CENTRO DE BACHILLERATO

TECNOLÓGICO, INDUSTRIAL Y
DE SERVICIOS NO. 60.
CBTis 60.
Av. Educación Tecnológica no.4.
Fracc. Interlomas. San Miguel de Allende,
Guanajuato.
MÓDULO III: Ejecuta métodos de análisis cuantitativos,
químicos y microbiológicos con base a las normas.
Submódulo II: Realiza análisis
cuantitativos empleando métodos
instrumentales.
Práctica 1: Uso del refractómetro
clínico con diferentes muestras.
Rivera C. Orlando.
4ALQ
16/Febrero/2021 – P.1
 “PRÁCTICA 1”
Uso del refractómetro clínico con diferentes muestras.
OBJETIVO: Calibrar y utilizar el refractómetro clínico usando diferentes muestras.
INTRODUCCIÓN:
¿Qué es la Refractometría?
Se denomina Refractometría al método óptico que determina la velocidad
de propagación de la luz en un medio contra la velocidad de la luz en el
vacío, con uso de la unidad de índice de refracción, lo cual se relaciona
directamente con la densidad de este medio. Para emplear este principio se
utiliza la refracción de la luz, (la cual es una propiedad física fundamental de
cualquier sustancia), y la escala de medición de este principio se
llama índice de refracción.
¿Qué son los refractómetros?
Los refractómetros son los instrumentos que emplean este principio de
refracción ya sea el de refracción, (empleando varios prismas), o el de
ángulo crítico, (empleando solo un prisma), y su escala primaria de
medición es el índice de refracción, a partir de la cual se construyen las
diferentes escalas específicas, Brix (azúcar), Densidad Específica, % sal,
etc. Los refractómetros se utilizan para medir en líquidos, sólidos y gases,
como vidrios o gemas. Su funcionamiento se basa en utilizar la refracción
de la luz, la cual es una propiedad física de cualquier sustancia y se
relaciona con algunas propiedades físicas como la densidad. A partir de
ello, y de acuerdo a su aplicación se construyen diferentes escalas. La
escala más usada es Grados Brix (Proporción de sacarosa o sales en una
solución). Existen otras escalas, como: Be (Baume), % de sal, gs, g/dl, nD,
% w/w, % vol, % agua, mash sacch, M- 10, MDT, entre otras.
Hay diferentes tipos de refractómetros, los más comunes son:

• Pulfrich con prisma en forma de “V”

• Refractómetros con método de Reflexión Interna Total.
• Pulfrich.
• Abbe.
• Clínico.
• Inmersión.
• Refracción total / ángulo crítico.
Refractómetro clínico.
Un refractómetro clínico o de mano común consta de dos prismas entre los
cuales se coloca la muestra, y sobre los que hacemos incidir la radiación.
Este haz de luz, al atravesar la muestra, se refracta y se recoge como un
único rayo de luz blanca, cuyo ángulo puede ser medido por un sistema
óptico. A través de un ocular podemos ver un círculo en el que aparecen
diferenciadas una zona clara y otra oscura.
La calibración de estos aparatos puede hacerse con agua destilada, o con
solución salina de densidad conocida. Es importante mencionar que el
índice de refracción varía con la temperatura de la sustancia, de modo que
debemos controlar que la temperatura del calibrador sea igual a la de la
muestra. En caso de no ser así, se empleará un factor de corrección
aumentando en 0.001 unidades el índice de refracción por cada 3ºC de más
en la temperatura de la muestra respecto al calibrador, y disminuyéndolo en
la misma proporción por cada 3ºC de menos.
Partes de un refractómetro clínico de mano.

• Prisma Principal: Es donde se colocan las muestras, permite medir

diferentes tipos de soluciones, por ejemplo: bebidas, azúcar, miel, agua
salada, alcohol, mermeladas, uvas, etc. El prisma posee una lámina que
permite cubrir las sustancias que aquí se depositan.
•
Tornillo de Ajuste: Se utiliza para ajustar la calibración del dispositivo.

• Tubo de Espejo: Refleja la luz hacia arriba a través del refractómetro.

• Ocular: Lente enfocable por donde se observa la escala.

• Escala: Ubicada el interior, indica la escala de medición y varía según su

aplicación y características.
Proceso correcto de calibración de un refractómetro clínico.

1. Asegúrese que el refractómetro este totalmente limpio.

2. Se coloca agua destila sobre el prisma; suficiente para

cubrir el prisma completamente.

3. Cierre el cubre objetos y gire el tornillo de ajuste de

manera que el limite claro / oscuro, se alinea con la línea
de cero.

4. Se limpia el agua destila con un pañuelo para lentes o

paño suave.

Pasos para analizar una muestra con el refractómetro clínico.

1. Coloca 1 o 2 gotas de la muestra sobre el prisma.

2. Cerrar la lámina que impide la entrada de luz, suavemente.

3. La muestra debe extenderse sobre la superficie del prisma.

4. Mira la escala a través del lente.

5. La lectura de la escala es en línea de frontera.

6. Seca y limpia la muestra del prisma con un papel tissue y agua.

Usos del refractómetro clínico.

En el laboratorio clínico, el refractómetro se emplea para obtener la

densidad de la orina. También para obtener la concentración de proteínas
totales en suero o plasma. El refractómetro clínico posee tres escalas. La
primera para proteínas en suero, la segunda para indicar el peso específico
de la orina, y la tercera para el índice de refracción. Las características del
refractómetro clínico utilizado son variadas según la función.
Mantenimiento del refractómetro clínico.

• Mantener limpios tanto la tapa como el prisma, la suciedad puede influir

negativamente sobre la precisión en la medición del refractómetro.

• Evite las ralladuras sobre el prisma, ya que éstas también pueden tener una
influencia negativa en la medición.

• En la limpieza utilice sólo un paño húmedo y evite limpiadores agresivos,

seque perfectamente el aparato tras su limpieza.

• Limpiar el aparato simplemente con un paño húmedo y nunca bajo el agua,

ya que ésta podría penetrar en el aparato.

• Evite golpes o caídas que podrían dañar el sistema óptico.

• Guarde el aparato en un lugar seco.

MATERIALES Y SUSTANCIAS:
Práctica 1: Muestra de uva.
Materiales: Sustancias y reactivos:

• Refractómetro clínico. • Jugo de una uva.

• Piseta. • Agua destilada.
• Tornillo de ajuste.
• Toallas de papel.

Práctica 2: Muestra de suero salino y disolución azucarada.

Materiales: Sustancias y reactivos:
• Refractómetro clínico. • Agua destilada.
• Piseta. • Suero salino fisiológico (0.9 g / 100 ml.
• Tornillo de ajuste. • Disolución azucarada, de la que no se conozca
• Toallas de papel. la concentración.
• Pipeta Pasteur.
Práctica 3: Muestra de orina.
Materiales: Sustancias y reactivos:

• Refractómetro clínico. • Agua destilada.

• Piseta. • Muestra de orina fresca.
• Tornillo de ajuste.
• Papel de filtro.
• Pipeta Pasteur.

PROCEDIMIENTO:
Práctica 1: Muestra de uva.
1.- Limpieza, comprobación y calibración: Se abrió la placa que cubría el
prima del refractómetro y se limpiaron ambos con agua destilada y una
toalla de papel suave que no desprendiera ni pelusas ni fibras, luego se
dirigió la parte del prisma hacia la luz brillante y se ajustó el anillo de
bioptrías hasta que se pudiera ver claramente la escala, después se
colocaron una o dos gotas de agua destilada para realizar la calibración del
equipo sobre el prisma, cerrando después la tapa que cubría la placa, se
giró el tornillo de ajuste hasta que se hiciera coincidir la línea divisoria azul-
blanca con el 0, por último, se abrió de nuevo la placa, se limpió y se secó
tanto el prisma como la propia placa.
2.- Añadir muestra: Se exprimieron una o dos gotas del jugo de una uva
sobre el prisma con cuidado y se cubrió este con la placa para que no se
saliera la muestra.
3.- Lectura y medición: Debió observarse por el ocular para leer el valor de
la escala de lo que se deseaba buscar en la muestra para registrarlo y se
limpió el instrumento con las medidas necesarias para guardarlo.
Ilustraciones del experimento.

Práctica 2: Muestra de suero salino y disolución azucarada.

1.- Se levantó la tapa que tiene el aparato (que en el caso de que estuviera
sucio se limpiaba con alcohol) y se introdujo una gota de agua en la placa.
Mirando por el objetivo hacia una fuente de luz para que reflejara en el
prisma y se evaluara la muestra que contenía el aparato y con ayuda del
tornillo de ajuste la marca blanca de la escala tenía que ponerse en 0.
2.- Hecho esto, se secó el agua y ahora se depositó el suero fisiológico con
ayuda de la pipeta en la placa. Este suero se sabía que tenía una
concentración de 0.9%, por lo que si el refractómetro funcionaba como tenía
que funcionar, en la escala que se veía en el ocular se observaría el valor
correspondiente de la concentración de la solución.

Ilustraciones del experimento.

3.- Luego, se limpió el suero de la placa y se introdujo una gota de agua
azucarada con ayuda de la pipeta para conocer la concentración de azúcar
en la muestra, siempre cerrando la tapa para que no se saliera la muestra y
observando la escala para el ocular para conocer el valor de la
concentración.
4.- Por último, se limpió el refractómetro y se guardó en su estuche,
además, se recogió todo el material que se había usado.
Ilustraciones del experimento.

Práctica 3: Muestra de orina. (Esta práctica no tiene imágenes porque la agregué del
archivo del wix para saber cómo se usa el refractómetro con muestras de orina y busqué
videos de esto, pero no encontré y por eso no tiene imágenes).
1.- Se abrió la placa que cubría el prisma y se limpiaron ambos con alcohol y un paño suave
que no desprendiera ni pelusas ni fibras.
2.- Dirigieron la parte del prisma hacia una luz brillante y se ajustó el anillo de dioptrías
hasta que se pudiera ver claramente la escala.
3.- Se colocaron una o dos gotas de agua destilada, o de una muestra patrón, para realizar
la calibración del equipo sobre el prisma, cerrando después la tapa que cubre la placa.
4.- Giraron el tornillo de ajuste hasta que hiciera coincidir la línea divisoria azul-blanco con el
0, si era agua destilada o si se trataba de una disolución de concentración conocida con su
valor correspondiente.
5.- Se abrió de nuevo la placa, se limpió y secó bien tanto el prisma como la propia placa.
6.- Colocaron una o dos gotas del líquido a medir con ayuda de la pipeta.
7.- Se cerró la placa y se miró por el ocular, leyendo directamente en la escala el valor de la
concentración buscada para después limpiar el material y guardarlo.

OBSEVACIONES:
Lo que más me llamó la atención de la práctica fue lo siguiente:

• El refractómetro clínico es un instrumento óptico preciso que basa su funcionamiento

en el estudio de la refracción de la luz.
• Para usar esta herramienta es necesario tener mucho cuidado y darle el
mantenimiento adecuado, logrando tener un mejor funcionamiento.
• Antes de analizar una muestra con el refractómetro clínico siempre es necesario una
calibración de este para mayor precisión de los valores, esto no es tan difícil hacerlo
y es muy práctico ya que solo se añade una muestra de agua destilada y con el
tornillo se ajusta la marca en 0.
• Con este procedimiento se pueden descubrir y encontrar diferentes características
de muchas muestras en sus escalas y estas muestras pueden ser de muchas cosas
y estar en diferente estado de agregación según el refractómetro que se use.
• Los modelos de refractómetro clínico son muy variados e incluso algunos llaman
mucho la atención por su avanzado diseño.
 • La temperatura de los reactivos que son analizados en el refractómetro suele influir
en el resultado de la escala por lo que se debe tener cuidado con esto.
• Si ocurre una falla con el instrumento no debe tratarse de arreglar si no se tiene
conocimiento por lo que se le debe dejar a especialistas.

Ilustraciones de las observaciones

RESULTADOS:
En nuestras prácticas no tuvimos resultados ya que no se presenció por el ocular del
instrumento la escala en la valoración de la muestra, sólo se supe la del agua destilada al
calibrar el instrumento que era de 0, la de suero fisiológico que era de 0.9 g / 100 ml y la de
solución azucarada de 2.4 g / 100 ml.
CONCLUSIONES:
Al final de la práctica llegué a la conclusión de que la Refractometría es el método óptico
que determina la velocidad de propagación de la luz en un medio contra la velocidad de la
luz en el vacío, con uso de la unidad de índice de refracción, la cual se relaciona
directamente con la densidad de este medio. Aprendí que los refractómetros son los
instrumentos que emplean este principio de refracción según el tipo de instrumento ya que
existen diferentes clases de estas herramientas. Conocí que su funcionamiento se basa en
utilizar la refracción de la luz, la cual es una propiedad física de cualquier sustancia. A partir
de ello, y de acuerdo a su aplicación se construyen diferentes escalas. Identifiqué que un
refractómetro clínico está conformado por un prisma principal, su tornillo de ajuste, un tubo
de espejo, un ocular y la escala. Vi que el procedimiento de medición con este instrumento
es demasiado fácil y práctico, sólo que debe realizarse con las medidas necesarias para no
afectar el resultado ni el equipo. Comprendí que la calibración de estos instrumentos ópticos
es fundamental para su funcionamiento y precisión en los resultados. Pude entender que la
temperatura de los reactivos o muestras que se utilizan influye en el resultado de la escala
por lo que debe tenerse mucho cuidado con eso. También aprendí que esta herramienta
sirve para medir características de muestras líquidas, sólidas y gases, como vidrios y
gemas. Por último, supe que este instrumento puede ayudar en diferentes actividades para
evaluar muestras y productos y conocer así información que se desee conocer de sus
características.
 Ilustraciones de las conclusiones.

Fuentes de información:
Auxilab. (06 de Mayo de 2016). Uso de los refractómetros de mano. Recuperado el 16 de
Febrero de 2021, de Youtube: https://www.youtube.com/watch?v=MgF6U&fbclid
Químico, L. (s.f.). Refractometro. Recuperado el 16 de Febrero de 2021, de TP Laboratorio
Químico: https://www.tplaboratorioquimico.com/refractometro
Radillo. (13 de Noviembre de 2016). Refractometría. Recuperado el 16 de Febrero de 2021,
de Pipetealo: https://www.pipetealo.wordpress.com/2016/11/13/refractometria
Rodríguez, F. (01 de Febrero de 2018). Uso del refractómetro clínico con muestras de orina.
Recuperado el 16 de Febrero de 2021, de Blog de Laboratorio Quimico:
https://www.franizmn.com/uso-del-refractometro

ACTIVIDADES:
¿Qué es el refractómetro y para qué sirve?
El Refractómetro es un instrumento óptico preciso, y como su nombre lo indica, basa su
funcionamiento en el estudio de la refracción de la luz. El refractómetro es utilizado para
medir el índice de refracción de líquidos y sólidos translucidos permitiendo:

• Identificar una sustancia.

• Verificar su grado de pureza.

• Analizar el porcentaje de soluto disuelto en una determinada solución.

• Ofrecer otros análisis cualitativos.

Su funcionamiento se basa en utilizar la refracción de la luz, la cual es una propiedad física

de cualquier sustancia y se relaciona con algunas propiedades físicas como la densidad. A
partir de ello, y de acuerdo a su aplicación se construyen diferentes escalas. La escala más
usada es Grados Brix (Proporción de sacarosa o sales en una solución). Existen otras
escalas, como: Be (Baumé), % de sal, gs, g/dl, nD, % w/w, % vol, % agua, mash sacch, M-
10, MDT, entre otras.

Dibujar un refractómetro con el que se usó y especificar sus partes.

¿Qué se puede medir con el refractómetro clínico?

En el laboratorio clínico, el refractómetro se emplea para obtener la densidad de la orina.
También para obtener la concentración de proteínas totales en suero o plasma. Además, se
puede utilizar para saber la concentración de azúcar en frutas y en diferentes destilados
para la elaboración de cervezas y vinos.
¿Cómo está estructurada la escala de medición?
El refractómetro clínico posee tres escalas. La primera para proteínas en
suero, la segunda para indicar el peso específico de la orina, y la tercera
para el índice de refracción. La calibración se realiza con agua destilada
haciendo coincidir la línea de separación con el valor 1.333 de la escala de
IR.
Mediante un dibujo explicar que es reflexión y refracción

Reflexión Refracción
Defina índice de refracción
Es el cociente de la velocidad de la luz en el vacío y la velocidad de la luz en el medio cuyo
índice se calcula. Se simboliza con la letra n y se trata de un valor adimensional. El índice
de refracción de un medio es una medida para saber cuánto se reduce la velocidad de la luz
(o de otras ondas tales como ondas acústicas) dentro del medio.
¿Qué son los grados brix y como se interpreta la lectura?
El Brix es una medida de la cantidad de sólidos disueltos que hay en un líquido, que se
obtiene a través de la gravedad específica y se usa sobre todo para medir la azúcar
disuelta. Un grado Brix es un gramo de sacarosa en 100 gramos de solución.
1 grado Brix (°Bx) = 1 g de sacarosa / en 100 g de solución

Escala:

Brix
(°Br o % p/p)

Información:

La escala Brix la creó Aldolf Brix, quien corrigió errores de cálculo en las tablas de Balling.

Uso:

La escala más usada a nivel mundial para medir la concentración de azúcar en diferentes
industrias y muestras (zumos de frutas, uvas, bebidas carbonatadas, etc.).

Instrumento de medición:

Densímetro digital, refractómetro digital, picnómetro, hidrómetro y refractómetros manuales.

¿En dónde se pueden aplicar las lecturas de un refractómetro?
Las medidas de los refractómetros son muy importantes en diferentes industrias y ámbitos,
por ejemplo, en la industria cervecera y vinícola, en la agricultura, procesadoras de
alimentos y fábricas debido a que con esto se estudian diferentes valores del contenido de
azúcar en ciertos productos a través de la refracción de la luz para determinar si dichos
productos son buenos o deben de evitar consumirse.