REPLICACIÓN DEL ADN. Generalidades.

1. Comienza en un origen
2. Es semiconservativa
3. Procede bidireccionalmente
4. Procede en dirección 5´ 3´
5. Es semidiscontinua
6. Es realizada por ADN polimerasas
7. Es muy precisa. Tiene lectura de prueba
8. Utiliza sustratos activados dNTPs
9. Es el proceso enzimático más exacto que se conoce
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La replicación del ADN es catalizada por ADN
polimerasas I. II y III.

Procede en dirección
5’ 3’
Ataque nucleofílico
sobre fosfato alfa
del dNTP entrante

PPi 2Pi
Favorece la reacción de
polimerización, desde punto de
vista energético.

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La replicación comienza en un origen y es bidireccional

Procariotas un sólo sitio de origen

Eucariotas múltiples
sitios de origen

La replicación inicia en muchos sitios en cada uno de los 46 cromosomas

(3.2X109 pb del DNA) en el núcleo de cada célula que inicia el proceso de
división celular. 3
 Replicación del ADN es semidiscontinua y
semiconservativa

La helicasa separa las dos cadenas de forma tal que cada una sirve de plantilla para
la ADN polimerasa en un proceso dependiente de ATP.
La ADN polimersa sintetiza la cadena adelantada de manera continua y la cadena
rezagada como una serie de fragentos de Okazaki.
https://www.youtube.com/watch?v=-EGKrYdQEHQ
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https://www.youtube.com/watch?v=TEQMeP9GG6M
La replicación es muy precisa. Lectura de prueba

Sitio activo
Lectura de prueba
exonucleasa

Es una forma tautómerica

rara de la Citosina (C*) que
aparea con A y se incorpora
en la cadena en crecimiento.

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La replicación es muy precisa. Lectura de prueba

Antes que la polimerasa avance, la

C sufre un cambio tautomérico. El
nuevo nucleótido se aparea de
forma incorrecta.

El 3΄-OH de la cadena en
crecimiento bloquea la elongación
del ADN.

La ADN Polimerasa se desliza hacia

atrás a la posición de la base
apareada incorrectamente y
posiciona su sitio activo
exonucleasa 3΄→ 5΄.

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La replicación es muy precisa. Lectura de prueba

El nucleótido apareado
incorrectamente es removido.

La ADN polimerasa se desliza hacia

adelante y retoma su actividad de
polimerización.

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El ADN es sintetizado por ADN Polimerasas

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PROTEÍNAS NECESARIAS PARA INICIAR LA
REPLICACIÓN DEL ADN

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 ADN polimerasa III
Es la enzima principal de replicación en E. coli

 Velocidad 1000 nt/s

 Requiere cebador: ARN
 Requiere un molde
 Complejo multiproteico:
900 kDa, 10 subunidades
  Polimerasa 5´ 3´
  Exonucleasa 3´ 5´
 2 2 Procesividad

También hay ADN polimerasas IV y V

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 Inicio de la replicación
DnaB (Helicasa) se une a repeticiones de 13 p

DnaC facilita la unión de DnaB

DnaA se une a repeticiones de 9 pb

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SÍNTESIS DE FRAGMENTOS DE OKAZAKI

Las proteínas requeridas para la replicación del

ADN

Helicasa (DNA B)
Proteína de unión a una cadena sencilla (SSB)
una pinza deslizante
ARN polimerasa
ADN girasa

PROTEÍNAS EN EL TENEDOR DE REPLICACIÓN

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 TERMINACIÓN DE LA SÍNTESIS DE LA CADENA LENTA
REMOCIÓN DE ARN Y SELLAMIENTO DE SEGMENTOS DE OKAZAKI – ADN
POLIMERASA I (actividad exonucleasa 5’→ 3’) actividad polimerasa 5’→ 3’

https://www.youtube.com/watch?v=TNKWgcFPHqw

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Terminación de la replicación del cromosoma

Las secuencias Ter estan arregladas de una forma que

crean una trampa a la que se entra pero no se puede
salir.

Al finalizar la sintensis del cromosoma, la

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topoisomerasa IV libera los dos anillos entrecruzados.
 Replicación en eucariotas
 Orígenes de replicación, ARS, o replicadores
 Complejo de reconocimiento del origen ORC
 Requiere otras dos proteínas: CDC6 y CDT1
 Velocidad de replicación  50 nt/seg, 20 veces más
lenta que en E. coli
 Múltiples sitios de origen
 Existen diversas polimerasas:
  Síntesis de primer fragmento okazaki
  Semejante a la polimerasa III
  Semejante a la polimerasa I
 Terminación – Telómeros
 Actividad telomerasa

https://www.youtube.com/watch?v=-EGKrYdQEHQ
Replicación del ADN
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Dinámica de la replicación

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Las moléculas de la replicación

Girasa

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