SIEMBRA DE MICRORGANISMOS

MARIA CAMILA

TECNOLOGO CONTROL AMBIENTAL

YOPAL CASANARE

2017

SIEMBRA DE MICRORGANISMOS
 INGENIERO JAIME NARVAEZ

TECNOLOGO CONTROL AMBIENTAL

YOPAL CASANARE

2017

INTRODUCCION
Los microorganismos son seres vivos que solo se pueden visualizar con
microscopio, estos se encuentran en todas partes, su supervivencia y crecimiento
depende de un suministro adecuado de nutrientes y un ambiente favorable para su
crecimiento. Un medio de cultivo es una solución que contiene los nutrientes
necesarios para permitir el crecimiento de microorganismos en condiciones
favorables de ph y temperatura.

Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porción de muestra (inoculo)

en un medio adecuado, con el fin de promover intencionalmente el desarrollo de
estas en medios de cultivos y condiciones favorables de laboratorio controladas.

Existen 3 tipos de medio de cultivo: según sus cualidades físicas liquidas,

semisólidos, y sólidos. Para esta práctica se utilizó un medio solido de agar, para
obtener cultivos. Para ello con un asa se tomó una muestra de la población mixta y
se adicionan a la superficie de un medio solido agar continuándose la siembra
masiva con la misma técnica por todo el agar, a continuación las cajas Petri se
inocuan permitiendo que las células aisladas experimenten un número suficiente
de divisiones para formar colonias visibles.

OBJETIVOS GENERALES

Identificar y aprender técnicas, métodos de preparación y uso de medios de cultivo

para el desarrollo de microorganismos presentes en el medio ambiente y la
importancia de estos para su identificación y clasificación.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Conocer los diferentes medios de cultivo, método de siembra en cajas Petri.

 Elaborar medios de cultivos para microorganismos.

MARCO TEORICO

Para aislar e identificar una especie de bacteriana del medio y de otra especie que
pueda confundirse morfológicamente es necesario usar medios de cultivo, que nos
permiten diferenciar características de crecimiento de bacterias, establecer su
identidad según el medio de cultivo que se use.
Los microorganismos se encuentran en muchos ambientes naturales como agua,
suelo, aire, hombre, otros seres vivos y alimentos. Haciendo parte de los
ecosistemas. Por ello se debe utilizar los medios de cultivo adecuados que se
asemejen al medio ambiente si se desea posibilitar el crecimiento de las bacterias.

Un medio de cultivo está diseñado para posibilitar el desarrollo y nutrición de las

bacterias por esto debe contar con una cantidad de sustancias como: carbono,
agua, azufre, fosforo, nitrógeno potasio sodio, magnesio entre otros. También su
crecimiento depende de muchos factores como ph, preferiblemente neutro,
humedad, oxigeno, temperatura, presión osmótica. Todo esto en condiciones
adecuadas.

Los medios de cultivo se clasifican dependiendo de las características que se

necesitan para su óptimo desarrollo los cuales según su consistencia pueden ser:

LIQUIDOS: no contienen agar y favorecen el crecimiento bacteriano ya que las

bacterias poseen una libertad de movimiento y al difundirse por todo el medio
encuentran su componente nutritivo y requerimiento de oxigeno más óptimo con
gran facilidad.

SOLIDOS: su concentración de agar es de 1.5 % a 2% en estos las bacterias

crecen con mayor dificultad ya que los nutrientes pueden agotarse fácilmente, se
utilizan para ver colonias, aislar microorganismos, características de crecimiento,
color tamaño, taxonomía entre otros.

SEMI-SOLIDO: su concentración de agar es de 0.5% y se utiliza para estudiar el

movimiento y algunas propiedades bioquímicas.

SIEMBRA DE MICROORGANISMOS

Materiales:

 Los agares (cultivos de bacterias)

 Agua destilada
 Mechero de alcohol industrial
 Encendedor
 Aza
 Goteros
 Vaso de precipitado
 matraz Erlenmeyer
 cajas Petri (para siembra de cultivo)
 embudo
 papel de filtración 0.45
 pinzas
 probeta
 Autoclave

PROCESO DE SIEMBRA DE MUESTRA DE GELATINA CON LECHE.

*Se prende el mechero y se toman 2.5 ml de agua destilada con un gotero,

se abre la caja de Petri estando cerca de la llama del mechero y se aplica el
agua destilada al agar, se tapa la caja Petri, se retira del mechero y se deja
reposar por 5 minutos.

*una vez haya pasado el tiempo determinado se flamean las pinzas y se

procede a sacar el papel de filtración con las pinzas, se lleva nuevamente la
caja Petri al mechero, para colocar sobre el agar el papel de filtración. Se
procede a flamear el Aza y hacer una pequeña película
Con la muestra de gelatina con leche, una vez terminado este proceso se
tapa la caja Petri y se lleva a la Autoclave tomando otros 5 minutos.

*Ya pasado el tiempo se abre nuevamente la Incubadora y se voltea la caja

Petri dejándose allí por 24 horas a 35°C.

PROCESO DE SIEMBRA DE BACTERIAS CON MUESTRA DE SALIBA

*Se prende el mechero y se toman 2.5 ml de agua destilada con un gotero,
se abre la caja de Petri estando cerca de la llama del mechero y se aplica el
agua destilada al agar, se tapa la caja Petri, se retira del mechero y se deja
reposar por 5 minutos.

*una vez haya pasado el tiempo determinado se flamean las pinzas y se

procede a sacar el papel de filtración con las pinzas, se lleva nuevamente la
caja Petri al mechero, para colocar sobre el agar el papel de filtración. Se
procede a flamear el Aza y hacer una pequeña película
Con las bacterias de la saliva, una vez terminado este proceso se tapa la
caja Petri y se lleva a la Autoclave tomando otros 5 minutos.

*Ya pasado el tiempo se abre nuevamente la Incubadora y se voltea la caja

Petri dejándose allí por 24 horas a 35°C.

PROCESO DE SIEMBRA DE BACTERIAS CON MUESTRA DE HECES

DE IGUANA

*Se prende el mechero y se toman 2.5 ml de agua destilada con un gotero,

se abre la caja de Petri estando cerca de la llama del mechero y se aplica el
agua destilada al agar, se tapa la caja Petri, se retira del mechero y se deja
reposar por 5 minutos.

*una vez
haya
pasado
el
tiempo
determinado se flamean las pinzas y se procede a sacar el papel de
filtración con las pinzas, se lleva nuevamente la caja Petri al mechero, para
colocar sobre el agar el papel de filtración. Se procede a flamear el Aza y
hacer una pequeña película
Con las bacterias de las heces de iguana. Una vez terminado este proceso
se tapa la caja Petri y se lleva a la Autoclave tomando otros 5 minutos.

*Ya pasado el tiempo se abre nuevamente la Incubadora y se voltea la caja

Petri dejándose allí por 24 horas a 35°C.
PROCESO DE FILTRADO DE AGUA CON PAPEL DE 0.45 MICRAS

*Se prende el mechero y se toman 2.5 ml de agua destilada con un gotero,

se abre la caja de Petri estando cerca de la llama del mechero y se aplica el
agua destilada al agar, se tapa la caja Petri, se retira del mechero y se deja
reposar por 5 minutos.

*una vez haya pasado el tiempo determinado se miden 10 ml de agua con

una pipeta de 1ml, la cual fue recolectada de un rio.
Se procede a filtrar los 10ml de muestra de agua en un filtro de 0.45 micras
el cual se había montado anteriormente en un embudo de vidrio sobre un
Erlenmeyer.

*Después de filtrada el agua se flamea una pinza la cual utilizamos para

colocar el filtro con los residuos de la muestra de agua sobre la caja de
Petri la cual contiene el medio para alimentar las bacterias que vamos a
encontrar en la muestra.

*Después esta es llevada a la Incubadora junto con el resto de las muestra

y son dejadas allí por 24 horas a 35°C.
PROSESO DE SIEMBRA DE BACTERIAS EN MUESTRA DE ORINA.

 Se toma un gotero y sacamos de nuestra muestra de orina una cantidad

de 2.5 ml, de contenido. Procedemos a abrir nuestra caja Petri de
14,055 de color morado. La abrimos cerca de mechero y procedemos a
impregnar la caja con lo tomado de la muestra de orina.
Una vez terminado esto cerramos nuestra caja Petri, y la dejamos
reposar durante un tiempo de 5 minutos. Terminado esto se coge y se
lleva a la incubadora donde la acomodamos boca abajo, después de 5
minutos se voltea y se cierra la incubadora donde estará por 24 horas.
Pasado este tiempo las retiraremos para analizarlas y así saber su
respectivo conteo de las colonias que allí se formaron.
PROSESO DE SIEMBRA DE BACTERIAS CON AGUA DESTILADA.

 Se toma un gotero y sacamos de nuestra muestra de orina una cantidad

de 2.5 ml, de contenido. Procedemos a abrir nuestra caja Petri de
14,055 de color morado. La abrimos cerca de mechero y procedemos a
impregnar la caja con lo tomado de la muestra de agua destilada.
Una vez terminado esto cerramos nuestra caja Petri, y la dejamos
reposar durante un tiempo de 5 minutos. Terminado esto se coge y se
lleva a la incubadora donde la acomodamos boca abajo, después de 5
minutos se voltea y se cierra la incubadora donde estará por 24 horas.
Pasado este tiempo las retiraremos para analizarlas y así saber su
respectivo conteo de las colonias que allí se formaron.
TIPO DE MUESTRA NUMERO DE EVIDENCIA
COLONIAS

Muestra de agua de En un promedio de

pozo profundo 172 cuadriculas, de
las cuales se
encuentran
colonizadas 134.

muestra de saliva En un promedio de

172 cuadriculas, de
las cuales se
encuentran
colonizadas 131

Muestra de heces de . En un promedio de

iguana 172 cuadriculas, de
las cuales se
encuentran
colonizadas 167.
 Muestra de orina No se encontraron
rasgos de colonias.
Por las temperaturas
que maneja nuestro
organismo, esto
según lo explicado por
nuestro instructor.

Muestra de agua No se encontraron

destilada rasgos de colonias.
Debido a que por la
composición del agua
destilada este debía
ser el resultado.

Muestra de gelatina En un promedio de

con leche 172 cuadriculas, de
las cuales se
encuentran
colonizadas 114

CONCLUSIONES

Al finalizar nuestro laboratorio podemos llegar a la conclucion de que, el proceso

de siembra aplicado es muy efectivo ya que al pasar las 24 horas las cajas petri
con el agar con una temperatura de 35°c en la incubadora o autoclave pudimos
realizar el conteo de las colonias y así tener una visión mas clara de lo que
nosotros mismo como aprendices cultivamos.
Se definió que, no se observaron colonias en la muestra de orina ni en la muestra
de gelatina con magi, aun no es claro por que fue pero pensamos que no se nos
dio por el debido proceso de filtración de nuestro propio sistema digestivo, a
diferencia de los demás cultivos por estos si nos dieron resultados satisfactorios.