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1/3/2021 Efectos de diferentes parámetros de fermentación sobre las características de calidad del kéfir.

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J. Dairy Sci. 96: 780–789


http://dx.doi.org/ 10.3168 / jds.2012-5753
© Asociación Estadounidense de Ciencias Lácteas ® , 2013.

Efectos de diferentes parámetros de fermentación sobre las características de calidad del kéfir.
Tuğba Kök-Taş, * 1 Atıf C. Seydim, * Barbaros Özer, † y Zeynep B. Guzel-Seydim *
* Departamento de Ingeniería de Alimentos, Facultad de Ingeniería y Arquitectura, Universidad Suleyman Demirel, Cunur, 32260 Isparta, Turquía
† Departamento de Tecnología Lechera, Facultad de Agricultura, Universidad de Ankara, Dıskapi, 06110 Ankara, Turquía

RESUMEN INTRODUCCIÓN

El principal objetivo del estudio fue determinar El kéfir es una leche fermentada, refrescante y autocarbonatada.
los efectos de diferentes parámetros de fermentación en el kéfir que tiene propiedades sensoriales únicas debido a una mezcla
calidad. Las muestras de kéfir se produjeron utilizando granos de kéfir. de ácido láctico, acetaldehído, acetoína, etanol y
o cultivo iniciador de kéfir natural, y la fermentación fue otros subproductos de fermentación obtenidos de una di-
llevado a cabo en atmósfera normal o modificada (10% verso gama de microorganismos inherentes a los granos de kéfir
CO 2 ) condiciones. El microbiológico (lactobacilos, lac- (Guzel-Seydim et al., 2011). Durante la fermentación, láctico
tococos, Lactobacillus acidophilus , Bifidobacterium spp., Las bacterias ácidas ( LAB ) convierten la lactosa en ácido láctico y
y levaduras), químico (pH, ácido láctico, sólidos totales, pro- otros compuestos de sabor y levaduras fermentadoras de lactosa
teína, etanol, exopolisacáridos), reológicos, producen CO 2 y pequeñas cantidades de etanol. Kéfir tiene un
y se investigaron las propiedades sensoriales de las muestras de kéfir. Sabor ligeramente ácido y a levadura con una efervescencia picante
cerrado durante un período de almacenamiento de 21 días. El uso de diferentes
dependiendo de la composición de los granos de kéfir o
parámetros de fermentación o la elección del grano versus cultivo iniciador de kéfir (Ertekin y Guzel-Seydim, 2010).
el cultivo de iniciador de kéfir natural no afectó significativamente El grano de kéfir es un cultivo iniciador natural único para el kéfir
el contenido de microorganismos. Lactobacilos, lactococos, producción. Los granos de kéfir son gránulos gelatinosos, de 2 a
y el contenido de levadura de las muestras de kéfir varió entre 9.21 15 mm de diámetro, constituido por una mezcla de microo-
y 9.28, 9.23 y 9.29, y 4.71 y 5.53 log ufc / mL, ganismos agrupados de una manera muy organizada. Kéfir
respectivamente, el día 1 de almacenamiento. Contenido de L. acidophilus Los granos consisten en una mezcla de LAB, bacterias del ácido acético,
y Bifidobacterium spp. estaban entre 5,78 y 6,43 y levaduras (Wszolek et al., 2006). El kéfir también puede ser
y entre 3,19 y 6,14 log ufc / ml, respectivamente, producido a partir de un cultivo iniciador de kéfir natural, que es
durante 21 d de almacenamiento. Durante el período de almacenamiento, el pH,
obtenido a partir de granos de kéfir. En la preparación de natural
ácido láctico (%), sólidos totales (%), proteína (%), acetal- cultivo de kéfir, los granos de kéfir (2-3%, p / vol) se fermentan
dehído y etanol de las muestras de kéfir variaron en leche reconstituida entre 20 y 25 ° C durante aproximadamente 24 h. los
de 4,29 a 4,53, de 0,81 a 0,95%, de 7,81 a los granos se eliminan y el líquido fermentado restante
8.21%, de 3.09 a 3.48%, de 3.8 a 23.6 mg / L, y se almacena asépticamente a 4 ° C (Guzel-Seydim et al., 2010).
de 76,5 a 5,147 mg / L, respectivamente. El exopolisa- Cultivos iniciadores de kéfir, que consisten en una variedad limitada
El contenido de charide de las muestras disminuyó durante 21 de microorganismos puros producidos biotecnológicamente,
d de almacenamiento en frío; las muestras fermentadas bajo modi- se han utilizado para aplicaciones industriales. Sin embargo,
atmósfera tenía una exopolisaccha- kéfir producido con cultivo iniciador difiere del natural
contenido del paseo, lo que indica un mayor potencial terapéutico kéfir producido a partir de granos de kéfir debido a la pérdida de
propiedades. Las muestras de kéfir exhibieron propiedades características del kéfir tradicional, que incluyen
comportamiento de flujo pseudoplástico de acuerdo con la ley de potencia las cualidades organolépticas y los beneficios para la salud, debido
modelo. Según los resultados sensoriales, el kéfir produjo a la microflora relativamente inadecuada en la fabricación a medida,
de cultivo de iniciador de kéfir natural bajo atmósfera de CO 2 Cultivos iniciadores definidos.
obtuvo el puntaje de evaluación general más alto en el día 1. La microflora de los granos de kéfir se mantiene unida en un
Palabras clave: kéfir, exopolisacárido, viscosidad, sen- matriz única de proteína y exopolisacárido mate-
tristeza rial ( EPS ; Rimada y Abraham, 2001; Frengova et
al., 2002). El EPS producido por los microorganismos del kéfir
se conoce comúnmente como kefiran, que es soluble en agua,

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glucogalactano ramificado que consta de cantidades iguales de
d-glucosa y d-galactosa (Micheli et al., 1999; Mitsue
et al., 1999). Kefiran está presente en el material capsular.
Recibido el 21 de mayo de 2012.
de algunas bacterias grandes en forma de bastoncillos, especialmente lactobacilos.
Aceptado el 28 de octubre de 2012.
1 Autor para correspondencia: tugbakoktas@sdu.edu.tr Lactobacillus kefir , Lactobacillus parakefir y lacto

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bacillus kefiranofaciens son los principales productores de EPS olor, textura y apariencia), inoculación óptima
bacterias presentes en la microflora del grano de kéfir (Cheirsilp et las tasas para KG y KS fueron 2% (p / vol) y 3% (p /
al., 2003a, b; Wang et al., 2008). El EPS producido por vol), respectivamente. La leche de kéfir inoculada fue fermentada.
Los microorganismos del kéfir mejoran la textura y la boca. Mentado en condiciones atmosféricas normales (KG y
sensación del producto. En los últimos años, el uso de kefiran en KS) o menos de 10% de CO 2 ( KG-C y KS-C ) a 25 ° C.
la industria alimentaria como goma de mascar y fortificación de calidad alimentaria
La fermentación bajo CO 2 se logró mediante el uso de un CO 2
agente y en el desarrollo de nuevos materiales de envasado generador (CO-150, New Brunswick Scientific, Enfield,
riales ha ganado popularidad (Kwon et al., 2006; Rimada CONNECTICUT). La tasa de CO 2 se determinó, después de
y Abraham, 2006; Piermaria et al., 2009). Kefiran estudios narios, de acuerdo con el crecimiento de LAB. El pH fue
puede tener inmunoestimuladores terapéuticos, antimuta- medido con un medidor de pH de electrodos combinados (WTW
actividades génicas, antialérgicas y antiulcerosas, y podría Sistemas de medición, Fort Myers, FL). Fermentación
actuar como un compuesto prebiótico (Yoon et al., 1999; WonHo se terminó a pH 4.6 y las muestras se almacenaron a
et al., 2003). 4 ° C durante 21 d.
Parámetros de fermentación, como el tipo de kéfir.
cultivo (de cereales naturales o cultivos iniciadores), Análisis microbiológico
la razón de cálculo, la temperatura y el tiempo, afectan la
calidad microbiana, química y sensorial final del kéfir. Los recuentos de lactobacilos se determinaron en De Man,
El oxígeno atmosférico puede afectar el crecimiento y el equilibrio Rogosa y Sharpe ( MRS ) medio (Merck, Darm-
(proporción de microorganismos) en la microflora del kéfir. Varios Stadt, Alemania) después de la incubación a 37 ° C bajo atmósfera
Existen métodos para medir la viabilidad de LAB, especialmente condiciones óbicas (6% CO 2 ) durante 3 d. Estreptococos lácticos
principalmente Bifidobacteria spp. y Lactobacillus acidophilus se enumeraron en medio M17 (Merck) a 37 ° C
(Scardovi, 1986; Shah, 2000), debido a la presencia en condiciones anaeróbicas (6% CO 2 ) durante 2 d. Levaduras
de microflora principalmente microaerófila y anaeróbica en se cultivaron en agar papa dextrosa (Merck) con ad-
granos de kéfir. El objetivo de este estudio fue investigar dición de ácido láctico al 0,14% a 25 ° C durante 5 días (Mossel et al.
los efectos de diferentes parámetros de fermentación: kéfir al., 1995). Se determinaron Lactobacillus acidophilus
grano versus cultivo iniciador de kéfir natural obtenido de en MRS con adición de 10% (p / vol) de sorbitol (Shah,
granos de kéfir y atmósfera de CO 2 durante la fermentación— 2000) y Bifidobacterium spp. se cultivaron en MRS
sobre los aspectos microbiológico, químico, sensorial y reológico con neomicina, ácido nalidíxico, cloruro de litio y
propiedades calóricas del kéfir durante un período de almacenamiento de 21sulfato
días. de paromomicina (MRS-NNLP; Shah, 2000) en
37 ° C en condiciones anaeróbicas (6% CO 2 ) durante 3 d.
MATERIALES Y MÉTODOS
Análisis aproximado
Materiales
Acidez titulable, DM, proteína, ácido láctico y grasa
Los granos de kéfir se obtuvieron del Departamento de se determinaron de acuerdo con AOAC International
Ingeniería alimentaria, Universidad Suleyman Demirel (Ispar- (1992) métodos. Contenido de acetaldehído y etanol de
ta, Turquía). La leche de vaca fue suministrada por Suleyman Las muestras se determinaron utilizando un espacio de cabeza (Turbo
Planta lechera Ünsüt de la Universidad Demirel. Todos los productos químicos
Matriks 16, Perkin Elmer, Waltham, MA) gas cromado
eran de grado analítico y eran de Sigma-Aldrich método matográfico (Auto System XL, Perkin Elmer)
Co. (San Luis, MO). que utilizó el detector de ionización de llama, de acuerdo con
Guzel-Seydim y col. (2000).
Preparación de muestras de kéfir
Purificación y cuantificación de EPS
Granos de kéfir ( KG ) y cultivo iniciador de kéfir natural
( KS ) se utilizaron para fermentar la leche para la producción de kéfir. Se realizó la separación y cuantificación de EPS
El iniciador de kéfir natural se obtuvo a partir de granos de kéfir por según Zisu y Shah (2003). Las proteínas en
colar después de la primera fermentación a 25 ° C durante aproximadamenteSe precipitaron 50 mL de muestra de kéfir diluida con 2
a las 22 h, finalizando la fermentación a pH 4,6 mL de TCA al 20% (p / vol) y separados por centrifugación

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(Figura
KS 1). Tiempo
era idéntico. La de fermentación
tasa (22 del
de inoculación h) entre KGfue
cultivo y ción (Sorvall
Ltd., RT7,NSW,
Lane Cove, Kendro Instruments
Australia) Australia
a 3313 Pty 30
× g durante
decidido después de estudios sensoriales preliminares. Muestras de kéfir min a 4ºC. Se ajustó el pH del sobrenadante.
cultivado con diferentes tasas de inoculación (2, 3 y 5%) a 6,8 con 40% (p / vol) de NaOH, y luego se hierve en un
fueron evaluados por un panel sensorial de 11 experimentados recipiente sellado a 100 ° C durante 30 min para desnaturalizar el
panelistas; según su valoración global (gusto, proteínas de suero. Las proteinas de suero desnaturalizado

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Figura 1. Esquema de flujo de la producción de muestras de kéfir y diseño experimental: KG = kéfir producido a partir de granos de kéfir en atmósfera normal,
KG-C = kéfir producido a partir de granos de kéfir en una atmósfera de CO 2 al 10% , KS = kéfir producido a partir de un cultivo iniciador de kéfir natural en una atmósfera normal,
y KS-C = kéfir producido a partir de un cultivo iniciador de kéfir natural en una atmósfera de CO 2 al 10% .

movido por centrifugación (a 3313 × g , 30 min, 4 ° C). husillo SC4-18. La velocidad de corte, el esfuerzo de corte y la vis-
El sedimento de hidrato de carbono restante se resuspendió La cosidad se midió a velocidades de rotación de 10 a 50
en 10 ml de agua desionizada H 2 O y la suspensión se rpm, aumentando en 2 rpm cada 5 s. Análisis duplicados
sonicado durante 1 ha 24 ° C usando un baño de sonicación (FX se llevaron a cabo a 4 ° C, y los datos obtenidos fueron
Baño de sonicación 14PH; Unisonics Pty Ltd., Sídney, procesado con el software de aplicación Rheocalc (V3.2
Australia). La suspensión se dializó en diálisis. Compilación 47-0; Brookfield Engineering Laboratories). los
tubo de membrana con un límite de peso molecular de 12.000 Las características de las curvas de flujo se determinaron utilizando el
Da (Carolina Biological Supply Company, Burlington, modelo de ley de potencias.
NC) contra agua del grifo a 4 ° C durante 2 semanas; el agua estaba
cambiado dos veces al día. La concentración de EPS en Análisis sensorial
la suspensión después de la diálisis se cuantificó utilizando el
método fenol-sulfúrico y se expresó en glucosa Las evaluaciones sensoriales se llevaron a cabo utilizando un
equivalentes (mg / L; Cerning, 1995). ber panel en el Departamento de Ingeniería de Alimentos en
Universidad Suleyman Demirel (Isparta, Turquía). Panel-
Análisis reológicos Los istas fueron seleccionados entre estudiantes graduados voluntarios y
personal académico del Departamento de Ingeniería de Alimentos.
Los análisis reológicos se llevaron a cabo utilizando un Los panelistas (n = 11) recibieron una sesión de capacitación de 30 h.

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Reómetro
LV; rotacional
Laboratorios Brookfieldde(modelo
de ingeniería DV-IIMiddleboro,
Brookfield, Pro sión sobre
sabores y lalaidentificación
técnica de análisis descriptivo,
de sabor, incluida
y utilizando la puntos
un 10
MA) según el método modificado de Penna et escala específica de producto con referencias (Meilgaard et al.,
Alabama. (2001) como se usa en Ertekin y Guzel-Seydim (2010) 1999). Los atributos con respecto a los efectos de los diferentes
y Kök-Taş y Güzel-Seydim (2010). El Brookfield Los tratamientos en la producción de kéfir se determinaron con
El reómetro con un pequeño adaptador de muestra se fijó con panelistas y el líder del panel antes del experimento

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iniciado (Uysal et al., 2004). Muestras de kéfir (100 mL) y KG. De acuerdo con nuestros hallazgos, la literatura
fueron servidos y presentados a los panelistas en copas con informa recuentos de lactobacilos y lactococos en kéfir de
ing un número aleatorio de 3 dígitos; cada muestra fue puntuada 10 8 y 10 9 ufc / ml, respectivamente (Rosi y Rossi, 1978;
individualmente. Se presentaron muestras a los panelistas en Kandler y Kunath, 1983; Rea y col., 1996; Motaghi et
vasos de plástico individuales, palitos de pan y un vaso de al., 1997; Kılıç et al., 1999; Witthuhn y col., 2004; Gu-
se administraron agua entre cada muestra. Evaluación sensorial zel-Seydim et al., 2005). Sin embargo, Simova et al. (2002)
ación se basó en escalas de 10 puntos de 0 = ausencia de informó que la proporción de estreptococos en el total
el atributo, a 10 = intensidad extremadamente alta de la la microflora del kéfir aumentó entre un 26 y un 30%, mientras que
atributo. El orden de servicio fue completamente aleatorio. de lactobacilos disminuyó en un 13 a 23%, en contraste con
Los atributos sensoriales apariencia, color, aroma, sabor, nuestros hallazgos. Los contenidos de levadura de KG y KG-C fueron 5.50
Se evaluaron la textura, el olor y la aceptabilidad general. y 5,53 log ufc / mL ( P > 0,05), mientras que los de KS
Se presentaron cuatro muestras de kéfir al grupo de panel. y las muestras de KS-C fueron 4,77 y 4,71 log ufc / ml,
en cada sesión. específicamente (Tabla 1). El contenido de levadura difirió significativamente
entre las muestras de KS y KG ( P <0.05), mientras que ap-
Análisis estadístico La aplicación de CO 2 no mostró ningún efecto adverso sobre
contenido de levadura ( P > 0.05). Una población de levadura reducida
Todos los análisis se replicaron 3 veces y se realizaron en el producto podría limitar la cantidad de hinchazón en
en duplicado. Los datos se analizaron utilizando SPSS Base los paquetes, lo que solucionaría un problema importante
16.0 (SPSS Inc., Chicago, IL). Resultados de los análisis en la industria del kéfir (Guzel-Seydim et al., 2010).
de parámetros reológicos y contenido de EPS de las muestras nivel de la levadura fue de 10 5 ufc / ml, en línea con la registrada
fueron evaluados estadísticamente por variables de medidas repetidas por Guzel-Seydim et al. (2010) y Kılıç et al. (1999).
técnica de análisis previo. Las diferencias dentro de los grupos fueron Recuentos de L. acidophilus y Bifidobacterium spp.
determinada por la prueba de Tukey, una prueba de comparación múltiple. de las muestras de kéfir se muestran en la Figura 2. Un significativo
se produjo una disminución en L. acidophilus y Bifidobacterium
spp. recuentos durante el almacenamiento en frío ( P <0,05). Condes de L.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
acidophilus en las muestras de KG-C y KS-C fueron 6,55 y
Contenido microbiológico de las muestras de kéfir 6,42 log ufc / mL, respectivamente (Figura 2a), y los
de Bifidobacterium spp. fueron 6,14 y 5,90 log ufc /
Las muestras de kéfir se examinaron a los 1, 7, 14 y 21 días. mL, respectivamente (Figura 2b). Lactobacillus acidophilus
de almacenamiento en frío. El contenido de LAB, lactococci y es microaerofílica y las especies de Bifidobacterium son an-
levaduras en las muestras KG, KG-C, KS y KS-C son microorganismos aerobios (Scardovi, 1986) y por lo tanto,
presentado en la Tabla 1. Las muestras de KG-C tuvieron la mayor la toxicidad del oxígeno es un problema crítico (Shah, 2000). Ap-
recuentos de lactobacilos ( P <0,05) seguidos de KS, KS-C, La aplicación de 10% de CO 2 tuvo un efecto creciente significativo.

Tabla 1. Contenido de lactobacilos, lactococos y levaduras en muestras de kéfir durante el almacenamiento en frío (1, 7, 14 y 21 días)

Especies y muestra 1 1 día 7 días 14 días 21 días

Lactobacillus spp. (log ufc / ml)


KG 9,21 ± 0,05 a, x 9,06 ± 0,02 a, x 8,86 ± 0,03 b, x 8.03 ± 0.19 b, x
KG-C 9,28 ± 0,03 a, x 9,31 ± 0,07 a, y 8,85 ± 0,04 b, x 8,29 ± 0,08 b, x
Kansas 9,27 ± 0,04 a, x 9,26 ± 0,03 a, y 9,06 ± 0,06 b, x 8,89 ± 0,02 b, y
KS-C 9,27 ± 0,04 a, x 9.22 ± 0.04 a, y 9,00 ± 0,08 b, x 9,00 ± 0,07 b, y
Lactococcus spp. (log ufc / ml)
KG 9,23 ± 0,04 a, x 9,07 ± 0,04 a, x 8,71 ± 0,08 b, x 8.04 ± 0.18 b, x
KG-C 9,26 ± 0,03 a, x 9,27 ± 0,08 a, y 8,83 ± 0,01 b, x 8,30 ± 0,11 b, x
Kansas 9,29 ± 0,06 a, x 9,38 ± 0,06 a, y 9,17 ± 0,02 b, x 8,92 ± 0,02 b, y
KS-C 9,27 ± 0,06 a, x 9,19 ± 0,03 a, y 9,07 ± 0,02 b, x 9.02 ± 0.05 b, y
Levaduras (log ufc / mL)
KG 5,50 ± 0,03 a, x 5,37 ± 0,06 a, x 5,07 ± 0,03 b, x 5,32 ± 0,02 a, x
KG-C 5,53 ± 0,03 a, x 5,52 ± 0,02 a, x 5,37 ± 0,11 a, x 5,56 ± 0,07 a, x
Kansas 4,77 ± 0,13 a, y 4,81 ± 0,04 a, y 4,91 ± 0,10 a, x 5,00 ± 0,09 a, x

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KS-C 4,71 ± 0,07 a, y 5,15 ± 0,22 una, x 5,03 ± 0,22 una, x 4,98 ± 0,15 a, x
a, b Las medias en la misma fila con diferentes letras en superíndice son significativamente diferentes ( P <0.05).
x, y Las medias en la misma columna dentro de una especie con diferentes letras en superíndice son significativamente diferentes ( P <
0,05).
1 KG = kéfir producido a partir de granos de kéfir en atmósfera normal, KG-C = kéfir producido a partir de granos de kéfir en un 10%

Atmósfera de CO 2 , KS = kéfir producido a partir de un cultivo iniciador de kéfir natural en atmósfera normal, y KS-C =
kefir produce a partir de cultivo iniciador kéfir natural en 10% de CO 2 atmósfera.

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en L. acidophilus y Bifidobacterium spp. cuenta en en otras leches fermentadas como el yogur (Abraham-Sen
kéfir ( P <0,05). Para obtener el máximo beneficio terapéutico, y Holmen, 1981; Katsiari et al., 2002). Collar (1996)
El nivel mínimo de bacterias probióticas en el yogur debe encontró que los LAB se multiplican y producen láctico y acético
ser log 5 a log 6 células viables (Robinson, 1987). Alto ácidos más lentamente en presencia de levaduras que en puros
niveles (al menos 10 6 / go 10 6 / mL) de microorganismos vivos cultura. Tras la evaluación de los resultados, determinamos
se recomiendan para productos probióticos (Kurmann y que los porcentajes de kéfir en grano y kéfir natural
Rasic, 1991). El kéfir debe considerarse como un producto natural. el cultivo de inicio utilizado en el estudio fue apropiado
producto probiótico debido a su alto contenido de ben- (los resultados químicos de las muestras fueron similares; por lo tanto,
microorganismos eficiales. Al final de los 21 d de frío el uso de cultivo iniciador de kéfir natural proporciona conveniencia
almacenamiento, la microflora del kéfir se mantuvo estable tanto en KG experiencia en la industria).
y muestras de KS. Acidez titulable (calculada como ácido láctico) y MS
Los valores de las muestras de kéfir no difirieron significativamente con
Análisis químico de muestras de kéfir tratamiento ( P > 0.05; Tabla 2). Valores de materia seca de
Las muestras de kéfir KG, KG-C, KS y KS-C en el día 1 fueron
La tabla 2 presenta las principales propiedades químicas del kéfir. 7,98, 8,06, 8,19 y 8,21, respectivamente (Tabla 2); estos
muestras. Las muestras de kéfir se produjeron con 0,1% de grasa. Los valores fueron más bajos que en otros estudios porque nuestra clave
Leche. Los valores de pH de las muestras oscilaron entre 4,47 Las muestras de abeto se obtuvieron a partir de leche descremada (Gambelli
y 4.53 el día 1 y disminuyó durante el almacenamiento, como ocurre et al., 1999; Garrote et al., 2001).
El contenido de proteína de las muestras el día 1 osciló entre
3,43 y 3,48 g / 100 mL (Tabla 2) y no difirió
significativamente entre las muestras de kéfir ( P > 0,05). Siendo de
dependiente del contenido de proteínas de la leche, valores de proteínas
de las muestras de kéfir fueron de 3,3 g / 100 ml en otros estudios
(Renner y Renz-Schaven, 1986; Hallé et al., 1994).
El contenido de acetaldehído de las muestras de kéfir osciló entre
3.8 a 23.6 mg / L durante el almacenamiento (Tabla 2). Beshkova
et al. (2003) informaron que la síntesis de acetaldehído
fue más intensivo en muestras de kéfir hechas con iniciador
mezclas de cultivo, con una concentración máxima de 18,3
μg / g en comparación con 9.5 μg / g en las muestras de kéfir hechas
con mezclas de cultivos iniciadores y granos de kéfir. Un com
nivel parativamente más bajo de acetaldehído en kéfir hecho
con granos de kéfir (Guzel-Seydim et al.,
2000). En nuestro estudio, el contenido de etanol de las muestras de kéfir
osciló entre 76,5 y 5,147 mg / L durante el almacenamiento. C.A-
El contenido de etaldehído del yogur disminuye durante el almacenamiento.
porque la alcohol deshidrogenasa convierte el acetaldehído
al etanol (Marshall y Tamime, 1997). Ertekin y
Guzel-Seydim (2010) informó que el kéfir sin grasa
la muestra tenía el contenido más bajo de etanol (160,24 mg / L)
en comparación con otras muestras (uso de inulina en kéfir y
uso de proteína de suero en kéfir) el día 1. El día 7, el etanol
el contenido osciló entre 151,46 y 266,76 mg / L en todos los
sus muestras. Concentraciones de etanol de 2 muestras de kéfir
hecho con mezclas de cultivos iniciadores y granos de kéfir fueron
4,006 y 2,998 mg / L después de 24 h de fermentación, y
4.010 y 3.100 mg / L después de 7 días de almacenamiento, respectivamente

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(Beshkova et al., 2003).
Figura 2. Contenido de (a) Lactobacillus acidophilus y (b)
Bifidobacterium spp. en muestras durante el almacenamiento en frío durante 21 d. KG = Contenido EPS de kéfir
kéfir producido a partir de granos de kéfir en atmósfera normal, KG-C = kéfir
producido a partir de granos de kéfir en una atmósfera de CO 2 al 10% , KS = producción de kéfir El contenido de EPS de las muestras se presenta en
derivado de un cultivo iniciador de kéfir natural en atmósfera normal, y
KS-C = kéfir producido a partir de un cultivo iniciador de kéfir natural en un 10% de CO 2
Tabla 3. Al comienzo del almacenamiento, el EPS
atmósfera. carpas de las muestras KG y KG-C fueron notablemente

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PARÁMETROS DE FERMENTACIÓN PARA LA PRODUCCIÓN DE KEFIR 785

Cuadro 2. Cambio en la composición química de las muestras de kéfir durante el almacenamiento en frío durante 21 días

Muestra 1 y DM Proteína Láctico Etanol Acetaldehído


tiempo de almacenamiento pH (% peso / peso) (g / 100 mL) ácido (%) (mg / L) (mg / L)

KG
1 día 4,47 ± 0,02 una 7,98 ± 0,04 una 3,47 ± 0,02 a 0,89 ± 0,01 una 111,3 ± 0,11 una 3,8 ± 0,28 una
7 días 4,38 ± 0,04 a 7,91 ± 0,09 a 3,41 ± 0,01 a 0,84 ± 0,00 a 440,3 ± 0,24 b 7,9 ± 0,75 b
14 días 4,31 ± 0,01 b 7,86 ± 0,13 una 3,30 ± 0,01 b 0,89 ± 0,01 una 2722 ± 0,91 c 13,9 ± 0,61 c
21 días 4,29 ± 0,00 b 7,86 ± 0,04 una 3,09 ± 0,03 b 0,92 ± 0,00 una 4,243.9 ± 0,4 d 23,6 ± 0,98 días
KG-C
1 día 4,53 ± 0,01 a 8.06 ± 0.11 una 3,48 ± 0,01 a 0,90 ± 0,00 una 123,6 ± 0,25 una 4,7 ± 0,32 una
7 días 4,43 ± 0,02 una 7,98 ± 0,01 una 3,40 ± 0,00 a 0,95 ± 0,01 una 567,2 ± 0,3 b 8,9 ± 0,29 b
14 días 4,34 ± 0,01 b 7,87 ± 0,13 una 3,35 ± 0,01 a 0,95 ± 0,01 una 2.176,7 ± 1,0 c 15,9 ± 1,24 c
21 días 4,32 ± 0,02 b 7,81 ± 0,09 a 3,19 ± 0,05 b 0,95 ± 0,01 una 5.147 ± 0,97 días 21,9 ± 1,57 días
Kansas
1 día 4,49 ± 0,00 a 8.19 ± 0.09 una 3,45 ± 0,02 a 0,81 ± 0,01 una 97,4 ± 0,56 a 3,9 ± 0,99 a
7 días 4,39 ± 0,02 una 8,14 ± 0,12 a 3,43 ± 0,00 a 0,82 ± 0,03 una 396,9 ± 0,3 b 6,3 ± 0,8 b
14 días 4,36 ± 0,03 b 8,10 ± 0,08 una 3,40 ± 0,07 a 0,93 ± 0,02 una 597,3 ± 1,78 c 9,5 ± 1,23 c
21 días 4,35 ± 0,01 b 7,99 ± 0,01 una 3,19 ± 0,13 una 0,92 ± 0,02 una 3,282.2 ± 1,23 d 16,5 ± 0,67 días
KS-C
1 día 4.50 ± 0.03 una 8,21 ± 0,16 a 3,43 ± 0,03 a 0,83 ± 0,03 una 76,5 ± 0,3 una 4,7 ± 0,81 una
7 días 4,44 ± 0,03 una 8,11 ± 0,08 una 3,38 ± 0,04 a 0,83 ± 0,03 una 485,0 ± 0,98 b 7,7 ± 1,56 b
14 días 4,42 ± 0,01 una 8.05 ± 0.04 una 3,30 ± 0,07 a 0,90 ± 0,02 una 790,0 ± 1,78 c 11,8 ± 1,59 c
21 días 4,37 ± 0,01 b 8.05 ± 0.04 una 3,19 ± 0,05 a 0,89 ± 0,01 una 3,268.3 ± 0,56 d 17,3 ± 0,95 días
a – d Las medias en la misma fila dentro de un tipo de muestra con diferentes letras en superíndice son significativamente diferentes ( P <0.05).
1 KG = kéfir producido a partir de granos de kéfir en atmósfera normal, KG-C = kéfir producido a partir de granos de kéfir en atmósfera de CO 2 al 10% , KS = kéfir
producido a partir de cultivo iniciador de kéfir natural en atmósfera normal, y KS-C = kéfir producido a partir de cultivo iniciador de kéfir natural en 10% de CO 2
atmósfera.

más altos en comparación con los de KS y KS-C (107,80 La contradicción puede explicarse por las diferencias en
y 130,15 mg / L frente a 79,05 y 85,72 mg / L). A través de- enzimas que son capaces de degradar EPS en ambos
fuera de almacenamiento, el contenido de EPS de las muestras disminuyó estudios. Otra posible razón podría ser cambios en
significativamente ( P <0.05). Aunque la fermentación bajo los parámetros físicos de la cultura durante extendido
10% de CO 2 no afectó las propiedades reológicas de la fermentación o almacenamiento en frío (Dierksen et al., 1997).
muestras de kéfir, el contenido de EPS de KG-C y KS-C Sin embargo, en el presente estudio, la tendencia de disminución
fueron más altos que sus contrapartes incubadas en el en los niveles de EPS de las muestras fue similar e independiente
ausencia de CO 2 . El contenido de EPS de la muestra KG-C, pendiente de las condiciones de fermentación; por lo tanto, probablemente
por ejemplo, fue un 20,87% más alto que el de la muestra No se puede atribuir la disminución de EPS solo a cambios en
KG ( P <0,05). parámetros de cultivo durante el almacenamiento en frío. Estudios futuros
Una explicación lógica para la disminución de EPS debe concentrarse en el desarrollo de métodos para
El contenido de las muestras de kéfir puede ser la hidrolización de aumentar el nivel de EPS del kéfir durante la fermentación y
polisacárido en sus monómeros por degradación enzimática para limitar la disminución durante el almacenamiento en frío.
dación. Ramachandran y Shah (2009) demostraron
que el contenido de EPS de los yogures viscosos disminuyó la Características reológicas del kéfir
notablemente durante el d 21 de almacenamiento en frío. Sin embargo, Doley-
res et al. (2005) no encontraron diferencias entre las EPS Valores de viscosidad de las muestras de kéfir producidas bajo
contenido de yogures viscosos durante 4 semanas de almacenamiento. Esta Las diferentes condiciones de fermentación se presentan en la Tabla.

Cuadro 3. Contenido de exopolisacáridos (mg / L) de muestras de kéfir durante 21 días de almacenamiento en frío

Muestra 1 1 día 7 días 14 días 21 días

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1/3/2021 Efectos de diferentes parámetros de fermentación sobre las características de calidad del kéfir.
KG 107,80 ± 11,44 a, A 76,40 ± 8,54 b, A 60,45 ± 7,54 c, A 56,48 ± 5,04 c, A
KG-C 130,15 ± 11,93 a, B 92,99 ± 2,93 b, B 72,31 ± 1,06 c, B 54,92 ± 0,75 días, A
Kansas 79,05 ± 7,51 a, C 74,96 ± 5,27 b, A 68,14 ± 2,08 b, B 65,72 ± 4,70 c, B
KS-C 85,72 ± 7,35 a, C 80,68 ± 2,16 b, A 78,67 ± 3,35 c, C 61,93 ± 7,70 días, B

a – d Las medias en la misma fila con diferentes letras en superíndice son significativamente diferentes ( P <0.05).
A – D Las medias en la misma columna con diferentes letras en superíndice son significativamente diferentes ( P <0.05).
1 KG = kéfir producido a partir de granos de kéfir en atmósfera normal, KG-C = kéfir producido a partir de granos de kéfir en un 10%
Atmósfera de CO 2 , KS = kéfir producido a partir de un cultivo iniciador de kéfir natural en atmósfera normal, y KS-C =
kefir produce a partir de cultivo iniciador kéfir natural en 10% de CO 2 atmósfera.

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786 KÖK-TAŞ ET AL.

Cuadro 4. Viscosidad (mPa · s) de muestras de kéfir durante 21 días de almacenamiento en frío

Muestra 1 1 día 7 días 14 días 21 días

KG 225,0 a, A 202,0 a, A 225,0 a, A 247,0 a, A


KG-C 227,3 a, A 199,0 a, A 187,0 a, A 171,9 a, A
Kansas 312,7 a, B 294,3 a, B 316,2 a, B 292,5 a, B
KS-C 315,2 a, B 281,9 a, A 270,5 a, A 284,3 a, B
a Las medias en la misma fila con diferentes letras en superíndice son significativamente diferentes ( P <0.05).
A, B Las medias en la misma columna con diferentes letras en superíndice son significativamente diferentes ( P <0.05).
1 KG = kéfir producido a partir de granos de kéfir en atmósfera normal, KG-C = kéfir producido a partir de granos de kéfir en un 10%
Atmósfera de CO 2 , KS = kéfir producido a partir de un cultivo iniciador de kéfir natural en atmósfera normal, y KS-C =
kefir produce a partir de cultivo iniciador kéfir natural en 10% de CO 2 atmósfera.

4. La viscosidad de las muestras de kéfir osciló entre 225 muestras de kéfir exhibieron pseudoplástico no newtoniano
y 315,2 mPa · s el día 1. Al comienzo del almacenamiento, comportamiento de los fluidos según el modelo de ley de potencias (R 2
Se encontró que los valores de viscosidad de las muestras eran = 0,99; Figura 3a). Con el aumento de la velocidad de corte,
independiente de la fermentación bajo atmósfera de CO 2 . En los valores de viscosidad aparente de las muestras disminuyeron,
Por el contrario, muestras fermentadas con cultivo de kéfir natural. demostrando tixotrofia (adelgazamiento por cizallamiento). Todo kéfir
(KS y KS-C) tenían mayor viscosidad que los fabricados muestras tenían características reológicas similares durante
con granos de kéfir (KG y KG-C; P <0.05). Un similar el período de almacenamiento, y ni el efecto de la fermentación
La tendencia se observó durante el día 21 de almacenamiento a 4 ° C. Con en atmósfera modificada ni la fuente de
a excepción de KG, los valores de viscosidad del kéfir
las muestras disminuyeron después de 21 d, siendo aún mayor en KS
y KS-C que en otras muestras de kéfir. Observación similar
otros investigadores (Thompson et al.,
1990; Irigoyen et al., 2005). Garote y col. (1998) ob-
sirvió una disminución de la viscosidad durante el almacenamiento en frío incluso
en proporciones elevadas de grano a leche. Porque la disminución de
la viscosidad fue independiente de los parámetros de fermentación
y la fuente de la microflora iniciadora de kéfir en la corriente
estudio, esta disminución puede explicarse por la hidrolización
ción de EPS en sus monómeros por glicohidrolasas (De-
geest et al., 2002; Purwandari et al., 2007). Pham y col.
(2000) demostraron que las glucohidrolasas eran capaces
de reducir la viscosidad de los polímeros producidos por
Lactobacillus rhamnosus , además de liberar algunos
ducir azúcares. La disminución de la viscosidad en los polímeros es
observado durante la fermentación prolongada (más de 24 h) y
continúa durante el almacenamiento en frío. Del mismo modo, Bensmira et
Alabama. (2010) demostraron que durante fermentaciones prolongadas
período de tation (> 30 h), la cantidad de EPS producida
por el kéfir, la microflora disminuye. A diferencia de nuestros hallazgos, el
Disminución del nivel de EPS en kéfir en función de la fermentación.
temperatura, tiempo y homogeneización de la leche
no conducir a la disminución de la viscosidad del complejo (η *) y la pérdida
valores de módulo (G ″) de muestras de kéfir (Bensmira et al.,
2010). Se sabe que los EPS bacterianos interactúan con la leche.

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1/3/2021 Efectos de diferentes parámetros de fermentación sobre las características de calidad del kéfir.
proteínas y mejorar las propiedades viscoelásticas de los
geles como el yogur (Vlahapoulou et al., 2001). Allí-
Por lo tanto, podemos suponer que una reducción en el nivel de EPS puede
Figura 3. (a) Viscosidad aparente en función de la velocidad de corte de
han llevado a una disminución de los valores de viscosidad del kéfir muestras de kéfir el día 1; (b) esfuerzo cortante en función de la velocidad de corte de
muestras en el estudio actual. muestras de kéfir el día 1. KG = kéfir producido a partir de granos de kéfir en condiciones normales
Para determinar el comportamiento de flujo dependiente del tiempo de atmósfera, KG-C = kéfir producido a partir de granos de kéfir en 10% de CO 2
atmósfera, KS = kéfir producido a partir de un cultivo iniciador de kéfir natural
las muestras de kéfir, determinamos la viscosidad aparente en atmósfera normal, y KS-C = kéfir producido a partir de kéfir natural
ity y cizalladura. Después de la fermentación (~ 24 h), el cultivo iniciador en atmósfera de CO 2 al 10% .

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PARÁMETROS DE FERMENTACIÓN PARA LA PRODUCCIÓN DE KEFIR 787

Los microorganismos iniciadores afectaron el flujo pseudoplástico. condiciones atmosféricas diferentes a las muestras de KS y KG
comportamiento. Contactos físicos sueltos entre proteínas como fueron estadísticamente insignificantes ( P > 0.05) en términos de
como resultado de un enlace electrostático e hidrofóbico débil- aroma y sabor.
se espera que conduzcan a un comportamiento de adelgazamiento por cizallamiento
En aceptabilidad
en general, las muestras de KS y KS-C tenían
leches líquidas fermentadas (Abu Jdayil y Mohammed, puntuaciones numéricamente más altas que las muestras de KG y KG-C
2002). En el estudio actual, el alto nivel del agua y un tiempo el día 1 ( P > 0,05). Según los resultados de la general
La disminución dependiente en el contenido de EPS del kéfir resultó en evaluación, las muestras iniciales tuvieron puntajes más altos a través de
comportamiento de adelgazamiento por cizallamiento no newtoniano (Figurael3b).
período de almacenamiento en comparación con las muestras de grano.
En general, KS y KS-C tuvieron valores de esfuerzo cortante más altos Basado en los resultados microbianos y sensoriales, la sugerencia
en función de la velocidad de corte que KG y KG-C. Similar vida útil estimada del kéfir producido a partir de kéfir natural
Se informaron resultados para el kéfir (Ertekin y Guzel- granos es 14 d. Los granos de kéfir se propagan utilizando
Seydim, 2010), ayran (Koksoy y Kılıç, 2003), láctico métodos alternativos, que no son fáciles de replicar en
bebidas (Penna et al., 2001) y suero de leche (Kris- producción industrial. Este estudio presenta importantes
tensen et al., 1997). hallazgos con respecto al contenido de probióticos y micro-
flora del kéfir, que son posiblemente las más importantes
Evaluación sensorial de muestras de kéfir criterios para su eficacia terapéutica. Estos hallazgos pro-
vide contribuciones significativas no solo a la literatura,
Los resultados de la evaluación sensorial de muestras de kéfir en d sino también a la industria láctea.
1, 7 y 14 se dan en la Tabla 5. La vida útil del kéfir
se completó el día 21 en una prueba preliminar. Por lo tanto, CONCLUSIONES
Se determinó el período de almacenamiento sensorial del estudio.
tener 14 d. La muestra de KS-C el día 1 tuvo la mejor Muestras de kéfir producidas con granos de kéfir y
pearance, con una puntuación media de 9,9 (Tabla 5), y olor, cultivo iniciador de kéfir natural sin granos tenía simi-
con una puntuación media de 9,4 en las muestras de kéfir KS-C en d lar química, microbiológica, reológica y sensorial
1, 7 y 14 (Tabla 5). Las muestras de KG y KG-C tenían propiedades. Uso de cultivo iniciador de kéfir sin granos.
puntuaciones medias de textura de 7.8 y 8.1, y KS y KS-C es más fácil y aplicable que el mantenimiento de
las muestras tenían puntuaciones medias de textura de 9,3 y 9,5 puntos granos de kéfir a escala industrial. El terapeutico
el día 14, respectivamente (Tabla 5). Los modelos KG, KG-C, KS y Las propiedades del kéfir se atribuyen a la fisiología.
Las muestras de KS-C tuvieron puntuaciones medias para la textura de 7,9, 8,2,
y propiedades promotoras de la salud del EPS (principalmente kefi-
9.0 y 9.5 en el d 7, respectivamente (Tabla 5). Según corrió). En este sentido, el contenido de EPS relativamente más alto
a los resultados del análisis sensorial, las muestras de KS fueron más en las muestras fermentadas bajo 10% CO 2 proporciona una
le gustó que las muestras de KG ( P <0.05). Aplicaciones de dif- ventaja adicional.

Tabla 5. Evaluación sensorial 1 de muestras de kéfir durante almacenamiento en frío (n = 12) durante 14 días

Muestra 2 y Aroma En general


tiempo de almacenamiento Apariencia Olor y sabor Textura aceptabilidad

KG
1 día 8,4 ± 0,53 8,7 ± 0,29 7,8 ± 0,50 8,1 ± 0,35 7,7 ± 0,17
7 días 8,9 ± 0,31 9,1 ± 0,36 7,6 ± 0,34 7,9 ± 0,34 7,3 ± 0,33
14 días 8,0 ± 0,55 6,4 ± 0,25 4,1 ± 0,37 7,8 ± 0,52 3,0 ± 0,47
KG-C
1 día 8,2 ± 0,46 8,7 ± 0,33 7,9 ± 0,39 8,2 ± 0,22 7,9 ± 0,11
7 días 9,0 ± 0,32 8,7 ± 0,43 7,5 ± 0,33 8,2 ± 0,32 7,4 ± 0,26
14 días 8,1 ± 0,50 7,9 ± 0,27 5,3 ± 0,41 8,1 ± 0,32 4,8 ± 0,24
Kansas
1 día 9,8 ± 0,24 9,2 ± 0,41 9,1 ± 0,35 9,3 ± 0,29 9,2 ± 0,15
7 días 9,2 ± 0,28 9,1 ± 0,33 8,6 ± 0,32 9,0 ± 0,29 8,9 ± 0,23

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1/3/2021 Efectos de diferentes parámetros de fermentación sobre las características de calidad del kéfir.
14 días 9,6 ± 0,08 9,3 ± 0,21 7,3 ± 0,48 9,3 ± 0,24 7,0 ± 0,22
KS-C
1 día 9,9 ± 0,11 9,3 ± 0,29 9,3 ± 0,29 9,4 ± 0,24 9,7 ± 0,17
7 días 9,5 ± 0,14 9,4 ± 0,22 9,5 ± 0,17 9,5 ± 0,17 9,1 ± 0,20
14 días 9,6 ± 0,18 9,4 ± 0,18 7,4 ± 0,31 9,5 ± 0,22 8,0 ± 0,13
1 Los atributos se puntuaron en una escala de 10 puntos, donde 0 = ausencia del atributo y 10 = índice extremadamente alto.
tensión del atributo.
2 KG = kéfir producido a partir de granos de kéfir en atmósfera normal, KG-C = kéfir producido a partir de granos de kéfir en un 10%

Atmósfera de CO 2 , KS = kéfir producido a partir de un cultivo iniciador de kéfir natural en atmósfera normal, y KS-C =
kefir produce a partir de cultivo iniciador kéfir natural en 10% de CO 2 atmósfera.

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788 KÖK-TAŞ ET AL.

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