Boletín Latinoamericano y del Caribe de

Plantas Medicinales y Aromáticas

ISSN: 0717-7917
editor.blacpma@usach.cl
Universidad de Santiago de Chile
Chile

MESA-VANEGAS, Ana María; ZAPATA-URIBE, Sebastián; ARANA, Luis Miguel; ZAPATA, Isabel
Cristina; MONSALVE, Zulma; ROJANO, Benjamín
Actividad antioxidante de extractos de diferente polaridad de Ageratum conyzoides L.
Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas, vol. 14, núm. 1, 2015, pp.
1-10
Universidad de Santiago de Chile
Santiago, Chile

Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=85632845001

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Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas 14 (1): 1 - 10
ISSN 0717 7917
www.blacpma.usach.cl

Artículo Original | Original Article

Actividad antioxidante de extractos de diferente polaridad de

Ageratum conyzoides L.
[Antioxidant activity of different polarity extracts from Ageratum conyzoides L.]

Ana María MESA-VANEGAS1, Sebastián ZAPATA-URIBE1, Luis Miguel ARANA1, Isabel Cristina ZAPATA2,
Zulma MONSALVE1 & Benjamín ROJANO2
1
Grupo de Investigación Agrobiotecnología, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales y
2
Grupo Ciencias de los alimentos,
Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia.
Contactos | Contacts: Benjamín ROJANO - E-mail address: brojano@unal.edu.co

Abstract: The present study aimed to investigate the antioxidant activity of extracts of different polarity of the species Ageratum conyzoides
L., evaluating by different spectrophotometric methods: ABTS•+, DPPH•, FRAP and ORAC. Extracts of A. conyzoides L., showed good
antioxidant activity in the methodologies evaluated. The extract was the most active of ethyl acetate (ACExtA) which showed the best
evaluated values techniques with higher power as determined by the assay values of TEAC ORAC = 494048.95 ± 29695.80 μMol
Trolox/100g sample. Measurements of antioxidant activity by different techniques offer advantages in terms of predicting the in vitro
antioxidant capacity of this plant, it is also recommended to explore the structural characteristics of the compounds present in the ethyl
acetate extract of the plant with to explore the potential benefits and possible mechanisms of action of new antioxidants.

Keywords: Antioxidants, Ageratum conyzoides L., reducing power

Resumen: El presente trabajo tuvo como objetivo investigar la actividad antioxidante de extractos de diferente polaridad de la especie
Ageratum conyzoides L., mediante la evaluación por diferentes métodos espectrofotométricos: ABTS•+, DPPH•, FRAP y ORAC. Los
extractos de A. conyzoides L., presentaron una buena actividad antioxidante en las metodologías evaluadas. El extracto más activo fue el de
acetato de etilo (ACExtA), que presentó los mejores valores por las técnicas evaluadas con la mayor potencia determinada por el ensayo
ORAC con valores de TEAC = 494048,95 ± 29695,80 μMol Trolox/100g muestra. Las mediciones de la actividad antioxidante por
diferentes técnicas, ofrecen ventajas en términos de la predicción de la capacidad antioxidante in vitro de esta planta, además se recomienda
explorar las características estructurales de los compuestos presentes en el extracto de acetato de etilo de esta planta con el fin de investigar
los beneficios potenciales y los mecanismos de acción de posibles nuevos antioxidantes.

Palabras clave: Antioxidantes, Ageratum conyzoides L., poder reductor.

Recibido | Received: 9 de Septiembre de 2013

Aceptado | Accepted: 2 de Noviembre de 2013
Aceptado en versión corregida | Accepted in revised form: 28 de Octubre de 2014.
Publicado en línea | Published online: 30 de Enero de 2015
Este artículo puede ser citado como / This article must be cited as: AM Mesa-Vanegas, S Zapata-Uribe, LM Arana, IC Zapata, Z Monsalve, B Rojano. 2015. Actividad
antioxidante de extractos de diferente polaridad de Ageratum conyzoides L. Bol Latinoam Caribe Plant Med Aromat 14(1): 1 – 10.

1
Mesa-Vanegas et al.
INTRODUCCIÓN
La prolongada exposición a oxidantes exógenos y/o a
metabolitos endógenos en el cuerpo pueden producir
especies reactivas de oxígeno (ROS), (Por ejemplo,
los radicales anión superóxido, radicales hidroxilo y
peróxido de hidrógeno) (Carocho & Ferreira, 2013).
Cuando un exceso de radicales libres se forma, puede
causar la destrucción de enzimas tales como
superóxido dismutasa (SOD), glutatión peroxidasa
(GPx), y catalasa, generando efectos letales en las
células por la oxidación de lípidos, proteínas, DNA y
enzimas; ocasionando reacciones en cadena que
perpetúa la creación de más radicales libres
aumentando el daño de tejidos (Krishnaiah et al.,
2011). Los radicales libres son responsables de
causar un gran número de enfermedades entre las que
se incluyen el cáncer, enfermedades cardiovasculares,
trastornos neuronales, Alzheimer, Parkinson,
deterioro cognitivo leve, enfermedades del hígado
inducidas por el alcohol, colitis ulcerosa, el
envejecimiento y la aterosclerosis (Alam et al.,
2013).
Los compuestos antioxidantes tienen la
capacidad de inhibir o interrumpir las reacciones de
transformación que causan daños a las biomoléculas.
En los últimos años los antioxidantes naturales
provenientes de plantas (por ejemplo, ácido ascórbico
(vitamina C), α-Tocoferol (vitamina E), glutationa,
carotenoides, y flavonoides), han sido frecuentemente
usados en diferentes campos de la industria
farmacéutica, alimentos y en medicina (Karre et al.,
2013). Muchos de estos, presentan una actividad
comparable con antioxidantes sintéticos de mayor
uso comercial como el 2-terbutil-hidroxitolueno
(BHT) y el 2-terbutil-hidroxianisol (BHA); los cuales
sin embargo, pese a sus propiedades antioxidantes
presentan la desventaja de tener efectos toxicológicos
(Koheil et al., 2011). Un gran número de
contribuciones sobre el reporte de extractos y/o
sustancias validadas por sus propiedades
antioxidantes se ha incrementado significativamente
en los últimos años. El estudio de nuevos y efectivos
antioxidantes puede ser de gran beneficio en la
mejora de la calidad de vida mediante la prevención y
aparición de enfermedades degenerativas. Además,
de presentar un sustancial ahorro en el costo de los
servicios de atención de la salud. Sin embargo, a
pesar de la gran cantidad de sustancias y/o especies
vegetales validadas por poseer propiedades
antioxidantes para inhibir el deterioro oxidativo, son
pocos los estudios complementarios y los recursos
que se destinan en la investigación, ya que sólo unas
Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas/2
Actividad Antioxidante de Ageratum conyzoides L.
pocas especies se utilizan como suplementos
antioxidantes o alimentarios (Suhaj, 2006).
Ageratum conyzoides, conocido normalmente
como manrubio blanco o morado (Asteraceae), es
una planta que se encuentra a nivel mundial,
particularmente en el suroeste de Asia, India, China,
Japón, Indonesia y Corea (Kohli et al., 2006; Kong et
al., 2004), también es muy común en el este de
África y algunas partes de Suramérica. Ageratum
consiste de aproximadamente 30 especies, pero solo
unas cuantas se han estudiado desde un punto de vista
fitoquímico. Los metabolitos más representativos
reportados en A. conyzoides, son mono y
sesquiterpenos, cromenos, cromonas, benzofuranos,
cumarinas, flavonoides, triterpenos, esteroles y
alcaloides (Okunade, 2002). En la medicina
tradicional, esta planta se ha utilizado en varias partes
de África, Asia y América del Sur para curar diversas
enfermedades. Algunos usos reportados incluyen
remedios populares como purgante, febrífugo,
cólicos, úlceras, antipirético, enfermedades mentales
e infecciosas, diarrea, así como dolores de cabeza,
disnea, antiasmático, antiespasmódica, enfermedades
ginecológicas, entre otras (Okunade, 2002).
De esta planta se ha reportado su actividad
contra parásitos pertenecientes al género Plasmodium
(Madureira et al., 2002) y al género Tripanosoma
(Freiburghaus et al., 1996). Nweze y Obiwulu, 2009;
confirmaron que también tiene un gran potencial en
el control de la Coccidiosis, una enfermedad
provocada por un protista de la subclase
Coccidiasina, por lo que se sugiere que esta planta se
podría emplear como un fitomedicamento en
enfermedades parasitarias (Nweze & Obiwulu, 2009).
Por otro parte, se evaluó el efecto gastroprotector in
vivo en ratones, mediante la administración oral de
500 y 750 mg/kg del extracto etanólico de A.
conyzoides. Los resultados sugieren que las diferentes
concentraciones del extracto protegían
significativamente las lesiones gástricas de los
ratones en un 80,59 y 89,33%, respectivamente. Estos
resultados permitieron deducir que la actividad
gastroprotectora significativa podría estar mediada
por su actividad antioxidante (Shirwaikar et al.,
2003). Posteriormente, se han reportado estudios
sobre la capacidad de atrapar radicales por el método
DPPH de diferentes extractos de A. conyzoides,
además de su actividad citotóxica (Adebayo et al.,
2010); igualmente Nasrin, 2013, evaluó la actividad
citotóxica y antioxidante del extracto metanólico de
esta planta (Nasrin, 2013). En este sentido, se
pretende determinar la capacidad antioxidante de
Mesa-Vanegas et al.
extractos de diferente polaridad de la especie
Ageratum conyzoides L. midiendo la actividad
antioxidante por diferentes metodologías
espectofotometricas ABTS•+, DPPH•, FRAP y ORAC
para caracterizar el potencial reductor de los
diferentes extractos de esta planta y de esta manera
ampliar y complementar los resultados frente a su uso
en diferentes enfermedades donde los procesos
oxidativos sean relevantes.
MATERIALES Y METODOS
Colección del material vegetal
Se obtuvieron hojas de manrubio blanco (A.
conyzoides), a partir de plantas silvestres del oriente
del departamento de Antioquia en el municipio de
Guarne. La identificación taxonómica de las plantas
se realizó en el herbario de la Universidad de
Antioquia.
Preparación de los extractos de diferente polaridad
y aceite esencial
El material vegetal se secó a temperatura ambiente
durante 10 días y posteriormente se molieron con un
tamaño de partícula de 5 mm. Se llevó inicialmente
50,49 g del material vegetal molido a un proceso de
percolación hasta agotamiento (5 días/3 veces),
utilizando etanol (E) destilado como solvente.
Posteriormente, se filtró y se concentró el extracto en
un rotavaporador para obtener el extracto etanólico
Ec. 1
Evaluación de la actividad antioxidante
Contenido de fenoles totales (CFT)
Determinación de fenoles totales. La determinación
del contenido de fenoles totales se realizó por el
método colorimétrico Folin - Ciocalteu (Singleton &
Rossi, 1965; Peyrat-Maillard et al., 2000,
modificado por Gaviria et al., 2009). Se construyó
una curva patrón utilizando como estándar ácido
gálico. Posteriormente se prepararon diluciones a
partir de las soluciones de trabajo, de forma que 50
µL de cada dilución fueron mezclados con 425 µL de
agua supra- pura, 125 µL del reactivo Folin y 400 µL
de carbonato de sodio, con el objetivo de obtener
lecturas a 760 nm, después de permanecer por una
hora en ausencia de luz, en un intervalo determinado
Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas/3
Actividad Antioxidante de Ageratum conyzoides L.
codificado como (CPExtE), Por otra parte, (307,15
g) de material molido se sometió a un proceso de
extracción con solventes de polaridad ascendente
(500 mL) mediante un proceso de percolación hasta
agotamiento con cada uno de los siguientes solventes:
hexano (H), diclorometano (D), acetato de etilo (A) y
metanol (M), Después de tres días se comenzó la
concentración del extracto a presión reducida en un
rotavaporador. El solvente recuperado en el
rotavaporador se agregó nuevamente al material
vegetal y se repitió el proceso de extracción tres
veces hasta cambiar el solvente. El aceite esencial se
obtuvo mediante extracción por arrastre con vapor
con 40,03 g de material vegetal, el condesado
(mezcla aceite esencial (AE) y agua) se recogió y se
extrajó con diclorometano, se filtró y se secó con
sulfato de sodio Na2SO4 y posteriormente se
rotoevaporó. Los seis extractos se codificaron con
las iniciales de Ageratum conyzoides y el tipo de
extracto (ACExtH, ACExtD, ACExtA, ACExtM,
ACExtE, ACExtAE) y se monitorearon por
cromatografía de capa delgada con fase estacionaria
de Silica gel 60 GF254 Merck®, mediante sistema de
elución diclorometano: metanol (DCM -MeOH; 9:1)
y revelando con lámpara ultravioleta UVGL-58 a 254
y 366 nm.
Los porcentajes de extracción de los
extractos se calcularon según la ecuación 1.
de la curva patrón. Los resultados se expresaron
como miligramos equivalentes de ácido gálico por
cada 100 g de extracto.
Ensayo de decoloración del catión radical α-α-
difenil-ß-picrilhidrazilo (DPPH•)
Para cuantificar la capacidad captadora de radicales
libres de los extractos se determina el grado de
decoloración que provocan sus componentes a una
solución metanólica de DPPH mediante el método de
Brand-Williams, con algunas modificaciones (Brand-
Williams et al., 1995; Puertas et al., 2005). Se
prepara una solución madre de DPPH•
aproximadamente 20 mg/L del radical en metanol,
990 μL de ésta solución se mezclan con 10 μL de
Mesa-Vanegas et al.
solución de extracto (a diferentes concentraciones),
Se prepara un blanco de muestra que contiene 990 μL
MeOH con 10 μL de muestra y un blanco de
referencia que contiene 990 μL DPPH• con 10 μL de
solvente, Se incuba a temperatura ambiente durante
30 minutos en la oscuridad y se mide la absorbancia a
517 nm, Los resultados se expresan como valores
TEAC (Trolox equivalent antioxidant capacity)
mediante la construcción de una curva patrón usando
como antioxidante TROLOX®.
Ensayo de decoloración con el radical catiónico
ABTS•+
Se fundamenta en la cuantificación de la
decoloración del radical ABTS•+, debido a la
interacción con especies donantes de hidrógeno ó de
electrones, El radical catiónico ABTS•+ es un
cromóforo que absorbe a una longitud de onda de 734
nm y se genera por una reacción de oxidación del
ABTS (2,2’-azino-bis- (3-etil benzotiazolin-6-
sulfonato de amonio) con persulfato de potasio, Las
mediciones se realizan a una longitud de onda de 734
nm (Re et al., 1999). En la evaluación se utilizaron
10μL de extracto y 990 μL de la solución del radical
ABTS•+, A los 30 minutos de reacción a
temperatura ambiente y en la oscuridad, se leyó el
cambio en la absorbancia respecto a la referencia del
reactivo, a una longitud de onda de 734 nm, La
referencia del reactivo consistió en una solución del
radical ABTS•+ con el solvente de la muestra, Los
resultados se expresaron como valores TEAC (Trolox
equivalent antioxidant capacity) mediante la
construcción de una curva patrón usando como
antioxidante TROLOX®.
Ensayo FRAP (Ferric Reducing/Antioxidant
Power)
Este método evalúa la capacidad antioxidante de una
muestra de acuerdo a su capacidad para reducir el
hierro ferrico (Fe+3) presente en un complejo con la
2,4,6-tri(2-piridil)-s-triazina (TPTZ) hasta la forma
ferrosa (Fe+2), que presenta un máximo de
absorbancia a una longitud de onda entre 590-595 nm
(Benzie & Strain, 1996). Este ensayo se llevó a
cabo en un buffer ácido acético-acetato de sodio (pH
3,4), que contiene TPTZ y FeCl3, Se utilizan 900 μL
de ésta solución, 50 μL de muestra y 50μL de agua
destilada, Luego de 60 minutos de reacción se
determina la absorbancia a una longitud de onda de
593 nm, Para cada muestra se tuvo en cuenta la
lectura de la absorbancia del blanco sin cromóforo,
de la misma manera que en las pruebas anteriores. La
Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas/4
Actividad Antioxidante de Ageratum conyzoides L.
curva de referencia se construyó usando ácido
ascórbico como patrón primario Las actividades de
las muestras se expresaron como AEAC (Ascorbic
Acid Equivalent Antioxidant Capacity: mg de ácido
ascórbico/100 g extracto).
Ensayo ORAC (Oxygen radical absorbance
capacity)
El procedimiento experimental está basado en
reportes previos de Ou et al. (2001), en el cual se
emplea Trolox como estándar y condiciones
controladas de temperatura a 37° C y pH 7,4. Las
lecturas se realizan a una λ de excitación de 493 nm y
slit de excitación 5, λ de emisión 515 nm y slit de
emisión 13, con atenuador del 1% y sin placa
atenuadora, Para el desarrollo de la técnica, se
utilizan soluciones de fluoresceína 1x10-2 M en PBS
(75 mM) AAPH 0,6 M en PBS (75 mM), La muestra
contiene 21 μL de fluoresceína, 2,899 μL de PBS, 30
μL del extracto ensayado y 50 μL de AAPH. Como
referencia se uso Trolox, El efecto protector del
antioxidante es calculado usando las diferencias de
áreas bajo la curva de decaimiento de la fluoresceína
entre el blanco y la muestra, y se compara contra la
curva del Trolox, y expresa en micromoles
equivalentes de Trolox por gramo de muestra (μmol
Tx/g muestra), de acuerdo a la siguiente ecuación (4):
Ecuación 4
Donde AUC es el área bajo la curva de la
muestra, AUC° área bajo la curva para el control,
AUC Trolox área bajo la curva para el Trolox, f es el
factor de dilución de los extractos,
Análisis estadístico
Las mediciones se realizaron por triplicado y los
resultados son presentados como la media y su
desviación estándar (DS), Todos los cálculos fueron
realizados y analizados en los programas estadísticos
GranPad Prisma 5, STATGRAPHICS CENTURIUN
XVI.
RESULTADOS
Los rendimientos de la extracción y los resultados
obtenidos empleando cinco metodologías de análisis
de actividad antioxidante se presentan en la tabla 1.
Los porcentajes de material extractable con los
Mesa-Vanegas et al. Actividad Antioxidante de Ageratum conyzoides L.

diferentes solventes mostraron mejores rendimientos polaridad ACExtD 1,49%, ACExtH, 1,21%,
para el extracto etanolico (ACExtE) siendo el ACExtA 0,59%, ACExtAE 0,16%.
porcentaje en peso con respecto al material vegetal
seco de 4,32%, seguido de los extractos de diferente

Tabla 1
Resultados de cuatro ensayos (fenoles totales, DPPH•, ABTS•+, FRAP y ORAC) para los extractos de
diferente polaridad de Ageratum conyzoides L.

% ORAC
Extracto Rendimiento Fenoles TEAC μMol TEAC μMol HIDROFÍLICO
mg a.a / 100 gr
Ageratum del extracto totales Trolox/ g de Trolox/ g de TEAC (μMol
(g de muestra
conyzoides extracto mg a. gálico / extracto extracto Trolox / 100g
•+ FRAP
L. /100g de 100 gr TEAC DPPH TEAC ABTS muestra)
material muestra
Vegetal seco)
ACExtH 1,21 1371,74 ± 59,70 2689,18 ± 668,01 11243,35 ± 802,95 2105,79 ± 78,53 497453,69 ± 22062,27
ACExtD 1,49 4223,55 ± 197,90 6981,68 ± 1193,13 28364,20 ± 858,21 3981,51 ± 58,78 368043,16 ± 9548,59
ACExtA 0,59 3697,64 ± 171,33 19103,49 ± 571,50 12247,93 ± 1038,35 5199,34 ±191,90 494048,95 ± 29695,80
ACExtM ND 2493,40 ± 131,97 15616,23 ± 2528,10 31339,38 ± 2957,52 2855,51 ± 309,71 199634,28 ± 2719,46
ACExtE 4,32 2479,80 ± 138,91 10075,80 ± 1016,63 27711,40 ± 1717,66 3636,32 ± 81,69 244178,38 ± 6048,28
ACExtAE 0,16 921,88 ± 29,26 939,14 ± 35,40 3510,48 ± 406,91 932,72 ±12,26 270615,10 ± 28563,44
ND*= No determinado

Los antioxidantes, incluyendo compuestos DPPH• (2,2 - difenil-1-picrilhidracilo) se basa en la

fenólicos (por ejemplo, flavonoides, ácidos fenólicos
y taninos), tienen diversos efectos biológicos, tales
como anti-inflamatorios, anti-cancerígenos y
antiaterosclerótica efectos, como consecuencia de su
actividad antioxidante (Chung et al., 1998). La
Figura 1, muestra el poder reductor de los diferentes
extractos de la especie A. conyzoides. Se evaluaron
los extractos de A. conyzoides, en términos de su
contenido de fenoles totales (CPT), los extractos
que mayor contenido de fue el ACExtD 4223,55 ±
197,90, seguido de ACExtA con 3697,64 ± 171,33,
ACExtM con 2493,40 ± 131,97, ACExtE con
2479,80 ± 138,91 y los de más bajo contenido
ACExtH y ACExtAE con 1371,74 ± 59,70 y 921,88
± 29,26 respectivamente.
El extracto de aceites esenciales no presentó
una actividad antioxidante significativa.
Existen varios ensayos de actividad
antioxidante rápidos y consistentes, sin embargo cada
uno de ellos presenta sus ventajas y desventajas, por
lo que se prefiere evaluar varios métodos en lugar de
un enfoque unidimensional. Los métodos más
comunes y fiables son los ensayos de DPPH• y
ABTS•+; éstos han sido modificados y mejorados en
los últimos años (Krishnaiah et al., 2011). La técnica
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premisa de que un hidrógeno donante es un
antioxidante. Este ensayo colorimétrico utiliza el
DPPH• radical, que cambia de púrpura a amarillo en
presencia de antioxidantes, y es ampliamente
utilizado como un estudio preliminar (Moon &
Shibamoto, 2009). Para el ensayo de DPPH• se
presentó un alto y promisorio potencial reductor para
el extracto de acetato de etilo ACExtA 19103,49 ±
571,50 seguido del extracto metanolico ACExtM con
15616,23 ± 2528,10. Los ABTS•+ (2,20-azinobis (3-
etilbenzotiazolina-6-sulfónico) ensayo de ácido es un
ensayo colorimétrico en el que los radicales ABTS•+
decolora en la presencia de antioxidantes
(carotenoides, fenólico compuestos y otros) (Moon &
Shibamoto, 2009). Este ensayo de decoloración mide
la capacidad antioxidante total, tanto lipofílico y
sustancias hidrófilas. Las muestras con altos valores
de TEAC en el ensayo ABTS•+ fueron para los
extractos de metanol y diclorometano, con valores de
ACExtM (31339,38 ± 2957,52) y ACExtD (28364,20
± 858,21) y para los extractos de etanol con valores
de ACExtE (27711,40 ± 1717,66). Estos resultados
indican que los extractos de acetato de etilo y
metanol de la especie A. conyzoides L. actúan
mediante la donación de electrones, por lo que
Mesa-Vanegas et al. Actividad Antioxidante de Ageratum conyzoides L.

podrían también reaccionar con los radicales libres, ACExtA (5199,34 ± 191,90) y el extracto de
convirtiéndolos en productos más estables y detener diclorometano ACExtD (3981,51 ± 58,78). Esto
las reacciones en cadena generada por radicales indica que la propiedad quelante de las muestras con
libres. Igualmente en el ensayo FRAP, los mejores mas alto potencial reductor pueden proporcionar
valores los presentó el extracto de acetato de etilo protección contra daño oxidativo.

40000
Fenoles totales
DPPH
ABTS
TEAC uMol Trolox/ g de extracto

mg a.a; galico/ 100 gr muestra

FRAP
30000
Fenoles totales/FRAP
DPPH / ABTS

20000

10000

E
tE
tM
tH

tD

tA

tA
Ex
Ex

Ex

Ex

Ex

Ex
C
C

C
A
A

A
Tipo de extracto a partir de A. conyzoides L.

Figura 1
Efecto antioxidante de los extractos de hexano (ExtH), diclorometano (ExtD), acetato de etilo (ExtA) y
metanol (ExtM) de Ageratum conyzoides L. Los resultados son expresados como la media ± desviación
estándar (DE, n=3). Diferencias entre los extractos con un nivel de p<0.05.

El ensayo ORAC utiliza como sustrato un pH. Sin embargo, ninguna técnica de medición de la
oxidable beta-ficoeritrina (PE). El ensayo ha sido actividad antioxidante satisface las condiciones
ampliamente utilizado en muchos estudios recientes anteriores; y para tener una idea del mecanismo de
de las plantas, ya que presenta la ventaja de combinar acción de los antioxidantes se deben establecer
el porcentaje de inhibición y el tiempo de duración de correlaciones entre el contenido de fenoles y los
la inhibición de los radicales libres de la acción en diversos ensayos antioxidantes (ver Figura 2).
una sola cantidad. El ensayo ORAC presentó altos Las medidas de los valores TEAC por la
valores para el extracto de hexano ACExtH técnica ABTS•+ son muy altos; sin embargo, es una
497453,69 ± 22062,27; acetato de etilo ACExtA técnica que no permite discriminar extractos que
494048,95 ± 29695,80 y diclorometano ACExtD contienen compuestos buenos antioxidantes como la
368043,16 ± 9548,59. gran mayoría de este trabajo; esto se debe a la
labilidad del reactivo ABTS•+, una estructura
Correlaciones entre los fenoles totales y las completamente plana que reacciona fácilmente con
actividades antioxidantes reductores mediante un mecanismo SET y/o HAT, lo
Un buen antioxidante para su correcta evaluación, anterior se refleja en la correlación entre los valores
debe cumplir con muchos requisitos como: una alta TEAC de ABTS•+ Vs Fenoles Totales (R2 = 82,475; p
solubilidad en el medio, una correcta orientación para < 0,005) (ver Figura 1).
interactuar con los radicales libres, proteger los En las Figuras 2, 3 y 4, se observa una
lípidos oxidables, ser un buen reductor y funcionar regresión logarítmica que expresa en un 79,49% la
con alta reactividad, tener efectividad a diferentes concentración de fenoles contra la actividad
Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas/6
Mesa-Vanegas et al. Actividad Antioxidante de Ageratum conyzoides L.

antioxidante expresada como TEAC por el ensayo fundamentalmente mediante un mecanismo de

DPPH•. Mientras que la regresión lineal entre FRAP
y Fenoles totales describe fuertemente en un
96,467% el fenómeno oxidativo; de tal manera, que
la mayoría de los compuestos fenólicos contenidos en
los extracto de A.conyzoides son buenos
antioxidantes y la mayoría de ellos, se expresan muy
bien como agentes reductores que reaccionan
(X 10000,0)
4
transferencia de electrones SET. Los valores TEAC
por el ensayo DPPH• y FRAP, tienen una alta
correlación entre ellos (R2 = 86,52; p < 0,005), por lo
tanto ambas técnicas describen de igual forma el
mecanismo oxidativo, siendo más significativo
estadísticamente el ensayo FRAP.

3
ABTS

0
0 1 2 3 4 5
(X 1000,0)
FENOLES TOTALES

Figura 2
Correlación entre ABTS•+ Vs Fenoles Totales

(X 10000,0)
2

1,6

1,2
DPPH

0,8

0,4

0
0 1 2 3 4 5
(X 1000,0)
FENOLES TOTALES

Figura 3
Correlación entre DPPH• Vs Fenoles Totales

Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas/7

Mesa-Vanegas et al. Actividad Antioxidante de Ageratum conyzoides L.

(X 1000,0)
6

FRAP
3

0
0 1 2 3 4 5
(X 1000,0)
FENOLES TOTALES

Figura 4
Correlación entre FRAP Vs Fenoles Totales

(X 1000,0)
6

4
FRAP

0
0 0,4 0,8 1,2 1,6 2
(X 10000,0)
DPPH

Figura 5
Correlación entre FRAP Vs DPPH

DISCUSIÓN un 80,59 y 89,33%, respectivamente. Estos resultados

Recientes investigaciones han demostrado que las
propiedades antioxidantes de las plantas podrían estar
correlacionadas con la defensa del estrés oxidativo y
en diferentes enfermedades humanas. Tres
mecanismos de defensa se ha desarrollado,
incluyendo: la prevención de las reacciones de
especies reactivas oxígeno, especies con compuestos
biológicamente importantes, rompiendo reacciones
en cadena de radicales libres y no radicales
indeseables reacciones de oxidación, limpiando los
productos de libre radicales reacciones con sustancias
y reparación biológicos de daños y perjuicios.
Shirwaikar et al., 2003, determinaron el efecto
gastroprotector in vivo en ratones del extracto
etanólico de A. conyzoides sugiriendo que las
diferentes concentraciones evaluadas del extracto
protegía significativamente las lesiones gástricas en
permitieron deducir que la actividad gastroprotectora
significativa podría estar mediada por su actividad
antioxidante. Adebayo et al., 2010, demostraron que
la actividad captadora de radicales libres por el
método DPPH, las presentaba el extracto de acetato
de etilo A. Conyzoides y que el kaempferol aislado de
este, presentaba una alta capacidad de atrapar el
radical a una concentración de 130,07 ± 17,36 g/kg.
Igualmente, Nasrin 2013, encontró que el extracto
metanólico de esta especie presentó un contenido de
fenoles totales de 38,125 ± 2,01mg/g equivalentes de
ácido gálico y una capacidad antioxidante total
medida por método fosfomolibdeno de 333.37 ±
4.22mg/g equivalente de ácido ascórbico. Estas
investigaciones sugieren que la especie A. conyzoides
posee notables propiedades antioxidantes y se
complementan con los resultados obtenidos en este

Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas/8

Mesa-Vanegas et al.
trabajo donde demostramos por diferentes
metodologías de medición antioxidante que los
extractos de acetato de etilo y metanol de la especie
A. conyzoides L. actúan mediante la donación de
electrones atrapando radicales libres y mediante sus
propiedades quelantes que pueden proporcionar
protección contra daño el oxidativo. Adicionalmente,
los resultados obtenidos por el método ORAC tienen
en cuenta la capacidad antioxidante de los extractos
con y sin fases de retardo, aspecto importante en una
muestra compleja como lo es un extracto, donde los
antioxidantes pueden ser de acción lenta y rápida. Por
lo que se recomienda seguir explorando las
características estructurales de los compuestos
presentes en el extracto de acetato de etilo y metanol
de la planta A. conyzoides, mediante un
fraccionamiento bioguiado por cromatografía para
aislar y purificar metabolitos que tengan una
promisoria actividad antioxidante con la presencia de
polifenoles bioactivos tales como, flavonoides,
taninos, saponinas, esteroles insaturados y/o
triterpenos que se puedan explorar con más
profundidad para un mayor entendimiento del
potencial reductor de esta planta, dado que los
métodos para medir la actividad antioxidante tienen
en cuenta aspectos como: intervención de
mecanismos, atrapamiento de radicales libres,
descomposición catalítica, supresión prooxidante,
porcentaje de atrapamiento y concentración efectiva
(moles de radicales libres atrapados por mol de
antioxidante).
CONCLUSIONES
En conclusión, los métodos seleccionados para
evaluar la actividad antioxidante de diferentes
extractos de la especie A. conyzoides L. mostraron
que los extractos polares y medianamente polares de
A. conyzoides presentaron una interesante actividad
antioxidante en las metodologías evaluadas y un alto
contenido de fenoles. Este tipo de muestras contienen
compuestos fenólicos reductores. En el método
ORAC que generalmente es considerado de alto nivel
debido al uso de los radicales libres de importancia
biológica y a su integración tanto de grado y tiempo
de inhibición demostró que el extracto de acetato de
etilo (ACExtA) fue el más activo y presentó uno de
los mejores valores con la mayor potencia
determinada por el ensayo ORAC de TEAC =
494048,95 ± 29695,80 μMol Trolox/100g muestra. El
presente estudio mostró que los efectos de la
actividad antioxidante de los extractos de A.
conyzoides L. mediante las mediciones por diferentes
Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas/9
Actividad Antioxidante de Ageratum conyzoides L.
técnicas ofrecen ventajas en términos de la predicción
de la capacidad antioxidante in vitro de esta planta y
de la dependencia de la presencia de polifenoles
bioactivos constituidos principalmente por taninos,
flavonoides, saponinas, esteroles insaturados y/o
triterpenos.
AGRADECIMIENTOS
A la Universidad de Antioquia y a la Universidad
Nacional de Colombia, sede Medellín.
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