1.

Clasifique y describa la composición de los siguientes medios de cultivo, como se

prepara, para que se emplea, y coloque una imagen del tubo y/o placa
conteniendo el medio sin sembrar y sembrado.

Agar Nutritivo

-Clasificación:

Es un medio de cultivo que según su estado físico es sólido y según su finalidad

es enriquecido.

-Composición:

 0,5% de peptona;
 0,3% de extracto de carne/extracto de levadura;
 1,5% de agar;
 0,5% de cloruro de sodio;
 agua destilada;
 pH casi neutro (6,8) a 25 °C.

-Preparación:

 Rehidratar 23 g del medio en un litro de agua destilada.

 Reposar 10 a 15 minutos.
 Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1
minuto para disolverlo por completo.
 Esterilizar en autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15 minutos.
 Enfriar aproximadamente a 45ºC.
 Vaciar en cajas de Petri estériles.
 Conservar en refrigeración de 2 a 8ºC.

-Empleo:

Se emplea para el aislamiento y recuento de microorganismos con escasos

requerimientos nutricionales, tiene importante aplicación en procedimientos para el
análisis de alimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria.

-Imagen:
 Sin sembrar Sembrado

Agar Gelatina

-Clasificación:

Es un medio de cultivo que según su estado físico es sólido y según su finalidad es

diferencial.

-Composición:

 Extracto de carne (3 g/l)

 Peptona de gelatina (5 g/l)
 Gelatina (120 g/l)
 pH casi neutro (6,8) a 25 °C.

-Preparación:

 Suspender 128 gramos del medio en un litro de agua destilada.

 Mezclar bien y disolver por calentamiento con agitación frecuente.
 Hervir durante un minuto hasta disolver por completo.
 Dispensar en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante
15 minutos.
 Vaciar en cajas de Petri estériles.
 Conservar en refrigeración de 2 a 8ºC.

-Empleo:
Se emplea para la investigación de la presencia de microorganismos proteolíticos,
como lo demuestra la licuefacción de la gelatina, especialmente en el análisis
bacteriológico del agua.
 -Imagen:

Sin sembrar Sembrado

2. ¿Por qué no es necesario ajustar el pH en el caldo nutritivo y si lo es en el

agar almidón?

Debido a que cuando se prepara el caldo nutritivo el pH del medio de cultivo

es aproximadamente neutro en cambio cuando se prepara el agar almidón el
pH del medio de cultivo no es neutro y se debe de modificar el pH.

3. Describa el autoclave y su forma de uso.

-Descripción:
Es un recipiente de presión metálico de paredes gruesas con un cierre hermético que
permite trabajar a alta presión para realizar una reacción industrial, una cocción o una
esterilización con vapor de agua a fin de desinfectar materiales e instrumentos
quirúrgicos. Su construcción debe ser tal que resista la presión y temperatura
desarrollada en su interior. La presión elevada permite que el agua alcance
temperaturas superiores a los 100 °C. La acción conjunta de la temperatura y el vapor
produce la desnaturalización de las proteínas de los microorganismos, entre ellas las
esenciales para la vida y la reproducción de estos, hecho que lleva a su destrucción.

-Uso:
Inicialmente, se debe girar la perilla de control de la válvula de drenaje de la autoclave
y hacia una posición cerrada. A continuación, se debe abrir la puerta de la cámara y
verter una cantidad adecuada de agua en la parte inferior de esta abertura, se debe
procurar llenarlo hasta justo debajo de la porción delantera de la línea límite de la
bandeja, usualmente, un galón de agua será suficiente. Después, se debe de
comenzar a cargar el material que se desee desinfectar y se lo debe de colocar en el
estante situado dentro de la autoclave, si se planea poner líquidos en botellas, el
envase debe estar como máximo a 3/4 partes de su capacidad, a la vez que es
prudente mantener las tapas ligeramente aflojadas. También se debe limpiar las placas
de Petri, pero se debemos de asegurarnos de cargarlas en la parte superior hacia
arriba, en cuanto a los instrumentos, debemos rodarlos en papel marrón y grapar la
envoltura para asegurar el contenido dentro. Cerramos y aseguramos firmemente la
puerta de la cámara de la autoclave, luego conmutamos el interruptor de escape de la
máquina, de esta manera, es posible controlar el escape dependiendo del material que
estemos esterilizando. Es importante que sigamos el tiempo de esterilización prescrito
para cada objeto, por ejemplo, las máquinas que contienen más de un litro de volumen
deben esterilizarse durante unos 30 minutos, mientras que las máquinas de pequeño
volumen sólo tardarán 15 minutos, máquinas más grandes que contienen un mínimo
de 1 galón de agua requieren el ciclo de 60 minutos. Esperamos a que el indicador de
presión y el temporizador marquen cero antes de abrir la puerta, se debe de hacer todo
lo posible para mantener la cara, brazos y manos lejos de la parte superior de la
puerta, para así evitar posibles quemaduras por el calor. A continuación, procedemos a
quitar el artículo esterilizado usando guantes resistentes al calor, luego vertemos los
elementos contaminados y fundidos en el contenedor de riesgo biológico antes de
enjuagar la cristalería con líquido caliente. Por último, vaciamos el agua girando el
control de drenaje en la autoclave a una posición abierta.