de FCM en San Diego (24).
A juzgar por la frecuencia de los casos sealados en los animales de los zoolgicos, las especies ms sensibles a la enfermedad AHV-1 seran probablemente los
bovinos salvajes de Asia (24), Bos javanicus (el banteng), y B. gaurus (el gaur de
India), y tambin los bisontes de Amrica del Norte y de Europa (Bison bison y B.
bonasus). Algunos antlopes africanos, los kudu (Tragelaphus strepsiceros) y los
sitatunga (T. spekei) son sin duda alguna sensibles, al igual que el Nilgai asitico
(Boselaphus tragocamelus). Los Cervidae parecen tambin ms sensibles que los
bovinos al virus de la FCM-AO (65, 69) o al AHV-1. Se han sealado focos importantes de FCM-AO que afectaban a sika, axis, a ciervos del Padre David y a ciervos
colorados, y ulteriormente se aadicron a la lista las especies de los rusa (ciervo
grande), barasingha y corzos (24, 65, 71). Se ha planteado incluso la posibilidad de

951
que para las ovejas y para algunos antlopes podra ser ecolgicamente positivo ser
portadores de virus tan patgenos para sus competidores (65). Es particularmente
importante recordar que algunos de estos animales, como por ejemplo el taxa, el
ciervo del Padre David y el bisonte de Europa, son especies amenazadas , que
no deberan exponerse nunca a la amenaza de FCM a partir de reservorios conocidos.
CULTIVO DEL VIRUS DE LA FCM-AO

Desde hace muchos aos se han realizado numerosas tentativas de cultivo del
virus de la FCM-AO mediante mtodos que haban tenido xito con los herpesvirus
de alcelafneos ; estos intentos permitieron aislar muchos virus candidatos ,
pero ninguno de estos permiti reproducir la enfermedad. El descubrimiento
reciente ms importante en lo referente a la FCM-AO fue el cultivo de lneas celulares de linfoblastos a partir de conejos, ciervos y vacunos infectados con el virus,
realizado por Reid y col. Resumiremos brevemente a continuacin la serie de fases
tal corno las describieron Reid y Buxton (66) :
La primer lnea, MF120, se propag por cultivo comn (c-cultivo), de clulas
renales de feto de ovino y de clulas de ganglios linfticos de conejo, tratadas con
polietileno glicol. Las clulas renales degeneraron, mientras que en la fase lquida
aparecieron clulas redondeadas y refringentes que posean las caractersticas morfolgicas y funcionales de grandes linfocitos granulares (LGL) o de clulas asesinas
naturales (NK). Eran portadoras de antgenos de clulas T y de receptores Fc,
tenan cariotipo de conejo, requeran clulas nutricias para su replicacin, eran
citotxicas para las clulas de cultivo primario o para las lneas celulares establecidas y, lo que es ms importante an, se demostr que transmitan el poder infectante de la FCM al ser inoculadas en conejos hasta una dosis mnima de 1 0 .
Ms tarde se cultivaron lneas celulares similares de clulas linfoblsticas a partir del lquido cefalorraqudeo o de los ganglios linfticos y de la crnea de vacunos
y ciervos afectados de FCM-AO, pero stas no reprodujeron la enfermedad en inoculaciones ulteriores a vacunos, ciervos o conejos. Se cultivaron clulas similares a
partir de ratas infectadas con AHV-1, despus de un pasaje sobre conejos, pero una
vez ms no pudieron reproducir la enfermedad al volver a inoculrselas a conejos,
ni tampoco indujeron efectos citopticos en cultivos celulares permisivos. Estas
clulas de rata inducen una enfermedad linfoproliferativa en las ratas destetadas y
sorprendentemente no exigen una capa nutricia (70). Estas lneas celulares
LGL/NK no slo no infectan a los huspedes sensibles a la FCM, sino que tampoco
presentan ante el microscopio electrnico ningn signo de herpes o de otros virus ;
por otra parte, en el interior de las clulas o en las membranas celulares no pudo
observarse ningn antgeno viral mediante inmunofluorescencia con antisuero
AHV-1 (66, 68). Se formul la hiptesis de que las lneas celulares de FCM seran
similares a las cepas linfoblsticas cultivadas a partir de tejidos de mono titi infectados con Herpesvirus ateles y Herpesvirus saimiri, que tambin son agentes linfoproliferativos en huspedes no habituales ; en estos casos slo se requiere una pequea
cantidad del genoma viral (27%) para mantener la transformacin. Se plantea que
las lneas de la FCM podran poseer una proporcin igualmente pequea del
genoma viral total, que sera insuficiente para la expresin de antgenos virales y,
por lo general, para infectar cualquier tipo de sistema.
-2

952
Reid y Buxton (65, 66) resumieron sus hiptesis sugiriendo que las clulas
LGL/NK son blancos fundamentales de la replicacin del virus de la FCM ; las
clulas NK aparecen en nmero significativo slo despus del comienzo de la enfermedad clnica en los conejos y conducen a una enfermedad linfoproliferativa caracterstica, probablemente induciendo una hiperplasia benigna de los linfocitos T
policlonales, ya sea a travs de la produccin de una cantidad abundante de interleukina 2 y/o a travs de la supresin de ayuda celular T. Siguiendo esta hiptesis,
la necrosis de las clulas, incluyendo la de los elementos linfoides y la de las paredes
de los vasos, se debera a una accin citotxica directa de las clulas NK proliferantes.
La hiptesis es muy interesante ya que explica una patogenia que aparece sino
corno desconcertante y controvertida (61, 75). Parece ms adecuada a la realidad
que una hiptesis que afirmara que, puesto que algunas de las caractersticas de los
virus de la FCM son obviamente similares a las de otros herpesvirus gamma, se
debera entonces considerar tambin a la FCM corno una enfermedad infecciosa
neoplsica,
al igual que la enfermedad de Marek, por ejemplo (30). La presencia de
slo una pequea fraccin del genoma viral en las lneas celulares LGL/NK podra
tambin explicar la dificultad, que si bien vara es siempre considerable, para transmitir la FCM-AO de los vacunos o ciervos a otros ciervos o a los conejos (71), y no
estara en contradiccin con la hiptesis de que el ADN viral puede estar integrado
al genoma celular o estar presente bajo la forma episomal (30).
Por el momento no existen ndices acerca de la forma en que el virus de la
FCM es mantenido o excretado por las ovejas ; probablemente se requiera una
infeccin plenamente productiva de las clulas superficiales para que se pueda efectuar la transmisin a los huspedes reveladores, por poco frecuente que sea esta
transmisin si se la compara con la gran difusin de la infeccin de las ovejas.
LA RELACIN ENTRE LAS FORMAS AO Y D DE LA FCM

Todos los observadores afirman que no es posible diferenciar las formas AO y


D a partir de criterios clnico-patolgicos y, por otra parte, su epidemiologa tambin es esencialmente similar. Parece cada vez ms evidente que con el tiempo se
podr demostrar que la FCM-AO se debe a un herpesvirus emparentado con el
AHV-1 sin ser idntico a l (27, 66). Al respecto, los datos importantes son los
siguientes :
a) Los ttulos de los anticuerpos (inmunofluorescencia indirecta) generados contra AHV-1 en las ovejas de muchos pases eran comparables a los de los us, pero
no tenan una actividad neutralizante significativa. La deteccin de anticuerpos en
corderos axnicos y privados de calostro parecera indicar una infeccin congenital
(73).
b) Con bastante frecuencia se descubrieron anticuerpos neutralizantes en especies de la subfamilia Caprinae, incluyendo las ovejas y cabras domsticas en Estados Unidos (vese Epidemiologa , a). Los ttulos eran bajos, salvo en el caso de
los ovinos de Berberia, Ammotragus
lervia. Tambin se seal que mediante inmunofluorescencia se podan identificar los antgenos que reaccionan con los antisueros AHV-1 en los leucocitos circulantes de algunos caprinos (27). En el Reino
Unido, 86 sueros de ovejas sobre un total de 508 (o sea, 17%), provenientes de 13
rebaos, presentaban anticuerpos neutralizantes del virus AHV-1, con ttulos entre
1/2 y 1/32 (20).

953
c) La utilizacin de antgenos AHV-1 en las pruebas de Western blot permiti comprobar que todos los sueros de ovejas reaccionaban con algunas de las mismas bandas que las que producan los sueros de us (66). Desgraciadamente, los
intentos con antisueros bovinos para poner de manifiesto antgenos emparentados
con el AHV-1 mediante inmunofluorescencia en cultivos de clulas linfoides o en
tejidos de conejo portadores de la infeccin FCM-AO han fracasado. Sin embargo,
tambin es muy difcil mostrar una fluorescencia especfica en tejidos animales
infectados con el agente homlogo, salvo siguiendo su cultivo in vitro y observando
la supuesta desrepresin de la sntesis proteica viral (vase 61, 66, 75). Se espera con
mucha impaciencia conocer los resultados de la aplicacin de sondas radioactivas
desarrolladas a partir del ADN de AHV-1.
c) Durante la evolucin de la FCM-AO, los vacunos de Europa, Estados Unidos
y Australia mostraron con frecuencia ttulos crecientes de anticuerpos especficos
ante el AHV-1 en inmunofluorescencia indirecta ; sin embargo, en el Reino Unido
esta observacin no se produjo en todos los casos, por lo que se formul la hiptesis de que en algunos casos poda estar implicado un agente diferente desde el punto
de vista antignico (20, 74).

EL DIAGNSTICO DE LA FCM
a) Diagnstico clnico-patolgico

A partir del cuadro clnico y del patolgico se puede reconocer sin dificultad la
mayor parte de los casos de FCM, de forma AO o D, en vacunos, ciervos o en
rumiantes exticos (vese las secciones anteriores de este trabajo). Los casos hiperagudos, relativamente frecuentes en algunas de las especies de ciervos, pueden no
suscitar sospechas debido a la ausencia de las descargas caractersticas, de la necrosis de las mucosas, de las lesiones de la piel y de los ojos y de la diarrea o disentera ; sin embargo, las modificaciones histopatolgicas tpicas igual pueden estar
presentes.
Las caractersticas macroscpicas e histolgicas ya han sido descritas en detalle
en muchas ocasiones (para la forma D, vase 11, 32, 40, 52, 55, 56 ; para la
forma AO, vase 34, 35, 36, 52, 80, 81). En el caso de la FCM-AO el diagnstico,
basado sobre todo en elementos clnico-patolgicos, sigue siendo esencial, ya que
no se han desarrollado mtodos para el aislamiento o la demostracin del o de los
virus causal(es). La puesta de manifiesto de ttulos crecientes de anticuerpos (IFI o
IPI) contra AHV-1 puede ser til, pero no ocurre sistemticamente (vase ms adelante).
b) Confirmacin experimental del diagnstico

En los animales infectados, son muy pocas las clulas que presentan antgenos
inmunofluorescentes cuando se utilizan antisueros AHV-1. Adems, no existen
antisueros FCM-AO. Por lo tanto, se considera que estos mtodos no tienen valor
diagnstico (61, 75). La afirmacin (26) de que se han puesto en evidencia antgenos virales de la FCM a travs de inmunofluorescencia en frotis de leucocitos de la
sangre perifrica de animales enfermos o portadores (caprinos), utilizando un
suero proveniente de un ciervo sika infectado crnicamente por AHV-1, es interesante pero no ha sido an confirmada.

954
No obstante, el desarrollo de anticuerpos contra AHV-1 se ha revelado til para
seguir las infecciones experimentales y es potencialmente til para el diagnstico de
casos clnicos. Los anticuerpos aparecen en general durante el perodo de incubacin o durante las fases clnicas precoces y antes de la muerte casi inevitable; las tcnicas ms tiles son inmunoperoxidasa indirecta (IPI) o la inmunofluorescencia
indirecta (IFI) usando reactivos anti-IgG apropiados (61, 75). Sin embargo, Heuschele (25) considera que a menudo la IFI no es til. Los mtodos de fijacin del
complemento tambin resultaron tiles, pero la inmunoprecipitacin y la inmunoelectroforesis no han tenido xito en los vacunos (61, 75). Sc ha cuestionado y estudiado la especificidad de las tcnicas inmunohistoqumicas para los anticuerpos (24,
25, 27, 78) ; indudablemente existen reacciones cruzadas con otros herpesvirus de
los bvidos, en particular BHV-1 (virus IBR) y BHV-3 (virus BCM), pero los ttulos
son por lo general ms bajos con sueros heterlogos. Obviamente, estos comentarios sobre la especificidad amplia tambin pueden aplicarse a las pruebas ELISA, la
IPI o la IFI.
La principal aplicacin de las tcnicas serolgicas en la investigacin de la FCM
ha sido en epidemiologa y en las pruebas de neutralizacin viral ; estas ltimas fueron las primeras que se desarrollaron (42, 67) y siguen siendo las ms especficas y
las ms econmicas para estudiar la distribucin de los virus de la FCM en las especies reservorio, tanto en los zoolgicos (26) como en los animales que viven en libertad (19). Sin embargo, la prueba creciente de relaciones antignicas (neutralizacin
del virus) entre los herpesvirus de la FCM-AO (caprinos) y los agentes patgenos alcelafneos han tornado imprecisas las divisiones entre ambos grupos ; es necesario
avanzar mucho ms en los trabajos sobre los epitopes concernidos utilizando los
anticuerpos monoclonales y las tcnicas virolgicas moleculares.
Las primeras recomendaciones para el diagnstico de la FCM a travs del aislamiento del virus (58, 59, 60) destacaban las caractersticas de los virus de la FCMDN que son importantes para obtener y manejar el material proveniente de los
casos sospechosos. En primer lugar, prcticamente todo el poder infeccioso en la
sangre o en los tejidos est asociado a clulas vivas e intactas y se pierde inmediatamente despus de la muerte de las clulas. En segundo lugar, la capacidad infecciosa del virus est asociada fundamentalmente con las clulas linfoides. Se pueden
preparar fcilmente leucocitos sanguneos lavados (fragmentos de cogulos) a partir de animales vivos para inocularlos en cultivos de clulas sensibles, especialmente
en capas monocelulares de clulas de tiroides de vacunos (BTh) de primera y
segunda explantacin, que presentan focos de una citopatologa caracterstica dentro de los 18 a 21 das. Los tejidos linfoides recogidos en el momento de la muerte o
en los 2 3 horas ulteriores a la misma deben ser ganglios linfticos, o eventualmente el timo o el bazo ; estos tejidos y las suspensiones de leucocitos deben ser tratados para mantener la viabilidad de las clulas, es decir dispersados de un modo
que evite las lesiones celulares, almacenados a aproximadamente - 4 C (no congelados), en un medio nutritivo que contenga suero, e inoculados tan pronto como
sea posible y a ms tardar a los 3 4 das, a animales o cultivos celulares. Como
alternativa, tambin se pueden almacenar las suspensiones a - 7 0 C o por debajo
de esa temperatura, siempre que se utilice 1097b de DMSO u otro croconservador ;
de todo modo, en el proceso de congelamiento se pierde parte del poder infeccioso.
Oliver y col. (46) sealaron la conservacin del poder infeccioso en suspensiones a
10% de ganglios linfticos de ciervos (FCM-AO) durante 8 meses a - 7 0 C sin croconservadores, pero ello es excepcional. En lo que se refiere a la torna de muestras
en bovinos afectos de FCM-D, el estadio de la enfermedad importa poco, ya que
el ttulo en la sangre o los ganglios linfticos es casi siempre superior a 10
T C D / m l 10 T C D / g respectivamente (56, 61).
2

50

50

955
La dificultad para producir cantidades adecuadas de clulas BTh llev a intentos de utilizar lneas de clulas de rin de ternero (BK) o de rion de embrin de
bovino (BEK) cultivadas en serie, especialmente para el pasaje in vitro de cepas
virales, para pruebas de inmunofluorescencia y para la produccin de virus extracelular con vistas a su caracterizacin y su neutralizacin (42, 60, 61, 78). Sin
embargo, fue difcil mantener las series de pasaje en clulas BK utilizando el virus
liberado como inoculum. Las lneas de clulas de testculos de ternero (BT) se revelaron ms tarde como sumamente sensibles para la deteccin y la titulacin del
poder infeccioso en los tejidos animales y produjeron virus infeccioso libre de clulas de ttulo elevado (hasta 10 TCD /ml) incluso en los primeros pasajes (48, 49,
60). La sangre y los tejidos linfoides infectados provenientes de bovinos (terneros)
ensayados en cultivos en tubos de clulas BT permitieron contabilizar focos infecciosos de hasta aproximadamente 10 /ml y 10 /g respectivamente. Estas cifras son
iguales o mayores que las obtenidas mediante una titulacin simultnea de muestras
similares en capas monocelulares de tiroides de bovino y de ternero (56). Adems,
la deteccin de los focos citopatgenos se hace ms fcil en las clulas BT, ya que
los sincitios presentan largos procesos refringentes y se generalizan en lugar de
retroceder o incluso desaparecer, como ocurre en las clulas BTh, BK o BEK ; las
diferencias se deben probablemente a la produccin precoz de virus libre de clulas
en las clulas BT (Plowright y Watt, indito ; 48).
5

50

La facilidad con la que las clulas BTh y BT en particular pueden utilizarse para
la obtencin cuantitativa directa del poder infeccioso del virus de la FCM a partir
de tejidos animales o de secreciones de us (43) contrasta con la experiencia de
investigadores norteamericanos (6, 7, 25) que utilizaron clulas BTh y BEK e inculos concentrados, pero sealaron sincitios con inclusiones intranucleares habitualmente despus del segundo o incluso hasta el sexto cultivo secundario. Para superar
las dificultades se preconizaron dos mtodos. En primer lugar, se utiliz la inoculacin a 32-34C, un mtodo utilizado por primera vez en Africa Oriental para incrementar la velocidad de aparicin y la cantidad de virus libre de clulas en liqudos
de cultivo y modificar los efectos citopticos predominantes, con lo cual la formacin de sincitio era reemplazada por el redondeamiento de las clulas y la refringencia de los elementos infectados (21). En segundo lugar, se ha recomendado la fusin
mediante polietileno glicol (PEG ; PM 1000-4000) de las suspensiones de clulas
sospechosas con las clulas permisivas (8, 9). Por otra parte, se preconiz la utilizacin de una cepa celular (FAK) derivada del rion de feto de musmn (ovino berberisco) (25, 26), pero no se han proporcionado datos sobre la sensibilidad relativa de
estas clulas en comparacin con las utilizadas para la deteccin y prueba de la
infectividad del AHV-1 en tejidos animales. Las clulas BTh o BT dan resultados
rpidos, las positivas se vuelven visibles en cultivos no coloreados a los 3 4 das de
inoculacin de leucocitos sanguneos provenientes de vacunos enfermos.
Una razn que explicara las diferencias sealadas entre los investigadores norteamericanos y los otros en la obtencin de los herpesvirus alcelafneos podra ser
que los primeros se ocuparon sobre todo de materiales de ttulo supuestamente
bajo, y tambin que existe una dificultad real para detectar focos citopticos antes
de su retroceso en las clulas BTh o BK. Ello condujo a utilizar grandes inculos,
tanto de suspensiones de leucocitos como de suspensiones de tejido linfoideo. Estas
dos ltimas, en concentraciones elevadas, supriman los efectos citopatgenos ; por
otra parte, los ganglios linfticos producan efectos citotxicos (56). La supresin
puede ser parcial o completa y ha sido estudiada una vez ms recientemente a travs
de titulaciones de tejidos linfoides bovinos infectados en una lnea sensible de clu-

956

las de testculos de ternero (BT11) (Plowright, indito). En el Cuadro V se presentan resultados tpicos ; stos sealan que, lavando las clulas 3 veces (en suero
salino) no se anulaba el efecto inhibitorio, que poda ser detectado hasta una dilucin peso/volumen de 1/500 (10- ) ; en segundo lugar, los cultivos secundarios de
tubos aparentemente negativos en los niveles ms bajos de los ttulos llevaban slo
parcialmente a resultados positivos y aadan muy pocos resultados positivos al
nivel superior de la titulacin. El factor inhibitorio no era reducido por el retiro de
las clulas adhridas al plstico de las suspensiones infectadas y no se observ en el
sobrenadante de una centrifugacin rpida de suspensiones brutas de ganglios linfticos infectados. Este efecto no era visible en las suspensiones de ganglios linfticos normales de ternero ; se observaba as que en los ganglios infectados las que
actuaban como mediadoras eran las clulas no adhrentes y no los anticuerpos u
otro factor soluble.
2,7

CUADRO V

Titulaciones del virus de la FCM (cepa C.500) de tejidos linfoides de ternero


en cultivos en tubos de la lnea BT11 de clulas de testculos de bovino *
Suspensin bruta de Ten
Broek. Efectos citopticos el 19 da

Suspensin de clulas lavadas


(3 veces). Efectos citopticos
el 19 da

a) Primera
inoculacin

b) Primer
cultivo
secundario

a) Primera
inoculacin

b) Primer
cultivo
secundario

- 1 , 2

0/5

ND

0/5

1/5

10-

2 , 0

0/5

4/5

0/5

2/5

10-

2 , 7

0/5

3/5

2/5

4/5

5/5

ND

5/5

ND

5/5

ND

3/5

4/5

4/5

5/5

1/5

2/5

Dilucin peso/volumen
de ganglio linftico

10

10

- 3 , 4

10

- 4 , 1

10

- 4 , 8

-5,5

10

Ttulo

0/5

(log TCD )
1 0

5 0

l0

5 , 0 8

0/5
/g

10

5 , 1 5

0/5
/g

10

4 , 3 8

0/5
/g

1 0

9
/

* Las clulas se encontraban en su 16 pasaje in vitro. L o s cultivos fueron inoculados con 1 ml de inoculum que fue retirado al cabo de 2 horas a 37C lavando dos veces con suero salino. Los cultivos secundarios de tubos negativos fueron realizados el 19 da mezclando clulas versenizadas con suspensiones celulares limpias distribuidas luego en 5 tubos.

La identificacin de cepas citopatgenas corno herpesvirus de la FCM-D se


efecta fcilmente mediante IFI o IPI utilizando antisueros especficos preparados
en vacunos o conejos. Los antisueros de referencia deben proceder de animales que
no han sido expuestos previamente a otros herpesvirus de bovdeos ; sin duda
alguna, esta condicin no es satisfecha por una referencia internacional propuesta (2). Las pruebas de neutralizacin pueden efectuarse apenas los virus libres
estn disponibles proceso acelerado por la incubacin a 32-34C y la utilizacin
de clulas de testculos de bovino (BT) o de feto de caprino (FAK) (21, 25, 60). La
neutralizacin de los virus permite distinguir perfectamente algunos de los mismos
si se realizan las pruebas cuantitativas recprocas, pero la neutralizacin cruzada de
AHV-1 con algunos sueros caprinos aboga en favor de la existencia de rela-

957
ciones antignicas muy amplias. Un examen en microscopio electrnico de clulas
en cultivo puede ser til para completar las observaciones sobre la citopatologa en
preparaciones no coloreadas o coloreadas y fijadas (5). Adems, la inoculacin
parenteral de clulas cultivadas infectadas en conejos, vacunos o ciervos puede producir la enfermedad, pero no todos los virus de los alcelafneos son patognicos
(61).
La diferenciacin de los virus alcelafneos, hipotrginos o caprinos de la FCM
mediante mtodos serolgicos o bioqumicos se encuentra an en sus primersimas
etapas. La centrifugacin sobre gradiente del ADN de AHV-1 da lugar a dos picos
similares a los (M y H) de herpesvirus Saimir y Ateles (25). Los modelos de endonucleasa de restriccin del ADN viral de AHV-1 presentan una separacin neta respecto de las cepas aisladas homogneas de BHV-4 (citomegalovirus bovinos) y diferencias menores entre la cepa WC11 obtenida mediante numerosos pasajes, de
escasa virulencia, y la cepa virulenta C500 o la cepa aislada del u de cola blanca
(23, 47). El clonaje de fragmentos de restriccin de AHV-1 en cuatro vectores abre
la posibilidad de estudios que permitan investigar su relacin con la FCM-AO (3).

EL CONTROL D E LA FCM

Por supuesto, todas las formas de la enfermedad pueden prevenirse evitando los
contactos entre las especies reservorio y las especies reveladoras, en particular en los
momentos de parto de las primeras. En la prctica, ello puede ser difcil en algunas
partes de Africa donde no hay barreras para el ganado y donde miles de us compiten con el ganado vacuno por el pastoreo y el agua. Los resultados a veces catastrficos que se producen cuando se permite que los vacunos y otras especies sensibles
estn en contacto ntimo con las ovejas y posiblemente con otros reservorios caprinos hablan a las claras de conveniencia de separar las dos clases de huspedes.
En el caso de los zoolgicos y de las explotaciones que mezclan las especies exticas, y en particular especies amenazadas de extincin en estado salvaje, se ha preconizado recientemente la utilizacin de pruebas serolgicas de rutina para evitar la
introduccin o el movimiento de portadores potenciales de virus y la obligatoriedad
de la notificacin de casos de FCM. Tambin se ha preconizado que no se cren terneros de especies reservorio, corno por ejemplo los us, a fin de evitar los riesgos
especficos planteados por estos excretores de alto nivel (24, 26, 64).
En las regiones de Africa en las que el ganado vacuno apacenta juntamente con
grandes rebaos de us, en particular en el pas Masai de Africa Oriental y en Botswana, la vacunacin contra la FCM podra constituir una alternativa ms interesante que la limitacin o la eliminacin de los animales salvajes. Por el momento,
los intentos de desarrollar vacunas atenuadas (58, 61, y Harkness J.W., comunicacin personal) o vacunas inactivadas (75) mediante mtodos empricos han fracasado o han tenido un xito limitado, a pesar de que esas vacunas posean un poder
antignico.
Harn falta muchos ms trabajos sobre la inmunologa y virologa molecular de
la FCM antes de que se logre un producto apropiado, pero las perspectivas econ-

958
micas no son muy interesantes ; por otra parte, tambin debe tener en cuenta la
posibilidad de una sobreinfeccin con virus salvajes virulentos y de una infeccin
congenital de la descendencia (63).
*
* *

BIBLIOGRAFA

(vase pg. 913)