SERVICIO NACIONAL DE APRENDIZAJE

CENTRO NACIONAL DE HOTELERÍA, TURISMO Y ALIMENTOS

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN

1. OBJETIVOS

 Establecer los lineamientos para realizar la limpieza y desinfección de las

superficies, materiales y equipos utilizados en el proceso de realización de
ensayos en el laboratorio de microbiología.

2. DEFINICIONES

DESINFECCIÓN: Proceso de inactivación, destrucción o remoción de la carga bacteriana

presente sobre una superficie. La desinfección no implica necesariamente esterilización.

DESINFECTANTE: Agente empleado para llevar a cabo el proceso de desinfección. Para

que un agente desinfectante sea considerado debe tener las siguientes características:

 Actividad antimicrobiana: Debe ser capaz de eliminar los microorganismos. A baja

concentración debe tener un amplio espectro de actividad antimicrobiana.

 Solubilidad: Debe ser soluble en agua u otros solventes, en la proporción

adecuada para su uso.

 Estabilidad: Durante el almacenamiento los cambios en sus propiedades deben

ser mínimos y no deben causar una pérdida una pérdida significativa de su acción
germicida.

 No debe ser tóxico para el hombre ni los animales.

 Homogeneidad: La preparación debe ser uniforme en composición, de manera

que los ingredientes activos estén presentes en cada aplicación.

 Efectivo a temperatura ambiente y que no reacciones con sustancias presentes en

la superficie de aplicación.

DETERGENTE: Sustancias químicas con propiedades limpiadoras. Pueden ser Alcalinos

que remueven suciedad y grasa pesada, en equipos e instalaciones; neutros que
remueven suciedad, grasa y proteínas en general y ácidos que actúan como
desincrustantes de minerales, proteínas coaguladas, residuos de detergente y biocapas.

ESTERILIZACIÓN: Proceso en la cual se elimina completamente toda forma de vida

microbiana.

Página 1 de 6
HIGIENE: La higiene es el conjunto de conocimientos y técnicas que aplican
los individuos para el control de los factores que ejercen o pueden ejercer efectos
nocivos sobre su salud.

LIMPIEZA: La limpieza se define como el proceso de remover, a través de medios

mecánicos y/o físicos, el polvo, la grasa y otros contaminantes de las superficies,
equipos, materiales, personal, etc. Este proceso, junto con un adecuado proceso de
desinfección, es indispensable para controlar la presencia de los microorganismos en el
ambiente.

SANITIZACIÓN: Proceso empleado para reducir el contenido de microorganismos

viables en una superficie limpia.

SANITIZANTE: Agente que reduce la población microbiana hasta niveles insignificantes

o según los requerimiento de salud pública.

SOLUCIÓN: Es una mezcla homogénea a nivel molecular o iónico de dos o más

sustancias, que no reaccionan entre sí.

3. NORMAS DE SEGURIDAD

 Lavarse las manos antes y después de realizar las labores de limpieza.

 Usar bata blanca, guantes, mascarilla, gorro y lentes de protección.
 No comer, beber, fumar, aplicarse maquillaje o cremas en el área de trabajo.
 No almacenar alimentos y bebidas en refrigeradores donde se encuentren los
elementos y productos de limpieza y desinfección.

4. MATERIALES Y EQUIPOS.

 Detergente líquido.
 Detergente en polvo.
 Soluciones desinfectantes (Hipoclorito de Sodio 0,5 %, Ácido Acético 5 %, Alcohol
Etílico 70%).
 Toallas de papel, limpiones.
 Esponjillas de lavado y churruscos para material de vidrio.

5. METODOLOGÍA.

5.1. Limpieza y desinfección de pisos.

 Recoger todos los objetos que obstaculicen la realización adecuada del

procedimiento.
 Remover la suciedad visible de los pisos con la ayuda de una mopa.
Página 2 de 6
  Trapear los pisos de las áreas de trabajo, utilizando un trapero impregnado de
solución de Hipoclorito de Sodio al 0,5 %.
 Enjuagar con suficiente agua y secar con el trapero limpio.
Los traperos y limpiones son sumergidos en una solución de Hipoclorito de Sodio
durante 10 a 20 minutos antes de realizar las labores de aseo.

5.2. Limpieza de mesones y superficies de trabajo.

 Retirar todos los objetos que se encuentren encima de los mesones.

 Lavar con jabón y refregar adecuadamente con una toalla o limpión.
 Secar con un paño húmedo.
 Desinfectar aplicando solución de Hipoclorito de Sodio al 0,5 %.
 Secar con paño húmedo.
Alternar semanalmente entre las siguientes soluciones (Hipoclorito de Sodio 0,5%,
Tego 51 2%, Alcohol Etílico 70%).

5.3. Limpieza de equipos.

5.3.1. Baño Serológico.

 Verificar que el equipo se encuentre apagado y desconectado.

 Desechar el agua contenida. Lavar las paredes y rejillas con una solución
detergente y retirar el residuo con abundante agua.
 Aplicar solución de Alcohol Etílico al 70 %; dejarlo actuar durante 10
minutos.
 Retirar el residuo del desinfectante con agua limpia.
 Dejar secar la superficie antes de poner en uso.

5.3.2. Microscopio.

 Limpiar la superficie del equipo con un paño limpio y seco, para retirar las
partículas visibles.
 Aplicar solución de Alcohol Etílico al 70 %; dejarlo actuar durante 10
minutos.
 Retirar el residuo del desinfectante con agua limpia.
 Dejar secar la superficie antes de poner en uso.
 Poner especial atención antes y después de su uso; utilizando un tejido
suave para la limpieza de los objetivos y los cristales, con el fin de evitar
ralladuras.

5.3.3. Incubadoras.

 Verificar que el equipo esté apagado y desconectado.

 Retirar el material que se encuentra en la incubadora.
 Retirar la suciedad visible limpiando las paredes con un paño limpio y seco.
 Aplicar solución de Tego 51 al 2% o de Alcohol Etílico al 70 %; dejarlo
actuar durante 10 minutos.
Página 3 de 6
  Retirar el residuo del desinfectante con agua limpia.
 Dejar secar la superficie antes de poner en uso.
 Alternar los desinfectantes semanalmente, realizar desinfección de choque
una vez al mes con los desinfectantes mencionados anteriormente.

5.3.4. Balanzas.

 Verificar que el equipo esté desconectado.

 Retirar la suciedad visible, con una paño seco.
 Aplicar solución de Tego 51 al 2% o de Alcohol Etílico al 70 %; dejarlo
actuar durante 10 minutos.
 Retirar finalmente con un paño limpio el remanente de la solución y exceso
de humedad sobre la superficie.
 Dejar secar completamente antes de poner en uso.
 Limpiar antes y después de operar el equipo, utilizando Alcohol Etílico al
70%, con precaución de no ejercer presión sobre el plato.

5.4. Inactivación y lavado de materiales.

Materiales utilizados en la realización de ensayos (Pipetas, puntas de pipeta, cajas

de petri, tubos de ensayos, frascos, etc.):

Trasladar los materiales utilizados en los procedimientos analíticos al área de

lavado luego llevar a cabo las siguientes instrucciones:

 Tomar el material sucio y someterlo por inmersión en una solución de

Hipoclorito de Sodio al 2% durante 30 minutos.
 Frotar los materiales, utensilios, instrumentos y recipientes con una esponjilla
impregnada de solución detergente para eliminar la suciedad.
 Enjuagar cuidadosamente con agua corriente hasta eliminar el residuo de
detergente.
 Enjuagar nuevamente con agua destilada y dejar escurrir sobre una superficie
limpia y seca.
 Tomar los materiales cuando estén completamente secos.

5.5. Materiales de trabajo (Frascos, cucharas, cuchillos, tenedores, pinzas, etc.):

Para analizar muestras de alimentos en el laboratorio de microbiología; los

recipientes y utensilios utilizados deben estar estériles. A continuación se
describen los pasos necesarios para el lavado, esterilización y preparación de los
materiales utilizados en el laboratorio de microbiología:

 Lavar los recipientes y materiales con detergente y agua corriente.

 Enjuagar cuidadosamente con agua corriente hasta eliminar el residuo de
detergente.

Página 4 de 6
  Enjuagar nuevamente con agua destilada y dejar escurrir sobre una superficie
limpia y seca.
 Tomar los recipientes y materiales cuando estén completamente secos.
 Cerrar correctamente los recipientes y colocar papel kraft en la tapa teniendo en
cuenta que el papel cubra la unión recipiente – cuello, con el fin de evitar
contaminación.
 Proteger los materiales y utensilios con papel kraft y llevar al área de
esterilización.
 Esterilizar el material en autoclave durante 15 minutos a 121ºC y 15 PSI.

Nota: Esterilizar los utensilios metálicos como: tenedores, cucharas, cuchillos,

material de porcelana y vidriería; en horno a 170° C durante 90 minutos.

6. ESTERILIZACIÓN

Esterilización por calor húmedo: Luego de proteger los materiales, adherir sobre la
superficie del papel a cada uno de ellos, una porción de cinta indicadora de
esterilidad. Inicialmente la cinta contiene una línea de color blanco o verde (A).
Cambiará a color oscuro (B) cuando el proceso de esterilización ha culminado de
forma adecuada.

Figura N° 1.

A B

Esterilizar el material a 121 ºC, 15 PSI durante 15 minutos.

Esterilización por calor seco: Luego de embalar los materiales, adherir sobre la
superficie del papel a cada uno de ellos, una porción de cinta indicadora de
esterilidad. Inicialmente la cinta contiene una línea de color blanco o verde.
Cambiará a color oscuro cuando el proceso de esterilización ha culminado de
forma adecuada. Esterilizar el material a 170 ºC durante 90 minutos.

Nota: Esterilizar por calor seco, solamente los elementos y materiales metálicos,
porcelana y elementos de vidrio. No introducir materiales plásticos, de caucho,
medios de cultivos o sustancias líquidas en el horno.

Página 5 de 6
7. BIBLIOGRAFÍA

 ISO/IEC 17025:2005 Requisitos generales para la competencia de los

laboratorios de ensayo y calibración.

 Manual de técnicas de análisis microbiológico de alimentos INVIMA 1998.

 ISO 9001:2008 Requisitos de un sistema de gestión de calidad.

Página 6 de 6