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Amortiguadores Fisiologicos
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Tampón fosfato
Se trata de un tampón inorgánico que se encuentra en los líquidos intracelulares y
mantiene el pH en torno al 6,86 debido al equilibrio existente entre un ácido débil; el
dihidrógeno fosfato (DHP) y su base: el monohidrógeno fosfato (MHP). Ambos
compuestos mantienen un equilibrio entre sí, pudiendo el DHP liberar un protón y
transformarse en MHP, (la reacción se desplaza hacia la derecha), y el MHP puede
unirse a un protón para originar una molécula de DHP, (la reacción se desplaza hacia
la izquierda). H2PO4- ? HPO4-2 + H+
Es decir, a pH fisiológico, las especies del fosfato con capacidad de tamponar son
H2PO4- y HPO4-2 ya que su valor de pK es de 6,8.
Así pues, para el tampón fosfato:
pH = 6,8 + log HPO4-2 / H2PO4-
A pH fisiológico de 7,4 la concentración de HPO4-2 (un 80%) es 4 veces superior a la
de H2PO4- (un 20%). Así pues, el tampón fosfato es un sistema muy eficaz para
amortiguar ácidos.
La concentración de fosfato en la sangre es baja (2 mEq/L) por lo que tiene escasa
capacidad de tamponar si lo comparamos con otros tampones como el bicarbonato.
En cambio, a nivel intracelular, las concentraciones de fosfato son elevadas lo que le
convierte en un tampón eficiente. Las grandes cantidades de fosfato dentro de las
células corporales y en el hueso hacen que el fosfato sea un depósito grande y eficaz
para amortiguar el pH.
Uso y Aplicación Es uno de los buffers más utilizados porque es isotónico y no tóxico
para las células. Se utiliza para diluir sustancias utilizadas para el cultivo y para lavar
los recipientes que contienen células.1
El PBS se emplea como vehículo neutro para células, ya que no modifica el perfil de
expresión y funcionamiento celular normal. El uso de esta solución es muy común
para lavar células a través de centrifugación. El PBS puede emplearse como diluyente
para métodos de desecación de biomoléculas, ya que las moléculas de agua
presentes en el PBS se adhieren alrededor de la biomolécula y permiten inmovilizarla
a una superficie sólida.2 Esta monocapa de agua evita que la biomolécula sea
desnaturalizada (o sufra modificaciones conformacionales) en el proceso de
desecación.
Tampón hemoglobina
La hemoglobina es una proteína globular multimérica que dispone de cuatro puntos de
unión a ligandos cuyas propiedades de unión están reguladas alostéricamente. La
función principal de la hemoglobina es el transporte de oxígeno por la sangre.
Referente a su estructura, se trata de un heterotetrámero y consta de dos pares de
cadenas polipeptídicas diferentes. Cada una de las cadenas lleva un hemo como
grupo prostético, donde se unen las moléculas de O 2, por lo que una hemoglobina
puede unir como máximo cuatro moléculas de O 2.
La captación de O2 se ve afectada, entre otros factores, por los H+ y el CO 2. Algunos
factores favorecen el estado T, en el cual la proteína no tiene O 2 unidos, y otros
favorecen el estado R, en el cual la hemoglobina tiene unidas moléculas de O 2. Este
fenómeno se denomina efecto Bohr. Es muy positivo para remarcar la diferencia entre
las distintas afinidades para el O2; la cual es esencial para que cumpla su función de
transporte.
Cuando el CO2 forma ácido carbónico y protones, los protones estabilizan el estado T,
de descarga de O2. Así, en los capilares periféricos, dónde encontramos CO 2, la
hemoglobina cede las moléculas de O2. En los capilares de los alvéolos pulmonares
se invierte este efecto.
Así, cuando se unen H+ a la hemoglobina, se produce un efecto en el equilibrio del
tampón bicarbonato ya que se induce a la formación de bicarbonato.
Es un tampón fisiológico muy eficiente gracias al cambio de su pK cuando pasa de la
forma oxidada (pK=7,16) a la reducida (pK= 7,71) y a la gran cantidad que hay en la
sangre.
Aminoácidos y proteínas
Los aminoácidos tienen carácter anfótero, es decir, pueden ceder protones y también
captarlos. Esto es así gracias a dos de los radicales comunes en todos los
aminoácidos: el grupo NH2 y el grupo COOH. Estos radicales, al estar en contacto con
el agua, se presentan ionizados o protonados; actuando los dos como donantes o
aceptores de protones.
En pH ácidos:
El NH2 capta un protón: NH3+ (el pka para este radical es 9)
En pH básicos: