LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR ELABORADO POR DOCENTE: KARINA PONCE

GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

Título de la práctica: Identificación microscópica de levaduras (células eucariotas) y su reproducción

(gemación) desde una solución de levadura y azúcar.

Número: 3-7-7.

Objetivos (educativos derivados de la planificación del sílabo):

 Evaluar apropiadamente y en forma grupal, la información investigada acerca de las levaduras.
 Definir con criterio los pasos necesarios para realizar el experimento en forma individual y grupal.
 Realizar correctamente un montaje y fijación de muestras de levaduras, respetando normas de
bioseguridad.
 Emplear adecuadamente el colorante azul de metileno, para realizar una tinción simple de muestras de
levadura, respetando normas de bioseguridad y el medio ambiente.
 Utilizar correctamente materiales de laboratorio, respetando normas de bioseguridad.
 Adquirir destrezas en la manipulación del microscopio óptico de campo claro, siguiendo normas
universales.
 Identificar estructuras de levaduras microscópicamente en base a bibliografía confiable.
 Discutir con criterio sobre la reproducción de levaduras por gemación en base a fundamento científico.
 Analizar los efectos de las levaduras mezcladas con azúcar, en base a fundamento bibliográfico.
 Interpretar apropiadamente, la relación entre fermentación a partir de levaduras y preservación de
alimentos.
 Compartir los resultados obtenidos entre los compañeros de la clase y los demás paralelos.
 Mantener correctamente el cuaderno de laboratorio con investigación científica actualizada de la práctica y
sus resultados.
 Realizar apropiadamente registros fotográficos y/o videos de resultados en red social para la asignatura,
cuaderno de laboratorio y aula virtual.
 Redactar correctamente un informe con uso de método científico en base a la práctica de laboratorio.

Muestras: Solución con presencia de levaduras.

Equipos: Microscopios (lentes objetivos 4, 10, 40 y 100x)

Materiales de protección personal: Mandil, guantes.

Reactivos: Azul de metileno, azúcar, aceite de inmersión, alcohol potable 96%, alcohol antiséptico, agua
destilada.

Materiales e insumos: Placas portaobjetos, cubre objetos, Erlenmeyers 250 mL, pipetas desechables,
mecheros de alcohol, vaso de precipitación 500 mL, picetas para agua destilada, bandeja de tinción, papel
especial para limpieza de microscopios, algodón, guantes, papel toalla, globo, cinta adhesiva masking o
scotch.

Organismos: Levaduras.

Procedimiento:
Preparación de muestra con levaduras
1. Disolver levadura de pan en un Erlenmeyer (o botella plástica) con agua (si es posible tibia), añadir azúcar
y tapar con un globo, cerrar bien con cinta masking o scotch. Este paso lo podrían hacer antes de empezar la
clase o la noche anterior.
2. Esperar al menos media hora.

Preparación de montaje de muestra para observación de gemación

3. Con la ayuda de una pipeta desechable, verter una gota de solución en una placa portaobjetos y cubrir con
una placa cubreobjetos.

Preparación de frotis y tinción con azul de metileno u otro colorante simple

4. Verter una gota de solución en otra placa portaobjetos, fijar al calor con mechero, llevar la placa a la
bandeja de tinción y teñir por 30 segundos con azul de metileno (Procedimiento para un solo estudiante por
grupo).

PERÍODO ACADÉMICO: OCTUBRE 2015 – FEBRERO 2016 LEVADURAS

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5. Eliminar el exceso de colorante sobre la bandeja de tinción, con la ayuda de una piceta o pipeta desechable
y secar a la llama del mechero.

Observación de placas al microscopio

6. Observar las placas al microscopio óptico de campo claro con los objetivos 4, 10, 40 y 100x e identificar
levaduras (estructuras y reproducción).

Resultados primarios: Identificación microscópica de levaduras.

Cálculos matemáticos y estadísticos: Ninguno.

Reporte de resultados: Gráfico o foto con identificación microscópica, especificando el lente objetivo del
microscopio.

Cuestionario: ¿Qué tamaño tienen las levaduras?, ¿Cuáles son las características morfológicas de las
levaduras?, ¿Cómo se reproducen las levaduras?, ¿Qué es el tubo germinal en las levaduras?, ¿Es posible
observar la reproducción de las levaduras al microscopio?, ¿Cuál es la importancia de las levaduras en la
industria?, ¿Cuál es el efecto del azúcar sobre las levaduras?, ¿Qué relación existe entre azúcar y
fermentación?, ¿Por qué la fermentación es una forma de preservar alimentos?, ¿Cómo se logra obtener
cerveza y otros productos fermentados con levaduras?.

Referencias:
 Brown, A. 2001. Benson´s Microbiological applications. Laboratory Manual in general microbiology.
Editorial interamericana Mc. Graw Hill. Eighth edition. U. S. A.
 Madigan, M., Martinko, J., Parker. 2004. Brock Biología de los microorganismos. Pearson Prentice Hall.
Décima edición, España.
 Salomon, E. P., Berg, L., Martin, D., 2008. Biología de Villée. Editorial interamericana Mc. Graw Hill.
Octava edición. España.
 Tortora, G., Funke, B., Case, Ch. 2013. Microbiology. An introduction. Pearson. Eleventh edition. U. S. A.
 Willey, J., Sherwood, L., Woolverton, C. 2008. Microbiología de Prescott, Harley y Klein. Mc. Graw Hill,
Séptima edición. España.

PERÍODO ACADÉMICO: OCTUBRE 2015 – FEBRERO 2016 LEVADURAS