Universidad Nacional Abierta y a Distancia

Vicerrectoría Académica y de Investigación

Guía de actividades y rúbrica de evaluación – Tarea 1 – Principios
cromatográficos

- Descripción general del curso

Escuela o Unidad Escuela de Ciencias Básicas, Tecnología e

Académica Ingeniería
Nivel de formación Profesional
Campo de Formación Formación disciplinar
Nombre del curso Cromatografía
Código del curso 401542
Tipo de curso Metodológico Habilitable Si ☐ No ☒

Número de créditos 3

- Descripción de la actividad
Número
Tipo de
Individual ☒ Colaborativa ☐ de 3
actividad:
semanas
Momento de Intermedia,
Inicial ☐ ☒ Final ☐
la evaluación: unidad 1:
Peso evaluativo de la Entorno de entrega de actividad:
actividad: 70 Seguimiento y evaluación
Fecha de inicio de la actividad: Fecha de cierre de la actividad:
sábado, 15 de febrero de 2020 viernes, 6 de marzo de 2020
Competencia a desarrollar:
El estudiante describe interpreta describe los fundamentos de la
cromatografía mediante el desarrollo de ejercicios prácticos y teóricos,
relacionados con las características, propiedades y aplicaciones de la
cromatografía plana y en columna, con el fin de identificar la afinidad de la
fase móvil y fase estacionaria, y la velocidad de migración de solutos.

Temáticas a desarrollar:
- Velocidad de migración de solutos: elución cromatográfica,
tiempos de retención, coeficiente de distribución, factor de
retención, factor de selectividad, resolución de la columna,
eficiencia de la columna, factores de retención, selectividad y
aplicaciones.
- Cromatograma: ensanchamiento de banda, resolución de picos
cromatográficos y selectividad.
- Cromatografía plana: generalidades, fase estacionaria y fase
móvil, métodos de detección (revelado), metodologías usadas
para la cromatografía en papel, preparación de placas de
cromatografía en capa fina y aplicaciones.
- Cromatografía en columna: generalidades, fase estacionaria y
fase móvil.
-
Pasos, fases o etapa de la estrategia de aprendizaje a
desarrollar

Tarea 1 – Principios cromatográficos

La tarea 1 está conformada por actividades individuales que integran la

estrategia de aprendizaje basada en tareas, mediante el desarrollo de 3
ejercicios:

Ejercicio 1. Cromatograma y la velocidad de migración de solutos.

Ejercicio 2. Cromatografía plana.
Ejercicio 3. Cromatografía en columna.

Actividades a desarrollar

Antes de dar inicio al desarrollo de los ejercicios que conforman la Tarea 1,

es necesario que realice las siguientes acciones básicas:
- Lea detenidamente toda la guía de actividades.
- Los aportes para el desarrollo de esta actividad se desarrollarán en el
entorno de Aprendizaje Colaborativo en el tema “Tarea 1– Principios
cromatográficos”.
- Haga una lectura comprensiva de la bibliografía asignada para esta
unidad, la cual se encuentra en el entorno de conocimiento.

A continuación, se presentan 3 ejercicios que debe desarrollar de manera

individual, en los que tendrá que relacionar los conceptos, características,
propiedades y aplicaciones de los temas de estudio de la primera unidad del
curso.

Ejercicio 1. Cromatograma y velocidad de migración de solutos

Realice la lectura y análisis de las siguientes referencias bibliográficas que se

encuentran en el entorno de conocimiento de la Unidad 1:

- Doria, G. (2013). Introducción general a la Cromatografía. En Módulo

Cromatografía (pp. 15-21). Bogotá, Colombia. UNAD - Universidad
Nacional Abierta y a Distancia.
- Gismera, G. M. J., Quintana, M. M. D. C., & Da, S. D. C. M. D. (2012).
Introducción a la cromatografía líquida de alta resolución. (pp. 23-34)
 Madrid, ES: Editorial Universidad Autónoma de Madrid.

Descripción del ejercicio 1.1:

Cada estudiante debe consultar las definiciones de los siguientes conceptos:

analíto, elución cromatográfica, tiempo de retención, coeficiente de
distribución, factor de retención, factor de selectividad, resolución de la
columna, eficiencia de la columna, factor de retención, selectividad,
ensanchamiento de banda y resolución de picos cromatográficos. Consolide
en la Tabla 1 del Anexo 1, la definición para cada concepto e incluya las
referencias bibliográficas de consulta.

Descripción del ejercicio 1.2:

A continuación, se da una descripción de un procedimiento realizado en un

laboratorio de análisis de alimentos, con el fin de lograr una aproximación
con el análisis cromatográfico de una muestra de pigmentos. Lea
atentamente el ejercicio y de respuesta a las preguntas que se solicitan.

Paso 1. Se mezclaron dos solventes inmiscibles y se agregó en la mezcla una

muestra (soluto) de pigmentos extraídos de tomate de árbol (Solanum
betaceum) del departamento de Cundinamarca. Posteriormente calentó la
mezcla hasta disolución del soluto en los solventes (Figura 1).
Figura 1. Montaje del procedimiento realizado en el laboratorio (Zambrano,
M. 2019)

Los solventes empleados fueron octanol que por sus características químicas
y estructurales es considerado un solvente hidrófobo (apolar) y el agua, que
es un solvente clasificado como hidrófilo (polar). Cuando se calculó la
constante de distribución se obtuvo un valor de 52, mientras que, al realizar
el mismo procedimiento, pero con una grasa obtenida por el método Soxhlet
(soluto) de una muestra de mayonesa, se obtuvo un valor de 89.

A partir de la información anterior, diligencie la Tabla 2 del Anexo 1,

incluyendo la definición de los conceptos que se solicitan y cite un ejemplo
relacionado al contexto del párrafo anterior. Adicionalmente, en la sección
“oración y definición de conceptos” de la misma Tabla, utilice las palabras
“mayor” o “menor” para completar la oración. Relacione las referencias
bibliográficas de consulta.

Paso 2. Con el fin de realizar un análisis de la separación mediante

cromatografía, de las dos muestras utilizadas en el experimento (Muestra A:
pigmentos, agua y octanol; Muestra B: grasas, agua y octanol), se analizó la
fase más densa de la muestra A y B en un Cromatógrafo Líquido de Alta
Eficiencia (HPLC) el cual permite la separación, identificación y cuantificación
de los componente de una mezcla. En el análisis realizado se obtuvieron los
siguientes cromatogramas:

Figura 2. Cromatograma 1 (Zambrano, M. 2019)

Figura 3. Cromatograma 2 (Zambrano, M. 2019)

De acuerdo con las figuras 2 y 3, se observa que:

- El cromatograma 1 presenta un pico en la parte derecha que representa
un analito y un pico de tiempo muerto (tM) en la parte izquierda.
- El cromatograma 2 presenta un pico que representa un analito y no
presenta un pico para el tiempo muerto (tM).
Paso 3. A partir de los resultados obtenidos, se requiere determinar el factor
de retención (k’); para realizarlo, se debe tener en cuenta que: si se sabe
que el factor de retención (k’) es menor a 1, la elución es tan rápida que no
se puede determinar el tiempo de retención (tR), mientras que, si el factor de
retención es mayor a 10, la elución es muy lenta.

Con base en la información anterior, diligencie la Tabla 3 del Anexo 1,

tomando como referencia que el factor de retención del cromatograma 1 y 2,
es de 4,5 y 11, respectivamente. Para diligenciar la tabla, tenga en cuenta
que el factor de retención depende de los valores de tM y tR. Defina los
conceptos que se presentan en la misma tabla y relacione las referencias
bibliográficas de consulta.

Paso 4. En el laboratorio se mezclaron las fases más densas de las muestras

A y B (descritas anteriormente), y se realizó un nuevo análisis de la mezcla
en el cromatógrafo de HPLC con una columna de 38 cm. El cromatograma
que se obtuvo como producto del análisis de la mezcla líquida se presenta a
continuación:

Figura 4. Cromatograma 3 (Zambrano, M. 2019)

Los tiempos de retención y el ancho de banda del cromatograma para el

compuesto “a” y “b”, los presentará su tutor en el foro, siguiendo la
estructura de la siguiente tabla:

Tabla 1. Información cromatograma 3.

Compuesto Tiempo de retención- seg (tR) Ancho de banda (W)

a
b

Teniendo en cuenta las definiciones de tR, tM y W consultadas y descritas en

la Tabla 3 del Anexo 1. Considere la información suministrada en la Figura
4 y la Tabla 1 de esta guía, y calcule:
- Tiempo de retención corregido.
- Factor de retención.
- Número de platos teóricos.
- Altura de plato.
- Factor de selectividad
- Resolución.
- Resolución en relación con factor de retención.
- Resolución en relación con la selectividad.
- Resolución en relación con la eficiencia.
Registre el proceso matemático empleado para cada cálculo en la Tabla 4
del Anexo 1.

Paso 5. Con el fin de realizar un análisis de los resultados obtenidos en la

Figura 4 y con base a los cálculos desarrollados, responda los siguientes
interrogantes, soportando la respuestas con fuentes bibliográficas y
regístrelas en la Tabla 5 del Anexo 1.
- ¿Qué indica el tiempo de retención en un análisis cromatográfico?
- ¿Qué indica el número de platos?
- ¿Qué indica la altura de plato?
- ¿Qué relación tiene la resolución con el factor de retención, la selectividad
y la eficiencia?

Ejercicio 2. Cromatografía plana

Realice la lectura y análisis de las siguientes referencias bibliográficas que se

encuentran en el entorno de conocimiento de la Unidad 1:

- Burriel Martí, F., Arribas Jimeno, S., Lucena Conde, F., & Hernández
Méndez, J. (2008). Cromatografía. En: Química analítica cualitativa (18a.
ed.). (pp. 323-314; 318-321). Madrid: Paraninfo.
- Doria, G. (2013). Introducción general a la Cromatografía. En Módulo
Cromatografía (pp. 31-35). Bogotá, Colombia. UNAD - Universidad
Nacional Abierta y a Distancia.
- Gismera, G. M. J., Quintana, M. M. D. C., & Da, S. D. C. M. D. (2012).
Introducción a la cromatografía líquida de alta resolución. (pp. 125-127)
 Madrid, ES: Editorial Universidad Autónoma de Madrid.
- Medellín, J. (2013). Separación de mezclas por Cromatografía de papel.
Objeto Virtual de Aprendizaje. Bogotá, Colombia: UNAD - Universidad
Nacional Abierta y a Distancia.

Descripción del ejercicio 2.1:

Cada estudiante debe consultar las definiciones de los siguientes conceptos

relacionados a la cromatografía plana: fase estacionaria y fase móvil,
métodos de detección o revelado, cromatografía en papel y cromatografía en
capa fina. Consolide en la Tabla 6 del Anexo 1, la definición para cada
concepto e incluya las referencias bibliográficas de consulta.

Descripción del ejercicio 2.2:

En un laboratorio de análisis químico se quiere hacer la separación de

compuestos de alimentos con polaridades medias y altas, aplicando la
Cromatografía de papel y capa fina, cuya diferencia radica en la naturaleza
del lecho o del adsorbente, que es una fase estacionaria sólida como placa de
gel de sílice o papel cromatográfico. De la migración diferencial de la mezcla
de compuestos con polaridades medias y altas, debido al movimiento capilar
en forma ascendente que ejerce la fase móvil, se obtuvo los siguientes
resultados experimentales:

● Ensayo 1
Se empleó una solución estándar para calcular el desplazamiento de la
muestra. La altura de la placa (h) y la distancia del borde inferior a la línea
de siembra la suministrará su tutor en el foro, así como el valor del
desplazamiento de la solución patrón (a) y el desplazamiento de la muestra
(d) (Figura 5).

Figura 5. Ensayo 1 (Zambrano, M. 2019)

● Ensayo 2
Se empleó una fase móvil compuesta por 10% de Tolueno y 90% de
cloroformo, y se sembraron cuatro muestras: a) 4-hidroxibenzaldehído, b)
Vainilla, c) Clorobenzaldehído y d) muestra problema. La altura de la placa
(h), la distancia del borde inferior a la línea de siembra y la distancia del
borde superior a la línea de frente de disolvente la suministrará su tutor en el
foro, así como el valor del desplazamiento de la muestra a, b, c y d (Figura
6).

Figura 6. Ensayo 2 (Zambrano, M. 2019)

Considerando que, en cromatografía plana el factor de retardo (R f)

representa la relación de las distancias recorridas por el soluto y la fase
móvil, calcule el Rf de las muestras analizadas en cada ensayo y diligencie la
Tabla 7 del Anexo 1.

A partir de las figuras 5 y 6, y del cálculo de Rf de los ensayos realizados,

responda los interrogantes que se presentan en la Tabla 8 del Anexo 1.
Emplee referencias bibliográficas sugeridas al inicio del ejercicio para dar
soporte a las respuestas.
Ejercicio 3. Cromatografía en columna

Realice la lectura y análisis de las siguientes referencias bibliográficas que se

encuentran en el entorno de conocimiento de la Unidad 1:

- Burriel Martí, F., Arribas Jimeno, S., Lucena Conde, F., & Hernández
Méndez, J. (2008). Cromatografía. En: Química analítica cualitativa (18a.
ed.). (pp. 313-316). Madrid: Paraninfo.
- Doria, G. (2013). Introducción general a la Cromatografía. En Módulo
Cromatografía (pp. 14-15;21-27). Bogotá, Colombia. UNAD - Universidad
Nacional Abierta y a Distancia.
- Gismera, G. M. J., Quintana, M. M. D. C., & Da, S. D. C. M. D. (2012).
Introducción a la cromatografía líquida de alta resolución. (pp. 27-33)
Madrid, ES: Editorial Universidad Autónoma de Madrid.

Descripción del ejercicio:

Una vez realice una revisión teórica de las características de la cromatografía
en columna, complete el paralelo comparativo de esta técnica con la
cromatografía plana. Diligencie la Tabla 9 del Anexo 1 y relacione las
referencias bibliográficas de consulta.

Entorno de Conocimiento
− Consulta el Syllabus para conocer la estructura del
curso y el material bibliográfico de la unidad.

Entorno de Aprendizaje Colaborativo

− Desarrolla la actividad en el tema titulado “Unidad 1:
Tarea 1 – Principios cromatográficos”.
Entornos para
su desarrollo
Entorno de Seguimiento y Evaluación
− El estudiante deberá hacer la entrega de la actividad
en el recurso titulado “Unidad 1: Tarea 1 – Principios
cromatográficos – Entrega de la actividad”.
− Registra en el E-portafolio los avances, logros y
dificultades que presente en el desarrollo de la
actividad.

Productos a
entregar por
Individuales:
 - Desarrollar los ejercicios 1, 2 y 3.
- Entregar el documento final con las indicaciones de la
el estudiante
guía, en el entorno de seguimiento y evaluación.

Lineamientos generales del trabajo colaborativo para el desarrollo

de la actividad

Planeación de
actividades
para el
No aplica.
desarrollo del
trabajo
colaborativo
Roles a
desarrollar por
el estudiante
No aplica.
dentro del
grupo
colaborativo
Roles y
responsabilida
des para la
producción de No aplica.
entregables
por los
estudiantes
Uso de Las Normas APA es el estilo de organización y presentación
referencias de información más usado en el área de las ciencias
sociales. Estas se encuentran publicadas bajo un Manual
que permite tener al alcance las formas en que se debe
presentar un artículo científico. Aquí podrás encontrar los
aspectos más relevantes de la sexta edición del Manual de
 las Normas APA, como referencias, citas, elaboración y
presentación de tablas y figuras, encabezados y seriación,
entre otros. Puede consultar como implementarlas
ingresando a la página http://normasapa.com/

En el acuerdo 029 del 13 de diciembre de 2013, artículo 99,

se considera como faltas que atentan contra el orden
académico, entre otras, las siguientes: literal e) “El plagiar,
es decir, presentar como de su propia autoría la totalidad o
parte de una obra, trabajo, documento o invención
realizado por otra persona. Implica también el uso de citas
o referencias falsas, o proponer citas donde no haya
coincidencia entre ella y la referencia” y liberal f) “El
reproducir, o copiar con fines de lucro, materiales
educativos o resultados de productos de investigación, que
cuentan con derechos intelectuales reservados para la
Universidad.
Políticas de
plagio
Las sanciones académicas a las que se enfrentará el
estudiante son las siguientes:
a) En los casos de fraude académico demostrado en el
trabajo académico o evaluación respectiva, la calificación
que se impondrá será de cero punto cero (0.0) sin perjuicio
de la sanción disciplinaria correspondiente.
b) En los casos relacionados con plagio demostrado en el
trabajo académico cualquiera sea su naturaleza, la
calificación que se impondrá será de cero punto cero (0.0),
sin perjuicio de la sanción disciplinaria correspondiente.

4. Formato de Rubrica de evaluación

 Formato rúbrica de evaluación

Tipo de Actividad Actividad

☐
actividad: individual colaborativa
☒
Momento de
Intermedia,
la Inicial ☐ ☒ Final ☐
unidad 1
evaluación
Niveles de desempeño de la actividad individual
Aspectos
Valoración Valoración Valoración Puntaje
evaluados
alta media baja
El estudiante
El estudiante El estudiante no
explica
explica en explica los
parcialmente los
forma correcta conceptos
conceptos
conceptos generales de la
generales de la
Estudio de generales de la cromatografía,
cromatografía, a
conceptos cromatografía, ya que no
partir de la
cromatográfic a través de la realiza la 5
construcción
os construcción de construcción de
incompleta del
(Ejercicio 1.1) un glosario con un glosario sin
glosario con
soportes soportes
soportes
bibliográficos. bibliográficos.
bibliográficos.
(Hasta 5 (Hasta 3 (Hasta 1
puntos) puntos) puntos)
Análisis de El estudiante El estudiante El estudiante no 10
cromatogram asocia describe de forma describe los
a y velocidad correctamente incompleta los conceptos de
de migración conceptos de conceptos de coeficiente de
de solutos coeficiente de coeficiente de distribución,
(Ejercicio 1.2) distribución, distribución, miscibilidad y
miscibilidad y miscibilidad y polaridad, y no
polaridad, a polaridad, así realiza una
partir de la como los identificación de
identificación ejemplos ejemplos
de ejemplos expuestos en el expuestos en el
expuestos en el contexto del contexto del
contexto del ejercicio. ejercicio.
ejercicio.
 (Hasta 10 (Hasta 5 (Hasta 2
puntos) puntos) puntos)
El estudiante
El estudiante El estudiante
relaciona de
relaciona no relaciona el
forma
correctament factor de
incorrecta el
e el factor de retención y la
factor de
retención y la resolución de
retención y la
resolución de picos
resolución de
picos cromatográfic
picos
cromatográfic os, por lo que
cromatográficos
os, a través no realiza el
, ya que no 5
del análisis análisis de
realiza
de tiempo de tiempo de
completamente
retención y retención y
el análisis del
tiempo tiempo muerto
cromatograma
muerto de un en un
expuesto en el
cromatogram cromatograma
contexto del
a. .
ejercicio.
(Hasta 5 (Hasta 3 (Hasta 1
puntos) puntos) puntos)
El estudiante El estudiante El estudiante 10
calcula calcula no calcula el
correctament incorrectament tiempo de
e el tiempo e el tiempo de retención
de retención retención corregido,
corregido, corregido, factor de
factor de factor de retención,
retención, retención, número y
número y número y altura de
altura de altura de platos platos
platos teóricos; teóricos;
teóricos; selectividad y selectividad y
selectividad y resolución, sin resolución, en
resolución, a un análisis un
través del completo de un cromatograma
análisis de un cromatograma para el estudio
cromatogram para el estudio de muestras
a para el de muestras de de alimentos.
 estudio de
muestras de alimentos.
alimentos.
(Hasta 10 (Hasta 5 (Hasta 2
puntos) puntos) puntos)
El estudiante
relaciona los
factores que El estudiante
influyen en la relaciona de
resolución de forma parcial los
un factores que
cromatograma influyen en la
para el análisis resolución de un El estudiante no
de una muestra cromatograma, relaciona los
de alimentos, a mediante un factores que
través del cálculo y análisis influyen en la
cálculo y incompleto del resolución de un
análisis de tiempo de cromatograma 10
tiempo de retención para el análisis
retención corregido, factor de una muestra
corregido, de retención, de alimentos.
factor de número y altura
retención, de platos
número y teóricos;
altura de platos selectividad y
teóricos; resolución.
selectividad y
resolución.
(Hasta 10 (Hasta 5 (Hasta 2
puntos) puntos) puntos)
Relación de El estudiante El estudiante El estudiante no 5
conceptos de explica en explica explica los
cromatografía forma correcta parcialmente los conceptos
plana conceptos de conceptos generales de
(Ejercicio 2.1) cromatografía generales de cromatografía
plana, a través cromatografía plana, sin la
de la plana, a partir de construcción de
construcción de la construcción un glosario con
un glosario con incompleta del soportes
 glosario con
soportes
soportes bibliográficos
bibliográficos.
bibliográficos.
(Hasta 5 (Hasta 3 (Hasta 1
puntos) puntos) puntos)
El estudiante El estudiante
calcula calcula
correctamente incorrectamente
el factor de el factor de
El estudiante no
retardo, a retardo,
calcula el factor
través del presentando
de retardo, en
análisis de errores en el
estudio de
placas análisis de placas 5
muestras de
cromatográfica cromatográficas
alimentos.
s realizadas en realizadas en un
un estudio de estudio de
Identificación
muestras de muestras de
de
alimentos. alimentos.
Cromatografía
(Hasta 5 (Hasta 3 (Hasta 1
plana y
puntos) puntos) puntos)
velocidad de
El estudiante
migración de El estudiante El estudiante no
relaciona de
solutos relaciona la relaciona la
forma incompleta
(Ejercicio 2.2) velocidad de velocidad de
la velocidad de
migración de migración de
migración de
solutos en dos solutos de dos
solutos en un
ensayos de ensayos de
ensayo de
cromatografía cromatografía 10
cromatografía
plana, a través plana, ya que no
plana, mediante
del cálculo de realiza el cálculo
un cálculo
factor de del factor de
incorrecto del
retardo. retardo.
factor de retardo.
(Hasta 10 (Hasta 5 (Hasta 2
puntos) puntos) puntos)
Comparación El estudiante El estudiante El estudiante no 10
de identifica las identifica de identifica las
cromatografía diferencias de forma incompleta diferencias de la
plana y en la las diferencias de cromatografía
columna cromatografía la cromatografía plana y
 plana y
cromatografía plana y
en columna, a cromatografía en cromatografía
través del columna, con el en columna, al
desarrollo de desarrollo no elaborar un
un cuadro incompleto de un cuadro
comparativo cuadro comparativo que
(Ejercicio 3)
que relaciona comparativo que relaciona las
las relaciona las características
características características de de cada técnica.
de cada cada técnica.
técnica.
(Hasta 10 (Hasta 5 (Hasta 2
puntos) puntos) puntos)
Calificación final 70