Facultad de Ciencias Básicas

Programa de Licenciatura en Ciencias Naturales

Asignatura: Biología Celular

PRACTICA N° 5

BIOMOLECULAS (Identificación de Lípidos y Ácidos Nucleicos)

OBJETIVO: Comprobar la presencia de algunas biomoléculas en muestras frescas utilizando

reactivos químicos y aplicar una técnica sencilla para obtener ADN de células vegetales

MATERIALES:
 Gradilla  Alcohol al 96%
 Tubos de ensayos  Papel absorbente
 Agua destilada  Beacker de 50 mL
 Aceite vegetal  Frasco de vidrio de 900 mL
 Pipetas Pasteur plásticas  Sal común
 Pipetas Pasteur de vidrio  Bicarbonato de sodio
 Leche  Tomate
 Sudán III  Cuchillo
 Beacker (500 mL)  Batidora de cocina
 Mantequilla  Colador pequeño
 Jeringa  Solución tampón de lisis
 Frasco de vidrio de 500 mL  Papel parafilm
 Pipetas de vidrio  Caja Petri pequeña

PROCEDIMIENTO:

Laboratorio experimental - Lípidos:

a) Preparar tubos patrón; patrón negativo (agua destilada), patrón positivo (aceite vegetal),
muestras problemas (leche y mantequilla).
b) Colocar 5 gotas de nuestro indicador Sudán III al patrón negativo, agitar y observar la
coloración.
c) Colocar 5 gotas de nuestro indicador Sudán III al patrón positivo, agitar y observar la
coloración.
d) Tomar 2 mL de leche y mantequilla (previamente derretida) con la jeringa, colocar 5 gotas de
nuestro indicador (Sudán III) a cada muestra, agitar y observar la coloración.
e) Observar la presencia de de lípidos en las muestras.

Links de apoyo: https://www.youtube.com/watch?v=Dsx00q1voC4

Experimentación – Extracción de ADN vegetal

a) Tomar el tomate y picar, agregar en un recipiente con agua destilada, mezclar o triturar con
una batidora por 10 s (romper las células).
b) Tomar el extracto obtenido y colarlo, para eliminar trozos de pulpa o piel que hayan quedado
del tomate.
c) Preparación de un tampón de lisis; ¼ de agua destilada, 2 cucharaditas rasas de sal de
común, 6 cucharaditas rasas de Bicarbonato de sodio y 2 mL de jabón líquido (lava vajillas).
 d) Mezclar 10 mL de extracto de tomate y 20 mL del tampón de lisis, tapar la muestra con papel
parafilm y agitar por 2 min.
e) Se filtra la solución con un colador y se pasa 5 mL de la solución a un tubo de ensayo.
f) El tubo de ensayo con la solución obtenida se le va agregando con mucho cuidado 10 mL de
alcohol al 96 %, observando en el tubo de ensayo una interfase blanca que corresponde al
ADN extraído del tomate.
g) Para recoger el ADN se toma una pipeta Pasteur de vidrio, se introduce en el tubo de ensayo
con cuidado en la parte de la interfase se enrolla el ADN en la punta de la pipeta y se tira
hacia arriba.
h) LA muestra de ADN se coloca en una caja Petri pequeña, para su posterior observación.

Links de apoyo: https://www.youtube.com/watch?v=PkjtFM_UVxk

Cuestionario
1. Consulta y explica en que consiste la reacción química que se lleva a cabo en la identificación
de lípidos. Realiza esquemas.

2. ¿Por qué existe diferencia entre las coloraciones observadas en los tubos de ensayo? (video
1).

3. Consulta y explica otros métodos para la identificación de lípidos (uno colorimétrico y uno
analítico).

4. Consulte y explica la función de cada uno de los reactivos y materiales empleados en la

extracción de ácidos nucleicos (video 2).

5. ¿Cuáles colorantes son empleados en la tinción de ADN? Explica en que consiste la reacción
química y realiza esquemas (2 colorantes).

6. Consulta y explica otro método para la identificación de ácidos nucleicos.

Referencias
 Caselles, A. 2013. Prácticas de Biología: Guía para el trabajo de laboratorio. Universidad
del Atlántico.
 https://www.colegiosantodomingo.cl/wp-content/uploads/2015/09/02_laboratorio-
biomoleculas.pdf
 http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioTinciones.htm
 https://portalacademico.cch.unam.mx/materiales/prof/matdidac/sitpro/exp/quim/quim2/quim
icaII/Actividad_de_laboratorio.pdf
 https://blog.unitips.mx/carbohidratos-lipidos-y-proteinas-guia-ipn