Procedimiento de la practica

A) Preparación de medios de cultivo

1. Realizamos los cálculos correspondientes, para pesar los gramos que se
requieren de acuerdo a la cantidad de mililitros requeridos, teniendo presente
la proporción para 1 litro que esta en la etiqueta.

1000 ml -------- 36g

100ml -------- X

100ml ×36g
X= 1000 ml
= 3, 6g

2. Se peso los 3,6gr

3. Colocamos en un balón de vidrio los 33,6g de medio y adicionamos 100 ml

de agua destilada

4. Calentamos hasta obtener una

 emulsión transparente, agitándola constantemente para impedir que el medio
se pegue en el fondo del recipiente.
5. Llevamos al autoclave 121°C durante 15 minutos
B) Valoracion de la calidad de los medios de cultivo.
1. Evaluacion mediante pruebas semicuantitativas de productividad y
selectividad: Medios de cultivo solidos solidos slectivos (Metodo ecometrico):

- Dividimos las cajas de un espesor de 4 mm seca en cuatro cuadrantes y

marcar de forma conveniente
- Empleamos los cultivos E. coli y salmonella
- Tomamos con un asa y trazamos sobre las superficies del medio 5 estrias
paralelas en cada cuadrante y una central
- Incubamos por 48 horas
C) Medios de cultivo liquidos selectivos
a) Productividad
- Seleccionamos tubos con 10 ml de caldo
- Inoculamos cultivo deseado en fase estacionaria en cantidades 10 UFC a
100 UFC y cultivos de microorganismos no deseados
- Incubar a tempertura y tiempo requerido por el medio y por la cepa
deseada
- Terminado el tiempo de incubación removimos 10 microlitos del medio de
cultivo mixto y sembramos en caja de agar del medio selectivo especifico
para microorganismos deseados
- Incubamos a temperatura y tiempo requerido para el medio cultivo y la
cepa deseada
b) Selectividad
- Seleccionamos tubos con 10 ml de caldo
- Inoculamos cultivo deseado en fase estacionaria en cantidades 10 UFC a
100 UFC y cultivos de microorganismos no deseados
- Incubar a tempertura y tiempo requerido por el medio y por la cepa
deseada
- Terminado el tiempo de incubación removimos 10 microlitos del medio de
cultivo mixto y sembramos en caja de agar del medio selectivo especifico
para microorganismos deseados
- Incubamos a temperatura y tiempo requerido para el medio cultivo y la
cepa deseada
D) Evaluacion de procedimiento de desinfección de manos (medida aseptica
básica)
1. Tomamos un hisopo esteril y lo humedecemos en un tuve de 9 ml de clado
nutritivo
- Realizamos un frotis en la palma de la mano y entre los dedos de un
compañero (sin lavarse las manos)
- Depositamos en el mismo tubo el hisopo rotulamos y llevamos a incubación
a 37°C por 24 horas.
2. Tomamos un hisopo esteril y lo humedecemos en un tuve de 9 ml de clado
nutritivo
- Realizamos un frotis en la palma de la mano y entre los dedos de un
compañero pero luego del lado y desinfección de manos
- Depositamos en el mismo tubo el hisopo rotulamos y llevamos a incubación
a 37°C por 24 horas.