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FACULTAD DE INGENIERÍA DE
INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
AUTORES:
Ponce Gonzales Mirella Paola
Tinoco Juárez Rosita Ariana
Zamorano Escalante Delia Varinia
Zapata Palacios Luz Stephanie
Zapata Zapata Maria del Carmen
ASIGNATURA:
Microbiología de los Alimentos
SULLANA - PERÚ
2020
1
INDICE
I. RESUMEN..........................................................................................................................3
II. INTRODUCCIÓN...............................................................................................................4
III. OBJETIVO......................................................................................................................5
3.1. Objetivo General:.......................................................................................................5
3.2. Objetivos Específicos:................................................................................................5
IV. FUNDAMENTO TEÓRICO..........................................................................................6
4.1. Bases Teóricas..............................................................................................................6
4.1.1 CARNE.....................................................................................................................6
4.1.1. Definición.............................................................................................................6
4.1.1.2 Composición.........................................................................................................6
4.1.1.3 Impactos del manejo pre-mortem en bovinos.......................................................7
4.1.1.4 Microbiología de la carne.....................................................................................7
4.1.1.5 Contaminantes más comunes................................................................................8
4.1.1.6 Microorganismos indicadores...............................................................................8
4.1.2 COMPUESTOS DESINFECTANTES....................................................................8
4.1.2.1 Características.......................................................................................................8
4.1.2.2 Ácido orgánico......................................................................................................9
4.1.2.3 Ácido perácetico...................................................................................................9
4.1.2.4 Ácido láctico.........................................................................................................9
4.3.1 CALIDAD DE LA CARNE.....................................................................................9
4.3.2 CALIDAD DE LA CARNE DE RES....................................................................10
4.3.2.1 Color...................................................................................................................11
4.3.2.2 pH........................................................................................................................11
4.3.2.3 Estado microbiológico........................................................................................11
4.4.1.1 Origen de la contaminación de la carne de pollo................................................12
4.1 Bases Conceptuales....................................................................................................13
V. METODOLOGÍA Y MATERIALES...............................................................................14
5.1. Metodología...............................................................................................................14
5.1.1. Método................................................................................................................14
5.1.2. Materiales............................................................................................................16
VI. RESULTADOS..............................................................................................................18
6.1. Esquematización de los procedimientos para identificar la carga microbiana en las
carnes.....................................................................................................................................18
2
VII. ANÁLISIS Y DISCUSIONES......................................................................................21
7.1. Análisis de esquematización de los procedimientos para poder identificar la carga
microbiana presente en las carnes.........................................................................................21
7.2. Análisis de la revisión de los resultados de prácticas realizadas para identificar la
carga microbiana presente en la carne...................................................................................21
DISCUSIONES.....................................................................................................................22
VIII. CONCLUSIONES.........................................................................................................23
IX. CUESTIONARIO..........................................................................................................24
X. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS..............................................................................25
I. RESUMEN
3
II. INTRODUCCIÓN
La carne y productos cárnicos son fácilmente alterables, por lo que deben manejarse con
especial cuidado durante todas las operaciones de proceso. La alteración se inicia como
resultado de acciones microbianas, químicas y físicas. Si no se controlan estas acciones, la
carne en poco tiempo se convertiría en un producto no apto para el consumo humano. Por lo
que es necesario minimizar su deterioro para prolongar el tiempo en el cual la carne mantiene
un nivel de calidad sanitaria aceptable. Generalmente, se admite que los cambios post-
mortem, asociados con la conversión del músculo en carne, y el almacenamiento y
manipulación subsiguiente se acompañan, de cierto deterioro de manera independiente a las
precauciones tomadas durante el proceso y manipulación. Sin embargo, la profundidad con
que tienen lugar estos cambios alterativos depende de las condiciones de manipulación,
proceso y almacenamiento observadas. Entre los cambios alterativos se incluyen los debidos a
microorganismos (bacterias, mohos y levaduras), insectos, enzimas endógenos (presentes
naturalmente en los tejidos cárnicos) enzimas exógenos (producidos por los microorganismos)
reacciones químicas distintas a las enzimáticas (como la rancidez oxidativa) y acciones físicas
(quemadura por frío, exudación, decoloración luminosa y aparición de colores anormales).
Cada uno de estos cambios contribuye a disminuir la calidad de la carne, siendo la
contaminación y actividad bacteriana el mayor problema durante el almacenamiento. Por lo
tanto, todas las prácticas de manipulación y métodos de almacenamiento deben basarse
fundamentalmente en minimizar y retardar la invasión y actividad microbiana.
Este informe de laboratorio costa con 10 capítulos, el primer capítulo nos muestra sobre el
resumen del informe, el segundo capítulo nos muestra la introducción del informe, donde nos
redacta un pequeño resumen de que trata la práctica, sus objetivos, su conclusión, etc. El
tercer capítulo nos presenta los objetivos de la práctica como objetivos generales y objetivos
específicos. En el cuarto capítulo nos narra sobre los fundamentos teóricos de la práctica a
realizar, donde encontramos bases teóricas y bases conceptuales. En el quinto capítulo nos
habla sobre la metodología y los materiales que se utilizaron en la práctica. En el sexto
capítulo se presenta los resultados de la práctica, por lo tanto, en el séptimo capítulo se
encuentran los análisis y discusiones de la práctica. En el octavo capítulo se muestran las
conclusiones de la práctica de laboratorio estas conclusiones van de acuerdo a los objetivos
planteados. Por último, en el noveno capítulo se encuentra el cuestionario resuelto de la
práctica, donde el docente ha planteado preguntas para los estudiantes. En el décimo capitulo
nos muestran las referencias bibliográficas donde hemos buscado información para detallar el
informe de práctica.
4
III. OBJETIVO
III.1.Objetivo General:
Reconocer las técnicas de identificación de la carga microbiana en las carnes.
III.2.Objetivos Específicos:
Esquematizar los procedimientos para identificar la carga microbiana en las carnes.
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IV. FUNDAMENTO TEÓRICO
IV.1.Bases Teóricas
4.1.1 CARNE
IV.1.1. Definición
El termino carne se define como el tejido muscular de los animales utilizados
como alimentos. Los productos animales se encuentran dentro de los principales
grupos nutricionales debido a su alto contenido proteico y sus sustancias
esenciales para nuestro organismo. [ CITATION Car01 \l 10250 ]
Según Araneda (2016), la carne (denominación común) está compuesta por tres
tipos de tejidos: tejido muscular, tejido conjuntivo y tejido graso. El tejido más
abundante es el muscular, el cual está formado por haces o paquetes de fibras
musculares. Las fibras son células elongadas que contienen muchas fibrillas
proteicas orientadas como ellas, responsables del movimiento cuando se
contraen y relajan.
4.1.1.2 Composición
Éstas se unen entre sí mediante el tejido conjuntivo, que formando un tendón
une a su vez el músculo con el hueso. Por último, asociado al tejido conjuntivo
que se encuentra entre los haces de fibras se encuentra el tejido graso, el cual
está conformado por células de grasa que sirve como fuente de energía para
las fibras musculares. Las cualidades de la carne (textura, color y sabor)
dependen en gran medida de la distribución y proporción relativa de estos
tejidos. [ CITATION Ano \l 10250 ]
6
Tabla 1: Componentes de varios tipos de carne
7
Flavobacterium spp. Entre los patógenos se pueden encontrar Salmonella spp.,
Sthaphylococcus aureus, Yersinia entorolitica/pseudotuberculosis, Campylobacter jejuni/coli,
Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Bacillus cereus, Clostridium prefringens y
Clostridium botulinum. [ CITATION Res01 \l 10250 ]
LA actividad del agua (Aw), pH, potencial de óxido-reducción y temperatura son los
principales factores que influyen en el crecimiento microbiano en la carne, ya que, si bien es
cierto el musculo contiene os nutrientes necesarios para el crecimiento de esta flora
contaminante, existen barreras como la pared celular, tejido conjuntivo y grasa de cobertura,
que hacen que estos nutrientes no se encuentren directamente accesibles. [ CITATION
Res01 \l 10250 ]
8
Alta estabilidad en su forma concentrada y por un periodo menos
prolongado en su forma diluida.
4.1.2.2 Ácido orgánico
Los ácidos orgánicos están constituidos por una cadena lineal saturada de ácidos
monocarboxílicos, con derivaciones de ácidos insaturados, hidroxílicos, fenólicos o
multicarboxílicos. Su actividad microbiana es dependiente del pH. En su forma no
disociada los ácidos son lipofílicos, lo cual los hace capaces de penetrar la membrana
microbiana celular e interrumpir la fisiología normal de las células al acumularse en su
interior y generar una reducción intolerable del pH. Bajo estas condiciones ácidas se
presenta una desestabilización de las proteínas que se cree que permite que el ácido
sea capaz de atravesar libremente la membrana y llegar al citoplasma. [ CITATION The11
\l 10250 ]
9
jugosidad y el sabor de la carne. La carne debe presentar un color normal y uniforme
a lo largo de todo el corte. Las carnes de vacuno, cordero y cerdo deberían además
estar veteada. [ CITATION Bra11 \l 10250 ]
4.3.1.2 Olor
El producto debe tener un olor normal, que diferirá según la especie (p.ej., vacuno,
cerdo, pollo), pero que variará sólo ligeramente de una especie a otra. Deberá
evitarse la carne que desprenda cualquier tipo de olor rancio o extraño. [ CITATION
San15 \l 10250 ]
4.3.1.3 Firmeza
La carne debe aparecer más firme que blanda. Cuando se maneja el envase para uso
y distribución al por menor, debe tener una consistencia firme pero no dura. Debe
ceder a la presión, pero no estar blanda. [ CITATION San15 \l 10250 ]
4.3.1.4 Jugosidad
La jugosidad depende de la cantidad de agua retenida por un producto cárnico cocinado.
La jugosidad incrementa el sabor, contribuye a la blandura de la carne haciendo que sea
más fácil de masticar, y estimula la producción de saliva. La retención de agua y el
contenido de lípidos determinan la jugosidad. El veteado y la grasa presente en los
bordes ayudan a retener el agua. Las pérdidas de agua se deben a la evaporación y goteo.
El envejecimiento post-mortem de la carne puede incrementar la retención de agua y, en
consecuencia, aumentar la jugosidad. [ CITATION San15 \l 10250 ]
4.3.1.5 Ternura
Está relacionada con diversos factores como la edad y el sexo del animal o la
posición de los músculos. Un factor que incide positivamente en la ternura de la
carne es el envejecimiento post-mortem. Las canales se envejecen almacenándolas a
temperaturas de refrigeración durante un cierto período de tiempo después de la
matanza y el enfriamiento inicial. La composición y organización estructural
sumadas a los cambios bioquímicos postmortem son elementos importantes al
describir el mecanismo que define la textura final de un corte de carne. [ CITATION
Cha04 \l 10250 ]
4.3.1.6 Sabor
El sabor y el aroma se conjugan para producir la sensación que el consumidor
experimenta al comer. Esta sensación proviene del olor que penetra a través de la
nariz y del gusto salado, dulce, agrio y amargo que se percibe en la boca. En el sabor
de la carne incide el tipo de especie animal, dieta, método de cocción y método de
preservación (p.ej., ahumado o curado). [ CITATION Cha04 \l 10250 ]
10
industriales y métodos de preservación e higiene durante los procesos de elaboración
de los distintos productos finales. [ CITATION Lop \l 10250 \m Van04]
4.3.2.1 Color
La canal fresca presenta el color rojizo característico de la mioglobina, proteína
sarcoplasmática formada de una sola cadena polipéptida unida a un grupo hemo en
forma del ión ferroso. Esta proteína es la responsable del transporte y almacenamiento
del oxígeno dentro del tejido muscular. Una vez que su superficie entra en contacto
con el aire el grupo hemo se une con el oxígeno dando como resultado un tono rojo
brillante el cual indica la presencia de la oximioglobina. Caso contrario ocurre en el
interior de la canal donde se presenta un color rojo púrpura de la desoximioglobina
debido a la ausencia de oxígeno. [ CITATION Cal12 \l 10250 ]
4.3.2.2 pH
El pH post-mortem de la canal es un factor determinante en lo referente al
crecimiento microbiológico, así como algunos cambios químicos que se pueden
presentar durante el almacenamiento. Cuando el animal está vivo, el valor de pH se
encuentra cerca de la neutralidad, el sacrificio de los animales provoca un fallo en su
circulación que no permite que el oxígeno, ni los nutrientes, fluyan a través de la
sangre dando lugar al metabolismo anaeróbico el cual se conoce como glicólisis
post-mortem. [ CITATION Lwr \l 10250 \m Edw06]
En la glicólisis post-mortem, el glucógeno es degradado a ácido láctico como último
intento para producir energía que permita que las células musculares sigan realizando
sus funciones vitales. Esta reacción va a provocar una disminución del pH hasta
valores de 5,4-5,5 donde se finaliza la actividad glucolítica como mecanismo de
protección contra los microorganismos. A esta etapa se le conoce como rigor mortis.
[ CITATION Lwr \l 10250 \m Edw06]
Antes del sacrificio, el animal presenta un mecanismo de defensa donde los glóbulos
blancos y anticuerpos producidos controlan de manera eficaz los agentes infecciosos,
sin embargo, el sacrificio del animal produce la pérdida de este mecanismo dando
lugar a una alta exposición a la contaminación microbiana y haciendo necesario la
toma de medidas para reducir dicha contaminación y minimizar el crecimiento y
actividad de la misma. [ CITATION Arg00 \l 10250 ]
11
4.4.1 CALIDAD MICROBIOLOGICA DE LA CARNE DE POLLO
La contaminación microbiana de la carne de pollo es indeseable pero inevitable, y
depende de la calidad microbiológica de las canales utilizadas como materia prima. Las
prácticas de higiene durante la manipulación, el tiempo y la temperatura de
almacenamiento afectan de forma importante al crecimiento microbiano (El-Leithy y
Rashad, 1989; Doyle y Buchanan, 2013.)
En la carne de ave se han encontrado varios cientos de especies de microorganismos.
Estos microorganismos pueden dividirse en dos grupos generales, por una parte, los que
son capaces de producir enfermedades en humanos, generalmente denominados
patógenos, y por otra, la alteración de la carne conocidos como microorganismos
alterantes. [ CITATION Mon12 \l 10250 ]
Retención: se produce cuando las canales entran en contacto con agua que contiene
bacterias. Una película de agua se retiene en la superficie de la canal. Por lo tanto, el
nivel de contaminación está relacionado directamente con la concentración microbiana
del agua de procesamiento (McMeekin y Thomas, 1978)
Atrapamiento: se produce cuando los tejidos (por ejemplo, piel, tejido conjuntivo,
músculo) absorben agua y comienzan a hincharse. Esta pequeña hinchazón produce
unas hendiduras en la que las bacterias penetran quedando atrapadas (Thomas y
McMeekin, 1980,1984; Lillard, 1988, 1989b; Benedict et al., 1991). Estas bacterias no
se pueden eliminar mediante pulverización de la canal. El proceso de escaldado y
desplumado determina el grado de daño físico a las capas superficiales de la piel de las
aves. Cuanto mayor es el daño físico de la epidermis y la exposición de la capa dérmica,
mayor es el riesgo de atrapamiento y adhesión a la piel (Kim y Doores, 1993a, b; Kim et
al., 1993)
12
epidermis de la piel, por el contrario, a 58ºC durante 2,5 minutos se elimina la epidermis
(Thomas et al., 1987). La piel sin cutícula es el sustrato más adecuado para la fijación
de Salmonella (Kim et al., 1993), y del crecimiento de organismos alterantes (Ziegler
and Stadelman, 1955; Essary et al., 1958; Clark, 1968; Berner et al., 1969).
IV.1.3. Inocuidad
La inocuidad de los alimentos puede definirse como el conjunto de condiciones y medidas
necesarias durante la producción, almacenamiento, distribución y preparación de alimentos
para asegurar que una vez ingeridos, no representen un riesgo para la salud.[ CITATION Ano \l
10250 ]
IV.1.6. deterioro
El deterioro es la alteración negativa en un alimento que afecta su apariencia, su valor
nutricional, su estado higiénico y sus características organolépticas, es la acción y efecto de
deteriorar o deteriorarse (empeorar, estropear, degenerar o poner en inferior condición algo)
[ CITATION Yat14 \l 10250 ]
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V. METODOLOGÍA Y MATERIALES
V.1. Metodología
V.1.1. Método
14
V.1.1.3. Análisis microbiológico
V.1.1.3.1. Recuento de microorganismos mesófilos totales
1. Luego de realizadas las diluciones pertinentes, procedemos a la inoculación por
profundidad,
2. Homogenizar y transferir 1 ml de las suspensiones de las diluciones a placa Petri,
esterilizada y rotuladas. Este proceso se realiza por duplicado por cada dilución y con
la mayor brevedad posible.
3. Terminada la distribución del inóculo en las placas Petri, verter aproximadamente 15 a
20 ml de medio de cultivo Agar Nutritivo o Agar Cuenta Gérmenes, licuado a 45ºC.
4. Homogenizar el medio de cultivo y el inoculo, realizando movimientos rotatorios en
diferentes direcciones por 5 veces en cada dirección.
5. Se deja una placa estéril sin inocular, para utilizarla como placa control.
6. Dejar que solidifique el medio de cultivo.
7. Incubar las placas en posición invertida a 30 ºC de 48 a 72 horas.
8. Realizar las observaciones y la determinación de UFC.
9. El conteo microbiológico se realiza en unidades formadoras de colonia (UFC/ml) y
sólo seleccionamos las placas que tiene un número contable de colonias (entre 15 a
300).
1. De los tubos seleccionados transferir 0.1 ml a caja Petri con Agar EC.
2. Haciendo uso del asa de siembra esterilizada realizar la técnica de estriado.
3. Dejar en reposo por un tiempo de 10 minutos.
4. Por cada dilución habrá dos cajas de Petri con Agar EC.
5. Incubar a 44,5°C durante 48 horas observar colonias de color entre azules y rojo-
azules.
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6. Los resultados son expresados en unidades formadoras de colonias.
V.1.2. Materiales
V.1.2.1. Equipos
1) Microscopio
2) Balanza analítica.
3) Autoclave.
4) pHmetro.
5) Mechero Bunsen.
6) Incubadora.
7) Estufa.
8) Cuenta colonias.
9) Baño María.
V.1.2.2. Instrumentos
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21) Torundas (para matraz y tubos de ensayos).
22) Asa de siembra.
23) Papel blanco (1/2 hoja)
V.1.2.3. Reactivos
1) Agar Nutritivo.
2) Agar Cuenta Gérmenes.
3) Agar PDA
4) Agar Saborout.
5) Agua Peptonada.
6) Agua Destilada Estéril.
7) Alcohol 70° (Estudiante).
8) Hipoclorito al 5% (lejía).
Carne
Laptop
USB
Internet
Agenda
Lapicero
Escritorio
Cable USB
Ficha técnica de observación
Agenda de apuntes
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VI. RESULTADOS
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RECUENTO DE COLIFORMES FECALES- ESCHERICHIA coli
2. Haciendo
uso del asa de
c)IDENTIFICACIO 1. De los tubos seleccionados
siembra
N DE E-coli transferir 0.1 ml a caja Petri con
esterilizada
Agar EC
realizar la
técnica de
estriado.
5. Los
4.Incubar a 44,5°C durante 48 3. Dejar en reposo por un
resultados son
horas observar colonias de tiempo de 10 minutos.Por
expresados en
color entre azules y rojo- cada dilución habrán dos
unidades
azules. cajas de Petri con Agar EC
formadoras de
colonias.
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VI.2.Analizar y determinar la forma, elevación, borde, superficie, tamaño, consistencia,
cromogénesis, grado de transparencia de las colonias de las siembre a 24 y 48 horas
después de la inoculación.
Tabla N°1 Características morfológicas de levadura y mohos y Escherichia coli.
(Espinales Delgado, K 2012)
CARASTERISTICA 24 HORAS 48 HORAS
S
Forma Circular Circular
INTERPRETACIÓN:
En esta tabla se muestra el estudio que realizo (Espinales Delgado,
K 2012) en su trabajo de investigación “Análisis microbiológico
para control cualitativo de carne ovina y caprina, seca y salada”
sobre las características morfológicas de levadura y mohos y
Escherichia coli.
Después de 24 horas y luego de 48 horas, donde se determina la
cantidad de UFC, forma, tamaño, borde,cromogenesis,etc.
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VII. ANÁLISIS Y DISCUSIONES
Como podemos observar en este resultado, nos explica el procedimiento que debemos
de realizar al momento de identificar la carga microbiana presente en la carne. Y así
poder obtener buenos resultados debemos seguir los procedimientos indicados, con el
uso correcto de EPP y teniendo una buena asepsia.
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VII.2. Análisis de la revisión de los resultados de prácticas realizadas para
identificar la carga microbiana presente en la carne.
Por la ausencia de padrones microbiológicos en la legislación, de la Unión Europea,
para la carne salada y seca de ovinos/caprinos, fueron tomados como referencia
parámetros descritos en la literatura para productos afines, como la buchada, la carne
de sol y similares. Los resultados estadísticos fueron obtenidos a través del programa
IBM SPSS statistics 20, los gráficos y tablas, fueron ejecutadas a través de Microsoft
Excel 2007. Los resultados obtenidos durante este trabajo son detallados a
continuación:
DISCUSIONES
23
24
VIII. CONCLUSIONES
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IX. CUESTIONARIO
Ahumado: Se entiende por ahumado el proceso por medio del cual los productos
cárnicos procesados adquieren la caracterización de color sabor y conservación, mediante
la acción del humo utilizando una relación de temperatura tiempo y humedad relativa
adecuadas.
Animales de abasto: Se entiende por animales de abasto los bovinos, equinos, ovinos,
porcinos, caprinos, aves de corral conejos, animales de caza y pesca y otras especies Que
se utilizan para el consumo humano y Que el Ministerio declare aptas para el mismo.
Curado: Proceso de conservación de los alimentos en el que se puede incluir algún tipo
de sazonado. El curado se usa sobre todo para la elaboración de carnes, pescados y
queso; en este tipo de procesos se utiliza una combinación de sal, azúcar, nitratos o
nitritos, aunque muchos otros también se incluyen técnicas de ahumado.
Ligante: Se hace referencia al término aglomerante con la capacidad de retención de
agua en las carnes magras o la adherencia de piezas de carne, que influyen en la
homogeneidad, de hecho, para que una sustancia se considere como aglutinante de una
emulsión o una mezcla, debe ser capaz de retener el agua y emulsionar la grasa.
[ CITATION Yat14 \l 10250 ]
2) ¿Cuáles son los requisitos organolépticos, químicos y microbiológicos que deben cumplir la
carne cruda, hamburguesa, jamonada y pates?
3) ¿Cuáles son los límites microbiológicos para las normas peruanas que deben cumplir los tipos de
productos cárnicos?
Limites por g.
N M
Aerobios mesofilos (30° C) 106 107
Escherichia coli 50 5 x 102
Staphylococcus aureus 102 103
Clostridium perfringens 102 103
Salmonella sp. Ausencia/25 g ----------
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4) ¿Cuáles son las condiciones generales para la elaboración y comercialización de productos
cárnicos que aseguren su calidad?
CONDICIONES GENERALES
Con el fin de garantizar la inocuidad de la carne, productos cárnicos comestibles y los derivados
cárnicos destinados para el consumo humano, todo eslabón de la cadena alimentaria debe garantizar
la temperatura de refrigeración o congelación en las etapas del proceso a partir de la planta de
beneficio, en el desposte, desprese, empaque, procesamiento, almacenamiento, transporte,
distribución, comercialización, expendio, importación y exportación, de tal forma que se asegure su
adecuada conservación hasta el destino final.
PARÁGRAFO 1o. La planta de beneficio, es responsable de que la carne y los productos cárnicos
comestibles alcancen la temperatura de enfriamiento. A partir de aquí, los demás eslabones de la
cadena, transporte y expendio, deberán conservar la temperatura del producto.
PARÁGRAFO 2o. Los requisitos de temperatura de la carne, productos cárnicos comestibles y los
derivados cárnicos destinados para el consumo humano, serán los establecidos en la normatividad
sanitaria que para el efecto se expida.
27
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5) ¿Qué tipos de agar se utilizan en los análisis microbiológicos de productos cárnicos?
Agar Nutritivo.
Agar Cuenta Gérmenes.
Agar PDA
Agar Saborout.
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X. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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