Biofarmacia Prá ctica No.

1 Absorció n de á cido acetilsalícilico en intestino delgado de pollo

PRACTICA No.1

“ABSORCIÓN DE ÁCIDO ACETILSALÍCICO EN

INTESTINO DELGADO DE POLLO

Objetivo

Que el alumno determine la constante de velocidad de absorció n a diferentes

concentraciones de á cido acetilsalicílico en un modelo bioló gico como el intestino delgado de
pollo.

Introducción

La absorció n, distribució n, biotransformació n y eliminació n de un fá rmaco requiere un paso

por membranas celulares. La difusió n y transporte de medicamentos se debe al paso a través
de las células siendo la membrana plasmá tica la barrera comú n.

Los fá rmacos cruzan las membranas por medio de procesos pasivos o por mecanismos en los
que influyen de manera activa los componentes de ella. En el primer caso, la molécula entra
por difusió n pasiva contra un gradiente de concentració n, gracias a su solubilidad en la
bicapa de lípidos; la transferencia es directamente proporcional a la magnitud del gradiente
de concentració n y al coeficiente de partició n lípido-agua del fá rmaco. Cuanto mayor sea
dicho coeficiente tanto má s grande será la concentració n del medicamento en la membrana
y por tanto, má s rá pida su difusió n.

En el transporte facilitado, se realiza por una proteína transportadora, aquí no hay aporte de
energía por lo que es a favor del gradiente de concentració n.

En el transporte activo, se realiza en contra del gradiente de concentració n y por lo tanto se

involucra un gasto de energía.

Una vez que se alcanza el equilibrio diná mico, la concentració n del medicamento es igual en
ambos lados de la membrana.

El á cido acetilsalicílico es un á cido débil que en solució n se encuentra en su forma no

ionizada, siendo liposoluble, lo cual le permite que se difunda a través de la membrana
celular.

Materiales y reactivos

 Agua destilada
 Á cido acetilsalicílico
 Intestino delgado de pollo
 Vaso de precipitados de 200 ml
 Vaso de precipitados de 250 ml
 1 probeta
 agitador

Técnica

1) Lavar el intestino delgado de pollo recién extraído

1
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2) Preparar una solució n de á cido acetilsalicílico segú n corresponda a su equipo de 20,

30, 40, 50 y 60 mg de á cido en 20 ml de agua destilada
3) Cerrar perfectamente uno de los extremos del intestino de un segmento de
aproximadamente 25 cm e introducir en el interior y cerrar el otro extremo.
4) Medir 100 ml de agua destilada en un vaso de precipitados y determinar el pH
5) Introducir el intestino en el vaso y medir el pH a los tiempo de 15, 40, 45 y 60 min.
6) Graficar pH vs tiempo para su concentració n así como una grá fica donde se observen
todas las concentraciones.

Resultados

Tabla 1. pH obtenidos a parir de las diferentes concentraciones del AAS en

diferentes lapsos de tiempos.
Concentración del ácido acetilsalicílico (mg/20 mL)
Tiempo 0 10 20 30 40 50 60
(min)
0 5.75 5.75 5.75 5.75 5.75 5.75 5.75
15 5.75 5.87 5.91 5.98 6.04 5.98 6.01
30 5.75 5.97 5.97 6.03 6.05 6.02 5.91
45 5.75 6.04 5.99 6.06 6.04 6.03 5.90
60 5.75 6.05 6.00 6.02 6.09 5.98 5.93

A partir del pH se realizó una grá fica de ‘’pH vs Tiempo’’ y se realizaron los cá lculos para
obtener la concentració n del á cido a partir de la siguiente ecuació n, teniendo en cuenta
que el pKa del ASS= 3.5

1
pH= ( pKa−log [ ácido ] )
2

[ácido ]=10( pKa−2 pH )

Tabla 2. Resultados de la concentración de 0 mg/20 mL de ASS

Tiempo (min) pH Concentración del Ln [AAS]
ácido (mg/mL)
0 5.75 1x10-8 -18.42
15 5.75 1x10-8 -18.42
30 5.75 1x10-8 -18.42
45 5.75 1x10-8 -18.42
60 5.75 1x10-8 -18.42

Gráfica de pH vs Tiempo del ASS en una

concentración de 0 mg/20 mL
8
6
4
pH

2
0
0 10 20 30 40 50 60
Tiempo (min)

2
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Gráfica de ln[AAS] vs Tiempo en una

concentración de 0 mg/20 mL

0
0 10 20 30 40 50 60
Ln[á cido] -5
-10
-15
-20
Tiempo (min)

Tabla 3. Resultados de la concentración de 10 mg/20 mL de AAS

Tiempo (min) pH Concentración del Ln [AAS]
ácido (mg/mL)
0 5.75 1x10-8 -18.42
-9
15 5.87 5.75x10 -18.97
30 5.97 3.63x10-9 -19.43
45 6.04 2.63x10-9 -19.75
60 6.05 2.51x10-9 -19.80

Gráfica de pH vs Tiempo del AAS en una concentración de 10

mg/20 mL
6.1
6
5.9
5.8
pH

5.7
5.6
5.5
0 10 20 30 40 50 60
Tiempo (min)

Gráfica de ln[AAS] vs Tiempo en una concentración

de 10 mg/20 mL

-17.5
0 10 20 30 40 50 60
-18
Ln[á cido]

-18.5
-19
-19.5
-20
Tiempo (min)

3
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Tabla 4. Resultados de la concentración de 20 mg/20 mL de AAS

Tiempo (min) pH Concentración del Ln [ASS]
ácido (mg/mL)
0 5.75 1x10-8 -18.42
15 5.91 4.79x10-9 -19.16
30 5.97 3.63x10-9 -19.43
45 5.99 3.31x10-9 -19.53
-9
60 6.00 3.16x10 -19.57

Gráfica de pH vs Tiempo del AAS en una concentración de 20

mg/20 mL
6.05
6
5.95
5.9
5.85
pH

5.8
5.75
5.7
5.65
5.6
0 10 20 30 40 50 60
Tiempo (min)

Gráfica de ln[ácido] vs Tiempo del AAS en una concentración

de 20 mg/20 mL

-17.5
0 10 20 30 40 50 60
-18
Ln[á cido]

-18.5
-19
-19.5
-20
Tiempo (min)

Tabla 5. Resultados de la concentración de 30 mg/20 mL de AAS

Tiempo (min) pH Concentración del Ln [AAS]
ácido (mg/mL)
0 5.75 1x10-8 -18.42
15 5.98 3.47x10-9 -19.48
30 6.03 2.75x10-9 -19.71
-9
45 6.06 2.40x10 -19.85
60 6.02 2.88x10-9 -19.66

4
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Gráfica de pH vs Tiempo del AAS en una concentración de 30

mg/20 mL
6.1
6
5.9
5.8

pH
5.7
5.6
5.5
0 10 20 30 40 50 60
Tiempo (min)

Gráfica de ln[AAS] vs Tiempo en una concentración de 30

mg/20 mL

-17.5
0 10 20 30 40 50 60
-18
Ln[á cido]

-18.5
-19
-19.5
-20

Tiempo (min)

Tabla 6. Resultados de la concentración de 40 mg/20 mL de AAS

Tiempo (min) pH Concentración del Ln [AAS]
ácido (mg/mL)
0 5.75 1x10-8 -18.42
15 6.04 2.63x10-9 -19.76
30 6.05 2.51x10-9 -19.80
45 6.04 2.63x10-9 -19.76
60 6.09 2.09x10-9 -19.99

Gráfica de pH vs Tiempo del AAS en una concentración de 40

mg/20 mL
6.2
6.1
6
5.9
pH

5.8
5.7
5.6
5.5
0 10 20 30 40 50 60
Tiempo (min)

5
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Gráfica de ln[AAS] vs Tiempo en una concentración de 40 mg/20

mL

-17.5
0 10 20 30 40 50 60
-18
-18.5
Ln[á cido]
-19
-19.5
-20
-20.5
Tiempo (min)

Tabla 7. Resultados de la concentración de 50 mg/20 mL de AAS

Tiempo (min) pH Concentración del Ln [AAS]
ácido (mg/mL)
0 5.75 1x10-8 -18.42
15 5.98 3.47x10-9 -19.48
-9
30 6.02 2.88x10 -19.66
45 6.03 2.75x10-9 -19.71
60 5.98 3.47x10-9 -19.48

Gráfica de pH vs Tiempo del AAS en una concentración de 50

mg/20 mL
6.1
6
5.9
pH

5.8
5.7
5.6
0 10 20 30 40 50 60
Tiempo (min)

Gráfica de ln[AAS] vs Tiempo en una concentración de 50

mg/20 mL

-17.5
0 10 20 30 40 50 60
-18
Ln[á cido]

-18.5
-19
-19.5
-20
Tiempo (min)

6
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Tabla 8. Resultados de la concentración de 60 mg/20 mL de AAS

Tiempo (min) pH Concentración del Ln [AAS]
ácido (mg/mL)
0 5.75 1x10-8 -18.42
15 6.01 3.02x10-9 -19.62
30 5.91 4.79x10-9 -19.16
45 5.90 5.01x10-9 -19.11
-9
60 5.93 4.36x10 -19.25

Gráfica de pH vs Tiempo del AAS en una concentración de 60

mg/20 mL
6.05
6
5.95
5.9
5.85
pH

5.8
5.75
5.7
5.65
5.6
0 10 20 30 40 50 60
Tiempo (min)

Gráfica de ln[AAS] vs Tiempo en una concentración

de 60 mg/20 mL

-17.5
0 10 20 30 40 50 60
-18
Ln[á cido]

-18.5
-19
-19.5
-20
Tiempo (min)

Tabla 9. Resultados de las concentraciones logarítmicas a las diferentes

concentraciones del AAS.
Tiempo 0 10 20 30 40 50 60
(min) mg/20 mg/20 mg/20 mg/20 mg/20 mg/20 mg/20
mL mL mL mL mL mL mL

0 -18.42 -18.42 -18.42 -18.42 -18.42 -18.42 -18.42

15 -18.42 -18.97 -19.16 -19.48 -19.76 -19.48 -19.62
30 -18.42 -19.43 -19.43 -19.71 -19.8 -19.66 -19.16
45 -18.42 -19.75 -19.53 -19.85 -19.76 -19.71 -19.11
60 -18.42 -19.8 -19.57 -19.66 -19.99 -19.48 -19.25

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Gráfica de ln[AAS] vs Tiempo en las diferentes concentraciones

de AAS
-17.5 Concentración de á cido de 0
0 10 20 30 40 50 60 mg/20 mL
-18 Concentración de á cido de 10
mg/20 mL
Concentración de á cido de 20
-18.5 mg/20 mL
Concentración de á cido de 30
ln[á cido]

-19 mg/20 mL
Concentración de á cido de 40
mg/20 mL
-19.5 Concentración de á cido de 50
mg/20 mL
-20 Concentración de á cido de 60
mg/20 mL

-20.5
Tiempo (min)

Discusión de resultados

Las grá ficas que corresponden a la concentració n de 0 mg de AAS se mantuvo constante

los 60 minutos de reacció n, como era de esperase, ya que no contenía acido acetil
salicílico, por lo que el valor de 5.75 corresponde al pH del agua destilada utilizada para
la prá ctica.

Con los resultados obtenidos y las grá ficas realizadas, se esperaba observar una
disminució n del pH proporcional a la concentració n del fá rmaco y su paso a través de la
membrana, sin embargo, como se puede observar en los grá ficos, los resultados
obtenidos son incorrectos, primeramente los valores de pH a las diferentes
concentraciones tendrían que salir menores al pH del agua destilada, debido a que se
está llevando a cabo una reacció n con un á cido débil, por lo que se esperarían valores
ligeramente menores, contrario a esto, los valores obtenidos fueron mayores, por lo que
las concentraciones logarítmicas obtenidas salieron negativas. Lo má s probable es que
se deba a algunas fallas técnicas durante el desarrollo de la prá ctica, desde el hecho de
haber lavado el intestino delgado con algú n tipo de jabó n, incluso no haber tomado
correctamente los pH a los tiempos indicados o que el agua no fuera destilada o
estuviera contaminada.

Observaciones

El intestino delgado de pollo utilizado para la realizació n de esta prá ctica fue lavado
antes de utilizarse con agua y detergente, esto influyó en la absorció n del fá rmaco en el
mismo, así los valores obtenidos de pH no son los esperados en el caso de utilizarse
ú nicamente agua.

Conclusiones

Con el fin de evaluar los efectos de la concentració n en la velocidad de difusió n del á cido
acetilsalicílico se probaron diversas concentraciones de á cido acetilsalicílico contenidas
en intestino delgado de pollo, sin embargo previo a la prá ctica, el intestino se lavó y en
dicho proceso se utilizó detergente, el cual altero la permeabilidad del intestino,
afectando así los resultados de la prá ctica. Como se observa los pHs van en incremento
conforme transcurre el tiempo, cuando lo esperado era una disminució n de los mismos
por efectos del paso de á cido acetil sálico. De igual forma en cada grá fico, la pendiente de
la grá fica resulta negativa, lo cual nos indica una velocidad de absorció n negativa.

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