Biodivers. Amazon:- Año 4 Vol.

4-2014

EXTRACCION Y CARACTERIZACION FISICOQUIMICA DEL ~COLORANTE DEL

HUITO (Gimipa americana) EN EL DISTRITO DE TAMBOPATA
Quispe-Herrera Rosel 1 • Paredes-Valverde Y olanda 1,Solis-Quispe Leoncio 2
1
Universidad Nacional Amazónica de Madre de Dios - roquihe@yahoo.es, yopavel@yahoo.es,
2
Universidad Nacional de San Antonio Abad del Cusco - qsleo@hotmail.com

Resumen

El huito es un árbol que crece en la amazonia del Perú, cuyo fruto es muy utilizado por
los nativos y los pobladores del distrito de Tambopata. Se utiliza el fruto verde como tinte
natural por su coloración negra, tanto para teñirse el cabello de negro, así como para teñir sus
alimentos y materiales textiles. La investigación se realizó en el Distrito de Tambopata de la
Región de Madre. de Dios, en frutos inmaduros colectados durante los meses de agosto y
setiembre del año 2011, entre los Kms 4 y 11 del eje carretero Puerto Maldonado -Comunidad
Nativa de Infierno. Los extractos crudos fueron obtenidos de frutos del Huito previamente
desengrasadas con bencina por percolación con mezclas hidroalcoholicas del 90% y 70%, así
como por solubilidad en agua. Las pruebas empíricas realizadas a los extractos mostraron que el
extracto acuoso es el que contiene los colorantes. El análisis fitoquímico cualitativo del extracto
acuoso muestra presencia de abundante proporción de glucósidos, moderada proporción de
flavonoides y una baja proporción de alcaloides y compuestos fenólicos y taninos. Del estudio
realizado se concluye que el extracto acuoso es el que contiene el colorante, mientras que los
metabolitos secundarios presentes incluyen glucósidos en abundante proporción, flavonoides en
mediana proporción y alcaloides, así como compuestos fenólicos y taninos en baja proporción.
El colorante no presentó forma cristalina y mostró una gran estabilidad frente a la temperatura y
la variación del pH. ·
Palabras clave: Genipa americana, colorantes, metabolitos secundarios, tintes naturales.

Abstract

Huito (Genipa americana) ís a native tree from the Neotropics that grows in the Amazon
region of Peru. The green fruit is widely used by indigenous people and residents of the District
of Tambopata as a natural dye hair black coloring, as well as for coloring food and textiles.This
study was conducted in the District of Tambopata, in the Madre de Dios Region of Peru.
Imrnature fruits were collected in the period August-September 2011, at the km 4-11 of the
road Puerto Maldonado - Infierno. Crude extracts were obtained from the Huito fruits. Samples
were previously degreased with benzene, then percoled with 90% and 70% hydroalcoholic
mixtures and diluted with water . Empirical tests on the extracts showed that the aqueous extract
is the one containing the dyes.
The qualitative analysis of the aqueous extract phytochemical shows abundant presence of
glycosides, a moderate ratio of flavonoids, and a low proportion of alkaloids, phenolics and
tannins. The study concluded that the aqueous extract is the one containing the dye, secondary
metabolites are glycosides in abundant proportion, flavonoids in median proportion and
alkaloids, phenolics and tannins in low proportion. Also, the dye did not present crystalline forro
and showed a great stability to temperature and pH variation.
Keywords: American Genipa, dyes, secondary metabolites

Introducción aprovechamiento a la madera, pueden destacarse

El uso de la vegetación ha sido, y es hasta
ahora el soporte económico y sociocultural más
importante de las comunidades nativas. Se tiene
evidencia que los bosques además de la madera,
proporcionan otros beneficios y productos no
forestales que las comunidades conocen y
utilizan desde tiempos remotos como elemento
indispensable y. tradicional de supervivencia
(Caballero, 1995). Entre los productos del
bosque que se presentan como alternativa de
98
las especies productoras de colorantes, ya que
son utilizadas por diferentes industrias (Klinger
et al, 2002).
El huito es un árbol que crece en la amazonia
del Perú y es muy utilizado por los nativos y los
pobladores del distrito de Tambopata como tinte
natural de coloración negro (Quispe et al 2010).
Desde tiempos ancestrales se ha utilizado el
fruto inmaduro para teñirse el cabello de negro o
pará teñir sus alimentos y materiales textiles,
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mientras que también se le utiliza en la esta especie vegetal en el distrito de Tambopata.

elaboración de refrescos, vinos y jarabes
(Calzada, 1980).
El fruto inmaduro del huito produce un
colorante de color azul oscuro por la oxidación,
el cual es soluble en agua y etanol (Penalber et
al. 1996). Según Nazaret (1998), la fruta
madura se somete a extracción con diversos
disolventes, tales como la extracción con
soluciones de hidróxido de sodio,
proporcionando en primera instancia un extracto
amarillo cristalino, para luego tomarse en un
extracto azul cuyo principal pigmento es un
geniposídeo.
La reacción espontánea de aminas primarias,
incluyendo proteínas con genipina, uno de los
constituyentes de la jenipapo iridoides forma un
pigmento azul que es una mezcla de polímeros
de alto peso molecular. Esta reacción no ocurre
con aminas secundarias y terciarias, siendo el
oxígeno indispensable para la formación del
color azul (Touyama et al, 1994).
Los estudios muestran que la formación de
pigmentos azules implica la formación de
intermedios de color amarillo, que son
precursores de otros productos intermedios de
color marrón-rojo (Touyama et al. 1994a).
Dadas las condiciones en las que
se produce la reaccwn, el
pigmento azul que se forma es
inducido por el oxígeno de los UCAYAU
Los resultados de este estudio contribuirán al
conocmuento de las características y
propiedades de un tinte natural derivado de un
producto forestal no maderable con potenciales
aplicaciones en la industria, lo cual puede
fortalecer la conservación de la biodiversidad
mediante la asignación de valor agregado al
bosque en pie. Esto es de vital importancia en
una región como Madre de Dios en donde las
industrias extractivas y las grandes obras de
infraestructura amenazan la conservación del
bosque húmedotropical.
Metodologia
Recolección
La colección de la muestra fue de 1O árboles
(cinco frutos por árbol) de forma intencionada
de frutos inmaduros aparentemente en buen
estado durante los meses de agosto y setiembre
del año 2011, entre los Kms 4 y 11 del eje
carretero Puerto Maldonado - Comunidad
Nativa de Infierno, Madre de Dios, Perú (Figura
1).
Figura 1. Mapa del área de muestreo en el
distrito de Tambopata, región Madre de Dios-
Perú.

radicales intermedios y
pigmentos deshidrogenados de
polimerización (Touyama et al.
1994b). Se han identificado los
siguientes compuestos en el fruto
del huito: genipina, manitol,
taninos, metil-eteres, cateina,
hidantoina y ácidos tánicos. La
genipina es un monoterpenoide
que produce coloración negra no
solamente con la proteína de la
piel sino con varios aminoácidos (Calzada
1980).
Preparación
En la presente investigación se tuvo como
Los frutos fueron secados y molidos en el
objetivo la extracción y caracterización del
laboratorio de química de la Universidad
colorante del huito (Genipa americana) en el
Nacional Amazónica de Madre de Dios, hasta
distrito de Tambopata. A pesar de que se han
que no quedara residuo en un tamiz de malla N°
realizado estudios en otras regiones amazónicas
40.
sobre la caracterización del colorante de esta
especie, la ubicación geográfica, clima, altitud, Se realizó el desengrasado con bencina cuya
tipo de suelo, entre otros, pueden tener un efecto finalidad fue la de "obtener una muestra libre de
en la composición y cantidad del colorante, se componentes solubles en este solvente apolar,
considera necesaria la evaluación cualitativa de
99
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como grasas y carotenoides que interfieren en el
aislamiento de los colorantes.
La obtención de los extractos crudos de las
muestras, se realizó por percolación con etanol
al 90% y etanol al 70% y finalmente con agua
caliente hasta agotamiento. El extracto acuoso se
obtuvo a partir de la torta, residuo de los
procesos de percolación, sometiendo este
residuo a ebullición por 30 minutos que
finalmente se filtró. Los extractos se evaporaron
a sequedad para su cuantificación (porcentaje de
extracción) y su evaluación correspondiente.
, Análisis fitoquímico
El análisis fitoquímico de los extractos, se
realizó aplicando las reacciones generales de
caracterización para metabolitos secundarios,
como: azúcares reductores, glucósidos,
flavonoides, compuestos fenólicos, quinonas,
alcaloides, lactonas, triterpenos y taninos,
descritas por Domínguez (1973), Lock (1988) y
Gibaja (1977).
La evaluación del pH en el colorante se
realizó en una solución de la muestra a
diferentes niveles de pH (10% HCl, 1, 2, 4, 6, 8,
10, 12, 14, 10% NaOH) utilizando solución de
ácido clorhídrico (HCl) para los pH ácidos e
hidróxido de sodio (NaOH) para los valores
básicos. El efecto de la temperatura se realizó
calentando hasta ebullición una mezcla acuosa,
punto en el cual se mantuvo por 20 min. para su
posterior evaluación.
Para observar la forma de cristalización, se
hizo evaporar 20 ml de colorante en un vaso de
250 ml a temperatura ambiente. La
cromatografia de capa fina, fue utilizada para
determinar la pureza del extracto acuoso, la cual
se realizó en cromatofolios de 2x10 cm
utilizando el sistema de solventes agua (H20) :
metanol (MeOH) en las proporciones 5:1 y 3:2.
Resultados
Se obtuvo un 33.26% del extracto
hidroalcoholico al 90%, 0.82% del extracto
hidroalcoholico del 70% y un 16.43% del
extracto acuoso. El análisis fitoquímico
cualitativo realizado. al extracto acuoso de los
frutos del huito (Genipa americana), muestra que
existe una abundante proporción de glucósidos,
moderada proporción de flavonoides y una baja
proporción de alcaloides, compuestos fenólicos
y taninos (Tabla 1).

Tabla l. Análisis fitoquímico cualitativo de los extractos.

Extracto
Metabolico Prueba
Acuoso Etanol 90%
Azúcares reductores Benedict +++
Glucósidos Hidrólisis + Benedict +++
Shin oda ±
flavonoides uv + +
NH 3 +UV ++ ++

Compuesto fenólicos FeC13 + ±

Leyenda:
Quino nas Bomtrager + --Negativo
±Muy poca
Dragendorff + + proporción
Alcaloides + Baja proporción
M ayer + +
++Moderada
Lacto nas Bajlet · +++ proporción
Triterpenos y esteroides Liebermann-Burchard +++ Abundante
Taninos FeCh + ± proporción

Respecto a la estabilidad del colorante frente a la variación del pH y temperatura se pudo observar
que no muestra una variación importante; al igual que por efecto del HCl y NaOH (Tablas 2 y 3).

lOO
 -. ~ .
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Tabla 2. Resultados de la influencia del pH sobre el extracto acuoso del fruto de huito ( Genipa
americana) r

Valores de pH 1 2 4 6 8 10 12 14

Sin* Sin* Sin* Sin* Sin* Sin*· Sin* Sin*

Características
observadas
azul azul azul azul azul azul azul azul
*Solución

Tabla 3. Resultados de la influencia de la temperatura sobre el extracto acuoso del fruto de huito
( Genipa americana)

Temperatura ec) 10 20 40 60 80 90

Características
Sin* Sin* Sin* Sin* Sin* Sin*
observadas
azul azul azul azul azul azul
*Solución

Discusión proporción de flavonoides y una baja proporción

De la obtención de los extractos
Para la obtención de los colorantes, primero se
desengrasó las muestras con bencina con el
objeto de quitar los lípidos y carotenoides que
interfieren en el aislamiento, comprobándose el
método propuesto por González (2004).
Asimismo, se comprobó el método descrito por
Cano (1994) para percolar las muestras con
etanol del 90% 70%, así como con agua para la
obtención de los extractos y la utilización de
solventes para disolver glicósidos o agliconas
hidroxiladas u oxigenadas (Cano, 1994).
En cada una de las etapas de extracción se han
realizado pruebas empíricas .y de observación
directa según lo reportado por Calzada (1980),
Brack (1999), González y Rodríguez (2004),
confirmándose que el tinte es de color azul
oscuro y pinta la madera o papel del mismo.
color, y que el extracto acuoso es el que presenta
estas características.
De la evaluación fitoguimica
Los resultados del análisis fitoquímico reportado
en nuestro estudio demuestran que existe una
abundante proporción de glucósidos, moderada
101
de alcaloides, compuestos fenólicos y taÍünos.
Realizada la cromatografía en capa fina se
detectó hasta tres manchas de regular intensidad
con lo que se confirma que el colorante es una
mezcla de componentes, además por la
observación hecha a la luz UV, se confirma la
presencia de flavonoides por la fluorescencia.
Los compuestos fenólicos abarcan un gran
número de sustancias que poseen un anillo
aromático unido a uno o más sustituyentes
hidroxilo (Novelli,l953). Los compuestos
fenólicos son solubles en agua porque la
mayoría de las veces se encuentran a azúcares
formando glicósidos, y normalmente se
localizan en las vacuolas. Entre los compuestos
fenólicos naturales se encuentran los
flavonoides, los fenoles monociclicos, los
fenilpropanoides, las quinonas fenólicas y las
cumarinas. Las sustancias poliméricas de las
plantas como los lignanos y taninos son
polifenólicos · y ocasionalmente también se
encuentran unidades feilólícas··en las proteínas,
alcaloides y los terpenoides. Además, Novelli
(19§3) clasifica a los' colorantes naturales en
Flavonoides, antecedentes que nos hace inferir
que los colorantes presentes en los frutos de
huito (Génipa americana) se tratarían de
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compuestos fenólicos y dentro de estos a un tipo
de flavonoides, taninos o quinonas.
Asimismo, de los resultados reportados se
infiere que el colorante contenido en el extracto
acuoso, presenta una alta estabilidad
posiblemente debido a la presencia de un anillo
aromático en su estructura. No se observó
cristales debido a que el extracto o colorante es
una . mezcla de compuestos y los cristales
generalmente se forman en compuestos puros e
ionicos (Penalber et al. 1996).
Conclusiones
Del estudio realizado se concluye que:
l. El extracto acuoso es el que contiene el
colorante.
2. Los metabolitos secundarios presentes son:
glucósidos en una abundante proporción,
flavonoides y alcaloides en mediana proporción,
compuestos fenólicos y taninos en baja
proporción ..
3. El colorante tiene una gran estabilidad
frente a la temperatura y la variación del pH, no
presenta forma cristalina y es una mezcla de por
lo menos tres componentes.
Agradecimiento
A las siguientes personas por su apoyo
durante el trabajo de campo y la fase de
laboratorio: Tomaylla Cruz Ciro, Choquegonza
Sonco Yakeli Damiana, Cahuana Mamani Percy,
Belizario Ferrel José Carlos, Cahuana Mamani
Delia.
Literatura Citada
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