MEJORA DE LA EFICIENCIA DEL USO DE FÓSFORO EN LA

AGRICULTURA: OPORTUNIDADES PARA LA REPRODUCCIÓN

Resumen
El fósforo (P) es a menudo un factor limitante importante para los rendimientos
de los cultivos, pero la roca fosfórica como fertilizante es un recurso no
renovable y se espera que sea escaso en el futuro. Los altos niveles de entrada
de P en la agricultura han dado lugar a problemas ambientales. Una de las
formas de abordar estos problemas simultáneamente es mejorar la eficiencia
del uso de fósforo (PUE) de los cultivos a través de la reproducción. En esta
revisión, describimos los rasgos arquitectónicos y fisiológicos de las plantas
importantes para PUE. Posteriormente, discutimos métodos eficientes de
detección de rasgos PUE. Abordamos los métodos de cultivo específicos,
incluidos los sistemas sólidos e hidropónicos, así como los métodos de prueba,
como los sistemas de análisis de imágenes y las mediciones de biomasa y
fotosíntesis. La variación genética para los rasgos PUE se ha evaluado en
muchos cultivos, y la genética de PUE se ha estudiado mediante análisis de
loci de rasgos cuantitativos (QTLs) y estudio de asociación de todo el genoma.
Se han caracterizado una serie de genes implicados en la respuesta de la
planta del bajo contenido de P. Estos genes incluyen factores de transcripción y
genes involucrados en la transducción de señales, vías hormonales,
señalización de azúcar, vías metabólicas que ahorran P y en la eliminación de
P, incluidos transportadores y metabolitos y/o ATP-ases que movilizan P en el
suelo. Además, se discute el papel de los microorganismos que promueven el
PUE de las plantas, particularmente los hongos micorrízicos arbusculares. Se
ofrece una visión general de los métodos para seleccionar combinaciones
óptimas de genotipos de plantas y hongos, y su genética, incluyendo QTLs y
genes involucrados. En conclusión, se ha logrado un progreso significativo en
la selección de rasgos para PUE, desarrollando sistemas para el fenotipado de
raíz difícil pero altamente relevante, y en la identificación de QTL y genes
involucrados.
Introducción
El fósforo es un nutriente esencial para el crecimiento de las plantas, pero la
absorción del suelo puede ser difícil y un factor limitante e importante para
lograr rendimientos óptimos en la agricultura (Smit et al. 2009). Incluso cuando
está presente en el suelo en mayores cantidades, la disponibilidad de fósforo
para las plantas a menudo sigue siendo un problema debido a la capacidad de
fijación de fosfato de varios tipos de suelo (Syers et al. 2008). Alrededor del
30% del suelo en todo el mundo muestra una alta capacidad de fijación de
fosfato, por ejemplo, en el sur de China, Brasil y África subsahariana (Kochian
2012).
La limitación del fósforo generalmente se supera mediante la aplicación de
fertilizantes que contienen Pi, pero dicho fósforo proviene básicamente de un
recurso no renovable (Vaccari 2009). La principal fuente de fertilizante de Pi es
el Pi de roca, que se puede extraer en solo unos pocos lugares del mundo. Un
solo país, Marruecos, posee el 85% de las reservas restantes conocidas.
Aunque es probable que las cantidades estimadas no se agoten en el corto
plazo, la roca del Pi se volverá escaso, al menos en términos de precios debido
al aumento de la demanda. De manera análoga a los desarrollos en otro
recurso no renovable, el petróleo, los investigadores han indicado "el apogeo
del fósforo", que se espera ocurra tan pronto como alrededor de 2030 (Cordell
et al. 2009), pero otros estudios extienden el agotamiento de P previsto a 2100
o dos. a tres siglos más allá (Sattari et al.2012). La escasez futura esperada ya
se refleja en que Estados Unidos y China han dejado de exportar por razones
estratégicas. Actualmente, China es el mayor productor de P con el 37,5% de la
producción mundial en 2010 (Sattari et al.2014). El Centro de Estudios
Estratégicos de La Haya señaló recientemente que la UE es particularmente
vulnerable a la disponibilidad del mercado de la roca de Pi, ya que depende
casi por completo de las importaciones del resto del mundo (De Ridder et
al.2012). Además, la calidad de la roca de Pi es variable. Por ejemplo, la roca
de Pi puede contener metales pesados como el cadmio que pueden
acumularse en suelos cultivables como resultado de la adición de esta roca.
Por otro lado, en la agricultura intensiva actual, el uso abundante de Pi,
derivado en parte de los excedentes locales de estiércol de la producción
ganadera intensiva, presenta un problema ambiental importante. Ha provocado
emisiones de fosfato a las aguas superficiales, incluyendo los mares y los
océanos, lo que resulta en floraciones de algas nocivas (Ashley et al. 2011).
Este problema se ha abordado con cierto éxito, pero, por ejemplo, en los
Países Bajos, todavía la mitad de los sitios monitoreados muestran valores que
no están en línea con los estándares recientes de la UE. Además, al reducir el
suministro de Pi, pronto se pueden alcanzar niveles en los que Pi puede volver
a limitar los rendimientos en algunos cultivos (Russchen et al. 2012).
Existen varias estrategias para abordar la necesidad de restringir el uso de Pi y
evitar el agotamiento de Pi en el futuro al mismo tiempo. Pi podría reciclarse de
varias fuentes, por ejemplo, aguas residuales y estiércol. El Pi también podría
aplicarse de manera más eficiente mediante la fertilización de precisión, por
ejemplo, utilizando cantidades de Pi basadas en los parámetros del suelo para
la disponibilidad de fosfato a las plantas o la aplicación en fila de Pi en períodos
de tiempo óptimos, adaptados a los requisitos de las plantas. Las estimaciones
actuales indican que las plantas usan solo el 10-25% del Pi aplicado ( Syers et
al. 2008), lo que indica que hay margen de mejora. Otro enfoque es mejorar la
eficiencia del uso de fósforo (PUE) de los cultivos por medios genéticos, es
decir, mediante el fitomejoramiento. Basado en su modelo de suelo P, Sattari et
al. (2012) indican que en muchas partes del mundo el P residual del suelo de la
fertilización intensiva en el pasado contribuirá significativamente a la
producción de cultivos durante un período considerable de tiempo. Una mayor
capacidad de la planta para usar ese P residual de manera eficiente será útil en
eso.
En esta revisión, se exploran las posibilidades de reproducción para PUE.
Primero, se dará una cuenta de los rasgos de las plantas relevantes para PUE
que podrían ser susceptibles de selección, la mayoría de los cuales se pueden
encontrar en la arquitectura y fisiología de las plantas. A continuación, se
discutirá la disponibilidad y el desarrollo de herramientas y estrategias de
mejoramiento: (1) técnicas eficientes de detección/fenotipado para la selección
de PUE en plantas, (2) la genética de PUE, por ejemplo, la identificación de
QTLs y genes involucrados, y la posibilidad de aplicar la selección por
marcadores y los métodos biotecnológicos, (3) el uso de micorriza, cuyo
principal activo se cree que es poner el fósforo a disposición de las plantas a
cambio de compuestos de carbono para su propio crecimiento.
Rasgos importantes para el PUE para la reproducción
El fósforo es un componente importante de las plantas, particularmente en los
portadores de energía, los ácidos nucleicos y las proteínas de la vía de
señalización (como las proteínas quinasas). El fósforo es importante para el
proceso de fijación de nitrógeno que demanda energía en cultivos leguminosos
(Vance et al. 2003) y, por lo tanto, indirectamente también para la
disponibilidad de este otro nutriente a menudo limitante del rendimiento, el
nitrógeno. Para las plantas, la absorción de fosfato del suelo a menudo es
difícil: en suelos alcalinos, el P está unido al calcio y en los suelos ácidos, el P
generalmente está unido al aluminio y/o al hierro (Kochian et al. 2004),
además, el material orgánico presente en el suelo (por ejemplo, a partir de
estiércol o restos de cultivos) también puede unir fosfato, en particular fitatos
(compuestos de inositol). Con los objetivos actuales de reducir los niveles de
fertilización con Pi, los cultivos deberán movilizar el fósforo residual del suelo, y
esto puede limitar los rendimientos de los cultivos y, por lo tanto, el uso
eficiente de la tierra. Para cultivos como zanahoria, cebolla, varios vegetales,
papa y maíz, se espera que los estándares de fertilización con P para los
Países Bajos en un futuro próximo afecten los rendimientos (Russchen et al.
2012). Se utilizan varios parámetros para medir el P disponible y movilizable en
el suelo (por ejemplo, P-CaCl2 y P-Olsen o una variante más reciente, P-AL,
respectivamente, ver Tabla 1, para una visión general de los parámetros en
uso). Sin embargo, existe incertidumbre sobre hasta qué punto estos son
representativos de lo que puede ser utilizado por especies de plantas
específicas, particularmente con respecto a la movilización de la materia
orgánica.
PUE se basa en un conjunto complejo de rasgos vegetales. Para mejorar el
éxito reproductivo, es importante desglosar esta complejidad en rasgos
componentes que pueden evaluarse eficientemente para una especie de cultivo
particular y que muestren contribuciones consistentes a PUE. Además, estos
rasgos deben mostrar preferiblemente una herencia lo más simple posible para
poder introducir PUE en material vegetal de élite de manera eficiente. En
general, se pueden distinguir dos mecanismos básicos importantes de PUE: la
capacidad de la planta para absorber P del suelo y la eficiencia de
asignación/movilización de P dentro de la planta para sostener la producción de
biomasa, a menudo denominada PUE externa e interna, respectivamente.
Particularmente para suelos ricos en P, optimizar el barrido de P sería un
objetivo de mejoramiento atractivo. Al final, se necesita un equilibrio en el ciclo
del fósforo. Por lo tanto, a largo plazo, la eficiencia del uso interno de P, aunque
probablemente sea más compleja, sería un objetivo de mejoramiento valioso
(Rose y Wissuwa2012).
También aquí, se necesita un equilibrio con la calidad nutricional en términos de
disponibilidad de P. Por ejemplo, en los pastizales pobres en nutrientes
ampliamente utilizados en el norte de Australia, el P puede llegar a ser limitante
para el crecimiento del ganado (McIvor et al.2011). Por otro lado, es posible
que no se necesiten altas concentraciones de fósforo en los granos en la
nutrición humana y animal, en la medida en que la mayor parte del P esté en
 forma no digerible, fitato, y por lo tanto no contribuya a la absorción directa,
sino solo a problemas de desechos por altos niveles de P en excrementos
(Rose et al.2010). En las siguientes secciones, los rasgos que se ha informado
que están involucrados en PUE se discuten por su posible valor para la
reproducción, antes de ver las formas en que estos rasgos podrían utilizarse en
la investigación de la reproducción. Primero, se discutirán los rasgos
arquitectónicos de la planta. Los rasgos arquitectónicos que obviamente son
relevantes para la eficiencia externa de P son los rasgos raíz relacionados con
la absorción de P. Posteriormente, se discutirán las características fisiológicas.
Entre estos, es probable que existan rasgos que tengan relevancia para la
eficiencia interna de P.
Tabla 1: Varios parámetros para evaluar el P del suelo disponible para las
plantas de Russchen et al. (2012) y otras referencias donde se indique
Parámetr
Método Comentarios
o
Método destructivo utilizando Demasiado crudo para evaluar la
P-Total
ebullición en H2SO4 disponibilidad de la planta.
Adecuado para suelos alcalinos y neutros,
Extracción con NaHCO3 a 0,5 M a indicador de capacidad de P (P
P-Olsen
pH 8,5 potencialmente accesible para la planta,
en este caso P unido a Ca)
Extracción 1:20 (p/p) utilizando
Camarad Indicador de capacidad de P (P
lactato de amonio 0.1 M y ácido
a potencialmente accesible para la planta)
acético 0.2 M a pH 3.75
Extracción 1:20 (p/p) utilizando
lactato de Ca 0.1 M, acetato de
P-CAL Variante de P-Al de Schüller ( 1969 )
Ca 0.1 M, ácido acético 0.3 M, pH
4.1
Indicador de una combinación de
capacidad de P y P directamente
Pw 1:60 (p/p) extracción con agua
disponible para la planta (menor
reproducibilidad que P-Al)
P-0.01 M Indicador de P directamente disponible
Extracción con CaCl2 0.01 M
CaCl2 para la planta
El método secuencial de Hedley et
Extracción con agua desionizada
al. ( 1994 ), paso 1, indicador de P
Resina-P y aniones AER /CER tiras de
inorgánico directamente disponible para la
catión
planta
El método secuencial de Hedley et
al. ( 1994 ), paso 2, indicador de P
NaOH-Pi Extracción con NaOH 0,1 M
inorgánico asociado con superficies de
óxido cargadas positivamente
El método secuencial de Hedley et
Extracción de la fracción NaOH-Pi
NaOH-Po al. ( 1994 ), paso 3, indicador de P
usando conc. H2S04 y H2O2
orgánico lábil (más fácilmente accesible)
El método secuencial de Hedley et
al. ( 1994 ), paso 4, indicador de P
Extracción de la fracción NaOH- asociado con superficies de óxido
H2SO4 -P
Pi usando 0.5 M H2SO4 cargadas negativamente a través de
cationes intercambiables y P retenido
dentro de cristales de óxido
extracción del residuo de suelo El método secuencial de Hedley et
Residual- restante usando conc. H2SO4 y al. ( 1994 ), paso 5, indicador del resto de
P H2SO2 calentado P inaccesible y P orgánico recalcitrante
(poco accesible)
Rasgos arquitectónicos de plantas relacionados con PUE
Para una absorción óptima de P, los rasgos de raíz son obviamente
importantes. La privación de P generalmente conduce a una mayor relación de
la raíz y el tallo y a cambios en la arquitectura de la raíz. Una contribución
importante para limpiar el suelo por P es la extensión de la raíz, así la rizosfera
rápidamente agota el P y la saturación de P de esta área por difusión y
movilización no mantiene el ritmo de la absorción. Además, el P a menudo no
se distribuye uniformemente en el suelo. Varios cambios arquitectónicos están
asociados con un PUE más alto desde las raíces. Un mayor número de raíces
laterales conduce a mejores posibilidades de eliminación de P (Lynch 2007)
Varios rasgos minimizarán el costo de carbono de producir estas raíces
laterales, incluida una morfología y características anatómicas más delgadas y
alargadas, como un menor crecimiento secundario de la estela y el parénquima
en la corteza (Zhu et al. 2010). El aumento de la ramificación lateral de la raíz
suele ir acompañado de una reducción del desarrollo primario de la raíz (Niu et
al. 2013). El aumento en la longitud de las raíces axiales, sin un aumento de la
ramificación lateral, también se ha encontrado en el maíz y el frijol común, y se
ha interpretado como un comportamiento exploratorio para parches de suelo
enriquecidos en P donde la formación de la raíz lateral sería funcional
(Richardson et al. 2011) La modificación del crecimiento del pelo radicular se
puede lograr a un costo de carbono relativamente bajo. Las densidades y
longitudes aumentadas conducen a una mayor capacidad de absorción de P
(Wang et al. 2004; Yan et al. 2004).
Dado que la parte superior de los suelos es a menudo más rica en P, las
adaptaciones de la arquitectura de las raíces que aumentan la densidad de las
raíces en las partes superiores del suelo favorecen la eficiencia de absorción
de P. Esto se logra mediante un ángulo de crecimiento más superficial de las
raíces axiales que conduce a una mayor longitud de las raíces en el suelo
superior. Las legumbres frijol común y soya pueden seleccionarse para obtener
un mayor número de espiral de raíz basal, es decir, las raíces laterales que
aparecen en "anillos" en la zona de transición entre el tallo y la raíz principal
(tap) (Lynch 2007). Además, Wang et al. (2004) mostraron en la soya que la
densidad del pelo radicular y la longitud total fueron más altas en las raíces
basales que en las raíces principales, mientras que la concentración de P de la
planta se correlacionó positivamente con la densidad del pelo radicular.
También mostraron una correlación negativa entre la densidad del pelo
radicular y la longitud promedio del pelo radicular, lo que podría interpretarse
como una compensación en términos de eficiencia en el uso de carbono, es
decir, la combinación de alta densidad y longitud para los pelos radicales sería
demasiado costosa en términos de entrada de carbono. Por otro lado, Yan et al.
(2004) encontraron pelos radicales más densos y largos en genotipos de frijol
común con eficiencia P. Aparentemente, no todos los cultivos tienen la
capacidad de aumentar la formación de pelo radicular para aumentar la
capacidad de absorción de P. Por ejemplo, la cebolla carece principalmente de
esta propiedad (Itoh y Barber 1983; Liu et al. 2006) De acuerdo con Ochoa et
al. (2006), en algunos cultivos será útil mejorar la formación de raíces
adventicias (raíces que se originan de otros tejidos, como los tallos, por
ejemplo, las raíces de la corona de los nodos del tallo basal en el maíz). Sin
embargo, una mayor formación de raíces adventicias puede tener el costo de
un menor enraizamiento lateral (Walk et al. 2006). Los cambios en la densidad
y el ángulo de crecimiento de las raíces laterales también aumentan la
capacidad de barrido en la capa superior del suelo (Ao et al. 2010). Sin
embargo, el predominio de las inversiones en la superficie de la raíz en la capa
superior del suelo puede tener un compromiso con la eficiencia del uso del
agua, ya que el agua generalmente será más abundante en las capas más
profundas en condiciones de limitación de agua (Ho et al. 2005).
Un caso especial son las raíces (raíces proteiformes racimo: densos racimos
de raíces laterales cortas) que se encuentran con bajo P en altramuz y las
especies silvestres de la familia Proteaceae (Shane y Lambers 2005;
Lambers et al. 2011, 2013). Estos también son más prominentes en la capa
superior del suelo y se cree que son principalmente efectivos al movilizar P a
través de la exudación de ácidos orgánicos en lugar de eliminar a través de la
extensión de la raíz (Rath et al. 2010, ver también la sección sobre fisiología a
continuación). Los altramuces combinan este rasgo con la ausencia de
micorrizas (con hongos micorrícicos arbusculares (AMF), ver más adelante en
la sección sobre micorrizas).
Los rasgos arquitectónicos de la raíz, como la ramificación lateral y la densidad
del pelo radicular, son claramente ventajosos para el PUE. Sin embargo,
monitorear estos rasgos y usarlos para la selección en programas de
mejoramiento ciertamente no es sencillo. Varios sistemas de cultivo y
fenotipado utilizados para estudiar y monitorear raíces se describen en la
sección sobre fenotipado a continuación.
Rasgos fisiológicos relacionados con el PUE
Como el fósforo está involucrado en muchos aspectos del metabolismo de la
planta, se espera que una amplia gama de rasgos fisiológicos participe en
PUE. Algunos de estos mejoran la captación y absorción de P, por ejemplo, al
aumentar la capacidad de transporte. Otros promueven un uso más económico
de P en el crecimiento de la planta, por ejemplo, optimizando la asignación
dentro de la planta. Estas estrategias a menudo se denominan PUE externas e
internas, respectivamente.
El PUE externo: rasgos relacionados con la absorción de P
Para mejorar la absorción de P, se cree que los exudados de raíz ayudan a
movilizar el P de fuentes fijas en el suelo (Vance et al. 2003). Estos exudados
parecen estar dirigidos de manera más efectiva al P movilizable en el suelo por
las raíces proteoides (racimos) en algunas especies de lupino (Rath et al.
2010). Los exudados incluyen protones y ácidos orgánicos, como citrato,
malato y oxalato. Se demostró que los genotipos eficientes de frijol común
tienen niveles significativamente más altos de exudación ácida que los
genotipos ineficientes (Yan et al. 2004) Aunque los exudados pueden alcanzar
niveles en la rizosfera que son teóricamente efectivos para liberar P de las
partículas del suelo, existe incertidumbre acerca de su efectividad. Por ejemplo,
la difusión puede ser limitada y, a menudo, no se dirigen a áreas del suelo con
los niveles más altos de P con la misma eficacia que las raíces del racimo, sino
a lo largo de toda la raíz (Pearse et al. 2007; Richardson et al. 2011). Los
ácidos orgánicos pueden ser rápidamente absorbidos en suelos ácidos y
rápidamente degradados en suelos calcáreos (Wang et al. 2010). Entre las
especies de plantas también existe una variación que aparentemente no es
consistente con su papel esperado, por ejemplo, a pesar de exudar citrato, se
demostró que el guisante no puede movilizar el P de AlP y FeP (Pearse et al.
2007) Además, puede haber mecanismos alternativos de acción. En los suelos
ácidos, ácidos orgánicos no necesariamente pueden mejorar la absorción de P
directamente, sino que también podrían ser eficaces proporcionando protección
contra la toxicidad de Al a crecimiento de la raíz a su vez mejorar
indirectamente la absorción de P a través de un sistema de raíces más
desarrollado (Delhaize et al. 2009). La exudación de ácidos orgánicos también
afectará a los microorganismos involucrados en la movilización de nutrientes.
Las enzimas hidrolíticas, tales como fosfatasas ácidas y ribonucleasas, están
regulados por incremento en respuesta a bajo contenido de P y sobre
exudación son capaces de liberar P fijo en formas orgánicas en el suelo, tales
como el fitato (hexaquisfosfato inositol) (Vance et al. 2003).
El PUE interno: utilización económica de P en la planta
Mejorar el PUE interna conducirá a un uso de P más eficiente en el uso de los
recursos que simplemente aumentar la absorción de P potencialmente escaso,
que fue ampliamente revisado por Veneklaas et al. (2012) Se cree que una
serie de modificaciones metabólicas están involucradas en la eficiencia del uso
interno de P. Un aspecto importante es la movilización efectiva de P dentro de
la planta, por ejemplo, el reciclaje de P de las partes maduras/senescentes de
la planta al tejido en crecimiento activo y la reutilización de fosfato de las
vacuolas que tienen una función amortiguadora en el almacenamiento de P
cuando exceden las necesidades metabólicas en la planta. citoplasma. Se
demostró que los cultivares de Brassica con un PUE alto tienen una
movilización interna eficiente de fosfato hacia partes activas de plantas no
maduras (Akhtar et al. 2008). Con P alto, hasta el 75% de P en las hojas
puede estar presente como ortofosfato, la mayoría de las cuales en las
vacuolas (hasta 85-95% de P celular, Akhtar et al. 2008). Sin embargo, tras la
limitación de P, la fotosíntesis se ve afectada rápidamente, por lo que
aparentemente existen limitaciones para la movilización de este P almacenado
(Richardson et al. 2011, también ver a continuación los efectos de la
señalización de citoquinina desde las raíces tras la limitación de P). Las
plántulas a menudo dependen de las reservas de semillas para P en el
crecimiento temprano (White y Veneklaas 2012). Al mismo tiempo, los niveles
de P de la semilla no son necesariamente óptimos para los consumidores,
particularmente porque en la semilla el P está principalmente en forma de fitato,
que es pobremente metabolizado por humanos y animales monogástricos
(Veneklaas et al. 2012). Ya se ha observado que las concentraciones de P de
semillas disminuyeron con los esfuerzos de mejoramiento que aumentaron el
índice de cosecha (HI) en los granos, pero las estrategias que apuntan a
mejorar el PUE al reducir drásticamente los niveles de fitato de semillas a
menudo afectan el vigor de las semillas. Esto puede compensarse mediante la
fertilización selectiva con P, por ejemplo, utilizando recubrimientos de semillas
(Veneklaas et al. 2012). Las fosfatasas no solo están involucradas en la
movilización de P en el suelo (ver sección "PUE externo" más arriba), sino
también en la reasignación interna en la planta y esta última involucra tipos
específicos de fosfatasas (Duff et al. 1994). Se sabe relativamente poco
acerca de las fosfatasas específicas localizadas internamente, pero se
demostró que un ejemplo codificado por LaSAP1 se potencia en la expresión
por bajo P en las raíces de lupino blanco (Tang et al.2013). Del mismo modo,
los transportadores de alta afinidad también parecen funcionar en la
movilización interna de P, es decir, se demostró que los genes transportadores
específicos se regulan positivamente en los tejidos senescentes (Veneklaas et
al.2012).
Otra estrategia para PUE interna es adaptar el metabolismo de la planta a un
requerimiento de P más bajo. Una forma es la sustitución de fosfolípidos por
sulfo y/o galactípidos en las membranas (Lambers et al. 2012). Las paredes
celulares también se adaptan en respuesta a condiciones bajas de P, es decir,
mediante el aumento de la síntesis de polisacáridos libres de P, como la
celulosa (Rao y Terry 1995; Byrne et al. 2011). Otra forma es evitar las
enzimas y/o las rutas metabólicas que requieren Pi- o ATP. En el metabolismo
de los carbohidratos, se producen varios intermedios fosforilados, como el
triose-P (gliceraldehído-3-fosfato) en el ciclo de fijación de carbono. Conforme
al contenido de P bajo, se observaron incrementos en los niveles de almidón en
los plástidos y sacarosa en el citosol a costa de triose-P en remolacha
azucarera (Rao et al.1989; Rao y Terry1995). Por otro lado, los miembros de
la familia de plantas Proteaceae que crecen en suelos extremadamente pobres
en P no mostraron niveles más bajos de glucosa 6- fosfato intermedio
fosforilado como se encuentra en la planta modelo Arabidopsis y especies de
cultivos como la cebada y la espinaca bajo limitación de P (Sulpice et al.2014).
Sin embargo, la mayor cantidad de P interno está presente en el conjunto de
rRNA y las especies de Proteaceae estudiadas mostraron bajos niveles de
rRNA, particularmente de rRNA plastídico, en el crecimiento temprano de la
hoja en comparación con Arabidopsis. Aparentemente, estas Proteáceas
economizan la producción de proteínas, incluidas las enzimas involucradas en
el metabolismo de los carbohidratos, en lugar de los metabolitos que contienen
P. Como consecuencia, el crecimiento de las hojas y la construcción de la
maquinaria fotosintética se separan en el tiempo durante el desarrollo de la
hoja, el resultado neto es un PUE fotosintético relativamente alto en estas
especies de Proteaceae (Sulpice et al. 2014). La Proteaceae también
muestran crecimiento mucho más lento que las plantas de cultivo, pero los
elementos de su economización en P pueden ser relevante, ya que hay
indicaciones de que por ejemplo Arabidopsis no está desplegando el pool de
rRNA en las hojas jóvenes de manera eficiente bajo estrés del P (Sulpice et al.
2014).
El enverdecimiento tardío observado en Proteaceae fue acompañado por un
color de hoja rojizo o amarillo que también podría ofrecer protección contra la
luz intensa o defensa contra la herbivoría (Sulpice et al. 2014). Se esperaba
que la modulación de la vía fenilpropanoidea bajo estrés por deficiencia de P
con el efecto fácilmente observable de la acumulación de antocianinas
ofreciera protección contra el daño fotoinhibidor como consecuencia de la
fotosíntesis limitada por P en la revisión de Vance et al. (2003). Sin embargo,
el papel preciso de la acumulación de antocianinas bajo el estrés de limitación
de P en las plantas aún no está claro. Por ejemplo, Henry et al. (2012) no
pudieron encontrar efectos consistentes de la acumulación de antocianinas en
términos de fotosíntesis mejorada o producción de biomasa bajo estrés de P en
maíz y coleo. Además, el bajo contenido de P induce aumentos rápidos en las
especies de oxígeno reactivo (ROS) potencialmente dañinas y mayores
actividades enzimáticas de eliminación de ROS (Wan et al. 2010), de manera
similar a otras tensiones abióticas y bióticas en las plantas.
Las vías hormonales y de señalización son integradores importantes de las
respuestas al estrés en las plantas y Chiou y Lin (2011) resumen su papel en
la capacidad de respuesta al P, entre otros. La señalización de auxina y etileno
está obviamente asociada con el inicio de la raíz lateral, que es una respuesta
fundamental a un bajo contenido de P como se describe en la sección anterior
sobre la arquitectura de la planta. La giberelina contrarresta los efectos de la
auxina en la formación de la raíz lateral. La producción de citoquinina se
reprime a niveles bajos de P y se sabe que la citoquinina inhibe los genes (PSI)
inducidos por la inanición de P. La baja citoquinina también promueve el
crecimiento de las raíces y la disminución en la exportación de las raíces
conduce a la inhibición del crecimiento de los tallos, incluso cuando las
reservas de P vacuolar no se agotan. Veneklaas et al. (2012) plantean la
hipótesis de que PUE podría mejorarse adaptando tales eventos de
señalización para hacer un uso más efectivo del conjunto de P del tallo, ya que,
por ejemplo, podría lograrse el desacoplamiento de la deficiencia de P y el
crecimiento del tallo manipulando la expresión del gen PHO1 en Arabidopsis. El
ABA es una hormona importante del estrés, pero no se ha demostrado que
tenga efectos claros en la capacidad de respuesta de P. Se demostró que las
estrigolactonas identificadas más recientemente afectan la arquitectura de la
raíz y se mueven hacia arriba desde las raíces disminuyendo la ramificación del
tallo en interacción con la auxina en respuesta al estrés del P (Kohlen et al.
2011). Las estrigolactonas también promueven la ramificación de las micorrizas
(cf. Ruyter-Spira y Bouwmeester 2012, ver más abajo la sección sobre
micorrizas).
La señalización de azúcar también interactúa con la capacidad de respuesta de
P. La disminución de la fotosíntesis en respuesta al bajo P conduce a una
mayor formación de almidón en los tallos (Hammond y White 2011). Además,
la carga de azúcar en el floema aumenta y, por lo tanto, se asigna a las raíces,
lo que a su vez aumenta la relación raíz/tallo y conduce a la activación de
genes que responden al P (Hammond y White 2011). Incluso el propio P
probablemente funciona como una señal directa ya que el fosfito análogo de Pi
no metabolizable (Phi) también actúa como una señal en la regulación del P en
las plantas (Chiou y Lin 2011). La vía del fosfato de inositol IP3 / diacilglicerol
(DAG), que funciona a través de la fosfolipasa C (PLC) y el Ca 2+ posterior a la
señalización, es una vía importante en la señalización de estrés. Es probable
que esté involucrado en la capacidad de respuesta de P, pero todavía se sabe
poco sobre esto (Chiou y Lin 2011).
Muchas de estas respuestas fisiológicas son complejas y difíciles de evaluar
con fines de reproducción. Sin embargo, algunos son relativamente sencillos,
como el análisis de exudados en respuesta a la baja P. Los rasgos más
complejos han sido objeto de técnicas genómicas, como la transcriptómica y la
metabolómica, que se analizarán en la siguiente sección sobre métodos de
detección/prueba.
Fenotipado: evaluación eficiente de las plantas para la variación
genotípica de PUE
Para una reproducción exitosa de cultivos eficientes en P, se necesita una
selección de alto rendimiento de genotipos óptimos. Esto solo será factible
cuando se identifiquen los rasgos involucrados en PUE que se pueden calificar
de manera eficiente. Aunque los ensayos de campo son el juez final de la
superioridad de las nuevas variedades, estos ensayos se ven obstaculizados
por la variabilidad en las condiciones ambientales, que pueden enmascarar la
variación genética buscada. Las condiciones de cultivo más controladas
reducirán esta variación ambiental y también permitirán imponer condiciones
que revelen más claramente los rasgos relacionados con PUE en las plantas
analizadas. Preferiblemente, las plantas también deben cultivarse de una
manera que permita una evaluación fácil de los rasgos. En las siguientes
secciones, se discuten los métodos de cultivo destinados a probar los rasgos
PUE, primero los sistemas basados en el suelo, seguidos de los sistemas
basados en el agua.
Métodos de cultivo/cribado
Sistemas basados en el suelo (sólido)
Se han desarrollado varios métodos que están dirigidos específicamente a la
detección del PUE de plantas y a diseccionar estos rasgos en componentes
genéticos. La configuración experimental más simple es el uso de macetas en
invernaderos regadas por soluciones nutritivas con varios niveles de fosfato.
Con el fin de mejorar la representatividad del medio de maceta para
condiciones normales del suelo, Da Silva y Gabelman (1992) desarrollaron un
sistema de fase sólida reproducible de liberación lenta/difusión limitada, que se
basa en la adición de fosfato pre-absorbido a la alúmina activada, arena de
cuarzo puro (Coltman et al. 1982).
Para mejorar el monitoreo de las características arquitectónicas de la raíz, se
implementaron varios refinamientos a los métodos de cultivo basados en
contenedores. Ao et al (2010) describieron un mini-rizotrón que consiste en
arena de silicio, a través del cual se colocaron tubos de acceso de plexiglás a
una distancia de 30 cm entre sí y en un ángulo de 30° con respecto a la
superficie del suelo. Los rasgos de la raíz se pueden registrar moviendo una
cámara endoscópica a través de los tubos de acceso. Nagel et al. (2012)
desarrollaron un sistema robótico de rizotrón que permite obtener imágenes
automáticas de raíces y brotes, con una tasa de rendimiento de 60 rizotrones
por hora. Fang et al (2009) lograron registrar el sistema de raíces total in situ
combinando un medio de crecimiento de raíces transparente basado en
phytagel con escaneo láser 3D.
Otros refinamientos apuntaban a la observación de tipos específicos de rasgos,
como la distribución de raíces laterales y exudaciones de las raíces al medio
(suelo). Un ejemplo de esto es el sistema de Liao et al. (2004, 2006), que
utiliza contenedores divididos en varios compartimentos por plexiglás
perpendicular a la dirección del crecimiento de la raíz principal. Esto permite
evaluar las características de las raíces en varias capas del suelo (por ejemplo,
0–1.5 cm, 1.5 – 6 cm, > 6 cm) que varían en los niveles de P y la disponibilidad
debido a la unión de Al. Como se discutió en la sección sobre el PUE externo,
en condiciones de campo, la capa superior del suelo es a menudo la más rica
en P. Otro ejemplo es la técnica de contenedor de estudio de la rizosfera (RSC)
de Zoysa et al. (1997, 1999) que consta de 2 o 3 compartimentos de suelo
separados por una malla de poliéster de 24 μm de diámetro de poro que retiene
las raíces como una estera plana. En el momento de la cosecha, los suelos de
cada compartimento se pueden cortar mediante congelación con N 2 líquido
(Kuchenbuch y Jungk 1982). Las porciones del compartimento con la planta
se pueden usar para medir el área de la superficie de la raíz, en particular el
tapete en la malla de poliéster. Las porciones de los otros compartimentos se
pueden usar para medir el agotamiento de P o los efectos de la exudación de la
raíz en relación con la distancia desde la estera plana de la raíz.
Hidroponía: cultivo de plantas en soluciones de agua.
En hidroponía, las plantas se cultivan en un medio líquido, lo que permite el
suministro controlado de nutrientes directamente a las raíces y la simple
cosecha de las raíces. Muchos estudios estaban utilizando sistemas
hidropónicos relativamente simples basados en soluciones nutritivas aireadas
con varios niveles de fosfato con renovación de las soluciones a intervalos fijos
(por ejemplo, Gong et al. 2011; Byrne et al. 2011: ryegrass perenne, Beebe et
al. 2006: común frijol). En la figura 1 se muestra un ejemplo de un experimento
que usa dos niveles de fosfato con cebolla. Una de las variantes simples es la
técnica de película de nutrientes (NFT, utilizada en Hammond et al. 2011): este
sistema utiliza una corriente de agua poco profunda con nutrientes que
atraviesan un barranco. Las plantas se colocan en agujeros en el lado superior
y tienen sus esterillas de raíz en la corriente parcialmente expuestas al aire
para optimizar la oxigenación. Al igual que con los sistemas de fase sólida de la
sección anterior, algunos estudios utilizaron formas de fosfato insolubles en
agua que deberían hacer que el sistema sea más similar a la situación en el
suelo. Esto incluyó el sistema de alúmina activada como se describió en la
sección anterior (Yan et al. 2004: frijol común) o variantes tales como Ca-P, Al-
P, Fe-P o fitato-P (Du et al. 2009) o Fosfal (Erro et al. 2010: garbanzo, lupino,
maíz). Liu et al. (2006) mostraron que dicho sistema de unión al P estaba
superando una limitación de la hidroponía, es decir, el pobre desarrollo del pelo
radicular que es importante para la absorción de P en los suelos (ver la sección
sobre arquitectura de la planta). En su sistema, que se basa simplemente en
TCP (fosfato tricálcico), varias especies de cultivos, incluido el maíz
generalmente poco inducible, crecieron abundantemente los pelos radiculares,
con la única excepción de la cebolla, que normalmente es un desarrollador
pobre del pelo radicular. Para combinar estudios de PUE con nodulación por
Rhizobium fijadora de nitrógeno en frijol común, L'taief et al. (2012) aplicaron
hidro-aeroponía. En este sistema, las raíces cuelgan en una niebla de solución
nutritiva, lo que mejora el acceso de las raíces al oxígeno y al nitrógeno desde
el aire.

Figura 1: Experimento hidropónico con cebolla. En la

fila de la izquierda, se usa una solución nutritiva que
contiene 40 μM de P-PO 4, en la fila de la derecha, 4
μM de P-PO4 (fotografía cortesía de Karin Burger)
Un método hidropónico más sofisticado se basa en el concepto de Ingestad de
suministrar el nutriente en estudio de acuerdo con un modelo de crecimiento
específico del cultivo, manteniendo así el alcance de la limitación de nutrientes
lo más posible a un nivel constante a lo largo de las diversas etapas de
crecimiento de una plántula. La mayor parte de la literatura sobre hidroponía
según el concepto de Ingestad trata la limitación de nitrógeno (N) (Ingestad y
Lund 1986; Ingestad y Ågren 1995; Hellgren e Ingestad 1996). Ericsson e
Ingestad (1988) mostraron que los experimentos hidropónicos con limitación de
fósforo (P) se pueden realizar de manera similar a los que se realizaron
utilizando la limitación de N con plántulas de abedul. En el concepto de
Ingestad, es más probable que la variación en PUE se base en la variación en
el PUE interno que en el PUE externo, ya que la capacidad de barrido de las
raíces difícilmente contribuirá al PUE, y los rasgos arquitectónicos de la raíz
tendrán un impacto diferente (muy probablemente menos) en el crecimiento de
las plantas con disponibilidad variable de P en cultivos hidropónicos que en el
suelo.
Métodos de detección/prueba
Para comparar el PUE de las plantas, muchos estudios realizaron una serie de
mediciones básicas que se pueden puntuar de manera relativamente eficiente
en grandes cantidades de genotipos, generalmente en las etapas de
plántulas/plantas jóvenes. Como medida aproximada de la arquitectura de la
planta, se determinaron principalmente el peso fresco y seco de los tallos y
raíces, y el número de macollas en el caso de gramíneas y cereales
(Gramineae/Poaceae). Al incluir las medidas de los niveles de fósforo en las
plantas, las dos vías básicas de la eficiencia del P en la planta, el PUE externo
e interno podría ser distinguido. Para el PUE externo, es decir, la eficiencia de
absorción, la cantidad de P absorbida por la planta se calcula como mg de
fósforo por planta. Sin embargo, esto no incluye los efectos sobre la producción
de biomasa por planta. Trolove y et al. (1996) específicamente evaluaron más
la cantidad de P absorbida por unidad de longitud de raíz. El PUE interno
aborda la eficiencia metabólica y se calcula como la proporción de biomasa
vegetal producida por unidad de P: por ejemplo, peso seco del tallo (SDW) por
mg de fósforo absorbido (Trolove et al. 1996; Zoysa et al. 1997, 1999; Zhang
et al. 2009). El PUE interna puede ser difícil de desenredar de la PUE externa,
ya que un mayor contenido de P del tejido puede conducir al PUE más baja;
entonces, debería emplearse alguna forma de corregir esto o igualar la
adquisición de P (Veneklaas et al. 2012). Otros ajustes fueron proporcionados
por Su et al. (2006) que utilizaron SDW/SPU (absorción del fósforo por el tallo)
para la eficiencia interna del P en líneas DH de trigo y Hammond et al. (2009)
que evaluaron la variación de absorción de masa/unidad de tallos en
accesiones y variedades de Brassica oleracea.
Las raíces son notoriamente difíciles de estudiar debido a su naturaleza
subterránea. Sin embargo, cada vez más, los sistemas se desarrollan y refinan
para monitorear el desarrollo de la raíz y las respuestas al medio ambiente.
Para obtener información más detallada sobre la arquitectura de la raíz, se
aplicó inspección visual o análisis de imágenes en raíces de cultivos
hidropónicos (por ejemplo, Yan et al. 2004) o en las raíces limpias
desarrolladas en el suelo (por ejemplo, Liang et al. 2010). En el último caso,
siempre habrá algún nivel de daño en las estructuras más finas, pero se han
desarrollado métodos eficientes incluso para ensayos de campo, como la
"pala": excavar un cilindro de suelo de 40 cm de diámetro/25 cm de
profundidad en la base de la planta usando una pala estándar, seguida de una
breve sacudida del suelo, remojándola en detergente suave y finalmente
enjuagando a baja presión de agua, todo en total, tomando un máximo de 10
minutos para la puntuación visual de la raíz (Trachsel et al. 2011, para el maíz
y el frijol). Esto no funcionará bien en suelos arcillosos pesados.
Un método básico de laboratorio para observar la morfología de la raíz es el
sistema 2D basado en agar para Arabidopsis usando placas de Petri colocadas
verticalmente con el segmento superior de agar eliminado para mantener la
parte del tallo libre de la superficie del agar (Dubrovsky y Forde 2012). Los
parámetros relacionados con el PUE que se evaluarán incluyen la densidad
lateral de la raíz (primordios y raíces/raíz primaria o longitud de la zona de
ramificación), preferiblemente durante un período de tiempo que abarca varias
etapas del desarrollo de las plántulas. Shi et al (2013) realizaron evaluaciones
de alto rendimiento de las longitudes de raíz primaria y lateral, y la densidad de
raíz lateral utilizando imágenes de alto rendimiento de los sistemas de raíz de
plántulas de Brassica napus en bandejas de agar plano y software ImageJ
(Abràmoff et al. 2004). Wang et al (2004) amplió los rasgos del pelo radicular,
utilizando el software de análisis de imágenes WinRhizo (Regent Instruments
Inc., Canadá) en imágenes de partes de la raíz lateral de 1 mm capturadas por
una cámara digital en un microscopio estereoscópico. En un nivel aún más
detallado, Burton et al. (2012) desarrollaron un software para el análisis de
imágenes de alto rendimiento de transecciones de raíz que muestra un ejemplo
de raíces de frijol común y arroz cultivado con bajo y alto contenido de fósforo
utilizando el sistema de alúmina dopado con arena/fósforo como Da Silva y
Gabelman (1992) describen en sección sobre métodos de detección/cultivo.
Los parámetros importantes para el PUE a bajo costo de carbono, como la
cantidad de aerenquima y el diámetro de estela (ver sección sobre arquitectura
de la planta más arriba), podrían cuantificarse de esta manera.
Como se describe en la sección anterior sobre métodos de detección/cultivo,
Fang et al. (2009) evaluaron la arquitectura de la raíz in situ con un sistema de
escaneo láser 3D logrando una precisión de 0.1 mm con plántulas de arroz y
soja. Para especies de plantas pequeñas, como Arabidopsis, esto sería una
resolución demasiado baja. Además, el tamaño de escaneo fue limitado, por lo
que no se pudieron observar plantas más grandes y/o maduras. Un sistema
similar fue utilizado por Ingram et al. (2012) para evaluar los rasgos de la raíz
en la hierba Brachypodium distachyon. En este caso, las raíces estaban
creciendo en cilindros de borosilicato que contenían medio nutritivo de goma
Gelzan, y las imágenes de las raíces se capturaron cada 18° alrededor de toda
la circunferencia del cilindro de crecimiento. En suelos normales, se analizó la
tomografía computarizada (TC) de rayos X, pero muestra problemas en la
superposición de valores que dificultan la distinción de las raíces del material
del suelo. Esto ha sido abordado recientemente por un sistema de tomografía
micro-computada usando seguimiento visual, llamado RooTrak. La utilidad de
RooTrak se demostró en maíz, trigo y tomate en varias texturas del suelo
(Mairhofer et al. 2012).
Los efectos de las raíces en el ambiente externo se monitorizaron usando
hidroponía o el sistema RSC compartimentado descrito en la sección anterior
sobre sistemas de detección basados en el suelo: exudación de H +, exudación
de ácido orgánico o exudación de fosfatasa ácida. Por ejemplo, Yan et al.
(2010) encontraron un mayor nivel de acidificación con las plantas de trigo más
eficientes en P en un sistema RSC. No encontraron diferencias en los niveles
de fosfatasas ácidas exudadas.
El PUE interna es difícil de evaluar centrándose en rasgos fenotípicos de alto
rendimiento y fácilmente calificables. Una indicación para la eficiencia de la
movilización puede provenir de la observación de Ozturk et al. (2005) que los
genotipos de trigo con síntomas de senescencia relativamente fuertes en las
hojas más viejas producían mayor biomasa en condiciones de estrés de P.
Estos genotipos pueden haber estado movilizando P más rápidamente de las
hojas más viejas. Akhtar et al. (2008) estudiaron el PUE interno en una serie
de Brassica cultivares siguiendo la distribución de Pi y Po (P orgánicamente
unido) entre las partes de la planta después de la privación de P en hidroponía.
Mostraron una asociación de mayor producción de biomasa con grandes
reservas de Pi a alta disponibilidad de P y rápida movilización interna de Pi a
bajo contenido de P para mantener la homeostasis de Po; En el estrés del P,
las raíces y las hojas jóvenes fueron los sumideros más importantes para Pi.
Un parámetro fisiológico de calificación relativamente eficiente es el contenido
de clorofila de la hoja, que se ve afectado por el estrés de P y puede medirse in
vivo usando un medidor SPAD (por ejemplo, Wan et al. 2010; Cai et al. 2012).
Además, los metabolitos se pueden medir en muestras de plantas usando, por
ejemplo, GC–MS (Byrne et al. 2011) e iones usando, por ejemplo, HPLC
(Uwimana et al. 2012). Una técnica más sofisticada fue la obtención de
imágenes de movimientos iónicos en plantas utilizando sistemas de obtención
de imágenes de radioisótopos en tiempo real (en este caso 32P) por Kanno et
al. 2012, que sin embargo parece ser demasiado complejo para un cribado
eficiente. Recientemente, un sistema que usa RMN o tomografía por emisión
de positrones proporcionó información muy útil, pero sería aún más difícil de
aplicar en la práctica (De Smet et al. 2012). Otro desarrollo prometedor es el
rastreo de fosfato in vivo por proteínas indicadoras fluorescentes (Gu et al.
2006; Sun et al. 2008; revisión: Frommer et al. 2009), pero esto tampoco se
implementará fácilmente en un sistema de detección de alto rendimiento.
Los cambios en la expresión génica para adaptarse a la inanición de P también
pueden ser indicativos de estrategias y rasgos que contribuyen al PUE. Se han
utilizado estudios completos de expresión de transcriptomas con micromatrices
para descubrir genes que responden a cambios en P en Arabidopsis, tomate,
frijol, maíz, arroz y mostaza silvestre (Nilsson et al. 2010) y papa (Hammond
et al. 2011). El próximo capítulo profundizará sobre los genes sensibles al P.
Genética y mejoramiento genético para el PUE
El PUE muestra una gran variación entre especies (Föhse et al. 1988, 1991).
Por ejemplo, la cebada es generalmente menos eficiente en P que el maíz y el
arroz. Lo que es más importante, también muestra una variación genética
considerable dentro de las especies (Ozturk et al. 2005; Hammond et al.
2009), que es la base para una mejora adicional en la reproducción. Sin
embargo, la reproducción del PUE probablemente sea un proceso complicado
debido a la complejidad de este rasgo y la influencia del medio ambiente. Por
ejemplo, la selección en alfalfa para plantas con altos niveles de P en suelos
alcalinos deficientes en P mostró solo un pequeño progreso por ciclo de
selección, pero en esta especie de cultivo cruzada, esto se confundió con los
efectos de endogamia (Sain et al. 1994). Górny y Sodkiewicz (2001) utilizaron
híbridos dialélicos de 5 o 6 endogámicos de cebada que se evaluaron en la
madurez y encontraron principalmente efectos genéticos aditivos para el PUE,
incluso más que en la etapa vegetativa. Además, las heredabilidades de
sentido estrecho fueron relativamente bajas en condiciones de estrés. Además,
las pruebas de eficiencia de uso de P en el campo pueden ser problemáticas
debido a la gran heterogeneidad espacial de la disponibilidad de P en el suelo.
En estudios sobre el trébol blanco, se descubrió que la eficiencia del uso de P
es heredable en condiciones de invernadero, pero este no fue el caso en
condiciones de campo (Caradus y Dunn 2000) Por otro lado, la selección
exitosa para un aumento del PUE se informó más recientemente para nuevas
variedades de soja, en este caso al centrarse en la arquitectura de la raíz. En el
sur de China, las nuevas variedades superaron a las variedades existentes en
suelos ácidos, que tienen una baja disponibilidad de P para las plantas (Wang
et al. 2010). Se informó un éxito similar para el frijol común en África, Asia y
América del Sur (Lynch 2007).
La investigación en mejoramiento clásico ha sido mejorada en gran medida por
desarrollos recientes en técnicas moleculares, como la selección asistida por
marcadores (MAS) y la genómica. Esto permite también diseccionar rasgos
cuantitativos complejos en factores genéticos subyacentes que pueden
localizarse en el genoma, es decir, utilizando mapas de enlace genético
basados en marcadores de ADN y ubicando estadísticamente sitios en estos
mapas vinculados a rasgos deseables, loci de rasgos cuantitativos (QTL). En la
siguiente sección, se discutirán los QTLs reportados para el PUE.
Factores genéticos: QTLs
Para muchos de los rasgos de PUE discutidos anteriormente, se han reportado
QTL en diferentes cultivos. Muchos de los estudios genéticos sobre el PUE
abordan rasgos altamente cuantitativos, como SDW y número de macollera
(TN) en trigo (Su et al. 2006), rendimientos de grano en maíz (Cai et al. 2012)
y SDW, R (raiz) DW y biomasa/rendimiento en soja (Liang et al. 2010, Zhang
et al. 2009). Además, se determinaron los contenidos de P (Yan et al. 2004),
para la raíz y el tallo por separado, (Liang et al. 2010). Además, las
aproximaciones de la eficiencia de absorción de P, como la absorción de P del
tallo (SPU) como SDW × concentración total de P (Su et al. 2006) o la
eficiencia de adquisición de P como P total (mg) / planta, (Zhang et al. (2009)
se calcularon; igualmente para el PUE interno g peso seco/mg de fósforo
absorbido, fue calculado por Zhang et al. (2009). Usando 152 RIL de un cruce
de soja, Zhang et al. (2009) detectaron un total de 34 QTL para los rasgos de
biomasa relacionados con PUE, incluido un grupo de QTL que representaba el
74% de la variación fenotípica y que coincidía con QTLs encontrados
previamente para la eficiencia de P y N. También encontraron un grupo QTL
asociado con una mayor actividad de la fosfatasa ácida. Además, se
identificaron 8 pares de QTL epistáticas en 12 grupos de enlace. En un informe
posterior, agregaron 13 QTL relacionadas con el rendimiento de grano bajo
estrés de P: tasas de abscisión de flores y vainas (FAR y PAR,
respectivamente) (Zhang et al. 2010). Entre ellos se encontraba un QTL
importante para FAR que explicaba el 32% de la variación fenotípica que se
localizaba junto con QTL para PAR, y había varios QTL que se ubicaban junto
con QTL para rasgos vegetativos con bajo contenido de P encontrados en
estudios anteriores.
Los rasgos arquitectónicos de la raíz, tales como longitudes de raíz específicas
en frijol común (Beebe et al. 2006) y longitud y densidad de raíz lateral en maíz
(Zhu et al. 2005) y Brassica napus (Shi et al. 2013) también se analizaron para
QTL bajo varios niveles de P. Shi et al., (2013) detectaron 38 QTLs en 9 de los
19 cromosomas, incluido un grupo de biomasa altamente significativa y número
de raíz lateral y QTLs de densidad de raíz en el cromosoma A03. Este grupo se
co-localizó con rasgos comparables en regiones sinténicas de B. oleracea y
genoma Arabidopsis, a un nivel más detallado, también se analizaron la
densidad y la longitud del pelo radicular. En ensayos de campo en suelos de
bajo P con 88 RIL de un cruce de soja, Wang et al. (2004) mostraron que la
densidad del pelo radicular tiene una heredabilidad menor que la longitud
promedio del pelo radicular. Con 86 RIL de un cruce de frijol común, Yan et al.
(2004) también encontraron heredabilidades relativamente bajas para rasgos
para la raíz en hidroponía, excepto por algunas características de exudación
ácida. Sin embargo, encontraron 8 QTL para los rasgos del pelo radicular
(densidad y longitud) y 9 QTL para las características de exudación ácida. Tres
de estos QTL de exudación ácida se ubicaron junto con dos QTL de eficiencia
de absorción de P identificados en un experimento de campo con bajo
contenido de P. Por conveniencia, muchos estudios utilizaron plántulas/plantas
jóvenes, pero también hay ejemplos de plantas maduras que evalúan los
rasgos del pelo radicular y las flores. y la abscisión de la vaina en respuesta al
estrés por P en la soja (Wang et al. 2004; Zhang et al. 2010).
La QTLs para exudados de raíz fueron reportados por Yan et al. (2004)
[exudación ácida (H+)]. Los QTLs para el área foliar y el contenido de clorofila
en el maíz en la etapa del desarrollo del estigma del maíz. Cai et al. (2012)
identificaron QTL tanto para el área foliar como para el rendimiento de grano en
condiciones de bajo contenido de P y un QTL importante que afecta el
contenido de clorofila en condiciones de bajo contenido de P, en una región
genómica en la que QTL que controla los niveles de clorofila en una etapa
temprana de crecimiento se había informado anteriormente. Los rasgos
internos de eficiencia de P claramente son más difíciles de evaluar. El PUE
interno a menudo se infiere de las mediciones generales de la planta y el
contenido de P. Usando 73 líneas de trigo, Ozturk et al. (2005) mostraron que
la PUE (proporción de desarrollo de biomasa de tallos en condiciones de bajo
suministro de P adecuado) para ser correlacionado con el contenido de P en el
tallo en lugar de la concentración en los tallos. Del mismo modo, Sain et al.
(1994) mostraron poco éxito en la selección del PUE basado en
concentraciones más altas de P en plantas de alfalfa cultivadas en suelos
alcalinos. Estas observaciones indican que el incremento de la absorción de P
no es necesariamente conducir a más usos de P interno en genotipos.
Los QTLs para el PUE podrían utilizarse mediante introgresión en variedades
de élite, aunque todavía no se ha hecho en los programas de mejoramiento
(Vinod y Heuer 2012). Los QTL también podrían usarse para identificar genes
involucrados en PUE a través de la clonación basada en mapas, aunque
todavía pocos QTLs han llevado a la identificación de genes subyacentes. Los
QTLs para la longitud de la raíz primaria en B. napus co-localizada con una
región sintenica de Arabidopsis (Bloque E) que contiene el gen LPR2
involucrado en detener el crecimiento de la raíz primaria en respuesta a la baja
concentración de P y el gen PRD involucrado en el alargamiento de la raíz
primaria y lateral (Shi et al. 2013). Un ejemplo reciente de un gen demostrado
experimentalmente que está involucrado en PUE es PSTOL1 que codifica una
proteína quinasa en arroz que originalmente se rastreó a través de un QTL
principal, Sus1, de una variedad tradicional (Gamuyao et al. 2012). Otro
ejemplo interesante en la soja es un QTL que se encuentra tanto en un estudio
de asociación de genoma completo (GWAS) como a través del mapeo de
enlaces, lo que condujo a la identificación de un gen candidato que codifica una
fosfatasa ácida, GmACP1, que posteriormente se demostró que estaba
involucrado en el PUE (Zhang et al. 2014). Los genes relacionados con el PUE
también se pueden rastrear utilizando métodos alternativos, tales como
mutagénesis y microarrays de expresión génica.
Genes relacionados con PUE
Uso de bibliotecas sustractivas de ADNc (Tian et al. 2008); microarrays (Wang
et al. 2002) y mutantes en la utilización de fósforo, se identificó una amplia
gama de genes que responden al estrés de P. Las descripciones recientes
relacionadas con genes involucrados en PUE se encuentran principalmente en
Arabidopsis con homólogos en especies de cultivos como tomate, arroz y maíz
(Calderón-Vázquez et al. 2011; López-Arredondo et al. 2014).
Los genes relacionados con el PUE incluyen factores de transcripción, genes
implicados en la transducción de señales, factores sensibles a las hormonas,
factores metabólicos (por ejemplo, fosfatasas) y proteínas directamente
involucradas en la eliminación de P (por ejemplo, fosfatasas ácidas y
transportadores de P de alta afinidad).
Un gen que puede actuar como regulador central de la respuesta a la baja
concentración de P, es PHR1 / PHL1 (Chiou y Lin 2011; López-Arredondo et
al. 2014). Este gen codifica un factor de transcripción R2R3 MYB-CC que se
une a un elemento P1BS en promotores de genes sensibles a Pi en
Arabidopsis. Se identificaron ortólogos de este gen en arroz y frijol común.
Tiene un efecto en una amplia gama de rasgos: arquitectura raíz,
transporte/asignación de P, producción de antocianinas y acumulación de
almidón. Curiosamente, PHR1 está involucrado en la regulación de miR399, un
microARN que actúa como una señal de larga distancia derivada del tallo hacia
las raíces, donde se dirige a PHO2. La represión de la expresión de PHO2 a su
vez conduce a respuestas de la inanición de P, como la expresión de
transportadores de alta afinidad. Transportadores de alta afinidad codificados
por la familia de genes Pht1 en Arabidopsis, como PHT1;1 y PHT1;4 (Chiou y
Lin 2011), son los principales responsables de la absorción de P en la
rizosfera. Esta familia también está representada en las plantas de cultivo. Por
lo tanto, en condiciones de baja concentración de P, se inducen 14 miembros
en la soja, 5 en el maíz y 4 de un total de 13 en el arroz (López-Arredondo et
al. 2014). Los genes Pht1 también se expresan en otras partes de la planta y,
por lo tanto, estarán involucrados en la movilización de P dentro de la planta.
Por ejemplo, se demostró que AtPT2 (PHT1; 4) se indujo en flores y hojas
senescentes en condiciones de deficiencia de P en Arabidopsis mediante
estudios de genes informadores impulsados por promotores (Karthikeyan et
al. 2002). Algunos genes Pht1 se inducen específicamente en las micorrizas.
En la tabla complementaria 1 se ofrece una visión general de los genes
relacionados con PUE.
Los genes identificados como relacionados con PUE se pueden caracterizar
aún más funcionalmente transformándolos en otras plantas (especies) o
cambiando su expresión en plantas transgénicas. De esta manera, también se
pueden obtener valiosos conocimientos para la selección y/o el desarrollo de
marcadores para la reproducción clásica (Tian et al. 2012). Se demostró que
un gen de resistencia al aluminio ALMT1 del trigo confiere una mejor absorción
de P cuando se expresa en cebada (Delhaize et al. 2009), y en Arabidopsis
AVP1 H + -PPasa aumenta la tolerancia a la sal / sequía del tomate y el arroz al
promover el secuestro de Na+ en la vacuola y osmorregulación (Gaxiola et al.
2011 , 2012) La expresión transgénica de AVP1 H + -PPasa también dio como
resultado un sistema de raíces más grande, lo que condujo a un rendimiento
mejorado de la planta con bajo contenido de P, incluyendo un mayor
rendimiento de brotes y frutos.
Las plantas transgénicas también pueden ser directamente útiles para el
desarrollo de cultivares cuando se desempeñan bien en condiciones
agronómicas con baja disponibilidad de P y preferiblemente también en
condiciones sin estrés por P. Es posible que estas condiciones no siempre se
cumplan, ya que el PUE, como otros rasgos relacionados con el estrés abiótico,
es complejo y los efectos de un solo gen pueden estar acompañados de
compensaciones, particularmente en situaciones de alta disponibilidad de P.
Por ejemplo, con la introducción transgénica del gen DREB1A que confiere
tolerancia a la sequía y al frío, fue necesario ponerlo bajo la regulación de un
promotor inducible por estrés para evitar efectos negativos en el rendimiento en
condiciones normales de crecimiento (Kasuga et al. 2004) La piramidación de
varios genes que contribuyen al PUE puede conducir a una mejora adicional,
pero el equilibrio de los niveles de expresión para un efecto óptimo puede no
ser sencillo. Se han informado algunos ejemplos de enfoques transgénicos
interesantes para mejorar la PUE. López-Arredondo y Herrera-Estrella
(2012) permitieron a Arabidopsis y tabaco metabolizar fosfito (PO33−)
transformándolos con un gen ptxD de oxidorreductasa específica de fosfito de
Pseudomonas stutzeriWM88. Como las plantas normalmente no pueden usar
fosfito para su suministro de P, esto permitiría a este cultivo transgénico
competir con las malas hierbas bajo la fertilización con fosfito. El fosfito podría
administrarse como fertilizante foliar para evitar el enriquecimiento de los
suelos por microorganismos metabolizadores del fosfito, que podrían
proporcionar P en una forma metabolizable por las plantas. Al mismo tiempo,
se informa que el fosfito es útil para controlar algunos patógenos,
particularmente los oomicetos. Bus et al. (2011). Han revisado las
posibilidades de usar fosfito como agente orgánico contra los patógenos. Otra
planta transgénica interesante mejorada para la utilización de una fuente de P
inaccesible fue el algodón que expresaba un gen de fitasa de Aspergillus
ficuum con el promotor específico de raíz pyk10 de Arabidopsis mirosinasa y
una señal del péptido extracelular de zanahoria (Liu et al. 2011). Esto permitió
a la planta excretar fitasa de su sistema de raíces y, por lo tanto, utilizar una
parte significativa del P orgánico en el suelo que está presente como fitato (=
mioinositol hexakisfosfato, que asciende a 4–20, a veces hasta 40% de P o en
suelos). El fitato se adsorbe fuertemente a las partículas del suelo, y precipita
con Fe/Al en suelos ácidos y con Ca en suelos alcalinos. Por lo tanto, no es
fácilmente accesible para las plantas. En el campo, lo más probable es que sea
liberado por microorganismos (Richardson et al. 2011). Sin embargo, una soja
provista de una Arabidopsis, la fosfatasa ácida PAP15 (APasa) acoplada a una
señal de péptido extracelular de zanahoria mostró una actividad de exudación
mejorada que condujo a un mayor rendimiento en suelo con bajo contenido de
ácido P i o una mezcla de arena / fitato (Wang et al. 2010).
Reproducción del PUE relacionada con interacciones con
microorganismos
La sección anterior ya indicaba la importancia de los microorganismos basados
en el suelo en la movilización de P fuertemente unido en el suelo, como el
fitato, poniéndolo a disposición de las plantas (Richardson et al. 2011;
Bulgarelli et al. 2013). Estos microorganismos pueden estar más o menos
asociados con la rizosfera; algunos muestran una relación más íntima con la
planta y se conocen como endófitos. Un ejemplo de un endófito asociado a
raíces fúngicas es el basidiomiceto Piriformospora indica que parece aumentar
la absorción de P de las plantas (Franken 2012). También se producen
endófitos en los tallos, como el muy estudiado hongo clavicipitaceo
Neotyphodiumen en pastos, puede afectar la eficiencia del uso de nutrientes,
incluida la absorción en las raíces, por ejemplo, promoviendo la producción de
exudados (Li et al. 2012; Omacini et al. 2012; McNear y McCulley 2012).
Todavía no está claro si existe un efecto directo de estos endófitos en el estado
de los nutrientes y los informes en la literatura a veces son contradictorios
(Franken 2012; Omacini et al. 2012; McNear y McCulley 2012). Se ha
demostrado que el endófito de Neotyphodium interactúa negativamente con
hongos micorrícicos arbusculares que tienen un papel importante en la
nutrición de P en la planta (Mack y Rudgers 2008; McNear y McCulley 2012),
aunque hay excepciones a esto (Omacini et al. 2012). Aunque se revisó el
potencial del uso de microorganismos que mejoran el estado de P para mejorar
el crecimiento de las plantas (Richardson et al. 2011; Bulgarelli et al. 2013),
todavía se ha publicado poco sobre la mejora de la eficiencia de los nutrientes
de las plantas al seleccionar combinaciones genotipo óptimas de plantas y
microorganismos rizosféricos o endófitos, a excepción de los hongos
micorrícicos arbusculares (AM).
La interacción de la raíz micorrízica con hongos AM puede mejorar la
capacidad de absorción de P de las plantas, ya que las hifas fúngicas pueden
aumentar en gran medida el volumen de tierra recolectada de P,
particularmente para especies con un pobre desarrollo de raíces y pelos
radiculares, como la cebolla (ver la sección de arquitectura de la planta). La
absorción de P por las hifas fúngicas se transporta relativamente rápido a las
células corticales de la raíz. El hongo obtiene carbono de la planta, lo que en
principio lo convierte en una interacción mutualista (simbiosis). La mayoría de
las especies de plantas son capaces de desarrollar micorrizas con hongos AM,
pero los miembros de Brassicaceae y Chenopodiaceae (incluidas las especies
de cultivos, como Brassicas y remolacha) no forman micorrizas. También los
especialistas que forman las denominadas raíces de racimo, como el lupino
(ver la sección sobre arquitectura de plantas) a menudo carecen de micorrizas.
Esto no siempre debe ser el caso. Por ejemplo, Galván et al. (2009) no
encontraron diferencias consistentes en la diversidad de micorrizas entre
cultivos orgánicos y convencionales de cebolla.

El equilibrio entre plantas y hongos en las micorrizas es complejo y existe una

gran variación en el rendimiento entre combinaciones específicas de genotipos
de plantas y hongos, incluidos ejemplos en los que el crecimiento de las
plantas aparentemente se ve obstaculizado por la colonización de micorrizas
(Smith y Smith 2011; en condiciones experimentales de alto contenido de P.
Esto puede estar relacionado con la cantidad de P obtenida por la cantidad de
C proporcionada, pero también puede haber otros efectos más específicos,
como la supresión de la absorción directa de P (DP) a través de la raíz (pelo
radicular) incluso a un nivel bajo de micorrización (y mal funcionamiento de la
vía micorrízica, MP, es decir, absorción de P a través de las hifas fúngicas)
(Smith et al. 2011 , 2012) La funcionalidad ecológica de las micorrizas también
podría consistir en aumentar la competitividad de la planta sin ganancias en el
crecimiento de los brotes en comparación con una situación sin hongos AM
(Smith y Smith 2011).
En los cultivos de mejoramiento genético para PUE, las combinaciones de
hongos de plantas deben mostrar ganancias significativas en el rendimiento del
rendimiento en relación con el estado no micorrícico para los genotipos de
plantas de élite de los mejoradores en situaciones de campo reales. Un
ejemplo extremo de ganancias de rendimiento de micorrizas que no son
directamente útiles desde el punto de vista agronómico es el mutante de maíz
lrt1, que es deficiente en la formación de raíces laterales y muestra un PUE
muy pobre. Esto podría ser corregido en gran medida por las micorrizas, por lo
que el mutante mostró claramente una alta capacidad de respuesta a las
micorrizas, pero como tal no sería una buena base para el desarrollo de
cultivares (Sawers et al. 2008) Sin embargo, podría ser útil para ayudar a
diseccionar los rasgos de las plantas relevantes para la capacidad de
respuesta de las micorrizas de tal manera que estos rasgos puedan luego ser
introducidos con éxito en las líneas de plantas de mejor rendimiento en
términos de rendimiento. Este podría ser un enfoque de investigación valioso
en vista de las complejas interacciones genotipo * ambiente discutidas
anteriormente. Esto se detalla en la siguiente sección sobre fenotipado y
selección.
Fenotipado
Al igual que con el fenotipo de PUE descrito en la sección anterior sobre
detección/prueba, se evaluaron las ganancias de crecimiento como
consecuencia de la micorrización (capacidad de respuesta micorrízica)
midiendo SDW en una serie de genotipos (Hetrick et al. 1996). En vista de las
complejas interacciones entre los genotipos de plantas y hongos mencionados
anteriormente, puede ser difícil separar la respuesta a los hongos AM de otros
rasgos que contribuyen al rendimiento de la planta en condiciones no
micorrícicas (NM), es decir, evaluar la variación positivamente vinculada a la
simbiosis sin sacrificar el rendimiento de rendimiento ya alcanzable bajo NM, y
por lo tanto útil para la cría de rasgos micorrícicos. Como la capacidad de
respuesta micorrízica varía con la disponibilidad de P, sus características solo
pueden evaluarse bien extrayendo parámetros, como la capacidad de
respuesta (absoluta), de una curva de respuesta basada en el crecimiento de la
planta en un rango de concentraciones de P. De esta manera, Janos (2007)
hicieron una distinción entre la dependencia de la planta (es decir, la
disponibilidad de P más bajo a la que las plantas de NM pueden crecer) y la
capacidad de respuesta de la planta (es decir, la diferencia de crecimiento con
las plantas de NM o la eficacia fúngica). Sin embargo, para un cribado eficiente
de una población reproductora, esto requeriría demasiado trabajo. Sawers et
al. (2010) esperaban que la capacidad de respuesta de Janos fuera de mayor
valor para mejorar el rendimiento de las plantas cultivadas en términos de
rendimiento que su dependencia, ya que esta última puede representar en gran
medida la medida en que las micorrizas pueden compensar a las plantas con
PUE básicamente pobre (ver el ejemplo extremo del mutante de maíz lrt1). Por
lo tanto, Sawers et al. (2010) desarrollaron modelos lineales para separar
estos dos tipos de variación, más específicamente la variación en común entre
las plantas M y NM (o NC, no colonizadas) y la variación específica para el
estado NM o M. Utilizaron datos sobre trigo de Hetrick et al. (1992) y maíz de
Kaeppler et al. (2000). Se encontró poca variación específica de micorrizas en
el conjunto de datos de trigo, mientras que se encontraron más valores atípicos
relacionados específicamente con el rendimiento de la planta de micorrizas,
tanto positivos como negativos, entre las líneas de maíz. En el último caso, se
identificó una línea de maíz que respondió negativamente a la micorriza que en
las pruebas posteriores mostró poca capacidad de respuesta en un amplio
rango de disponibilidad de P, mientras que una línea de maíz positiva mostró
un cambio hacia un mayor rendimiento más específicamente relacionado con la
micorriza en condiciones de bajo contenido de P. La disección de la variación
genética común y basada en micorrizas parecería ser aún más problemática
con la cebolla más dependiente de AMF, que tiene un sistema de raíces
bastante débil que carece en gran medida de pelos radiculares (ver sección
sobre la arquitectura de la planta), por lo que es probable una alta dependencia
de las micorrizas. Galván et al. (2011) encontró que la capacidad de respuesta
relativa de las micorrizas (es decir, la diferencia de peso entre las plantas
micorrícicas y no micorrícicas (NM) divididas por el peso de las plantas NM
para cada genotipo de planta) no es adecuada como criterio de reproducción
para la cebolla, ya que se correlacionó negativamente con la biomasa de la
planta NM. Galván et al. (2011) propuso el rendimiento promedio (AP) de las
plantas de micorrizas y NM como índice de selección, ya que se correlacionó
positivamente con la biomasa de las plantas de micorrizas y NM. Además, no
encontraron apoyo para una disminución de la capacidad de respuesta de las
micorrizas con las variedades modernas de cebolla, lo que supuestamente
podría ser una consecuencia de la selección para cultivos intensivos donde la
alta disponibilidad de P puede ir acompañada de un pobre desarrollo de las
micorrizas. Sin embargo, Galván et al. (2009) ya había demostrado que la
micorriza también está bien desarrollada y contribuye a producir en condiciones
de P alto en cebolla, lo que podría estar relacionado con su sistema radicular
poco desarrollado. Sawers et al. (2010) mostraron una disminución en la
capacidad de respuesta micorrízica para los cultivares de trigo en comparación
con las variedades locales más antiguas, como concluyeron Hetrick et al.
(1992) basado en la capacidad de respuesta relativa, que también es poco
probable a partir de su propio modelo de datos de Hetrick et al. (1992) descrito
anteriormente. La prueba de la respuesta micorrízica de los genotipos de
plantas generalmente se realiza en cultivos en macetas en el invernadero.
Además, se informaron experimentos de hidroponía con plantas micorrícicas
(Colpaert y Verstuyft 1999; Oseni et al. 2010), pero en estos casos, se
usaron sustratos sólidos, vermiculita o perlita en combinación con soluciones
nutritivas análogas al enfoque de Ingestad descrito anteriormente (Ingestad y
Lund 1986). Al igual que con el PUE de las propias plantas, se han aplicado
métodos genómicos y de mejora genética asistida por marcadores moleculares
a los estudios de cultivos de micorrizas. Estos se analizan en las siguientes
secciones sobre QTL y genes.
Factores genéticos: QTL y genes.
Utilizando 197 RIL de un cruce entre los endogámicos de maíz, se identificaron
QTL B73 * Mo17, entre los cuales 3 para SDW en condiciones no micorrícicas y
en bajo P y 1 para capacidad de respuesta micorrízica (Kaeppler et al. 2000).
Aunque las líneas diferían en gran medida en la capacidad de respuesta
relativa, los QTLs parecían estar más basados en la variación de la progenie en
PUE en condiciones no micorrícicas que en la variación específicamente
relacionada con la micorriza. Esto fue elaborado modelando en Sawers et al.
(2010), quienes optaron por diferentes combinaciones de líneas, para estudiar
QTLs se enfocaron en la variación de rasgos más específicamente
relacionados con micorrizas que las usadas en Kaeppler et al. (2000). En un
Allium cepa (A. roylei * A. fistulosum), Galván et al. (2011) identificaron varias
QTLs para el rendimiento promedio (AP) entre experimentos en dos años.
Hubo una co-localización de QTL para la biomasa, AP y capacidad de
respuesta micorrízica en dos sitios, en los cromosomas 2 y 3, respectivamente,
y de QTL para biomasa, AP y el número de raíces en el grupo de enlace 9 (este
último LG no pudo ser vinculado a un cromosoma específico por falta de
marcadores adecuados).
Hetrick et al. (1995) utilizaron líneas de sustitución cromosómica en trigo para
localizar regiones genómicas asociadas con la capacidad de respuesta
micorrízica. Varios cromosomas de un cultivar sensible (Cheyenne) confieren
un efecto significativo de las micorrizas sobre el peso seco a un cultivar no
sensible (primavera china). Curiosamente, uno de los cromosomas (5B)
provenientes de otro cultivar que no responde (Hope) también condujo a una
respuesta significativa de crecimiento de micorrizas en este cultivar que no
responde. La aparente complejidad de las interacciones genéticas entre los
cromosomas también fue evidente a partir de la distribución de la respuesta
micorrízica entre las especies relacionadas que tienen el genoma A, B o D del
trigo. Por ejemplo, algunos cromosomas B fueron más efectivos para conferir
capacidad de respuesta micorrízica, pero la especie se cree que es más similar
al ancestro del genoma B del trigo, No se encontró que Aegilops speltoides
respondiera a las micorrizas.
Se ha informado la expresión inducida específicamente de fosfatasas y
transportadores de P en plantas micorrízicas, por ejemplo, el transportador de
P de alta afinidad Pht1; 4 en la planta modelo leguminosa Medicago truncatula
y su ortólogo en la planta modelo de hierba Brachypodium distachyon (Hong et
al. 2012). También se informaron homólogos para las especies de cereales
arroz, maíz, cebada y trigo. En el arroz, se expresaron 10 genes Pht en las
raíces, de los cuales Pht1; 2 y Pht1; 6 disminuyeron en condiciones no
micorrízicas en comparación con las micorrízicas, mientras que Pht1;11 se
indujo en el estado micorrízico (Sawers et al. 2008). Esto podría estar
relacionado con la aparente represión de la vía de absorción directa de fosfato
por la vía micorrízica discutida anteriormente.
Resumen y conclusiones
El PUE es un rasgo complejo para el fitomejoramiento, con muchas
interacciones y compensaciones potenciales con otros factores que afectan el
rendimiento del cultivo, como la eficiencia en el uso del agua y el equilibrio
energético (Jin et al. 2005). Sin embargo, el PUE se puede diseccionar en
rasgos que son más susceptibles de detección y selección. Entre estos se
encuentran los rasgos fisiológicos, como la exudación de ácidos y fosfatasas
de las raíces que permiten la eliminación de P en el suelo, y los rasgos
arquitectónicos principalmente de la raíz. Existen informes sobre el desarrollo
exitoso de variedades PUE para suelos ácidos / fijadores de P en los trópicos y
subtropicales para frijol y soya común, al centrarse en los rasgos
arquitectónicos de la raíz (Lynch 2007; Wang et al. 2010). Aspectos
importantes de la arquitectura de la raíz son el número y la morfología de la
raíz lateral, así como su localización, particularmente en las capas superiores
del suelo, a menudo más ricas en P. Además, la densidad y la longitud del pelo
radicular son particularmente útiles para absorber el P de los suelos.
Las raíces son notoriamente difíciles de estudiar debido a su localización
subterránea. Sin embargo, se han desarrollado métodos de cultivo que
permiten el fenotipado de la raíz del germoplasma para el PUE, que van desde
cultivos simples en macetas hasta sistemas y cultivos hidropónicos sofisticados
que permiten la evaluación tridimensional de la raíz o las actividades de la raíz
en varios compartimentos del suelo (por ejemplo, capas superiores vs. mayor
parte del suelo). En algunos de estos sistemas, la arquitectura raíz puede
incluso observarse in situ. Los refinamientos, como la liberación lenta de
portadores de P, han ayudado a que estos sistemas se comporten más como
los suelos en los campos, incluso los cultivos hidropónicos. Aun así, en el
suelo, el P a menudo está muy heterogéneamente distribuido y, por lo tanto, el
PUE de las plantas es más difícil de evaluar y corroborar en el campo.
Con todos estos sistemas de fenotipado, se han evaluado conjuntos de
genotipos para una amplia gama de cultivos, como maíz, arroz, cebada, trigo,
frijol común, soja y brassicas. Los rasgos medidos incluyen los de la
arquitectura de la raíz mencionada anteriormente, pero también los rasgos del
tallo, como el área de la hoja, el contenido de clorofila y el desarrollo de flores y
granos. Esto ha llevado a la identificación de factores genéticos involucrados
en estos rasgos como QTL. Por ejemplo, se han encontrado QTL para la
relación tallo/raíz, la absorción total de P por planta y el PUE interna (biomasa
por P absorbida). La eficacia de los enfoques de mejoramiento basados en
tales rasgos y QTL a menudo aún debe evaluarse en condiciones complejas y
variables en el campo, pero hay ejemplos de QTL que se localizan junto con
QTL para el PUE en ensayos de campo. Algunos estudios QTL incluso se
realizaron directamente en el campo PSTOL1). Además, se han informado
varios ejemplos potencialmente interesantes de aplicaciones directas de
plantas transgénicas para mejorar la producción de cultivos, aunque estos aún
deben demostrar su valor en condiciones de campo más variables. El
conocimiento de los genes involucrados en la capacidad de respuesta de P
también se podría aplicar en los enfoques de mejoramiento asistido por
marcadores (MAB), la extracción de alelos, etc., pero todavía han aparecido
pocos informes al respecto.
Hay ejemplos claros de compensaciones con el PUE mejorada, como los
costos de carbono de los sistemas de grandes raíces y/o exudación, o un
enfoque en la extensión de la raíz en niveles más altos del suelo a expensas de
capas más profundas para la eficiencia del uso del agua. Sin embargo, las
plantas se han desarrollado con compromisos aparentemente relativamente
pequeños con respecto a otros rasgos, como PSTOL1 en el arroz en el que la
mejora del desarrollo temprano de la raíz también condujo a una mayor
absorción de otros nutrientes y agua. Otro ejemplo es AVP1 en tomate con
tolerancia mejorada a la sal/sequía acompañada de un sistema de raíz más
grande que también mejoró el PUE y los rendimientos de brotes y frutos.
La simbiosis micorrízica es otra oportunidad importante para mejorar el PUE,
particularmente el tipo generalizado que involucra hongos micorrízicos
arbusculares (AM). Los hongos AM (Glomerales) son un grupo difícil de
estudiar, ya que son biótrofos obligatorios, por lo que no pueden estudiarse por
separado de sus huéspedes. Sin embargo, se ha avanzado mucho en
desentrañar la interacción entre los hongos AM y las plantas, y la relevancia
para la adquisición de P de la planta huésped. También se ha demostrado que
es compatible con los enfoques descritos para la identificación de rasgos
involucrados en el PUE: el fenotipado en condiciones más o menos
controladas, e identificación de QTL y genes involucrados en la respuesta
micorrízica. También hay complicaciones específicas que puede ser difícil
seleccionar combinaciones de genotipos de plantas y hongos de élite que
mejoren consistentemente los rendimientos en un rango de niveles de P en el
campo y distinguir el rendimiento de la planta específicamente debido a las
micorrizas de las características de las plantas que trabajan sin colonización
por hongos. Se han informado varias formas de diseccionar la capacidad de
respuesta de la planta a las micorrizas. Además, el rendimiento de las
micorrizas en el campo puede ser incluso más difícil de evaluar y predecir a
partir del trabajo experimental en condiciones controladas que los rasgos
básicos del PUE de las plantas.
En conclusión, la reproducción de PUE parece ser factible al diseccionarla en
rasgos susceptibles de análisis y manipulación genética. Para esto, es
importante tener un sistema de fenotipado óptimo para evaluar los rasgos
arquitectónicos de la raíz, incluido el barrido de P mediante exudaciones de la
raíz y micorrizas. Además de este PUE externo, también será importante
desarrollar métodos de alto rendimiento para diseccionar el PUE interno más
difícil y accesible, ya que esto probablemente será más eficiente, aunque solo
sea para evitar las inversiones que consumen energía en la capacidad de
absorción de P relacionada con el PUE externo.