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Facultad de Medicina

Obstetricia

Clase 2:
Bacteriología 2
2.a Crecimiento Microbiano y
Control de Crecimiento
microbiano
Primer semestre de 2021

Paulina Aguilera Cortés, MSc.


T.M. Adolfo Ríos Alcorta
Clase de hoy…
1. Crecimiento y control de crecimiento microbiano

- Nutrición y tipos de metabolismo


- Condiciones de crecimiento
- Curva de crecimiento
- Control físico y químico del crecimiento
- Clasificación de Spaulding

2. Genética Bacteriana
- Concepto de mutación
- Transferencia genética

3. Quimioterapia antimicrobiana
- Clasificación de antimicrobianos
- Mecanismos de acción
- Resistencia
- Antibiograma
Crecimiento Microbiano
NUTRICIÓN DE MICROORGANISMOS
NUTRICIÓN DE MICROORGANISMOS

NUTRIENTES : Compuestos químicos externos a través de los cuales se construye


la célula bacteriana

MICRONUTRIENTES
Se requieren en bajas cantidades Micronutrientes Macronutrientes
Indispensables para el metabolismo.
Desempeñan funciones catalizadoras, como
cofactores enzimáticos, al formar parte de las
enzimas (grupos prostéticos) o como co-enzimas. Mg
Ca
Fe Na
K
MACRONUTRIENTES
S P O
Se requieren en grandes cantidades
Suministran la mayor parte de la energía. Zn Nitrógeno (N)
Son elementos estructurales en la construcción (12% del peso seco
Se Cu )
de la célula bacteriana.
Co Carbono (C)
Ni Mn (50% del peso seco
)
NUTRICIÓN DE MICROORGANISMOS
AUTOTROFOS : Base de la cadena alimentaria, toman ENERGIA LIBRE y
SUSTANCIAS INORGANICAS con las que sintetizan sustancias orgánicas

CO2 H2O Sales


Minerales

Nutrición
LUZ
FOTOSINTETICOS (Vegetales y Bacterias con Clorofila)

QUIMIOSINTETICOS REACCIONES DE OXIDACIÓN


(Solo algunas bacterias)

HETEROTROFOS : Obtienen energía de la MATERIA


ORGANICA además de los elementos nutritivos
necesarios para su actividad vital
ANIMALES
VEGETALES SIN CLOROFILA
BACTERIAS
NUTRICIÓN DE MICROORGANISMOS

FUENTE DE ENERGIA DONADOR DE ELECTRONES (Sustrato) FUENTE DE CARBONO

Quimio LITO Organo Hetero


Foto (Luz) Auto (CO2)
(Oxidación) (Inorgánico) (orgánico) (Orgánico)

FOTO LITO AUTOTROFO Plantas, Bacterias Fototrofas, Cianobacterias

FOTO LITO HETEROTROFO Chromatiaceae

FOTO ORGANO AUTOTROFO Chloroflexus

FOTO ORGANO HETEROTROFO Varias Bacterias Púrpuras

QUIMIO LITO AUTOTROFO Diversos Grupos De Bacterias

QUIMIO LITO HETEROTROFO Nitrobacter

QUIMIO ORGANO AUTOTROFO Methanotirx

QUIMIO ORGANO HETEROTROFO Mayoría de las Bacterias, Hongos y Animales


CONDICIONES DE CRECIMIENTO MICROBIANO
CULTIVO
Corresponde al crecimiento de microorganismos en condiciones favorables para su desarrollo

MEDIOS DE CULTIVO: Material alimenticio que favorece el crecimiento microbiano.

MEDIOS DEFINIDOS MEDIOS COMPLEJOS

“Los medios de cultivo


deben resolver las
necesidades nutricionales
de los microorganismos
inoculados, según sus
capacidades biosintéticas”
TIPOS DE MEDIOS
CONDICIONES DE CULTIVOMICROBIANO
DE CRECIMIENTO
+
MEDIOS SÓLIDOS

%Agar-Agar
MEDIOS SEMISÓLIDOS

MEDIOS LÍQUIDOS

-
• TÉCNICA ASÉPTICA
CONDICIONES DE CRECIMIENTO MICROBIANO
Colonia
Una población de células (bacterias u hongos)
visible macroscópicamente, que crecen en medio
sólido a partir de una única célula.

Unidad Formadora de Colonias


Una célula única capaz de clonarse hasta formar
toda una colonia de células idénticas
CRECIMIENTO POBLACIONAL:
CONDICIONES DE CRECIMIENTO MICROBIANO
MEDIDA DEL CRECIMIENTO
• Modos para determinar crecimiento bacteriano
RECUENTO EN PLACA
(células viables UFC) .
RECUENTO EN CÁMARA

Dilución seriada

Conteo de células mediante microscopio


(no sirve para muestras muy diluidas).
CRECIMIENTO POBLACIONAL:
CONDICIONES DE CRECIMIENTO MICROBIANO
MEDIDA DEL CRECIMIENTO

RECUENTO EN PLACA
CONDICIONES DE CRECIMIENTO MICROBIANO
FACTORES AMBIENTALES Y CRECIMIENTO
Los requerimientos para el crecimiento microbiano se pueden dividir en dos categorías:
• FISICOS (Temperatura)
• QUIMICOS (pH, presión osmótica, oxigeno, nutrientes)

TEMPERATURA
CONDICIONES DE CRECIMIENTO
FACTORES AMBIENTALES MICROBIANO
Y CRECIMIENTO

pH NaCl

ACIDÓFILOS
Los microorganismos que tienen un crecimiento óptimo en niveles de pH inferiores a 6. Estos microbios se encuentran en varios entornos,
incluyendo los géiseres y las piscinas sulfúricas, así como en el estómago humano.
ALCALÓFILAS
Los microorganismos alcalófilos tienen un crecimiento óptimo en valores de pH entre 9 y 12. Estos microorganismos crecen en lagos,
suelos alcalinos y otros entornos de pH alto.
NEUTRÓFILOS
Los valores de pH neutro, entre 6 y 8, son más comunes en la naturaleza. A lo largo de su evolución, la mayoría de los microorganismos se
han adaptado para tener crecimientos óptimos en entornos de acidez neutra.
CONDICIONES DE CRECIMIENTO
FACTORES AMBIENTALES MICROBIANO
Y CRECIMIENTO
OXIGENO

A. Aerobios estrictos
B. Anaerobios estrictos
C. Anaerobios Facultativos
D. Microaerófilos
E. Anaerobios Aerotolerantes

Presencia de O2

Aerobios Anaerobios Microaerofilos

estrictos,
obligados aerotolerantes facultativos
obligados
CONDICIONES DE CRECIMIENTO MICROBIANO
OXÍGENO
Reducción del oxígeno hasta agua mediante la incorporación secuencial de electrones.
Todos los compuestos intermediarios que se forman son altamente reactivos y tóxicos para las células

• Especies reactivas de oxígeno (ROS): • Enzimas que destruyen a las ROS:


SUPERÓXIDO (O2-): Oxigeno normal que ha pasado a un estado
de alta energia siendo extremadamente reactivo. Se suele
formar por la accion de la luz visible. Está presente en las
células fagocitarias, donde juega un papel en la destrucción de
células extrañas una vez ingeridas por los fagocitos.
PERÓXIDO DE HIDRÓGENO (H2O2): Forma toxica del oxigeno. Se
genera en pequeñas cantidades durante la respiración normal.
RADICAL LIBRE HIDROXILO (OH): Compuesto intermediario del
oxigeno y probablemente el mas reactivo. Se forma en el citoplasma
celular por efecto de radiaciones ionizantes.

Prueba de catalasa
FERMENTACIÓN
FERMENTACION
*FERMENTACIÓN
FERMENTACION
CURVA DE CRECIMIENTO BACTERIANO
4 fases secuenciales:

1. Latencia: fase de adaptación al


medio. Las células no se dividen. Se
Estacionaria
sintetizan ARN, proteínas, etc.

2. Exponencial: fase de duplicación

Mu inació
De
de las células. Aumenta la

cl
ert
al
nci

eo
población. Se puede calcular el
on

n
Exp

tiempo generacional.

Latencia 3. Estacionaria: fase que inicia


cuando comienza el agotamiento
de los nutrientes. No hay aumento
poblacional. La tasa de crecimiento
El conocimiento de la curva de crecimiento bacteriano es igual a la tasa de muerte.
es crítico para comprender la dinámica de la población y
el control de la población en enfermedades infecciosas y 4. Muerte: los nutrientes se agotan
preservación de la comida, como también en proceso por completo y las células mueren.
industriales, como la producción de etanol

https://www.youtube.com/watch?v=cZsVi3CaZ7s
Control del Crecimiento Microbiano
FERMENTACION
CONTROL FÍSICO Y QUÍMICO DEL CRECIMIENTO

Desinfección: destrucción o remoción de patógenos


autoclave vegetativos, pero no de endosporas. Usualmente usado
solo en objetos inanimados.
Esterilización: Destrucción o remoción completa de todos
los microorganismos viables. Usado en objetos inanimados.
Antisepsis: Químicos aplicados a superficies del cuerpo
para destruir o inhibir patógenos vegetativos.
Quimioterapia: Químicos utilizados internamente para
matar o inhibir el crecimiento de microorganismos en los
tejidos del hospedero.
FERMENTACION
CONTROL FÍSICO Y QUÍMICO DEL CRECIMIENTO
EFECTO DE LA TEMPERATURA
FERMENTACION
CONTROL FÍSICO Y QUÍMICO DEL CRECIMIENTO

EFECTO DE LA RADIACIÓN y FILTRACIÓN


FERMENTACION
CLASIFICACIÓN DE SPAULDING
CRÍTICO
Material que entra en contacto con el sistema vascular y zonas estériles del organismo.
Requiere esencialmente un procesamiento de limpieza, seguido de esterilización.
Ej. implantes, prótesis, catéteres, sondas, agujas, instrumental quirúrgico.

SEMICRÍTICO
Material que entra en contacto con mucosas intactas. El procesamiento de este material
requiere limpieza seguida de nivel alto de desinfección.
Ej. Maquinas de diálisis, endoscopias flexibles, termómetros rectales, espéculo vaginal,
etc.

NO CRÍTICO
Material que entra en contacto con piel intacta, pero no con mucosas o no toca
directamente al paciente. Requiere procesamiento de limpieza seguido de un nivel
intermedio o bajo nivel de desinfección.
EJ. Fonendoscopios, termómetros axilares, orinales (chatas), esfigmomanómetro,
desfibriladores, etc.
FERMENTACION
ESTERILIZACIÓN

ESTERILIZACIÓN
Procedimiento utilizado para destruir todas las formas de vida microbiana, incluyendo
formas resistentes, como las esporas.

Es el procedimiento más eficiente de eliminación microbiana.

Ej: Glutaraldehído, Óxido de etileno


FERMENTACION
NIVELES DE DESINFECCIÓN
NIVEL ALTO
En condiciones estrictamente controladas, este procedimiento elimina lvirus, hongos y
formas vegetativas bacterianas, incluyendo micobacterias (tuberculicidas), y solamente
admite la presencia de algunas esporas bacterianas convencionalmente consideradas no
patógenas.
FRACASA CON ALGUNAS ESPORAS
Ej: Formaldehído, Glutaraldehído, Hipoclorito de Sodio 1%

NIVEL INTERMEDIO
Inhibe generalmente, y en condiciones muy controladas destruye bacterias tuberculosas,
elimina a la mayoría de bacterias vegetativas (dependiendo de la biocarga), a la mayoría de
hongos (fundamentalmente los levaduriformes) y a la mayoría de virus, pero no
necesariamente a las esporas bacterianas.
FRACASA CON ESPORAS
Ej: Alcohol etílico 70%

NIVEL BAJO
Puede inhibir o destruir (generalmente) a la mayoría de bacterias en su estado vegetativo,
algunos hongos y virus. Este procedimiento es poco confiable si se desconoce la bio-carga o
el riesgo.
FRACASA CON ESPORAS, TBC, VIH Y VHB
Ej: Compuestos de Amonio cuaternario
NIVELES DE DESINFECCIÓN
CLASIFICACIÓN DE SPAULDING

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