Electrofisiolog�a

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"Pinza de corriente" es una t�cnica com�n en electrofisiolog�a. Esta es una

grabaci�n de pinza de corriente (c�lula-completa) de una neurona disparando al ser
despolarizada por inyecci�n de corriente
Electrofisiolog�a (del griego ??e?t???, elektron, "�mbar"; f?s??, physis,
"naturaleza, origen"; y -????a, -log�a) es el estudio de las propiedades el�ctricas
de c�lulas y tejidos biol�gicos. Incluye medidas de cambio de voltaje o corriente
el�ctrica en una variedad amplia de escalas, desde el simple canal i�nico de
prote�nas hasta �rganos completos como el coraz�n. En neurociencias, se incluyen
las medidas de la actividad el�ctrica de neuronas, y particularmente actividad de
potencial de acci�n. Registros a gran escala de se�ales el�ctricas del sistema
nervioso como Electroencefalograf�a, tambi�n se pueden clasificar como registros
electrofisiol�gicos.

�ndice
1 T�cnicas
1.1 T�cnicas electrofisiol�gicas cl�sicas
1.2 T�cnicas �pticas electro fisiol�gicas
2 Registro intracelular
3 Referencias
4 Enlaces externos
T�cnicas
T�cnicas electrofisiol�gicas cl�sicas
La electrofisiolog�a es la ciencia y rama de la fisiolog�a que pertenece al flujo
de iones en tejidos biol�gicos y, en particular, a las t�cnicas de registro
el�ctrico que permiten las mediciones de este flujo. Las t�cnicas de
electrofisiolog�a implican colocar electrodos en varias preparaciones de tejido
biol�gico. Los principales tipos de electrodos son: 1) Conductores s�lidos simples,
como discos y agujas (individuales o arreglos, usualmente aislados exceptuando la
punta), 2) trazos en un tablero con circuitos impresos, tambi�n aislados, y 3)
tubos huecos llenos con un electrolito, como pipetas de vidrio llenas de soluci�n
de cloruro de potasio u otra soluci�n electrol�tica. Las preparaciones principales
incluyen 1) organismos vivos, 2) tejidos extirpados, 3) c�lulas disociadas de
tejido extirpado, 4) tejidos y c�lulas desarrollados artificialmente, o 5) h�bridos
de los anteriores.

Si un electrodo es lo suficientemente peque�o (micr�metros) en di�metro, entonces

el eletro-fisiologo puede insertar la punta en una sola c�lula. Esta configuraci�n
permite la observaci�n directa y registro de la actividad el�ctrica intracelular de
una sola c�lula. Sin embargo, al mismo tiempo este procedimiento tan invasivo
reduce la vida de la c�lula, y causa una fuga de sustancias a trav�s de la membrana
celular. La actividad intracelular tambi�n puede ser observada usando una pipeta de
vidrio formada especialmente (hueca) que contenga un electrolito. En esta t�cnica,
la punta de la pipeta es presionada contra la membrana celular, a la que se adhiere
bien por la interacci�n entre el vidrio y los l�pidos de la membrana. El
electrolito dentro de la pipeta puede quedar en continuidad con el fluido del
citoplasma enviando un pulso de presi�n al electrolito con el fin de romper el
peque�o parche de la membrana rodeado por el borde de la pipeta. Alternativamente,
se puede establecer continuidad i�nica por perforar el parche al permitir un agente
ex�geno �formador de poros� en el electrolito para insertarse en el parche de
membrana. Finalmente, el parche se puede dejar intacto.

El electrofisi�logo puede escoger no insertar la punta dentro de una c�lula. En

cambio, la punta del electrodo puede ser dejada en continuidad con el espacio
extracelular. Si la puntilla es lo suficientemente peque�a, esta configuraci�n
puede permitir observaci�n indirecta y registro de potenciales de acci�n de una
sola c�lula, y es denominado registro de unidad-celular. Dependiendo de la
preparaci�n y ubicaci�n precisa, una configuraci�n extracelular puede recoger la
actividad de varias c�lulas cercanas simult�neamente, y se denomina registro de
multi-unidad

A medida que el tama�o del electrodo aumenta, el poder de resoluci�n disminuye.

Electrodos m�s grandes son solamente sensibles a la actividad neta de muchas
c�lulas, denominado Potencial de Campo Local. Aun electrodos grandes, como las
agujas sin aislamiento y electrodos de superficie son usados por cirujanos y
neurofisiologos cl�nicos, estos electrodos son sensibles solamente a ciertos tipos
de actividad sincr�nica dentro de las poblaciones de c�lulas, enumeradas en
millones. Otras t�cnicas cl�sicas de electrofisiolog�a incluyen Registro de canal
individual y Amperometr�a.

T�cnicas �pticas electro fisiol�gicas

Las t�cnicas electro fisiol�gicas �pticas fueron creadas por cient�ficos e
ingenieros para sobreponerse a una de las principales limitaciones de las t�cnicas
cl�sicas. Las t�cnicas cl�sicas permiten observaci�n de la actividad el�ctrica a
aproximadamente un solo punto de todo el volumen del tejido. Esencialmente, las
t�cnicas cl�sicas singularizar un fen�meno distribuido. El inter�s en la
distribuci�n espacial de la actividad bioel�ctrica exige el desarrollo de mol�culas
capaces de emitir luz en funci�n de su entorno el�ctrica o qu�mica. Un ejemplo de
estos son la tinci�n voltaje-sensitiva y las prote�nas fluorescentes. Despu�s de
introducir uno o m�s de este tipo de compuestos en el tejido por perfusi�n,
inyecci�n o expresi�n g�nica, la distribuci�n unidimensional o bidimensional de la
actividad el�ctrica puede ser observada y registrada.

Muchas lecturas electro fisiol�gicas particulares tienen nombres espec�ficos:

Electrocardiograma- para el coraz�n

Electroencefalograf�a- para el cerebro
Electromiograf�a- para los m�sculos
Electrooculograma- para los ojos
Registro intracelular
Un registro intracelular consiste en medir la tensi�n o la corriente a trav�s de la
membrana de una c�lula. Para realizar un registro intracelular, se debe insertar la
punta de un microelectrodo muy fino dentro de la c�lula, de modo que se pueda medir
el potencial de membrana. Por lo general, el potencial de membrana en reposo de una
c�lula sana estar� entro los -60 y -80 mV, y durante un potencial de acci�n el
potencial de membrana podr�a alcanzar los 40 mV. En 1963, Alan Lloyd Hodgkin y
Andrew Fielding Huxley obtuvieron el Premio Nobel de Fisiolog�a o Medicina por su
contribuci�n a la comprensi�n de los mecanismos subyacentes a la generaci�n de
potenciales de acci�n en las neuronas. Sus experimentos consist�an en registros
intracelulares del ax�n gigante del calamar atl�ntico (Loligo pealei), y estuvieron
entre las primeras aplicaciones de la t�cnica de "fijaci�n de voltaje". Hoy en d�a,
la mayor�a de microelectrodos utilizados para la grabaci�n intracelular son
micropipetas de vidrio, con un di�metro de punta de <1 micra, y una resistencia de
varios MOhm. Las pipetas se llenan con una soluci�n que tiene una composici�n
i�nica similar al l�quido intracelular de la c�lula. Un alambre de plata clorurada
insertado en la pipeta conecta el electrolito el�ctricamente al amplificador y a un
circuito de procesamiento de se�ales.