Actinobacterias Aisladas de raíces y suelo rizosférico de Portulaca oleracea.

OBJETIVOS

 Identificar el género Streptomyces en actinomicetos aislados de la rizósfera de maíz

 Cuantificación de nitrógeno fijado, fosfato solubilizado e indoles producidos
 Efecto de Actinobacterias en el desarrollo vegetativo de tomate

90 mL de solución salina esterilizada (NaCl 0,85% p/v). Fragmentos de

Después de agitar el contenido de los frascos (10-1 ) aproximadamente 5 cm,
durante 10 minutos , se tomaron alícuotas y se sembraron aleatoriamente se tomaron
mediante la técnica de agotamiento y estría en agar submuestras de 10g de
avena con antimicótico raíces junto con el suelo
adherido
Se incubaron a 30ºC, hasta por
7 días y se seleccionaron las
colonias típicas de
Actinobacterias
La caracterización microscópica sembrar los
actinomicetos en agar avena y al mismo
tiempo introducir en el medio de cultivo
cuatro cubreobjetos esterilizados, dispuestos
con una inclinación de 45º respecto a la
superficie del agar.

durante 5 días y después retirar los

cubreobjetos y colocarlos sobre una lámina
portaobjetos con cristal violeta, para la
identificación del género Streptomyces por la
morfología de sus esporóforos: no
espiralados, con espirales primitivos y con
espirales abiertos o cerrados.
 En la caracterización macroscópica
Para su mantenimiento, cultivar
Streptomyces spp. en agar avena,
durante 72 horas y mantener a
refrigeración (8 ºC), con
subcultivos cada 30 días

Cuantificación de nitrógeno fijado, fosfato solubilizado e indoles producidos

El inóculo (5%: 0,25 mL) de cada cultivó bacteriano se

sembró por triplicado en 5 mL de caldo NBRIP y se
incubaron a 30ºC, con agitación constante a 150 rpm,
por 14 días. Después, los caldos se centrifugaron
durante 5 minutos y en el sobrenadante se cuantificó el
fósforo soluble considerándose una coloración azul
positiva a la solubilización del fosfato. La absorbancia
se leyó en espectrofotómetro de luz visible a 690 nm
 A continuación 0,4 mL de cada
de cada cultivo bacteriano fue sembrado por sobrenadante se depositaron en
triplicado en 5 mL de caldo tripticasa soya tubos, se agregaron 1,6 mL del
suplementado con triptófano (Figura 16, anexo reactivo de Salkowski modificado
5). Después de la incubación a 30ºC, con (relación 1:4), se mezclaron y se
agitación constante a 150rpm, por 8 días, los dejaron en reposo durante 30
cultivos se centrifugaron a 3000 rpm, durante 5 minutos, en oscuridad.
minutos.

Efecto de Actinobacterias en el desarrollo vegetativo de tomate

Cultivos puros de Actinobacterias

seleccionados

Semillas de
Lycopersicon
esculentum Mill.
 Prueba de germinación de semillas de
Lycopersicon esculentum Mill.
Inoculación de Actinobacterias en semillas de
Lycopersicon esculentum
Mill.

Suelo experimental en vasos

de tecnopor.

RESULTADOS
BIBLIOGRAFIA

CALVAY, A., y SANTISTEBÁN, A. (2018). Actinobacterias aisladas de raíces y suelo rizosférico de

Portulaca oleracea L. como potenciales promotoras del crecimiento de plantas en suelos
salinos.[tesis de posgrado, Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo]. Repositorio
Institucional. http://repositorio.unprg.edu.pe/handle/UNPRG/3031