UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

INFORME DE LABORATORIO – SEMANA 12

“Amonificación y reducción de nitratos”

ASIGNATURA:
Microbiología General

AUTOR:
Natividad Ruiz Diego Fernando

DOCENTE:
Vásquez Valles María Nelly

Trujillo – Perú

2020
1
 ÍNDICE

1. INTRODUCCIÓN __________________________________________ 3

2. OBJETIVOS ______________________________________________4

3. MATERIAL Y MÉTODO _____________________________________4

4. RESULTADOS ____________________________________________5

5. COMENTARIO ____________________________________________7

6. REFERENCIAS ____________________________________________7

2
I. INTRODUCCIÓN:

La amonificación es el proceso por el cual los compuestos nitrogenados

encontrados en el suelo, productos de la descomposición de materiales
orgánicos complejos tales como proteínas, aminoácidos, ácidos
nucleicos y nucleótidos son degradados a compuestos simples por
organismos que habitan el suelo, principalmente bacterias y hongos.
Estos microorganismos metabolizan estos compuestos y liberan el
exceso de nitrógeno en forma de amoníaco o ión amonio.

Por otro lado, la nitrificación es el proceso por el cual varias especies

de bacterias comunes en los suelos son capaces de oxidar el amoníaco
o el ión amonio. Es un proceso generador de energía, y la energía
liberada es utilizada por estas bacterias como fuente de energía
primaria. Un grupo de bacterias oxida el amoníaco o ión amonio a nitrito
y luego otro grupo lo oxida a nitrato. (Iñón, 2016).

La reducción de nitrato se lleva a cabo en dos pasos. El nitrato se

reduce primero a nitrito (NO2-) en el citosol mediante nitrato
reductasa utilizando NADH o NADPH. El nitrito se reduce luego a
amoníaco en los cloroplastos (plastos en las raíces) por una nitrito
dependiente de ferredoxina reductasa. En los tejidos de fotosíntesis,
utiliza una isoforma de ferredoxina (Fd1) que se reduce por la PSI,
mientras que en la raíz usa una forma de ferredoxina (Fd3) que tiene
un potencial de punto medio menos negativo y se puede reducir
fácilmente por NADPH.13 En los tejidos que no producen fotosíntesis,
el NADPH se genera mediante la glucólisis y la vía de la fosfatasa de
pentosa. (Miller, 2014)

OBJETIVOS

1. Conocer los métodos para la determinación cualitativa de

amoniaco y nitrato en muestras de suelo.

3
II. MATERIALES Y MÉTODOS:

1.1 Amonificación:
Muestra de suelo y estiércol
Agua destilada
Matraces
Tubos de ensayo
Caldo nutritivo y caldo urea
Pocillo
Reactivo Nessler
2.2. Nitrificación:

Muestra de suelo y suelo industrial

Agua destilada
Matraces
Tubos de ensayo
Caldo Glucosa Nitrato de Potasio
Pocillo
Reactivo de Griess

III. PROCEDIMIENTO:

4
En dos matraces se agrega 10g de suelo y 10g de estiércol respectivamente.
Adicionándoles a ambos, se añade 90 ml de agua destilada. Estos se
homogenizan y se dejan reposar por 10 minutos. Luego, se agrega 1ml del
sobrenadante en los medios de cultivo que en este caso son caldo nutritivo y
caldo urea (9 ml en cada tubo). Al final, se tienen 3 tubos de caldo nutritivo y
3 de caldo urea; uno de cada uno para cada muestra. La última muestra es la
muestra control la cual contiene 1ml de agua destilada estéril. Se lleva a
incubar todos los tubos a 28 °C durante 48h.

Luego del tiempo de incubación se retira 1 ml de cada tubo y se pone en un

pocillo, se le agregan 2 gotas del reactivo de Nessler y se hace la lectura.

Resultado: El control resulto no tener nada para ambos caldos, así como el
estiércol y el suelo en caldo nutritivo. Sin embargo, el estiércol y el suelo en
caldo urea sí presentan amoniaco.

5
En 2 matraces agregar 10g de suelo agrícola y 10g de suelo industrial
respectivamente, adicionándoles a ambos, 90 ml de agua destilada. Se
homogeniza y se deja reposar por 10 minutos. Luego, se agrega 1ml del
sobrenadante en el medio de cultivo que en este caso es Caldo Glucosa
Nitrato de Potasio (9 ml en cada tubo). Se tiene un tubo para cada muestra.
La última muestra es la muestra control la cual contiene 1ml de agua destilada
estéril. Se lleva a incubar todos los tubos a 28 °C durante 48h.

6
 Después del tiempo de incubación se retira 1 ml de cada tubo y se pone en
un pocillo, se le agregan 2 gotas del reactivo de Griess y se hace la lectura.

Resultado: Tanto el suelo agrícola como el suelo industrial dan un color

rojizo pues presentan nitritos.

IV. COMENTARIO

Durante el desarrollo de la práctica fue importante saber como ocurre

el proceso de amonificacion y nitrificación (en el ciclo del nitrógeno)
para la reducción de nitratos.
Otro punto importante que se trato, fueron el uso de los reactivos de
Nessler (Puede utilizarse para la determinación del NH3 el filtrado
obtenido para la determinación del cloruro de sodio (NaCl), pH y
acidez) como de Griess ( prueba química que detecta la presencia
de nitritos orgánicos), ambos muy importantes para el tratamiento del
nitrógeno,

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Iñón, N. (2016). CICLO DEL NITRÓGENO.

Miller, A. (2014). ASIMILACIÓN Y EFICIENCIA DEL NITRÓGENO.