Practica N° 1

AISLAMIENTO DE ADN DE CELULAS EUCARIONTES

Camila Andrea Morales; Wendy Esquivel González

Universidad de Córdoba, Ciencias básicas, Biología

RESUMEN

El ADN es una molécula que puede ser visualizada en conjunto y ser extraída con
facilidad de cualquier tejido debido a que se encuentra presente en todos los
organismos. Para llevar a cabo la extracción o aislamiento casero de ADN en
células eucariotas (cebolla), es necesario seguir un sencillo protocolo que consta
básicamente de cinco pasos con los que se pretende expresar el material genético.
Finalmente, se agrega alcohol frío lentamente por las paredes del recipiente que
contiene la solución de precipitado y allí será posible observar que el ADN se va
ubicando en la interface (entre el alcohol y el agua).

PALABRAS CLAVES

ADN, célula eucariota, extracción, protocolo.

SUMMARY

DNA is a molecule that can be viewed together and easily extracted from any
tissue because it is present in all organisms. To carry out the extraction or home
isolation of DNA in eukaryotic cells (onion), it is necessary to follow a simple
protocol that basically consists of five steps with which it is intended to express the
genetic material. Finally, cold alcohol is added slowly through the walls of the
container that contains the precipitate solution and there it will be possible to
observe that the DNA is located at the interface (between alcohol and water).

KEYWORDS

DNA, eukaryotic cell, extraction, protocol.

INTRODUCCION

El ácido desoxirribonucleico es el material genético de los seres vivos, está

constituido por dos cadenas de nucleótidos, unidas entre sí formando una doble
hélice. El esqueleto presenta grupos fosfato que están cargados negativamente y
son polares, lo que le confiere al ADN una carga neta negativa. Dentro del núcleo,
esta molécula se encuentra empacada con proteínas a su alrededor. La extracción
de ADN requiere una serie de etapas básicas: En primer lugar tiene que romperse
la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la
célula. También debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el
ADN. La extracción de ADN se realiza con la finalidad de hacer estudios genéticos,
forenses y moleculares. Se puede extraer ADN de forma fácil con productos
caseros y un poco de cuidado. Para los estudios genéticos más profesionales, se
requieren protocolos especiales con diversos pasos y materiales que pueden ser
contaminantes. Sin embargo, podemos hacer una extracción de ADN a partir de
materiales que tenemos en casa.

MARCO TEORICO

Los ácidos nucleicos son polímeros de nucleótidos unidos por enlaces fosfodiéster
que por su composición química se han clasificado en dos tipos: ácido
desoxirribonucleico (DNA) y ácido ribonucleico (RNA).
ADN es el nombre químico de la molécula que contiene la información genética en
todos los seres vivos y consiste en dos cadenas que se enrollan entre ellas para
formar una estructura de doble hélice y cada una de estas cadenas tiene una parte
central formada por azúcares (desoxirribosa) y grupos fosfato (Austin, C).
La función del DNA es la de almacenar y transferir la información genética que
conforma a un organismo y a su descendencia. El genoma de un individuo
comprende la totalidad de la información genética contenida en el DNA y este
junto con los tres tipos de RNA (rRNA, tRNA y mRNA) participa en la biosíntesis
ordenada de los componentes de la célula, codificando la expresión espacio
temporal de las proteínas y respondiendo a los estímulos del medio ambiente.
El genoma se encuentra organizado en forma diferente en las células procariotas y
eucariotas; en estas últimas presenta un mayor grado de complejidad, además se
encuentra organizado en cromosomas, que son estructuras de DNA relacionadas
con proteínas básicas a las que se les denomina histonas las cuales le confieren
estabilidad a la molécula y permite que el DNA que mide casi 2 metros de longitud
se empaquete en un núcleo de 10 µm de diámetro (Martínez, 2015).
De acuerdo con el tipo de célula en estudio, para poder aislar y observar el DNA,
se deben deshacer la membrana plasmática y la envoltura nuclear y también se
precisa la desnaturalización de las proteínas; a partir de esto, la purificación de los
ácidos nucleicos se realiza mediante la extracción de las proteínas y los lípidos con
solventes orgánicos y su recuperación, en un paso posterior, al precipitarlos con
alcohol, es decir, para poder estudiar esta molécula con detalle se precisa
generalmente su aislamiento de la célula, y para ello es necesario un conjunto de
materiales e instrumentos de laboratorio complejos. Sin embargo, este
experimento pretende un acercamiento simple y sencillo a la técnica de extracción
de DNA que se puede realizar en cualquier hogar con materiales de la vida
cotidiana.
METODOLOGIA

Se cortó una cebolla y puso en una licuadora, se agregó un poco de agua para que
esta pudiera ser licuada más fácil, se licuo por 30 segundos para moler la cebolla,
se hicieron pausas para que hubiera una mejor trituración, esto se realizó hasta
que la cebolla quedo liquida, luego se realizó la mezcla para crear la solución de
lisis, en un recipiente se agregaron 3 cucharadas de sal, 2 cucharadas de jabón
líquido y un poco de agua, después se unieron las dos soluciones. Se puso un filtro
y se agregó la mezcla. La solución final se puso en un vaso de vidrio y se le agrego
alcohol frio por las paredes del vaso y después de unos minutos se pudo observar
el ADN.

RESULTADOS

Figura 1. Resultado del aislamiento del ADN de cebolla.

ANALISIS

CONCLUSION

Al aplicar el protocolo adecuadamente se pueden apreciar las fibrillas blanquecinas

que flotan en la interface que hay entre el agua y el alcohol. Con esto podemos
saber cómo es el procedimiento de la extracción del DNA, así como su estructura
de una forma fácil y sencilla; sin embargo el procedimiento no permite una
purificación completa del DNA, es más, lo que observamos no es únicamente DNA
sino una mezcla de ácidos nucleicos (RNA y DNA).
BIBLIOGRAFIA

Martínez, L. (2015) EXTRACCIÓN DE DNA. Experimento con reactivos de la vida

cotidiana. Recuperado de:
http://genetica.uab.cat/base/documents/genetica_gen/Laura%20Mart
%C3%ADnez%20Mart%C3%ADn2015_4_19P21_19.pdf

Austin, C. (Sin fecha) DNA. National Human Genome research Institute (NIH).
Recuperado de: https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/ADN-acido-
Desoxirribonucleico#:~:text=%E2%80%8BADN%20(%C3%81cido
%20Desoxirribonucleico)&text=ADN%20es%20el%20nombre%20qu
%C3%ADmico,una%20estructura%20de%20doble%20h%C3%A9lice.

Betancourt, A. (Sin fecha) Extracción de DNA. Recuperado de:

https://www.monografias.com/trabajos91/informe-experimento-extraccion-
adn/informe-experimento-extraccion-adn.shtml#conclusioa

https://www.todamateria.com/extraccion-adn-experimento/

Dra. Puppio, A. (2011) Precauciones antes de hacer un análisis de DNA.

Recuperado de: http://microarraydna.blogspot.com/2011/03/precauciones-antes-
de-hacer-un-analisis.html

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. Menciona que precauciones se deben tomar para realizar un análisis de ADN

confiable en casos clínicos o legales.
R/Los estudios genéticos deben reunir requisitos de protocolo mínimos
como los que se detallaran a continuación:
 La participación de un profesional de la salud con conocimientos de
genética tanto en la selección de un estudio como en la
interpretación de los resultados.
 Confidencialidad.
  El consumidor debería estar totalmente informado sobre lo que el
estudio puede decir o no respecto de su salud, su identidad, o de su
relación de parentesco biológico.
 La interpretación de estos resultados es sumamente complicada y
necesita ser comunicado en una forma comprensible.
  Los estudios genéticos que utilizan bases de datos poblacionales
deben estar acordes a la raza del individuo o grupo a estudiar.
 Evidencia científica en las que se basa el estudio.
 Acreditaciones y habilitaciones del laboratorio.
 Matricula profesional otorgada por el Ministerio de Salud Nacional y/o
Provinciales.
 Acceso personalizado a los profesionales que realizan la prueba de
ADN.

2. Qué consideraciones existen para el transporte y almacenamiento de ADN

de un sitio de un crimen a un laboratorio para ser analizado.
R/Lo primero es la labor de campo, en la cual los operadores intervienen en los
lugares del hecho y/o escenas del crimen con funciones de reconocimiento,
selección, recolección de las evidencias pasibles de ser objeto pericial. Como
resultado de todo ello, la evidencia es enviada a los laboratorios, quienes son los
responsables de su aceptación, controlando el cumplimiento de los estándares
mínimos para su tratamiento. Cada muestra debe llegar al laboratorio
correctamente identificada y debidamente acondicionada en su contenedor a los
fines de garantizar la autenticidad e integridad de la misma; esto es lo que se
denomina rotular.
En segunda instancia se debe cumplir con las normas de bioseguridad para
preservar la integridad de la muestra en el momento de la recolección, manipuleo
y acondicionamiento, recolectar la muestra con utensilios o material descartable
estéril, utilizar recipiente estéril o bien limpio con tapa a rosca de cierre hermético,
precintar la tapa al cuerpo del recipiente firmemente con cinta o faja de papel para
asegurar la inviolabilidad o no adulteración de la muestra, no usar lacre porque
contiene plomo, el precinto debe ser firmado por la persona que realiza la toma de
muestra y finalmente, acompañar las muestras de un mismo caso con el
documento de cadena de custodia oficial correspondiente.