UNIVERSIDAD PRIVADA DEL NORTE

FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL

DETERMINACIÓN DE PRESENCIA DE ENTEROBACTERIA

“ESCHERICHIA COLI”, MEDIANTE TSI Y LIA EN EL TRAMO
DEL PUENTE DEL RÍO CHILLÓN – PUENTE PIEDRA, 2019.

DETERMINATION OF THE PRESENCE OF ENTEROBACTERIA “ESCHERICHIA

COLI”, THROUGH TSI AND LIA IN THE BRIDGE OF THE RIVER CHILLÓN,
2019.

Alta B, Melgar R, Polanco J, Sánchez M, Tapia H, Vidal H.

RESUMEN
El trabajo está estructurado en seis capítulos. El primero, se refiere a la descripción del río Chillón; el
segundo, precisa los objetivos, aquellos que se llevarán a cabo en la investigación del proyecto; el tercero,
presenta la metodología, como es que se llevará a cabo el proceso de recolección de muestras y materiales
que se necesitarán para cumplir los objetivos y los procedimientos que se llevarán son dos, el aislamiento
de bacterias con el Agar MacConkey y para determinar la enterobacteria “Escherichia Coli”; el
procedimiento se llevará a cabo mediante la prueba bioquímica del TSI; el cuarto determina los resultados
obtenidos en el laboratorio, el quinto hace referencia a las semejanzas del trabajo de investigación y el
último son las conclusiones acorde al trabajo realizado en tramo del puente del río Chillón.

Palabras claves: Aislamiento de bacterias, Agar MacConkey, Escherichia Coli, Prueba bioquímica TSI
ABSTRAT
The work is structured in six chapters. The first refers to the description of the Chillón River; the second,
specifies the objectives, those that will be carried out in the investigation of the project; the third, presents
the methodology, how it will be carried out the process of collecting samples and materials that will be
needed to meet the objectives and the procedures that will be carried are two, out are the isolation of
bacteria with the MacConkey Agar and to determine the enterobacteria " Escherichia Coli "; the
procedure will be carried out by means of the TSI biochemical test; the fourth determines the results
obtained in the laboratory, the fifth makes reference to the similarities of the research work and the last
one is the conclusions according to the work done in the section of the Chillón river bridge.

Keys words: Isolation of bacteria, Agar MacConkey, Escherichia Coli, TSI biochemistry test.

I. INTRODUCCION Nacional de Salud Pública, “Patógenos e

La presencia o aumento de bacterias, parásitos,
virus y hongos en el agua surge usualmente por
efecto directo o indirecto de cambios en el
medio ambiente y en la población tales como
urbanización no controlada, crecimiento
industrial, pobreza, ocupación de regiones antes
deshabitadas, y la disposición inadecuada de
excretas humanas y animales. (Facultad
indicadores microbiológicos de calidad del agua
para consumo humano” 2017).
De hace unas décadas los recursos hídricos se
dejaron de llamar energía renovable, ya que se
alteraba el ciclo natural del agua por el consumo
y retención de esta, el agua es uno de los
recursos indispensables para la vida en nuestro
planeta. Ésta se encuentra principalmente como
agua salada en los océanos (97%), en los Puente del Río Chillón – Puente
glaciares y casquetes polares (2.15%) y Piedra, 2019.
solamente una pequeña porción (0.85%) se
II.2.Objetivos Específicos
presenta como agua dulce utilizable por el
hombre (Guillén A, y Queque J, "Estudio del Monitorear el lugar de estudio
agua del río Chillón",2003). determinado en el tramo del Puente del
Río Chillón.
En la presente investigación nos centraremos en Realizar la prueba bioquímica
el tema de los microorganismos, que se pueden mediante TSI, de la muestra extraída
definir como un sistema biológico que solo del Río Chillón.
puede visualizarse con el microscopio.
Analizar las consecuencias de la
Las características principales de este trabajo enterobacteria “Escherichia Coli”, en
son poder visualizar la presencia de los la población cercana.
microorganismos que estarán presentes en las
muestras obtenidas de la zona del Puente del III. METODOLOGÍA
Río Chillón en el distrito de Puente Piedra.
Materiales:
Para dar a entender la problemática de la
Agua destilada 250ml
contaminación de este río es necesario
1 Aza de siembra aguja
mencionar que la determinación de la calidad
1 Aza de siembra en aro
bacteriológica resulta de gran importancia en el
1 Mechero
ámbito de la salud pública, ya que permite
4 Placas Petri
garantizar la inocuidad del agua destinada al
1 Pabilo
consumo y/o actividades domésticas y así
4 Tubos de ensayo
evitando epidemias gastrointestinales entre
1 Tijera
otras.
1 Paquete de algodón
1 Espátula
Este estudio, se realizó por el interés de conocer
3 Pliegos de papel Kraft
las consecuencias del cambio del río, e
1 Gradilla
identificar los posibles riesgos a los que se
expone la población aledaña, ya que permitirá
Instrumentos Volumétricos:
identificar las relaciones que existen entre los
microorganismos. 2 Pipetas
Esta vigilancia exige el uso de herramientas 1 Pro pipeta
diagnósticas para identificar los organismos 1 Probeta
presentes; sin embargo, hay gran limitación para
determinar la totalidad de agentes involucrados Instrumentos no Volumétricos:
en su contaminación, tanto en las fuentes de
abastecimiento como en los sistemas de 3 Matraces Erlenmeyer
tratamiento del agua. (Facultad Nacional de 1 Vaso de precipitado
Salud Pública, “Patógenos e indicadores
microbiológicos de calidad del agua para Equipos:
consumo humano”, 2017).
Incubadora
II. OBJETIVOS: Autoclave
Balanza analítica
II.1.Objetivos General
Medio de Cultivo:
Determinar la presencia de
enterobacteria “Escherichia Coli”,
Agar TSI
mediante TSI y LIA en el tramo del
 para evitar el deterioro y
contaminación de la misma.

- Para los análisis microbiológicos se

Método dejó un espacio vacío para la
aireación.
Procedimiento (Toma de muestra)
Imagen 1: Ubicación del lugar de
Localización: estudio.

Puente del Río Chillón – Puente Piedra,

Auxiliar de la Panamericana Norte.

Las aguas del Río Chillón a esta altura

son prácticamente inutilizables por las
malas condiciones sanitarias. Debido a la
existencia de los botaderos de residuos
en las riberas del río y a las descargas
directas de los desagües domésticos.

Los residuos son arrojados por la misma

Fuente: Elaboración Google Maps, 2019.
población.

Materiales:

2 Frascos de boca ancha

Guantes
Mascarillas
1 Cooler mediano
Gel refrigerante (Ice Pack)
Cadena de custodia
EPP (chalecos y botas de seguridad)

Toma de muestra:

Al llegar al río se debe ubicar una

zona específica donde se va a
trabajar. Se deben de tomar las
muestras en puntos distintos para
obtener una mayor información de
grado de contaminación del Río
Chillón.

- En la toma de muestra se
identificó el envase rotulando
una etiqueta con información
suficiente; esta debe constar del
nombre de la persona que
realizo el muestreo, la fecha,
hora y localización.

- La muestra se transportó con

suma precaución al laboratorio
 T: 24 h
Proceso para la determinación de la
°C: “Escherichia
37° Coli”:
Prueba bioquímica (TSI)
Aislamiento de bacteria (A. Mac Conkey).

Aislamiento de Identificación
bacteria bacteriana

Recepción de equipos y Recepción de equipos y

materiales materiales

Limpieza, desinfección y Limpieza, desinfección y

esterilización de materiales esterilización de materiales

MAC
CONKE
Y
Realizar los Realizar los
correspondientes cálculos de correspondientes cálculos de
AGAR: agar
5g
agar

Pesado Pesado

Agar + TSI
Agua Mezcla Mezcla
destilada

T: 20min/
Esterilización T: 20min/ Esterilización
121°C
121°C

Después de
Adición del agar 48 horas de Extracción de la muestra
incubación
de la placa

Extracción de la muestra 8 ml del agar Siembra estría cruzada (TSI)

método de estría cuadrante en cada tubo
radial cruzada a usar

T: 24 h
Encubar
Encubar
IV.RESULTADOS

La muestra sembrada en las 4 placas con agar V. DISCUSION

Mc Conkey, revisado dentro de las 48 horas nos
dio positivo para bacilos Gram negativos.
Debido a su coloración violeta al final del
proceso de la tinción GRAM observados con el
microscopio pudimos detectar que
efectivamente se trataba de un bacilo GRAM
negativo.
Al utilizar las bacterias crecidas en las placas,
para la nueva siembra con el agar TSI nos revela
presencia de E. coli por la coloración amarilla
obtenida.
Tabla 1
Análisis bioquímico con TSI.
Fue necesario realizar la tinción Gram,
puesto que dependía de ello determinar si en
nuestra muestra había bacilos Gram
negativos, cuya presencia fue comprobada
con el microscopio.
La revista CENIC Ciencias Biológicas
(2013) menciona que la bacteria Escherichia
coli es un indicador fecal, con base a esto la
muestra analizada está contaminada con
materia fecal, lo cual se considera que al
consumir esta agua existe una alta
probabilidad de adquirir enfermedades
gastrointestinales causadas por bacterias
entero patógenas.

Análisis de enterobacterias
VI.CONCLUSIONES
Muestra del río
Mac Conkey
Chillón Se determinó la presencia de E. Coli
mediante TSI en las aguas del Rio Chillón-
N°1 N°2 Puente piedra.

A estas alturas el agua del rio Chillón debe

Gram tratarse antes de ser utilizado, puesto que no
(+) (+)
Negativas es apto para consumo humano, animales ni
actividades (lavar).

Fuente: Elaboración propia, 2019. Es posible que las alergias o problemas

dermatológicos se debe al uso de estas
aguas, sin previo tratamiento.
Tabla 2
Análisis bioquímico con Mac Conkey VII. REFERENCIAS
BIBLIOGRAFICAS

Análisis de enterobacterias Ríos, S. Agudelo, R., Gutiérrez L.

(Abril/enero 2017). “Patógenos e
Muestra del río indicadores microbiológicos de calidad
TSI del agua para consumo humano.
Chillón
Universidad de Antioquia. Colombia -
Revista de Facultad Nacional Salud
N°1 N°2 Pública 35 (2). 237-238.

Guillén, R., Quequejana, C. Giovana.

E. COLI (+) (+) N. (2003). "Estudio del agua del
río Chillón" (Tesis de pregrado,
Universidad Nacional de Ingeniería.).
Fuente: Elaboración propia, 2019. (Acceso el 2 de diciembre de 2018)
Aliaga,M.(2010).“Situación ambiental
del recurso hídrico en la cuenca baja
del rio chillón y su factibilidad de
recuperación para el desarrollo
sostenible”(tesis de
pregrado).Universidad Nacional de
Ingenieria,Lima,Peru.Recuperado de
http://cybertesis.uni.edu.pe/bitstream/u
ni/645/1/aliaga_mm.pdf
Larrea, J. Rojas, M., Romeu A., Rojas
N., Heydrich M. (2013). “Bacterias
indicadoras de contaminación fecal en
la evaluación de la calidad de las
aguas: revisión de la literatura”. La
Habana - Revista CENIC Ciencias
Biológicas.