Capítulo 20

Anatomía de las plantas en la

investigación etnobotánica:
micrográfic Tecnicas y Aplicaciones
Soledad Molares y Ana H. Ladio

Resumen
En este capítulo encontrará una
discusión general sobre la importancia
de la anatomía de las plantas en
etnobotánica.
investigación: su alcance y
limitaciones. Se han dado algunos
ejemplos detallados de la utilidad de la
metodología micrográfica para aclarar
dudas sobre el uso de plantas en
diferentes contextos culturales y
temporales.
y en diferentes categorías de uso.
Finalmente, las técnicas de anatomía
vegetal aplicada más comúnmente
utilizadas serán
descrito.

Introducción
Etnobotánica, una ciencia alimentada
por contribuciones de varios
diferentes disciplinas y métodos,
implica la recopilación y análisis de
datos relacionados con las
interrelaciones entre plantas y seres
humanos. La micrografía vegetal en
particular es una de las disciplinas.
áreas de considerable importancia en
los estudios etnobotánicos.
Reúne una serie de técnicas de
laboratorio que, por medios de
observación microscópica, facilitan el
hallazgo y Descripción de elementos y
estructuras que caracterizan las
muestras de plantas. Usando este
método, junto con las pruebas
histoquímicas, un gran variedad de
componentes del metabolismo
primario y secundario de Las plantas
también pueden ser detectadas.
La detección de estas sustancias y
estructuras es importante.
porque contienen elementos de alto
valor para las poblaciones humanas
en términos de utilidad y simbolismo,
y que se han tomado ventaja desde
tiempos antiguos para diferentes usos.
A través de ambos procesos de
aprendizaje individual y social a lo
largo de muchas generaciones, los
humanos han explorado, directa o
indirectamente, los recursos vegetales
en su entorno natural La búsqueda de
nutrientes esenciales (carbohidratos,
proteínas, lípidos, vitaminas, etc.),
metabolitos con efectos medicinales
efectivos (p. ej., aceites esenciales,
alcaloides, taninos) y fibras vegetales
para el trabajo de artesanías y tintes
(taninos,clorofila,etc.),entre otros
componentes de la planta, por lo tanto,
constituiría una estrategia evolutiva
compleja influenciada tanto por
factores socioculturales y ecológicos
como por los botánicos y anatómicos,
y habría resuelto problemas en la vida
cotidiana de las personas vidas y así
mejoraron su calidad de vida [1, 2].
La información obtenida del estudio
micrográfico puede ser de
considerable relevancia para el trabajo
de diagnóstico, como el taxonómico
identificación de especies y complejos
de plantas (mezclas de dos o más
especies que comparten el mismo
nombre común y / o cualidades
organolépticas) cuando esto no se
puede determinar botánicamente con
Técnicas macroscópicas
convencionales.
Desde el punto de vista de la botánica
económica, encontrar y caracterizar
estructuras en los órganos donde se
encuentran los fitoquímicos que nos
interesan nos permitiría determinar el
mejor método.
para su extracción, evitando la
inclusión de material no deseado
y reduciendo así el tiempo y el costo de
producción [3].
En este punto la viabilidad de aplicar
micrografía básica
Se deben resaltar las técnicas de los
estudios etnobotánicos.
Aunque se requieren ciertos
materiales y equipos, así como
dedicación y capacitación en su uso, la
micrografía puede ser valiosa
en la resolución de ciertas hipótesis y
preguntas que surgen en
el campo y el laboratorio, mientras que
al mismo tiempo proporcionan un
mayor y una mirada más integrada al
ser humano y su entorno.
A continuación, encontrará una breve
descripción de algunos usos de la
micrografía en la etnobotánica
cotidiana, junto con los más generales
y Técnicas micrográficas específicas
para el estudio de etnobotánica.
material.

Materiales y métodos
2.1 Metodología para la observación
de tejidos en Longitudinal y Secciones
Transversales
2.1.1 La selección y fijación de órganos
Se deben seleccionar muestras de
órganos de plantas cuyo desarrollo sea
representativo de la especie, es decir,
de tamaño medio, sano, de color
característico, etc.
El material vegetal recolectado que no
sea para uso inmediato puede
conservarse en alcohol etílico al 70%.
Aunque es importante tenga en cuenta
que el etanol tiende a deshidratarse y
reducir el tejido, esto se puede
controlar agregando una pequeña
cantidad de glacial ácido acético
(aproximadamente el 5% del volumen
total). Porcentajes del etanol por
encima del 75% hace que el tejido sea
gomoso, y se vuelve difícil
cortar.
Otra opción para la fijación es el fijador
FAA (formaldehído 10%: alcohol 50%:
ácido acético 5%: agua 35%). Las
ventajas de Esto incluye la penetración
rápida y completa del tejido por el
formaldehído, la posibilidad de un
almacenamiento más prolongado del
material.
y un equilibrio en la contracción-
expansión producida por el alcohol y el
ácido acético. Las desventajas incluyen
la toxicidad del formaldehído [36, 37].

2.1.2 Secciones

El material fresco se corta

directamente, mientras que se
conserva en 70% de etilo.
el alcohol se lava en agua varias veces
antes de cortarlo. En el
En el caso de muestras secas, el
material debe hidratarse en agua
caliente.
para que sea más fácil de cortar, y
cuando es muy duro y leñoso, debe
hervirse durante unos minutos o hasta
algunas horas, hasta que esté suave.
Dependiendo de la consistencia del
material, las secciones pueden ser
corte a mano alzada con una cuchilla
de afeitar, o con un microtomo
deslizante o de congelación. El tallo y
la raíz se pueden cortar sin el soporte
necesario para cortar hojas y pecíolos.
Para estos sugerimos colocar el
material entre dos semicilindros de
poliestireno o de alta densidad
Espuma de poliestireno, luego
cortarlos juntos. El material cortado es
recogido con un cepillo y se conserva
en agua para evitar que se seque y
dañar. Es muy importante que la
herramienta de corte tenga un filo
suficiente cuchilla, de lo contrario se
puede ejercer una presión excesiva
sobre el segmento, o se puede generar
un movimiento de sierra, que
deformarlo o aplastarlo. Después de
esto, el más delgado y más uniforme.
Las secciones se seleccionan con una
lupa. Estos siempre deberían
mantenerse en agua hasta que se
manchen.

2.1.3 Clarificación y Directo, rápido y

simple Tinción para el Observación de
planta Estructura.

Las secciones se colocan en un vaso

de precipitados con hipoclorito de
sodio al 50%.
para aclarar Cuando se pongan
blancas, lávelas bien varias veces.
veces con agua. Póngalos en 50º de
etanol, luego 70º de etanol. Recoger
las secciones con un pincel y
transfiérelas a un reloj de vidrio o
vaso de precipitados con safranina
diluida en alcohol al 80% y dejarlos
durante 2 a 5 min, o el tiempo
necesario para que tomen el color.
Lavar con agua.

2.1.4 Montaje

Las preparaciones temporales (para

ser observadas inmediatamente)
pueden ser montado en agua-
glicerina 50:50%. Ponga una o más
gotas de este líquido en una
diapositiva y con un pincel recoja la
sección seleccionada y colóquelo en
la diapositiva, luego cúbralo con el
cubreobjetos. Los medios de montaje
permanentes incluyen bálsamo de
Canadá y sintético resinas [36].

2.1.5 Observación con Microscopio

óptico.

Las observaciones y descripciones del

material manchado deben
hacerse, así como mediciones de las
estructuras de diagnóstico.
Las paredes lignificadas y la cutícula
se verán en un rosa intenso.
color y las células del parénquima un
color rosa suave
2.1.6 Etiquetado
Si se va a preservar la muestra, se
coloca una etiqueta en un lado de
la diapositiva, con el nombre de la
especie, la técnica aplicada, y
La fecha de preparación.

2.2 Metodología para la

identificación de Contenido de la
celda [36]

Cómo se pronuncia

Para la detección de los principales

contenidos celulares y componentes
de
la pared celular, la sección no tratada
se coloca en el portaobjetos y
Según la prueba a realizar, una o más
gotas son
añadido de:
1. Sudán III en etanol a 90º para
detectar lípidos y aceites esenciales.
Una reacción positiva da un fuerte
color naranja.
2. Reactivo de Lugol para detectar
almidón. El almidón tomará una
color azul intenso
3. 1% de floroglucinol en 96º etanol-
HCL para detectar lignina.
La lignina manchará un color rojo
violeta.
4. 5% de tricloruro férrico para
identificar los taninos. Una reacción
positiva
da un color azul verdoso.
 5. Ácido sulfúrico concentrado para
saponinas. Si la muestra de tejido
contiene saponinas, primero tomará
un color amarillo, que
cambia a rojo después de 30 minutos
y finalmente, se volverá violeta o
azul verde.
6. Una solución al 1% de ácido pícrico
para aleuronas. Los aleurones
mancha amarilla
7. Acetato cúprico para oxalato de
calcio. Si hay oxalato de calcio
cristales presentes, se disolverán y el
ácido oxálico se extenderá
a lo largo de los espacios
intercelulares, donde formarán
cristales de oxalato cúprico.
2.3 Metodología para
la observación de Muestras en polvo
El polvo se toma en la punta de una
espátula y se coloca entre
deslice y cubreobjetos con una o dos
gotas de agua. En lugar de agua,
se puede usar agua-glicerina al
50:50%, lo que mantendrá la sección
hidratado por más tiempo [38].
En este caso, las técnicas
histoquímicas descritas
anteriormente
Para la detección de células y
componentes de la pared celular se
pueden utilizar.

2.4 Metodología para el estudio de la

Epidermis.
Importantes características de
diagnóstico se encuentran en la
epidermis [39].
Las técnicas para la observación de la
superficie de este tejido son variadas,
el
más simple que consiste en separar la
epidermis del resto de
El órgano con pinzas. Como en
muchos casos esto es particularmente
complicado, también se emplean otras
técnicas, basadas en cortar un
sección del material vegetal y
haciendo transparente el mesófilo,
o diáfano
Dos de las técnicas más utilizadas
para la diafanización son:
 2.4.1 El Diseño de Técnica de
Strittmater

Hervir el material en etanol a 96º

durante 10 minutos, luego
colocarlo en una solución de
partes iguales de etanol a 96º e
hidróxido de sodio al 5%, y hervir
por 5 min. Enjuague con agua
varias veces. A continuación,
coloque el material en una
solución de hipoclorito de sodio al
50% y déjelo allí. hasta que se
vuelva transparente. Enjuagar
con agua. Coloque piezas de la
material en una solución
preparada con 5 g de hidrato de
cloral en 20 ml de agua para que
pierda su opacidad. Finalmente,
enjuague con agua y manche con
safranina diluida, montar en
agua-glicerina 50: 50% y
observar.

2.42 Determinación de
parámetros cuantitativos
En hojas

Aclarar piezas del material en

hipoclorito de sodio al 50%,
enjuagar
agua y observar sin tratamiento
adicional. La diafanización

del material permitirá la

determinación de parámetros
cuantitativos
Eters en hojas, como el índice de
empalizada, el índice estomático y

índice venoso-islote. Estos índices

a menudo se usan en la
comparación de

especies similares pertenecientes

al mismo género, ecotipos y especi
mens en un estado fragmentado
[41]. Se usan las siguientes
fórmulas

para su cálculo:
- Índice de empalizada: el número
de células de parénquima
empalizada cubiertas
por una sola célula epidérmica.
PI no de empalizada parénquima =.
/ 4 células ma células epidérmicas
- El índice estomático: el número
de estomas por 100 epidérmicos.

células medidas en un área de 1

mm 2, marcadas con un microm-
Lente Eter.

2.6 Metodología para

el análisis de almidón
Granos

Una técnica utilizada para la

identificación de harina de
cereales (trigo, arroz,
maíz, etc.) frutas y órganos de
almacenamiento subterráneo
(raíces, tubérculos,
bombillas, etc.) [31, 43].
Vale la pena señalar que los granos
de almidón pueden ser de dos
tipos:
transitoria o de almacenamiento.
Los primeros se producen en hojas
verdes y
tallos y se usa rápidamente en el
catabolismo de las plantas. Estos
últimos se encuentran
completamente desarrollado y
cumple la función de
almacenamiento a largo plazo.
Los granos de almidón de
almacenamiento son, por lo tanto,
los más confiables como
diagnóstico
características [44].
Los órganos de almacenamiento se
raspan con una cuchilla de afeitar
o bisturí.
Con el material así obtenido, las
preparaciones semipermanentes
son
ensamblado en agua-glicerina, que
permite la rotación de los granos.
Se pueden teñir con Lugol para
una coloración diferencial.
Las observaciones se realizan con
un microscopio óptico como
máximo.
Magnificación, tanto con luz
normal como con luz polarizada.
Las muestras se tratan como se
especifica en el ítem “muestras en
polvo
forma "(sección 2.3).
 3 Observaciones finales
Otras técnicas micrográficas no
consideradas en este capítulo pueden
También se utilizará en el estudio de
material etnobotánico. Por ejemplo,
los microscopios electrónicos de
barrido ambiental son útiles en
situaciones
donde la definición taxonómica es
difícil, para el análisis de adaptaciones
y formas particulares, etc. Cabe
señalar, sin embargo, que su uso
requiere equipo sofisticado y los
costos son altos.
La micrografía óptica, por otro lado,
es rápida y de bajo costo.
método, relativamente fácil de llevar a
cabo, que permite la proporción
de un componente en una mezcla a
afirmar (una situación común
cuando se estudian usos medicinales
de plantas), el origen del material
ser identificado, etc.
Sin embargo, un problema
frecuentemente enfrentado por un
etnobotánico
al intentar identificar un espécimen
moderno y fragmentado utilizando el

método micrográfico, es una falta de

catálogos de referencia con ana-
descripciones tomicales. Debido a esta
situación en muchas partes del

mundo, es necesario promover y

desarrollar claves de micrografía
características que harán posible la
identificación de especies
incluso cuando las muestras están
incompletas o en mal estado. Tambien
es
necesario para desarrollar recursos
humanos en este campo y alentar
trabajo interdisciplinario entre
botánicos que son anatomía vegetal
expertos