UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN

BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

PRÁCTICA DE MICROBIOLOGÌA
PRESENTADO POR

BONILLA GLENY INGRID ALEXANDRA

CÓDIGO
191020093U

DOCENTE
JOSE BUENDIA
LIMA-PERÚ
2020-II
 PRÁCTICA N° 17 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE BACILOS GRAM
NEGATIVOS: GÉNERO PSEUDOMONAS
Pseudomonas Aeruginosa
Pseudomonas aeruginosa pertenece a la familia Pseudomonaceae. Se trata de un
bacilo recto o ligeramente curvado Gram negativo, con un tamaño de 2–4 x 0,5-1
micras, y móvil gracias a la presencia de un flagelo polar. En relación con su
metabolismo, es aerobio (aunque puede desarrollarse en condiciones anaerobias
utilizando nitrato), catalasa positivo y oxidasa positivo. Se caracteriza por producir una
variedad de pigmentos, como la piocianina (de color azul verdoso), la pioverdina
(pigmento fluorescente de color verde amarillento) y la piorrubina (de color rojo).
TIPO DE MUESTRA

• Quemaduras severas,
• pus, sangre, orina,
• LCR,
• lavados bronquiales,
• esputo
• tracto genital femenino.

PRUEBAS

Es una bacilo Gram negativo, no

formador de esporas .Puede
presentar 1.5 a 5 um de largo, y un
Coloración Gram diámetro de 0.5 a 1.0 um. Las
especies de este género son móviles,
debido a la presencia de uno o más
flagelos polares.

Prueba de la Catalasa
Catalasa (+)
 Prueba de la
Citocromo-oxidasa Citocromo oxidasa (+)

SIEMBRA EN CULTIVOS

Agar Mac-Conkey
Colonias redondas, incoloras por no
utilización de la lactosa.

Medio TSI : Agar hierro Superficie inclinada (Rojo), Fondo

triple azúcar (Rojo), H2S (-), Gas (-).

Producción de hemolisina, enzima

que le permite la degradación de la
hemoglobina presente en el agar
Agar Sangre
sangre de carnero. En este medio
todas las cepas produjeron halos de
color verdoso, propios de una
hemolisis parcial (β hemolisis)

Caldo Tripticasa +
PIOCIANINA: Color azul verdoso y
cloroformo
soluble en cloroformo
Agar MIO (Movilidad-
Motilidad: Positiva.
Indol-Ornitina)
Indol: Negativa
Ornitina: Negativo. No se observó de
color púrpura.

Caldo nutritivo Pigmento de verde y olor

característico a uvas

Agar nutritivo
Presencia del psideróforo
PIOCIANINA

Agar Cetrimide
Colonias redondas, lisas, de bordes
regulares. Producción de pigmento
verde (pioverdina)
 PRÁCTICA N° 18 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE BACILOS GRAM
NEGATIVOS: GÉNERO BRUCELLA
Brucella es un genero de bacterias gramnegativas y constituido por cocobacilos
pequeños en inmóviles, carentes de càpsula y flagelos, de la familia
Brucellaceae, con una amplia distribución mundial. Este microorganismo infecta
principalmente a ganado, aunque puede infectar a otros animales mamìferos y a
las personas. Se conocen diez especies de Brucella, algunas de ellas con
distintos biotipos, cada una de las cuales se diferencia en la especificidad del
huésped: Se describen seis especies clásicas, las cuales se han diferenciado
con base en sus características antigénicas y su hospedador animal
preferente: B. melitensis (oveja, cabra, camello); B. abortus (ternera, búfalo,
camello, yak); B. suis (cerdo, liebre, reno, roedor, caribú); B. canis (perro); B.
neotomae (roedores) y B. ovis (ovejas). Recientemente se han descrito cuatro
especies adicionales: B. ceti y B. pinnipedialis para especies que se hospedan
en cetáceos y focas respectivamente; B. microti para especies que se hospedan
en zorros rojos y roedores de campo; y B. inopinata, aislada el año 2009 de una
infección en humano.
TIPO DE MUESTRA
• Sangre
• LCR
• Médula ósea
• Biopsias de ganglios linfáticos
• Hígado
PRUEBAS RESULTADOS

Tinción de gram realizada a un

cultivo de Brucella melitensis. 1000
aumentos. Se observan
Coloración Gram, cocobacilos diminutos (0.5 × 0.6 a
1.5 μm), gram negativos o mal
teñidos. La tinción directa de la
muestra no es sensible.

Las cepas lisas (S) producen

colonias circulares, convexas con
Agar/Caldo TSA bordes regulares, translúcidas y
coloración ámbar. A la luz reflejada
son brillantes, ligeramente
opalescentes y de color gris
azulado.
 Prueba de la Catalasa (+)
Catalasa

• Ureasa (-): Hidrólisis débil

B. abortus
Hidrólisis de úrea B. melitensis
• Ureasa (+)
B. suis
B. canis

• H S (+) 2 S (-)
B. melitensis, B. cani
Producción de H2S • H2 H S (+)
B. abortus, B. suis

Prueba de la
Citocromo-oxidasa Citocromo-oxidasa (+)
 Tras incubar el medio 2-4 días, es
posible observar en la fase sólida
pequeñas colonias que se deslizan
por el agar en forma que recuerdan
las lágrimas de cera resbalando por
Hemocultivo la vela. Una pequeña proporción de
casos presenta el crecimiento entre
los 5-15 días, y sólo de forma
excepcional, éste se retrasa hasta
pasados 30-45 días.

Determina la cantidad de
aglutininas totales (IgM, IgG e IgA)
Serología anti-brucella en suero, líquido
cefalorraquídeo y otros fluidos,
sobre todo si se emplea el
micrométodo, que solo requiere de
10 ul de muestra.

MEDIOS DE CULTIVO

En el caso de Brucella Canis, no

produce H,S. No poseen Ay M.
Forman sedimento mucoso
Medio Fucsina en medios líquidas. Presenta
ant:geno de superficie (R). Infecta
prinCipalmente
a canes de ambos sexos y se ha
aislado en humanos.

En el caso de Brucella melitensis,

produce trazas de en mediO
peptonado, posee un antígeno M
Medio Thionina predominante, patógeno para
caDrinos y OVinos otras animales y
humanos. Presenta 3 blovares.
 PRÁCTICA N° 19 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE
ENTEROBACTERIAS: COPROCULTIVO
Las enterobacterias (familia Enterobacteriaceae).son bacterias Gram
negativas del orden Enterobacterales que contienen más de 30 géneros y más
de 100 especies que pueden tener morfología de cocos o bacilos. Los miembros
de este grupo forman parte de la microbiota del intestino (llamados coliformes) y
de otros órganos del ser humano y de otras especies animales. Algunas especies
pueden vivir en tierra, en plantas o en animales acuáticos. Sucumben con relativa
facilidad a desinfectantes comunes, incluido el cloro. Con frecuencia se
encuentran especies de enterobacterias en la bioindustria: para comprobar la
sanidad de la fermentación de quesos y productos lácteos, alcoholes y en
tratamientos médicos,como la producción de toxinas en el uso de cosméticos y
fabricación de agentes antivirales de la industria farmacéutica, etc.
Bacilos Gram (-) fermentadores:
Enterobacterias PATÓGENAS Enterobacterias OPORTUNISTAS

Escherichia coli Enterobacter sp.

Salmonella sp Serratia sp.

Shigella sp Proteus sp

Yersinia sp. Klebsiella sp.

PRUEBAS

Agar manitol Agar Mac- Agar SS Agar Sabouraud Coloraciòn

salado Conkey (Salmonella Gram
Shigella)
BIBLIOGRAFÌA

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neutropenic patient with acute myeloid leukemia. J Infect. 2011; 63:83-5.
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editor-inchief. Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology, 2nd. ed, 2001,
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• - Foster G, Osterman, BS, Godfroid J, Jacques I, Cloeckaert A. Brucella
ceti sp. nov.and Brucella pinnipedialis sp. nov. for Brucella strains with
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