Guía Parasitología 2019 II

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
DEPARTAMENTO ACADEMICO DE CIENCIAS BASICAS
PARASITOLOGIA
GUIA DE PRACTICA
HELMINTOS
Lombrices Teni a
Esquistosomas
ALUMNO : …………………………………………………………….
PROFESOR:................................................ GRUPO: ………...
LIMA-PERU
2019 - II
FMH-USMP-Parasitología 2019 II
PROPIEDAD INTELECTUAL: Departamento Académico de Ciencias Bésicas-USMP

RESPONSABLE DE LA ASIGNATURA: Mg. Gaudhy Chávez Pasco- Med. Fernado
Chapoñan- Med. Ángela Victoria Yovera Puican.
GUIA ELABORADA POR: Dr. Juan A. Jiménez Chunga
LIMA - PERU
2019 - II
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CONTENIDO Paginas
PRACTICA 1
NORMAS DE BIOSEGURIDAD
I. INTRODUCCIÓN
La bioseguridad es un conjunto de medidas probadamente eficaces para evitar la
adquisición accidental de infecciones con patógenos contenidos en las muestras, así
como los riesgos relacionados con la exposición a agentes químicos, físicos y/o
mecánicos a los que esta expuesto el personal en los laboratorios.
Sólo si las personas que trabajan en los laboratorios conocen las normas de
bioseguridad y las aplican, pueden determinar su propia seguridad, la de sus compañeros
y de la colectividad. El personal de laboratorio debe cumplir con las normas de
bioseguridad y los directivos de la institución deben cumplir con brindar las facilidades
para que éstas sean aplicadas.
Conocer las principales normas para proteger la salud de las personas que
puedan estar expuestas a riesgos relacionados con la exposición a agentes biológicos,
químicos, físicos, y otros en los laboratorios de ensayos, biomédicos y clínicos.
II. AGENTES DE RIESGO

El personal de laboratorio diariamente realiza muchas actividades que pueden
causar enfermedad o daño en él o en las personas que trabajen en ambientes cercanos,
e incluso en sus familiares y la comunidad. Estas enfermedades pueden ser causadas
por:
- Agentes biológicos, transmitidos por ingestión, inhalación, inoculación y por contacto
directo a través de piel o mucosas.
- Agentes físicos y mecánicos, como las temperaturas extremas, radiaciones ionizantes,
contactos eléctricos o conexiones defectuosas y vidrios resquebrajados de recipientes
dañados o tubos rotos.
- Agentes químicos que pueden ser corrosivos, tóxicos, carcinogénicos, inflamables,
explosivos.
III. PRINCIPIOS BÁSICOS DE BIOSEGURIDAD
El término contención se utiliza para describir métodos seguros para manejar

materiales infecciosos en el ambiente de laboratorio donde son manipulados o
conservados.
El objetivo de la contención es reducir o eliminar la exposición de quienes trabajan
en laboratorios u otras personas y del medio ambiente externo a agentes potencialmente
peligrosos.
IV. NIVELES DE CONTENCIÓN
El elemento mas importante de la contención es el cumplimiento estricto de las

practicas y técnicas microbiológicas estándar de procesamiento de las muestras de
laboratorio. Cuando las practicas de laboratorios no son suficiente s para controlar los
riesgos asociados a un agente o a un procedimiento de laboratorio particular, es
necesario aplicar medidas adicionales.
Estas medidas adicionales corresponden a los equipos de seguridad diseñados
para la protección del personal y practicas de manejo adecuadas (barrera primaria), un
diseño de la instalación y características de la infraestructura de los locales (barrera
secundaria). Estos niveles estan definidos de la siguiente manera:
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 Contención Primaria:
Constituyen la primera línea de defensa cuando se manipulan materiales biológicos,

químicos y/o físicos.
Las barreras de contención primaria son:

- Equipos de protección personal (EPP).
- Técnicas de laboratorio estándar y normas de higiene personal.
- Inmunización (vacunación).
- Esterilización y desinfección de instrumentales y superficies.
Es la protección del personal y del medio ambiente inmediato contra la exposición a

agentes infecciosos y/o productos químicos de riesgo. Es provista por una buena
técnica microbiológica y el uso apropiado del equipo de seguridad. El uso de vacunas
aumenta el nivel de protección personal.
 Contención secundaria:
Se refiere al diseño y construcción de un laboratorio, lo que en seguridad biológica se

conoce como contención o barrera secundaria, contribuye a la protección del personal
de laboratorio, personas que se localizan fuera del laboratorio y protege a las personas
de la comunidad frente a posibles escapes accidentales de agentes infecciosos.
Los modos de transmisión en el laboratorio pueden ser insidiosos y algunas veces

complicados, debido a que los vehículos y rutas de transmisión difieren de los modos
clásicos.
El personal de Laboratorio está frecuentemente expuesto a niveles muy altos de los

agentes infectantes, por lo que los periodos de incubación pueden ser mas cortos que
los del mismo tipo de infección provocada por una exposición corriente.
TIPOS DE LABORATORIO CON RELACION AL NIVEL DE BIOSEGURIDAD

(NBS)
NBS 1:
El personal de laboratorio cuenta con una capacitación especifica acerca de los

procedimientos realizados en el laboratorio y es supervisado por una persona con
capacitación general en microbiología o una ciencia relacionada. Adecuado para agentes
biológicos del grupo 1.
NBS 2:
Se aplican normas similares at NBS 1 y es adecuado para trabajos que involucran agentes
biológicos de riesgo 2 con potencial moderado para el personal y el medio ambiente.
NBS 3:
Es aplicable a las instalaciones clínicas, de diagnóstico, enseñanza, investigación o

producción en las que se llevan a cabo trabajos con agentes biológicos del grupo 3 que
pueden producir una enfermedad grave o potencialmente como resultado de la
exposición por vía de inhalación.
NBS 4:
Debe aplicarse para trabajar con agentes peligrosos y exóticos que poseen u n riesgo
5
individual alto de producir infecciones de laboratorio transmitidas por aerosoles y
enfermedades mortales. El laboratorio de nivel de bioseguridad 4 tiene características

especiales de ingeniería y diseño para evitar la diseminación de los microorganismos en
el medio ambiente. Este NBS permite manipular agentes biológicos del grupo 4.
CLASIFICACION DE LOS MICROORGANISMOS POR GRUPO DE RIESGO
Agente biológico del grupo 1
Es poco probable que cause una enfermedad en el hombre. Es decir, los que no
producen enfermedad en el ser humano y de susceptibilidad conocida y estable a los
antimicrobianos. Ejemplo: E. coli K12, Saccharomyces cerevisiae, microorganismos que
se utilizan en la industria de la alimentación para la elaboración de quesos, embutidos,
entre otros.
Puede causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro para los
trabajadores, siendo poco probable que se propague a la colectividad y existiendo
generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Como algunos que, perteneciendo a la
propia flora habitual del hombre, son capaces de originar patología infecciosa humana de
gravedad moderada o limitada. Ejemplo: Staphylococcus epidermidis, Salmonella sp,
entre otros. Parásitos: los estados infecciosos de los parásitos han causado infección por
ingestión, penetración por la piel o mucosas o inyección accidental. Las preparaciones
que se saben libres de los estados infectivos no requieren de este nivel de contención.
Ejemplo: Trypanosoma cruzi, Cryptosporidium, Necator, Strongyloides, Taenia solium.
Puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro para los
trabajadores, con riesgo de que se propague a la colectividad y existiendo frente a él
generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Implican patología grave, de difícil y largo
tratamiento, que pueden curar con secuelas y ocasionalmente producir la muerte. El
mayor y mas frecuente peligro que entrañan éstos es la infección adquirida a través de
aerosoles y por fluidos biológicos. Ejemplo: /\I. tuberculosis, Brucella sp, Coxiella burneti,
Influenza A N1H1, entre otros.
El laboratorio debe tener características de diseño e ingeniería especiales. Sin embargo, se

reconoce que algunas instalaciones existentes pueden no presentar todas las
características recomendadas para el nivel de bioseguridad 3 (por ejemplo, zona de
acceso con doble puerta y penetraciones selladas).
En esta circunstancia, se puede lograr un nivel de seguridad aceptable para la practica de

procedimientos de rutina. La decisión de implementar esta modificación a las
recomendaciones del nivel de bioseguridad 3 debe solamente tomarla el coordinador o
jefe del laboratorio.
Aquel que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para
los trabajadores, con muchas probabilidades de que se propague a la colectividad y sin
que exista generalmente frente a él profilaxis o tratamiento eficaz.
Normalmente son microorganismos de dosis infectiva baja y altamente contagioso.
Ejemplo: Arenavirus como el que produce la fiebre de Lassa, Machupo, Ebola, Hantavirus
y el VIN.
6
PRECAUCIONES DE TRABAJO
1) Las puertas del laboratorio deberán estar cerradas y el acceso at mismo deben estar
restringido mientras se lleven a cabo trabajos con materiales biológicos. La puerta
deben portar emblemas que digan: "Prohibido pasar, Peligro biológico".
2) El laboratorio deberá ser mantenido limpio, ordenado y libre de materiales extraños.
3) No se permitirá comer, beber, fumar y/o almacenar comidas así como el uso de
cualquier otro ítem personal (Ej. cosméticos, cigarrillos) dentro del área de trabajo.
4) Usar bata, chaqueta o uniforme dentro del laboratorio. Esta ropa protectora
deberá ser quitada inmediatamente antes de abandonar el área de trabajo.
5) Antes de iniciar la tarea diaria asegúrese que la piel de sus manos no presente
cortes, raspones y otras lastimaduras, en caso que así sea cubrir la herida de manera
conveniente antes de colocarse los guantes.
6) Usar guantes de látex de buena calidad para todo manejo de material biológico o
donde exista aunque sea de manera potencial el riesgo de exposición a sangre o
fluidos corporales. Cambiar los guantes de látex toda vez que hayan sido
contaminados, lavarse las manos y ponerse guantes limpios. Una vez usados los
guantes de látex deberán ser colocados dentro del recipiente con solución
descontaminante.
7) No tocar los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas.
8) No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar de trabajo con los guantes
puestos.
9) El uso de agujas, jeringas y cualquier otro instrumento similar deben ser
restringido a su uso indispensable. Las agujas y otros elementos punzantes deberán
ser descartados en un recipiente resistente y destinado a tal fin.
10) Todas las muestras deben ser tratadas como altamente infecciosas para evitar
posibles contagios.
11) Los procedimientos deberán ser realizados de manera tal que sea nula la creación de
aerosoles, gotas, salpicaduras, etc.
12) Bajo ninguna circunstancia se pipeteara sustancia alguna con la boca, para ello se
usaran pipeteadores automáticos.
13) Las superficies del área de trabajo deberán ser descontaminadas cuando se termine la
tarea diaria. Usando para tal efecto una solución de hipoclorito de sodio en
concentración adecuada.
14) El recipiente para descontaminar especímenes deben contar con tapa de seguridad
para todo traslado fuera del lugar de trabajo. En ese caso el exterior del recipiente
deberá ser mantenido libre de toda contaminación con sangre usando solución
decontaminante.
15) El desecho de los fluidos orgánicos puede efectuarse por las cañerías habituales una
vez que estos hayan sido c onvenientemente decontaminados.
16) Lavar las manos con jabón (liquido o sólido suspendido) y agua inmediatamente
después que el trabajo haya sido terminado. Si los guantes de látex están
deteriorados, lavar las manos con agua y jabón después de quitarlos.
17) Informe inmediatamente a su superior de cualquier accidente ocasionado con
elementos del laboratorio.
7
PRACTICA 2
METODOS DE DIAGNOSTICO PARASITOLÓGICO
I. INTRODUCCIÓN
Puesto que el diagnóstico de la parasitosis intestinal depende del hallazgo de
huevos o larvas de helmintos y quistes o trofozoítos de protozoos en heces, la colección y
el manejo adecuado de las muestras son indispensables para la búsqueda e
identificación de los parásitos en el laboratorio.
Son factores que interfieren en el examen, la ingestión de medicamentos previa a

la colección y las muestras viejas o conservadas en forma inadecuada. La cantidad de
heces para un examen rutinario es de el tamaño de una nuez o de cinco a seis
cucharadas. Las muestras se depositan en un recipiente de boca ancha, con tapa
hermética y limpia, no debe contaminarse con agua, orina o cualquier otro material
extraño; no debe obtenerse de la taza del baño, ni del suelo. En lactantes, la muestra se
obtiene mediante la cucharilla recta.
Las muestras deben ser etiquetadas con el nombre del paciente, hora de
colección y fecha. Generalmente se recomienda examinar tres muestras en serie y en
días sucesivos. Las heces blandas, diarreicas y liquidas, deben examinarse dentro de las
primeras horas de haber sido colectadas, si esto no es posible, las heces deben
depositarse en una solución conservadora. Ej.: Formol 10%, alcohol polivinilico (PVA),
merthiolate — yodo (MIF) o fenol-alcohol-formol (PAF). Las heces formadas pueden ser
examinadas durante el mismo día de su colección. Si no es posible pueden ser
refrigeradas durante 24 horas o conservadas (una parte de material fecal por tres de la
solución conservadora).
II. DIAGNÓSTICO
1. Examen directo
Principalmente se busca en muestras frescas, la presencia de formas evolutivas
de parásitos de tamaño microscópico sean estos trofozoítos, quistes de protozoos:
Entamoeba histolytica, Giardia intestinalis, Balantidium coli, etc.; así como larvas
(Strongyloides stercoralis), o huevos de helmintos: Ascaris lumbricoides, Trichuris
trichiura, Hymenolepis nana, Taenia sp., Fasciola hepatica, etc.).
Elementos normales: En un examen microscópico suelen encontrarse como

elementos normales estructuras reconocibles y otras no, fruto de la ingestión de
alimentos. Las mas frecuentes son: Fibras vegetales, Cristales de oxalato de calcio,
Granos de almidón, esporas de hongos, fosfato amónico—magnesio, granos de polen,
fibras musculares lisas, fibras musculares estriadas, cristales de ácidos grasos, grasa
neutra, abundantes bacteria.
MATERIALES
• Muestras de heces frescas/fijadas en formol 100
• Lamina portaobjeto y laminilla cubreobjeto.
• Mondadientes
• Guantes y mascarillas.
• Suero fisiológico (SF) 0.85›O
• Lugol
• Papel lente
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• Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol)
• Microscopio de luz.
PROCEDIMIENTO
1. Recolecte la muestra de heces en un envase limpio y tapela. Asegúrese de no

mezclar papel higiénico u orina con la muestra.
2. Transporte la muestra hasta el laboratorio a temperatura ambiente.
3. Coloque una gota de salina en una lamina portaobjeto.
4. Añada una cantidad pequeña de muestra de heces utilizando un aplicador de
madera y mézclela con la solución salina. Proceda igual agregando lugol.
5. Coloque un cubreobjetos sobre la muestra y examine bajo el microscopio (10X é
40X).
6. Evalué la muestra y determine si hay parásitos presentes. El diagnostico definitivo
se logra demostrando la presencia de parásitos. En algunas ocasiones es
necesario hacer exámenes repetidos en días consecutivos antes de establecer que
la muestra esta negativa.
ESQUEMA:
SF Lugol
Tinción
Movilidad
Vocuolas
(Trofozoítos)
Núcleos
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2. Métodos de concentración
Este método permite concentrar quistes de protozoarios, larvas y huevos de

helmintos contenidos en las heces, para obtener una mayor cantidad de parásitos
mediante centrifugación, sedimentación, o flotación. Las mas usadas son s edimentación
espontanea, Ritchie, Willis, Faust, entre otras.
A. MÉTODOS DE FLOTACIÓN
Técnica de Willis
Este método se basa en la propiedad que tiene algunos quistes de protozoarios y
huevos de helmintos de flotar en la superficie de una solución saturada de cloruro de
sodio debido a su menor densidad.
Material
• Muestra de heces fresca.
• Tubo de ensayo y gradillas
• Lámina portaobjeto y cubreobjeto.
• Guantes y mascarillas
• Solución saturada de Cloruro de sodio (NaCl)
• Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol, lugol)
• Lugol.
Procedimiento
Colocar en un tubo de prueba uno o dos gramos de heces. Anadir 4 ml de
solución saturada de NaCl. Emulsionar con una bagueta y completar con la misma
solución el tubo hasta que en el borde se forme un menisco, déjelo reposar durante 20
minutos.
Se toma la muestra cubriendo el tubo con un cubreobjeto, en el se adhieren los
protozoarios. Hacer una observación microscópica de la muestra en una lamina con lugol.
B. MÉTODO DE CENTRIFUGACIÓN Y FLOTACIÓN
Técnica de Faust modificada

Se basa en que los quistes y/o huevos de los parásitos flotan en la superficie por
ser de menor densidad que el sulfato de zinc a 33,3%, cuya densidad es 1180. Es útil
para la búsqueda de quistes y/o huevos de parásitos y excepcionalmente se observan
larvas. Se recomienda controlar la densidad del sulfato de zinc y usar agua filtrada para el
lavado previo de la muestra.
Materiales
• Tubo de ensayo 13 x 100 mm
• Gradillas
• Sulfato de Zinc USP 33,3 g
• Agua destilada tibia 100 ml
• Muestra de heces frescas
10
• Lugol
• Microscopio de luz
Procedimiento
1. Preparar una suspensión fecal en un tubo de prueba, completar el volumen a 10
ml con agua destilada.
2. Centrifugar a 2500 RPM durante un minuto y decantar el sobrenadante; repetir el
procedimiento anterior tres veces (hasta que el sobrenadante este claro).
3. Agregar la solución de sulfato de zinc 2 ml, mezclar bien y completar con la misma
solución.
4. Centrifugar a 2500 RPM.
5. Luego con un asa de platino tomar una o dos asadas del material
flotante (superficie) y colocarlo una lamina portaobjeto.
6. Agregar una gota de lugol y cubrir la preparación con una laminilla cubreobjeto
7. Observar al microscopio.
Película
superficial
Sulfato de Zinc
Sedimento
C. MÉTODO DE CONCENTRACIÉN: RITCHIE
Se basa en la concentración de quistes y huevos por sedimentación mediante la

centrifugación, con ayuda de formol (fijador) y éter (disuelve las grasas de las heces) para
separar y visualizar los elementos parasitarios.
Procedimiento:
1. Se mezcla 1 g de heces con 8 ml. de solución salina en un tubo. Homogenizar.

Centrifugar a 2000 RPM (revoluciones por minuto) por 2-3 minutos y decantar
(repetir 2 veces, hasta que el sobrenadante este claro).
2. Decantar el sobrenadante y agregar at sedimento 6 ml. de formol at 10%.
Homogenizar. Reposar 5 minutos.
3. Luego se agrega 3 ml. de éter sulfidrico y se agita con cuidado (usar un
tampón).
4. Centrifugar 3 min. a 3000 RPM.
5. Se rompe la capa de detritus y se decanta.
6. Se toma una gota del sedimento y se prepara el examen directo con lugol.
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Eter
Restos Lipidos
disueltosfdetritusJ
Formalina
Sedimento
Par:isitos
D. TÉCNICA DE GRAHAM
Se usa para la búsqueda de huevos de Enterobius vermicularis y consiste en
aplicar el lado adhesivo de un pedazo de cinta sobre el área perianal, despegar el mismo
y volver a pegarlo sobre la lamina portaobjeto.
En el laboratorio, se desprende la cinta engomada del frotis pen anal por un

extremo, se agrega solución de tolueno, hidróxido de sodio 2% en solución salina,
aplicando 1 é 2 gotas de la sustancia elegida que clarificara la muestra y que permitirá
una mejor observación de los huevos y/o adultos de E. vermicularis. Es necesario
observar la lamina en su totalidad. Observar at microscopio, huevos de otros helmintos,
principalmente huevos de Taenia sp., Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura entre otros.
3. Métodos diagnósticos de hemo e histoparásitos
Después de las heces, la sangre es la muestra mas estudiada. La presencia de

parásitos puede no ser constante. Los métodos "estándar" mas empleados son:
Extensión fina y preparación de gota gruesa. Otras posibilidades: Extensión en fresco,
Movilidad (Trypanosomas). Familiarizar al estudiante con las diferentes técnicas de
detección directa para el diagnostico de hemo e histo-parásitos.
METODOS DE EXÁMENES PARA INVESTIGACIÓN DE PARÁSITOS HEMÁTICOS

Para estos exámenes se utiliza sangre extraída del pulpejo del dedo o de la vena
en este caso se debe utilizar con anticoagulante y las preparaciones pueden ser hechas
en extensión o frotis en gota gruesa.
Frotis
• Se prepara de modo que las células sanguíneas se dispongan planas sobre la
superficie del vidrio.
• Se pretende que las células no se amontonen, que su espesor no supere una
célula.
• Todos los elementos quedan un poco aplanados (x tamaño).
• Las proteínas séricas (incluyendo la hemoglobina) deben fijarse previamente
• Estas preparaciones son muy útiles para estudiar detalles de hematíes y parásitos
sanguíneos.
• Principal limitación: Escasa cantidad de sangre estudiada.
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Gota gruesa
• Contiene entre 6-20 veces mas cantidad de sangre que la extensión.
• Se extiende sobre un área de aproximadamente 15 x 12 mm.
• No se fija antes de la tinción.
• Se somete a un tratamiento de deshemoglobinización.
• La rotura de los hematíes y la pérdida de su hemoglobina permite la observación
microscópica de otras estructuras, incluyendo parásitos.
• Resulta útil para diagnostico rápido de parasitemias leves.
• No es muy adecuado para estudios morfológicos linos.
Importante:
• Portaobjetos limpios y bien desengrasados.
Sangre fresca.
• Punción de dedo.
• Punción lóbulo de la oreja.
• Punción venosa y realización inmediata.
• Realizar extensión.
Secado al aire y eventualmente en estufa 37º C.

• Fijación (previa a tinción) o no.
Coloración de frotis con colorante Wright

- Cubra el frotis con el colorante.
- Déjelo actuar 1 o 2 minutos (EI alcohol metílico que es el disolvente del colorante actúa
como fijador)
- Luego agregue una gota de agua taponada y sin que se derrame mezcle bien soplando
suavemente, deje reposar de 5 a 7 minutos,
- Lavar con chorro débil de agua corriente y déjese secar.
- Observar con objetivo de inmersión.
Coloración de gota gruesa

- Para colorear con Wright, la preparación debe ser previamente hemolizada, para l o cual
a la preparación ya seca, se Ie agrega agua y se deja un tiempo hasta que toda la
hemoglobina de los glóbulos pase at agua.
- Verter el agua suavemente y dejar secar.
- Colorear en la forma indicada para el frotis.
- Si se usa el colorante Giemsa, se sumerge el portaobjeto en el colorante, sin hemólisis
previa, luego del tiempo necesario (variable según el colorante) se lava con cuidado y se
deja secar.
13
ESQUEMAS (PRACTICA 2)
14
PRACTICA 3
CARACTERISTICAS MORFOLÓGICAS
DE PROTOZOARIOS Y HELMINTOS
I. INTRODUCCION
Los parásitos intestinales se identifican rutinariamente por sus características
morfológicas en los análisis de laboratorio de la materia fecal, conocidos como
examen coprológico, mediante observación microscópica en montajes húmedos con
solución salina o con solución de lugol como colorante.
También se pueden hacer extendidos para realizar posteriormente coloraciones
permanentes, como la coloración de hematoxilina férrica o la coloración tricrómica de
Gomori, los cuales facilitan la identificación al revelar detalles estructurales no
detectables en los montajes húmedos.
En algunos casos se pueden tomar biopsias intestinales para identificar la
patología producida por el parasito y observarlo en el tejido, en este caso se puede
utilizar la coloración de hematoxilina-eosina, que aunque no es una coloración
especifica para parásitos permite detectar algunos detalles del parasito buscado.
Los protozoos intestinales se presentan generalmente bajo tres formas de vida:
1. El trofozoíto o forma vegetativa, que generalmente es el que produce la patología.
2. El quiste o forma de resistencia que desarrolla el parasito para poder sobrevivir en

condiciones adversas.
3. El prequiste que es una forma intermedia.
Todos los protozoos que se transmiten por vía oro-fecal presentan formas
quísticas, mientras los que se transmiten por contacto intimo o por vectores,
generalmente no presentan esta forma de resistencia.
En el intestino humano se pueden encontrar protozoos patógenos y protozoos

comensales, la aparición de estos últimos puede deberse a varios factores como son
las condiciones de salubridad e higiene y factores inmunológicos; su aparición, aunque
no amerita tratamientos para su erradicación, puede dar una idea de estas condiciones
en los pacientes, por Io tanto en los análisis de laboratorio general mente se informa su
presencia.
MATERIAL
• Heces frescas/fijadas en formol 10%

• Laminas coloreadas con hematoxilina férrica, tricrómica de Gomori de frotis de
heces
• Pipetas, baguetas, guantes, mascarilla
• Suero fisiológico 0.85% y lugol
• Aceite de inmersión, laminas portaobjeto y laminillas cubreobjeto
• Papel lente
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III. CARACTERISTICAS DE ALGUNOS PARASITOS INTESTINALES
Conocer microscopicamente las características morfológicas de los principales

parásitos del intestino humano en extendidos de materia fecal en montaje húmedo.
1. Quiste de Entamoeba coli

2. Quiste de Endolimax nana
3. Quiste de lodamoeba butschlii
4. Quiste de Chilomastix mesnili
5. Quiste de Giardia intestinalis
6. Quiste de Blastocystis hominis
7. Huevo de Fasciola hepatica
8. Huevo de Taenia sp.
9. Huevo de Hymenolepis nana
10. Huevo de Ascaris lumbricoides
11. Huevo de Trichuris trichiura
12. Huevo de Enterobius vermicularis
13. Huevo de Ancylostoma duodenale y/o Necator americanus (uncinarias)
14. Huevo de Diphyllobothrium sp.
15. Larva de Strongyloides stercoralis
Observación a 100X y 400X de aumento (Figura 1 y 2).
1. Entamoeba coli.“ en los quistes, de mayor tamaño de 10 a 35 micras (pm) de

diámetro con mas de cinco núcleos y presencia, en ocasiones de barras
cromidiales finas como astillas en el citoplasma. En las preparaciones teñidas con
lugol se suele apreciar vacuolas yodófilas.
2. Endolimax nana.“ El quiste oval o redondeado de 8-10 pm de tamaño,

generalmente, presenta cuatro núcleos. La preparación tenida con lugol permite
observar los núcleos como puntos mas brillantes.
3. lodamoeba butschlii.“ El trofozoíto mide de 8 a 20 micras y el quiste de 5 a 14 pm.

En las preparaciones teñidas con hematoxilina férrica o Gomorri-Trichrome se
observa una vacuola vacía en el citoplasma y el núcleo presenta una cariosoma
grande que emite fibrillas hacia la membrana nuclear. En la preparación tenida
con lugol, la vacuola se aprecia tenida (color marrón) debido a su contenido de
glucógeno (vacuola yodofila).
4. Giardia intestinalis”. El quiste es ovalado y mide de 10 a 12 pm en su diámetro

mayor, en las preparaciones teñidas con lugol, tiene una membrana quística doble
y se distinguen de dos a cuatro núcleos, el axostilo y en ocasiones los cuerpos
parabasales.
5. Chilomastix mesnili”. El quiste tiene forma redondeada con una prominencia que l o
asemeja a un limón y mide de 6 a 10 pm, presenta doble membrana y en su
interior se observa los elementos descritos en el trofozoíto.
6. Blastocystis hominis. Mide alrededor de 8-10 pm. Presenta gran vacuola central
que ocupa el 50 a 95% de las células y restringe el citoplasma a un espacio
periférico que contiene los núcleos en numero de 2 a 5.
16
7. Ascaris lumbricoides.” Huevo: forma ovalada con cubierta mamelonada. Identificar

huevo: Fértil, infértil, decorticado.
Trichuris trichiura.” Huevo: de forma elíptica, de color parduzco cuya dimensión

alcanza de 40 a 50 pm en su diámetro mayor. Presentan una envoltura gruesa y
con tapones en ambos polos.
9 Enterobius vermicularis.“ Huevos: distinga la forma plana-convexa a cada lado y el

tamaño que alcanza de 50 a 60 pm de largo por 20 a 30 pm de ancho; en el
interior reconozca la larva.
10. UNCINARIOSIS: infección intestinal producida por los nematodos Ancylostoma

duodenale y Necator americanus, conocidos como anquilostomoideos; se
localizan en el intestino delgado del hombre sobre todo en el yeyuno.
a. El término uncinaria se refiere a la curvatura del extremo anterior a manera
de gancho, con capsula bucal con dientes (Ancylostoma) o placas
cortantes (Necator).
b. Ancylostoma duodenale y Necator americanus‘. Huevo: de uncinarias de
forma oval, con cascara delgada y traslucida y con blastómeros; m iden
de 60 a 70 pm por 30 a 40 pm.
11. Taenia sp‘. Huevo: de forma esférica, de 35 a 40 pm de tamaño, con una cascara
gruesa y radiada conteniendo un embrión hexacanto u oncósfera en este distinga
los ganchos.
12. Diphyllobotrium sp.” Huevo: de forma ovalada y distinga en ellos la cubierta

gruesa y en uno de sus polos el opérculo. Los huevos de D. pacificum miden 50-
60 x 36-40pm, mas pequeñas que D. latum (59-75 x 42-45pm).
13. Hymenolepis nana Huevo: de 30 a 40 pm de diámetro, que se caracteriza por

presentar corteza gruesa, transparente, membranas, provista de dos mamelones
polares de donde nacen tres pares de filamentos, contiene un embrión hexacanto
con ganchos dispuestos en paralelo.
14. Fasciola hepatica.” Huevo de 120 a 150 pm, de forma ovalada, con cubierta gruesa
y en uno de sus polos el opérculo.
15. Strongyloides stercolaris.“ Larva rabditoide: OBSERVE en preparados de heces

larvas de 200 pm de longitud; en la parte anterior localice capsula bucal corta y un
esófago con un bulbo posterior.
17
18
PRACTICA 4
IDENTIFICACIÓN DE AMEBAS INTESTINALES
I. INTRODUCCION
Las amebas son organismos eucariontes unicelulares. Presentan locomoción por

seudópodos. Su ciclo biológico incluye dos fases: trofozoíto (forma móvil y vegetativa) y
quiste (forma inmóvil y de resistencia). Su reproducción es por fisión binaria y múltiple. La
forma infectante es el quiste mientras que las formas diagnosticas son tanto quistes como
trofozoítos.
La vía de infección de estas parasitosis es la oral y el mecanismo de transmisión
es la ingestión de alimentos contaminados con quistes. Amebas del género Entamoeba
son las que pueden parasitar el lumen intestinal del hombre: Entamoeba histolytica,
Entamoeba dispar, Entamoeba polecki, Entamoeba coli y Entamoeba hartmanni. De
estas solo E. hisfolytica es reconocida como patógena (Figura 3).
AMEBA PATOGENA
Entamoeba histolytica
Características morfológicas
Presenta dos formas evolutivas: Trofozoíto: viven en el intestino grueso del ser
humano pudiendo invadir y atravesar la mucosa intestinal. Mide de 15 a 30 pm. El
trofozoíto ameboideo con membrana citoplasmática, un citoplasma dividido en una parte
externa hialina y transparente casi sin granulaciones (ectoplasma) y otra interna muy
granulada con orgánulos celulares (endoplasma). EI núcleo es esférico y con cromatina
muy pequeña en el centro (puntiforme), llamado cariosoma. Además presenta cromatina
adherida a la cara interna de la membrana nuclear, distribuida en forma mas o menos
homogénea. Quiste: forma de resistencia, se eliminan at exterior con las heces. El quiste
maduro tetranucleado es la forma infectante y mide de 10 a 20 pm de diámetro. Los
estadios de prequiste con 1-2 núcleos con las características nucleares descritas en la
forma vegetativa y cuerpos cromidiales con extremos romos.
Diagnóstico parasitológico
Examen microscópico de muestra de heces, para demostrar la presencia de

trofozoítos o quistes mediante el examen directo de la muestra en solución salina, lugol o
coloración (tricrómica de Gomori o hematoxilina férrica) o su demostración en biopsia de
la mucosa intestinal o hepática.
AMEBAS NO PATOGENAS
+ Entamoeba coli
• Se ubica en el ciego y colon y su incidencia es muy alta. Trofozoíto de 15-50 pm.

Rango usual 20-25 pm. Coloreado con hematoxilina férrica: citoplasma granular
indiferenciado. Bacterias en las vacuolas alimenticias. D iagnóstico: núcleo con
19
aglomeraciones irregulares de cromatina periférica, con cariosoma grande y de
posición excéntrica. Quiste: De 10-35 pm. Rango usual de 12-15 pm.
Redondeados u ovales con doble envoltura. Ocho núcleos como máximo, visibles
fácilmente. En los quistes inmaduros se observan los cuerpos cromidiales en
forma de aguja y haces de extremos irregulares. Vacuolas de glicógeno e color
caoba at teñirse con lugol.

trofozoítos o quistes mediante el examen directo de la muestra en solución salina, lugol o
coloración (tricrómica de Gomori o hematoxilina férrica).
+ L odamoeba butschlii
• Ubicada en el intestino grueso del hombre. Quiste: mide de 5-20 pm, presenta una
vacuola de glucógeno, de bordes irregulares. Posee un núcleo único relegado a
una posición lateral por la vacuola caracterizada por carecer de cromatina
periférica con cariosoma grande central de bordes irregulares.

quistes mediante el examen directo de la muestra en solución salina, lugol o coloración
(tricrómica de Gomori o hematoxilina férrica).
+ Endolimax nana
• Es la ameba mas pequeña del intestino. Quiste: Mide de 5-14 pm. Presenta cuatro
núcleos sin cromatina periférica y con un gran cariosoma ubicado hacia un lado
del núcleo.

quistes mediante el examen directo de la muestra en solución salina, lugol o coloración
(tricrómica de Gomori o hematoxilina férrica).
+ Blastocystis hominis
• Es un protozoario que habita el intestino del hombre y de otros animales.

Asociado a sintomatología gastrointestinal inespecífica. Posee seudópodos de
locomoción y de alimentación; se multiplica por fisión binaria, endodiogenia,
esquizogonia. Presenta tres formas morfológicas diferentes: vacuolar, granular y
20
ameboide.
• Mide alrededor de 8-10 pm. Presenta gran vacuola central que ocupa el 50 a 95%
de las células y restringe el citoplasma a un espacio periférico que contiene los
núcleos en número de 2 a 5.
II. MATERIAL
• Muestras de heces fijadas en formol 100 con quistes de amebas
• Láminas portaobjeto
• Laminillas cubreobjeto
• Lugol
• Láminas coloreadas con hematoxilina férrica o tricrómica: Entamoeba histolytica
(quiste y trofozoito), Entamoeba coli, (quiste y trofozoito), lodamoeba butschlii,
(quiste y trofozoito), Endolimax nana, (quiste y trofozoito), Blastocystis hominis
(quiste).
• Aceite de inmersión
• Papel lente
21
AMEBAS DE VIDA LIBRE
I. INTRODUCCION
Las amebas de vida libre (AVL) se encuentran ampliamente distribuidas en la

naturaleza. Se han detectado amibas de vida libre en redes publicas de agua, albercas,
estanques, lagos, ríos, aguas termales, lodos, suelos desnudos y encharcados, canales
artificiales, aguas de desecho industrial, redes de agua potable, agua embotellada,
unidades dentales, de diálisis, fisioterapia, y aire acondicionado, así como en materia
fecal de diversos animales. Algunas especies pueden encontrarse en aguas saladas.
Adicionalmente, Naegleria y Acanthamoeba han sido aisladas en tracto respiratorio de
sujetos con y sin datos de infección en vías respiratorias. Las AVL son capaces de
producir enfermedades en el hombre como la meningoencefalitis amebiana aguda o
primaria (Naegleria fowleri) y la meningoencefalitis amebiana crónica o granulomatosa
(Acanthamoeba castellani y Balamuthia mandrilaris) (Figura 4).
+ Acanthamoeba castellani y Balamuthia mandrilaris
• Acanthamoeba castellani se caracteriza por presentar dos formas morfológicas

diferentes: el trofozoíto y el quiste.
• Los trofozoítos son pleomórficos, de 15-45 pm de diámetro. En el citoplasma se
distinguen un núcleo central y abundantes vacuolas. El carácter distintivo de los
trofozoítos es la presencia de seudópodos puntiagudos llamados acantopodios.
• Los quistes miden 10-15 pm de longitud. Se caracterizan por poseer un solo
núcleo y una pared doble, en donde la capa externa es de forma irregular y la
interna es poligonal. También se observa la presencia de poros llamados ostiolos.
• Balamuthia mandrilaris se caracteriza por presentar dos formas morfológicas
diferentes: el trofozoíto y el quiste. Los trofozoítos son pleomórficos, de 12-60 pm
de diámetro. En el citoplasma se distinguen de 1-2 ndcleos cada uno con 2-3
cuerpos nucleares. Los quistes son esféricos y miden 12-30 pm de longitud. Se
caracterizan por poseer un solo núcleo y una pared triple.
• La demostración microscópica de los trofozoítos o quistes es la base del

diagnostico. Los exámenes histopatológicos de biopsias de cerebro piel o cornea
son recomendados.
• También se recomienda el diagnóstico por imágenes (tomografía axial
computarizada, resonancia magnética).
• Se puede cultivar las amebas en un medio con baja concentración de nutrientes
en el cual se ha sembrado previamente bacterias coniformes (Medio xenico).
• Los exámenes de liquido cefalorraquídeo o los extendidos coloreados con la
tinción de Wright o Giemsa no se recomiendan pues son poco sensibles.
+ Naegleria fowleri
• Naegleria se caracteriza por presentar tres formas morfológicas diferentes: el

trofozoíto, la forma flagelada y el quiste.
• Los trofozoítos son pleomórficos, de 10-25 pm de longitud. En el citoplasma se
22
distinguen un núcleo central y abundantes vacuolas. El carácter distintivo de los

trofozoítos es la presencia de seudópodos redondeados llamados lobopodios.
• Bajo ciertas condiciones del medio, principalmente por la concentración de iones,
los trofozoítos pueden adoptar una forma biflagelada.
• Los quistes son esféricos y miden 7-14 pm de diámetro. Se caracterizan por
poseer un solo núcleo y una pared delgada sin la presencia de poros.
• El mecanismo de transmisión se lleva a cabo en aquellos individuos que toman
baños de aguas contaminadas con estas amebas: lagos, piscinas, embalses,
corrientes termales, manantiales. Estas amebas en algunos casos pueden
penetrar a través de la lamina cribosa del etmoides, pudiendo alcanzar el cerebro
y las meninges causando graves cuadros de necrosis e inflamación.
Observaciones experimentales inducen a pensar que la infección por Naegleria se
contrae por penetración de los microorganismos a través de la nariz o a través del
neuroepitelio olfatorio
• La demostración microscópica de los trofozoítos es la base del diagnóstico. Se

recomienda realizar exámenes de liquido cefalorraquideo (LCR) o extendidos
coloreados con la tinción de Wright o Giemsa.
• Si la muestra de LCR resulta negativa, se puede recurrir a exámenes
histopatológicos de biopsias cerebrales o diagnostico por imágenes (tomografía
axial computarizada).
• Se puede cultivar las amebas en un medio con una baja concentración de
nutrientes en el cual se ha sembrado previamente bacterias coliformes.
• Las técnicas serológicas tiene poco valor diagnostico pues la respuesta inmune
demora en aparecer. Se ha probado la técnica de inmunoensayo enzimático
(ELISA) y la inmunofluorescencia indirecta (IFI).
II. MATERIAL
+ Laminas coloreadas con hematoxilina férrica o tricrómica de Gomori:

Acanthamoeba castellani, Balamuthia mandrilaris, Naegleria fowleri
• Papel lente
23
ESQUEMAS (PRACTICA 4 )
24
PRACTICA 5
IDENTIFICACIÓN DE FLAGELADOS Y CILIADOS
INTESTINALES
I. INTRODUCCION
Parásitos caracterizados por poseer flagelos en su forma de trofozoíto, los cuales
les sirven para la locomoción. Desde el punto de vista clínico, podemos dividirlos según la
localización anatómica donde se suelen encontrar en flagelados intestinales, genitales,
hemáticos y tisulares. Entre los flagelados intestinales la especie mas importante es
Giardia intestinalis, parasito que se localiza en el duodeno y que se multiplica por división
longitudinal. En los niños provoca cuadros diarreicos, aunque a veces pueden encontrase
en heces sin estar asociado a patología alguna. Otras especies de flagelados intestinales
menos frecuentes son: Trichomonas hominis, Chilomastix mesnilii (Figura 5).
Los ciliados son protozoarios que se caracterizan por la forma de cilios para su
locomoción, además tienen como caracteres de valor diagnostico dos núcleos, citostoma
y citopigio. La transmisión de los ciliados ocurre por ingestión de quistes en alimentos o
agua contaminada con residuos fecales. Cuando se ingieren los quistes, estos pasan al
tracto intestinal inferior, se desenquistan e inician su multiplicación como trofozoítos que
se alimentan.
La forma infectante es el quiste mientras que las formas diagnósticas son tanto
quistes como trofozoítos. La vía de infección de estas parasitosis es la oral y el
mecanismo de transmisión es la ingestión de alimentos contaminados con quistes.
A. IDENTIFICACION DE FLAGELADOS INTESTINALES
Giardia intestinalis
Se localiza en el duodeno, tiene un estadio de trofozoíto y otro de quiste. El

trofozoíto mide 10-20 pm. Es periforme de simetría bilateral con dos núcleos ovales y
cuatro pares de flagelos, dos axostilos y dos cuerpos parabasales y un disco suctorio. El
quiste mide 8-19 pm (promedio 10-14 pm). Son ovoides que contienen 4 núcleos
pequeños, restos de flagelos y cuerpo parabasal, el citoplasma esta claramente separado
de la pared quística.
Hallazgo de trofozoítos o quistes en las heces. En las laminas coloreadas estudie

las características de ambos estadios.
Chilomastix mesnilli
Flagelado intestinal no patógeno. EI trofozoíto, periforme de 6-20 pm, tiene un

núcleo, citoplasma grande, forma ancha que se extiende hasta la mitad del cuerpo. El
quiste, mide 6-24 pm con apariencia de limón contiene un solo núcleo.
25
En las muestras de heces formoladas observe quistes. En las laminas coloreadas

estudie las características del trofozoíto y quiste.
B. IDENTIFICACION DE CILIADOS
Balantidium coli
El único ciliado que infecta al hombre. Parasita el intestino grueso. El trofozoíto es de

forma ovoide y tiene de tamaño promedio de 70 x45 pm, y puede alcanzar un tamaño de
150-200 micras, en su extremo anterior esta el citostoma y en el posterior el citopigio.
Tiene un núcleo grande reniforme que es el macro núcleo, uno mas pequeño y vacuolas
contráctiles. Los cilios que son los órganos de locomoción están implantados en la
membrana celular. El quiste tiene pared quística gruesa transparente y es casi esférico
con un diámetro promedio de 55 pm (50-70 pm), tiene un macro núcleo reniforme y un
micro núcleo.
La balantidiosis requiere de un diagnóstico clínico diferencial con otros agentes

infecciosos que producen colitis o disentería. Principalmente entamoebosis, disentería
bacilar y colitis ulcerativa. El diagnóstico de laboratorio se realiza por el examen de
heces, at observarse los trofozoítos móviles at examen directo, en heces diarreicas, o los
quistes en heces no diarreicas.
II. MATERIAL
• Heces frescas/formol 10%
• Laminas coloreadas con hematoxilina férrica o tricrómica de Gomori: Giardia
duodenalis (quiste y trofozoíto), Chilomastix mesnilli (quiste y trofozoíto),
Balantidium coli (quiste y trofozoíto).
• Pipetas, baguetas, suero fisiologico y lugol.
• Aceite de inmersión, laminas y laminillas.
• Papel lente.
26
27
PRACTICA 6
IDENTIFICACION DE ESPOROZOARIOS I NTESTINALES
Y TISULARES
I. INTRODUCCION
Son protozoarios del Phylum Apicomplexa pues con microscopia electrónica se

visualiza una estructura denominada complejo apical (conoide, anillo polar, roptrias,
microtúbulos). Tienen ciclos complejos (monoxenos, heteroxenos), donde intervienen
diversas etapas evolutivas sexuadas y asexuadas: esporozoítos, merozoitos, gametos
que forman el ooquiste o cigote. En su mayoría son agentes oportunistas porque para
ejercer su acción patógena requieren condiciones favorecedoras en el hospedero.
En los coccidios intestinales (Cryptosporidium, Cyclospora, Cystoisospora) la

forma diagnostica es el ooquiste. En el caso particular de Cryptosporidium e\ ooquiste
eliminado en las heces ya es directamente infectante. La vía de infección de estas
parasitosis es la oral y el mecanismo de transmisión es la ingestión de alimentos
contaminados con ooquistes maduro.
Toxoplasma gondii es un esporozoario intestinal del gato, siendo el hospedero definitivo,

mientras que el hombre y otro animales son hospederos intermediarios. El diagnóstico en
humanos es básicamente serológico.
+ Cryptosporidium spp
Coccidio intestinal con ciclo complejo que se completa en un único huésped

(monoxeno). Distintas especies y distintos genotipos: C. parvum.“ genotipo en 1 humanos,
genotipo 2 en rumiantes y genotipo 3 en caninos. Otros: C. felis, C. meleagridis, C
hominis.
Se localiza en el epitelio intestinal con localización de las etapas reproductivas

dentro de una vacuola parasitófora: intracelular pero extra citoplasmática. La vía de
transmisión es por ooquistes de pared delgada (autoinfección) y los ooquistes de pared
gruesa (heteroinfección). Ooquistes: Pequeños de 4 — 6 pm de diámetro, ovoides o
esféricos, altamente refringentes, con cuatro paredes exteriores lisas. Pueden observarse
4 esporozoítos inermes dentro de los ooquistes maduros (no se presenta esporoquistes).
Puede infectar todo el tracto digestivo y también otros epitelios. Altera la

arquitectura del epitelio intestinal (vacuola parasitófora). Ocasiona atrofia de las
vellosidades, aumento de las criptas e infiltración de la lamina propia. Interfiere con la
absorción de fluidos y nutrientes l o que conduce a provocar diarrea coleriforme que
puede comprometer la vida por desequilibrios hidroelectrolíticos. Diarrea aguda
autolimitada en inmunocompetentes. Diarrea crónica severa en inmunodeprimidos
• La demostración microscópica de los ooquistes es la base del diagnóstico. Se

recomienda realizar exámenes seriados de heces y métodos de concentración
(técnicas de Ritchie y Sheather). Los ooquistes se pueden observar en un
extendido teñido con coloración acido-resistente (método de Kinyoun o Zielh-
Neelsen modificado) y/o Auramina/rodamina
28
• Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parásitos por biopsia
intestinal o utilizarse el diagnóstico indirecto para detectar coproantígenos con la
ayuda de las técnicas de inmunoensayo enzimático (ELISA) o
inmunofluorescencia indirecta con anticuerpos monoclonales (IFI).
+ Cyclospora cayetanensis
• Los ooquistes de Cyclospora se caracterizan por presentar una forma esférica y

miden entre 8-10 pm de diámetro. Cada ooquiste contiene dos esporoquistes que
desarrollan dos esporozoítos cada uno. Se eliminan en las heces de forma
inmadura

(técnicas de Ritchie y Sheather).
• Los ooquistes se pueden observar en un extendido tenido con coloración acido-
resistente (método de Kinyoun o Zielh-Neelsen modificado). Con luz ultravioleta
presentan autofluorescencia.
inmunofluorescencia indirecta (IFI).
+ Cystoisospora belli
• Los ooquistes de Cystoisospora se caracterizan por presentar una forma ovalada

y mide entre 20- 30 pm de largo por 10-20 pm de ancho.
• Cada ooquiste contiene dos esporoquistes de membrana doble que desarrollan
cuatro esporozoítos cada uno. Se eliminan en las heces de forma inmadura

(técnicas de Faust y Sheather). Es característica la presencia de los cristales de
Charcot Leyden, que se generan por la destrucción de los eosinófilos.
• Los ooquistes se pueden observar en un extendido tenido con coloración acido-
resistente (método de Kinyoun o Zielh-Neelsen modificado). Con luz ultravioleta
presentan autofluorescencia.
inmunofluorescencia indirecta (IFI).
29
+ Toxoplasma gondii
• El ooquiste tiene una forma esférica y mide entre 10-12 pm de diámetro. Cada
ooquiste contiene dos esporoquistes que desarrollan cuatro esporozoítos cada
uno.
• Los taquizoítos tienen aspecto semilunar o en “arco” y miden entre 4-6 pm de
largo por 2-4 pm de ancho.
• Los quistes tisulares son redondeados y poseen una membrana propia, miden
entre 20-200 pm de diámetro.
• El criterio clínico es la base del diagnóstico. La demostración microscópica de los

taquizoitos es difícil y sólo se da en muestras de LCR y médula ósea. También se
puede intentar su aislamiento mediante inoculación experimental en ratones o en
cultivos celulares (células HeLa)
• Se pueden buscar los parásitos por biopsia intestinal o utilizarse el diagnóstico
indirecto para detectar anticuerpos con la ayuda de la reacción de Sabin &
Feldman (RSF) o las técnicas de inmunoensayo enzimático (ELISA),
inmunofluorescencia indirecta (IFI) o hemoaglutinación indirecta (HAI).
• Actualmente se recomienda el uso de técnicas moleculares (como la reacción en
cadena de la polimerasa PCR) para muestras de sangre, LCR, médula ósea y
biopsias.
+ Sarcocystis sp.
Es un parasito unicelular que se encuentra en los músculos y otros tejidos de los

mamíferos, aves y reptiles. Un sarcoquiste mide en promedio 70 pm, pero su tamaño
fluctúa entre 30 y 130 pm. Se Ie ha encontrado en todo el mundo infectando diversas
especies. Es una zoonosis, entre los animales que infecta se pueden incluir ovejas,
caballos, cerdos, perros, gatos, conejos, ratones, pollos, humanos, venados, patos, focas,
entre otros. Existen varias especies, nombradas de acuerdo at hospedero en donde se
encuentran, por ejemplo: S. rileyi (pato), S. cuniculi (conejo), S. tenella (oveja) y S.
miescheriana (cerdo). Produce la enfermedad conocida como sarcocystosis. Las
principales especies que infectan humanos son S. hominis y S. suishominis. Los
humanos pueden infectarse por ingestión de carne infectada o bien por ooquistes
excretados en las heces.
Análisis de las heces de animales infectados donde se observan los ooquistes

esporulados. Observación de los quistes en los hospederos intermediarios por medio de
biopsias de tejido (con gran cantidad de bradizoitos. La sarcocistosis extraintestinal
puede detectarse mediante anticuerpos anti-sarcocystis a través de las pruebas
serológicas, entre ellas la ELISA, HAI, dot-ELlSA e IFI.
+ Microsporidios
Características morfológicas:
El tamaño promedio de sus esporas (forma infectante) varia entre 1.2 a 2 pm de

largo por 0,7-1.5 pm de ancho
• Enterocytozoon bienusi, es el principal microsporidio patógeno del hombre. Infecta

los enterocitos del intestino delgado, principalmente en pacientes
inmunocomprometidos. Su desarrollo se produce directamente en el citoplasma
de la célula hospedadora sin formar vacuola parasitófora. Su túbulo polar presenta
de 5-7 vueltas.
• Encephalitozoon intestinales, infecta los enterocitos del intestino delgado,
principalmente en pacientes inmunocomprometidos. Su desarrollo se produce en
el interior de una vacuola parasitófora. Su túbulo polar presenta de 4-7 vueltas.
• Encephalitozoon hellem, produce en vacuolas parasitóforas en el interior de las
células de su hospedador y forma esporas redondeadas. Su túbulo polar presenta
de 6-8 vueltas.
• Encephalitozoon cuniculi, produce en vacuolas parasitóforas en el interior de las
células de su hospedador y forma esporas. Su túbulo polar presenta de 4-5
vueltas.
• Nosema connori, no produce vacuola parasitófora y forma esporas ovales. Su
túbulo polar presenta de 10-11 vueltas.
• Vittaforma corneae, no produce vacuola parasitófora y forma esporas cilíndricas
Su túbulo polar presenta de 5-6 vueltas.
• Pleistophora sp. Forma vacuolas parasitóforas y sus esporas son de aspecto oval,
Su túbulo polar tiene 10-11 vueltas.
Diagnóstico
• La demostración microscópica de las esporas es la base del diagnóstico. Las

esporas se pueden detectar en material de biopsia o mediante el examen de
heces, esputo, aspirado duodenal, LCR y orina.
• Se pueden observar utilizando extendidos tenidos con la coloración de Gram (son
grampositivos), la coloración acido-resistente (método de Zielh-Neelsen), la de
Giemsa o la de Schiff. La coloración de Weber basada en cromotropos ha
demostrado ser útil.
• Se puede utilizar pruebas serológicas como la inmunofluorescencia indirecta (IFI)
o moleculares como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), pero aún no
han demostrado ser fiables para el diagnóstico de rutina. También se han logrado
cultivar en líneas celulares como las de riñón de mono (MK) o de pulmón fetal
humano (FLH).
II. MATERIAL
• Heces frescas formoladas positivas a coccidios
• Láminas coloreadas método Kinyoun modificado: Cryptosporidium spp.,
Cyclospora cayetanensis, Cystoisospora belli.
• Lámina coloreada con Giemsa: Toxoplasma gondii
• Lámina coloreada con hematoxilina- eosina: Sarcocystis sp.
• Lámina coloreada con Gram cromotrope: Microsporidium
• Pipetas, baguetas, suero fisiológico y lugol.
• Microscopio de luz, papel lente
31
32
PRACTICA 7
IDENTIFICACION DE FLAGELADOS HEMATICOS,
TISULARES Y DEL APARATO GENITOURINARIO
I. INTRODUCCION
Los flagelados parásitos sanguíneos tienen como hospedador intermediario a un

vector. Se reproducen por fisión binaria longitudinal. Leishmania en su ciclo biológico
adopta la forma de amastigote (con un flagelo intracelular) y de promastigote (con flagelo
libre pero sin membrana ondulante). Trypanosoma cruzi en su ciclo biológico adopta la
forma de amastigote, epimastigote (con flagelo libre y una corta membrana ondulante) y
tripomastigote (con flagelo libre y membrana ondulante completa - forma infectante). La
forma infectante en el caso de Leishmania es el promastigote metaciclico y en el caso de
Trypanosoma es el tripomastigote metaciclico (deyecciones del vector) La vía de
infección de estas parasitosis es la cutánea. El mecanismo de transmisión es la picadura
del vector (Leishmania). Las formas habituales de transmisión de Trypanosoma cruzi son
aquellas conectadas directamente at vector, a la transfusión de sangre, a la vía congénita
y, mas recientemente, las que ocurren vía oral, por la ingestión de alimentos
contaminados. Mecanismos menos comunes envuelven accidentes de laboratorio,
manejo de animales infectados, trasplante de órganos.
Los flagelados urogenitales (Trichomonas) carecen de forma quística. La vía de

infección de esta parasitosis es la sexual y el mecanismo de transmisión es el contacto
sexual y los fomites.
+ Leishmania spp.
• Los amastigotes de Leishmania son formas intracelulares. Se caracterizan por

presentar una forma ovoide y miden entre 2-5 pm de diámetro (Figura 6).
• Cada amastigote se caracteriza por la presencia de un núcleo posterior (con
cariosoma central) además de un cinetoplasto anterior at núcleo y restos de
flagelo.
• El cinetoplasto tiene forma de “bastoncillo” y esta conformado por ADN. Es una
estructura que contiene at cuerpo parabasal y un blefaroplasto puntiforme de
donde se origina el flagelo.
• El carácter particular de los amastigotes es la ausencia de membrana ondulante y
la presencia de un flagelo intracelular que no se aprecia en las observaciones
microscópicas.
• En el vector, el parasito adopta una forma llamada promastigote, que se
caracteriza por su forma alargada y medir entre 14-20 pm de longitud.
• Cada promastigote se caracteriza por la presencia de un núcleo central, un
cinetoplasto anterior al núcleo y un flagelo.
• La demostración microscópica de los amastigotes es la base del diagnóstico. Se

debe buscar el parásito en muestras de tejidos.
• Se recomienda realizar exámenes directos de extendidos de las lesiones
mediante raspado con bisturí utilizando coloraciones de Giemsa o Leishman.
33
• Si la muestra resulta negativa, se pueden buscar los parásitos por biopsia de

tejidos o se les puede cultivar en medio de Novy, McNeal y Nicolle (NNN) e
inocularlos en animales de laboratorio.
• Las técnicas serológicas útiles para el diagnóstico indirecto son la técnica de
intradermorreacción (prueba de Montenegro), el inmunoensayo enzimático
(ELISA) e la inmunofluorescencia indirecta (IFI).
+ Trypanosoma cruzi
• Los tripomastigotes de Trypanosoma se caracterizan por presentar una forma

fusiforme alargada y ser aplanados lateralmente. Miden entre 10-25 pm de
longitud.
• Cada tripomastigote se caracteriza por la presencia de un núcleo central (con
cariosoma central) además de un cinetoplasto subterminal posterior at núcleo y un
flagelo (1/3 de la longitud total del parasito).
• El carácter particular de los tripomastigotes es la presencia de una membrana
ondulante bordeada por el flagelo que se inicia en el cinetoplasto y sale por el
extremo anterior. No se reproducen.
• Los amastigotes se caracterizan por presentar una forma redondeada y miden
• Cada amastigote se caracteriza por la presencia de un núcleo central, un
cinetoplasto anterior al núcleo y un flagelo intracitoplasmatico.
• En el vector, el parasito adopta una forma llamada epimastigote que se
caracteriza por su forma alargada y por medir entre 18-20 pm de longitud.
• Cada epimastigote se caracteriza por la presencia de un núcleo central además
de una membrana ondulante corta (1/2 de la longitud total del parasito), un
cinetoplasto anterior al núcleo y un flagelo libre.
• La demostración microscópica de los tripomastigotes es la base del diagnóstico.

Se debe buscar el parasito en muestras de sangre o tejidos.
• Se recomienda realizar exámenes directos de extendidos sanguíneos y técnicas
de “gota gruesa” con coloraciones de Giemsa o Wright.
• También se pueden utilizar métodos de concentración (técnica de Strout) y se les
puede cultivar en medio de Novy, McNeal y Nicolle (NNN) e inocularlos en
animales de laboratorio.
• Las técnicas como el xenodiagnóstico y el hemocultivo, se utilizan con fines
epidemiológicos.
• Las técnicas serológicas útiles para el diagnóstico indirecto son la técnica de
fijación de complemento (prueba de Guerreiro-Machado), el inmunoensayo
enzimático (ELISA), la hemoaglutinación indirecta (HAI) y la inmunofluorescencia
indirecta (IFI).
• La determinación de zimodemas (perfiles isoenzimaticos) es útil en la
identificación especifica de los parásitos.
CLASE INSECTA: ORDEN DIPTERA

• Identificación de insectos vectores de leishmaniosis: Lutzomyia sp.
CLASE INSECTA: ORDEN HEMIPTERA.

• Identificación de insectos vectores de tripanosomiasis americana: Triatominos:
Rhodnius robustus, Triatoma infestans, Pastrongylus herreri.
34
+ Trichomonas vaginalis
• Los trofozoítos se caracterizan por presentar una forma piriforme y miden entre
10-30 pm de largo por 5-12 pm de ancho.
• Cada trofozoíto se caracteriza por la presencia de un núcleo (con cariosoma
subcentral y cromatina uniformemente distribuida) además de un citostoma
(abertura oral), blefaroplastos, axostilo y cuerpos parabasales.
• El carácter particular de los trofozoítos es la presencia de dos pares de flagelos
anteriores libres y un quinto a lo largo de la membrana ondulante que ocupa 2/3
anteriores del cuerpo.
• No presenta formas quísticas.
• La demostración microscópica de los trofozoítos es la base del diagnóstico. Se

recomienda realizar exámenes directos de muestras frescas de secreción vaginal,
secreción uretral u orina.
• Son característicos los movimientos de rotación de los parásitos.
• También se pueden observar los trofozoítos en un extendido tenido con coloración
Giemsa o Papanicolau y se pueden cultivar en medio de Diamond (crecen
después de 5-7 días).
• Si la muestra resulta negativa, se pueden buscar los parásitos en secreción
prostática o utilizarse el diagnóstico indirecto con la ayuda de las técnicas de
inmunoensayo enzimático (ELISA) o inmunofluorescencia indirecta (IFI).
II. MATERIAL
• Láminas coloreadas con Giemsa: Leishmania spp. ( amastigotes y promastigotes)
Trypanosoma cruzi (amastigotes, epimastigotes y trypomastigotes metaciclicos)
• Lámina coloreada con Giemsa: Trichomonas vaginalis
• Corte histológico (H-E) con nidos de amastigotes de Trypanosoma cruzy
• Impronta con amastigotes de Leishmania spp.(Giemsa)
• Papel lente
35
36
PRACTICA 8
IDENTIFICACION DE ESPOROZOARIOS HEMATICOS
I. INTRODUCCION
Son parásitos sanguíneos. Tienen como hospedador definitivo a un vector. Los
parásitos de la malaria son miembros del género Plasmodium (phylum Apicomplexa). En
los humanos la malaria es causada por P. falciparum, P. malariae, P. ovale, P. vivax y P.
knowlesi. Su ciclo biológico incluye estadios asexuales (trofozoítos, esquizontes y merozoitos)
y sexuales (macrogametocitos, microgametocitos, ooquistes y esporozoítos). Plasmodium
vivax es selectivo y solo invade eritrocitos jóvenes, observándose agrandados. Plasmodium
falciparum no es selectivo e invade eritrocitos en cualquier fase de desarrollo, pudiendo
múltiples esporozoítos infectar un solo eritrocito, no aumentando su tamaño. La forma
infectante es el esporozoíto y las formas diagnósticas se observan en la sangre periférica,
las cuales van a depender de la especie de Plasmodium. Ejm trofozoítos y gametocitos en el
caso de P. falciparum. La vía de infección de esta parasitosis es la cutánea y el mecanismo
de transmisión es la picadura del vector (inyecta esporozoitos).
El eritrocito parasitado por P. vivax presenta granulaciones de Schuffner, P.
falciparum presenta granulaciones de Maurer y P. malariae presenta granulaciones de
Ziemann.
Plasmodium spp.
Características morfológicas generals
• En el hombre se pueden observar estadios de trofozoíto, esquizonte y gametocito,

que tienen valor diagnostico.
• El trofozoíto es el primer estadio eritrocitario, tiene un aspecto de “anillo” y mide
• El esquizonte tiene un aspecto globular y da origen a los merozoitos. Estos son
esféricos y miden entre 2-4 pm de diámetro y dan lugar a nuevos trofozoítos.
• Los gametocitos varían en forma y tamaño. En Plasmodium vivax y P.malariae son
redondeados y miden 8-10 pm ocupando todo el eritrocito mientras que en
Plasmodium falciparum tiene forma de “media luna” y miden 12-14 pm.
• La demostración microscópica de los estadios esquizogénicos (trofozoítos,

esquizontes y gametocitos) es la base del diagnóstico. Se recomienda realizar
extendidos sanguíneos y métodos de concentración (técnica de “gota gruesa”).
• Los estadios esquizogonicos se pueden observar en un extendido tel\ido con
coloración de Giemsa, Wright o Leishman.
• También se puede utilizar pruebas serológicas como el inmunoensayo enzimático
(ELISA), la inmunofluorescencia directa (IFD) o la hemoaglutinación indirecta (HAI),
aunque no son de gran ayuda en el diagnóstico. En la actualidad se usan las
pruebas moleculares como la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), la cual
es de gran ayuda en la detección de infecciones mixtas.
CLASE INSECTA: ORDEN DIPTERA
• Identificación de insectos vectores de malaria: Anopheles pseudopunctipenis, A.

albimanus.
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II. MATERIAL
• Láminas coloreadas con Giemsa para observar los diferentes estadios de:
Plasmodium vivax.” Trofozoito joven, Trofozoito mediano y adultos. Esquizonte
joven, Esquizonte maduro, Macrogametocito, Microgametocito. Plasmodium
falciparum.” Trofozoito joven, Gametocitos.
• Papel lente
Diferencias morfológicas de Plasmodium humanos en sangre periférica
ESPECIES P. vivax P .falciparum P. malariae

Trofozoito joven Anular ocupa 1/3 Anular ocupa 1/6 del Anular o en banda
del hematíe rara hematíe a menudo ocupa 1/3 del hematíe
vez hay 2 varios en un hematíe muy raro mas de una.
Trofozoito Adulto Forma irregular Forma ameboidea Forma en banda se
ameboidea, se ve pequeña. No se ve ve en sangre
en sangre en sangre periférica. periférica, pigmentos
periférica, pigmento Citoplasma en gránulos grandes.
marrón amarillento compacto, pigmento
Esquizonte joven Grande amenoide Tamafio medio, Pequeño cromatina

cromatina cromatina fragmentada,
fragmentada, fragmentada, no se pigmento grueso.
pigmento lino ve en sangre
periférica
Esquizonte maduro Grande doble hilera Pequeños, sólo en Forma de roceta o
de merozoitos de sangre visceral 18 a margarita con 6 a 12
18 a 24. 32 merozoitos merozoitos.
Microgametocito Grandes, esféricos, Media luna, Similar a P. vivax,
cromatina difusa, cromatina única taxa, pero mas pequeños.
Abundante Pigmento malárico
pigmento malárico y oscuro.
granulaciones
(amarillo)
Macrogametocito Esférico, cromatina Media luna, Similar a P. vivax pero
compacta, cromatina compacta, pequeño, pigmento
Abundante Pigmento malárico grueso diseminado.
pigmento malárico y oscuro.
granulaciones
(amarillo)
Presencia de formas Todas las formas Gametocitos y Todas las formas
en sangre circulante dependiendo del Trofozoitos Jóvenes como suceden en
momento en que P.vivax.
tome la sangre en
relación con el ciclo
febril.
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39
PRACTICA 9
IDENTIFICACION DE TREMATODES
I. INTRODUCCIO
N
Los trematodos son gusanos hermafroditas, de simetría bilateral,

dorsoventralmente aplanados y no segmentados (con excepción de Schistosoma que
presenta sexos separados y cuerpo cilíndrico). Su cuerpo no se divide en regiones y
presenta dos ventosas, una oral y otra ventral (acetábulo). Presenta aparato digestivo
incompleto. Su ciclo biológico incluye estadios de huevo, larva (miracidio, esporoquiste,
redia, cercaria y metacercaria) y adulto. Su fecundación es interna.
En los trematodos (Fasciola y Paragonimus) la forma infectante es la
metacercaria
mientras que la forma diagnostica es el huevecillo no embrionado. La vía de infección de
estas parasitosis es la oral y el mecanismo de transmisión es la ingestión de alimentos
contaminados con metacercarias.
Fasciola
hepatica
Características
morfológicas
• Fasciola es un gusano plano en forma de “hoja de laurel” y de color parduzco,

que mide entre 2-4 cm. por 1-2 cm (Figura 10).
• Se caracterizan porque en su región anterior se distingue la ventosa oral
mientras que un tercio por detras se encuentra la ventosa ventral o acetábulo.
• Los huevos son de forma eliptica y color amarillento, miden 120-150 um por 60-
100 u m; tiene cascara delgada y son operculados (Figura 11).
Diagnóstico
parasitológico
• La demostración microscópica de los huevecillos es la base del diagnóstico. Se

recomienda realizar exámenes seriados de heces y utilizar métodos de
concentración (técnica de Faust o de Baerman).
• Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parásitos en bilis por
aspirado duodenal, estudios radiológicos o biopsias hepáticas.
• También puede utilizarse el diagnostico indirecto para detectar coproantigenos.
Doble difusión arco 2 (DD-2), inmunoensayo enzimático (ELISA),
hemoaglutinación indirecta (HAI) e inmunofluorescencia indirecta (IFI). Las
técnicas moleculares no se han utilizado por el momento.
Paragonimus peruvianus
Características
morfológicas
• Paragonimus es un gusano plano de forma ovalada y de color rojizo, que mide
entre 8-15 mm por 4-5 mm (Figura 12).
• Se caracterizan porque la ventosa oral es subterminal y de mayor diámetro que
la ventosa ventral o acetábulo que se encuentra por debajo de ella.
• Los huevos son de forma ovalada y color marrón rojizo, miden 80-90 um por
40
50- 60 u m; tiene cascara delgada y son operculados.
• Las metacercarias se caracterizan por carecer de envoltura quística y miden 1.47
pm por 0,67 u m.
Diagnóstico
parasitológico
• La demostración microscópica de los huevecillos es la base del diagnóstico. Se

recomienda realizar exámenes de esputo colectado por 24 horas y tratado con
hidróxido de sodio.
• Si la muestra de esputo resulta negativa, se pueden buscar los parásitos en
heces o aspirados gástricos, exámenes radiográficos o biopsias pulmonares.
• También puede utilizarse el diagnostico indirecto para detectar coproantígenos
con la ayuda de las técnicas de intradermorreacción, inmunoensayo enzimático
(ELISA), inmunofluorescencia indirecta (IFI) y hemoaglutinación indirecta (HAI).
• Las técnicas moleculares no se han utilizado por el momento.
Schistosoma mansoni
El género Schistosoma posee gran cantidad de especies, parasitas de

mamiferos silvestres y domésticos, incluido el hombre. Al menos tres especies parasitan
al hombre: Schistosoma mansoni, Schistosoma japonicum y Schistosoma haematobium
(Figura 13).
S. mansoni (trematodo sanguíneo de Manson) se localiza en la mayor parte de

África; también se encuentra en el continente americano, introducido con los esclavos
africanos infectados. Los adultos viven en las venas mesentéricas del intestino grueso
de muchos mamíferos, tanto silvestres como domésticos, incluido el hombre (hospedador
definitivo).
S. japonicum (trematodo sanguíneo oriental) se encuentra en el continente

asiatico. El adulto vive en las venas mesentéricas del intestino delgado y a veces en las
venas del sistema porta del hombre y otros mamíferos (hospedador definitivo).
S. haematobium (trematodo sanguíneo de la vejiga) se distribuye por gran parte

de África y por ciertas zonas de Asia. Los adultos viven en las venas que rodean la vejiga
urinaria (venas vesicales) del hombre y otros primates (hospedador definitivo).
El ciclo vital es similar en todas las especies. Los huevos, ya embrionados,

eclosionan en el agua; surge un miracidio que penetra activamente en un caracol
acuático (hospedador intermediario) (Biomphalaria spp. para S. mansoni, Oncomelania
spp. para S. japonicum y Bulinus spp. para S. h aematobiom), donde se transforma en
esporoquiste, que origina esporoquistes hijos, de donde surgen cercarias (no se
producen redias). Las cercarias salen del caracol y penetran activamente, a través de
la piel, en su hospedador definitivo cuando se sumerge en aguas con caracoles
infectados.
Durante la entrada en el hospedador definitivo, la cercaria pierde la cola y se

transforma en esquistosémula, que se dirigirá al sistema hepático, donde evolucionara
hasta adulto, para posteriormente dirigirse a su hábitat especifico.
Una de las características de las esquistosomiasis es la producción de

granulomas alrededor de los huevos que quedan entre los tejidos del hospedador
41
cuando se desplazan tratando de salir a la luz intestinal o a la vejiga urinaria.
La hembra, larga y delgada, se encuentra parcialmente introducida en el canal

ginecóforo del macho. Los machos son gruesos de 6-15 mm de longitud y 1,5 mm de
diámetro; poseen 3-7 testículos y el tegumento puede estar ornamentado con tubérculos
espinosos ricos de glucógeno. Las hembras son delgadas, de tegumento liso y poseen
un
solo ovario, situado en el tercio anterior del cuerpo; el útero es corto. Huevo de
S . mansoni es grande (120-170x40-50 um), sin opérculo y con una espina lateral. Sale
con las heces del hospedero ya embrionado (contiene al miracidio).
II. MATERIAL
• Muestras de heces formoleadas con huevos de Fasciola y Paragonimus
• Metacercaria de Fasciola hepatica
• Miracidio de Fasciola hepatica
• Adultos de Fasciola hepatica (material preservado)
• Adulto de Fasciola hepatica coloreado con carmin
• Hospedero intermediario: Lymnaea columella — caracol
• Metacercaria de Pargonimus peruvianus
• 1er H.I..” Aroapyrgus sp. — caracol
• 2do. H.I. Hypolobocera chilensis - cangrejo
• Adulto de Paragonimus peruvianus coloreado con carmin
• Adultos de Schistosoma mansoni
• Huevo de Schistosoma mansoni
• Corte histológico con huevo de Schistosoma mansoni
• Papel lente
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43
PRACTICA 10-11
IDENTIFICACION DE CESTODES INTESTINALES Y
TISULARES
I. INTRODUCCION
Los cestodos son gusanos hermafroditas, de simetría bilateral, dorsoventralmente
aplanados y segmentados. Su cuerpo se divide en tres regiones, Cabeza o escólex, el
cuello y el estróbilo. Carecen de aparato digestivo. Su ciclo biológico incluye estadios de
huevo, larva (cisticerco, cisticercoide, procercoide, plerocercoide e hidátide) y gusano
adulto. El escólex lleva los órganos de fijación (ganchos, ventosas, botrias) y el estróbilo
esta formado por un conjunto de segmentos llamados proglótidos (inmaduros, maduros y
grávidos). Los gusanos adultos ocupan el tubo digestivo de los vertebrados y sus larvas
se encuentran en los tejidos de vertebrados e invertebrados.
+ Taenia solium
• Forma infectante: la ingesta de la larva cisticerco (Cysticercus celulosae),

presente en el musculo de porcino, ocasiona en el hombre teniasis intestinal. La
ingesta de huevos de T. solium ocasiona cisticercosis.
• Huevos: 31 x 43 pm, esféricos o sub-esféricos, con cascara gruesa y estrías
radiadas prominentes. Oncósfera embrionada con tres pares de ganchos
(Embrión hexacanto) dentro del embrioforo, que es la forma diagnóstica del
género Taenia.
• Proglótide: Mas largos que anchos. Los segmentos grávidos tienen un tallo
uterino central con 7 — 10 ramas laterales.
• Escólex: Cuatro ventosas características del género, con un rostelo armado de
doble corona de ganchos quitinosos (Figura 14).
+ Taenia saginata
• Forma infectante: la ingesta de la larva cisticerco (Cysticercus bovis) presente en

el musculo de vacuno, ocasiona en el hombre teniasis intestinal.
• Huevos: semejantes a T. solium.
• Proglótide: Mas largos que anchos. Los segmentos grávidos tienen un tallo
uterino central con 15 — 20 ramas laterales a cada lado. Son móviles cuando
estan recién eliminados.
• Escólex: Cuatro ventosas características del género, con una corona inerme,
desprovista de rostelo sin ganchos. Mide 2 mm de diámetro (Figura 14).
NOTA: El hombre es el único ser que puede alojar en su intestino delgado a la Taenia
solium y la Taenia saginata. Ambos producen huevos que salen junto con las heces y
pueden contaminar el agua y los alimentos, que al ser consumidos por e l h o m b r e
desarrollan la Cisticercosis (solamente los huevos de T. solium), enfermedad que
afecta al cerebro, los músculos o el ojo.
El hombre al consumir carne de cerdo o vacuno infectado con el estadio larvario
(cisticercos) adquiere nuevamente el parasito (teniasis)
44
+ Echinococcus granulosus
El hospedero definitivo es el Perro (se infecta al ingerir vísceras con quiste

hidatídico), los hospederos intermediarios son el humano, bovinos, vacunos,
porcinos (se infectan al ingerir huevos).
• Huevo: Semejantes a los de Taenia spp. Con cubierta radiada y embrión
hexacanto
• Gusano adulto: 3 — 6 mm. Cuello corto y delgado de 1 mm. Estróbilo consta de 3
— 4 proglótidos, con poros genitales regularmente alternos; el ultimo segmento
mide aproximadamente la mitad del largo total del parasito. Anatomía interna
semejante a la de las tenias (Figura 15).
• Escólex: Pequeño, globular, 300 pm de diámetro, Posee cuatro ventosas y un
rostelo armado con doble corona de ganchos (25 — 30 ganchos).
+ Quiste hidatídico o hidátide (Larva):
• Hidátide: Tiene forma mas o menos esférica, pudiendo alcanzar hasta 10 cm. de
diámetro. Esta constituida por una membrana que consta de dos capas: Externa
o cutícula (1 mm de espesor) e interna, germinativa o prolifera (25 mm de
espesor); esta ultima da lugar a la formación de escólices, vesículas proliferas e
hijas; presenta un contenido formado por un liquido estéril incoloro o amarillo claro
y un sedimento denominado “arenilla hidatídica” constituido por ganchillos,
escólices y vesículas que se desprenden de la capa germinativa.
+ Diphyllobothrium pacificum
• Forma infectante: Larva plerocercoide en la carne de pescado de agua salada.

• Huevos: 50-60 x 36-40 pm, ovales o elípticos. Se observa un opérculo en uno de
los extremos con un pequeño botón terminal en el otro. La cascara es delgada y
lisa.
• Proglótide: Mas largos que anchos. Poro genital y poro uterino de posición central.
Un útero en la parte media o central del proglótide, con aspecto de roseta.
Testículos y glándulas vitelogenas.
• Escólex: Forma de corazón, con una hendidura longitudinal poco profunda (botrias),
rodeada en ambos lados por pliegues semejantes o labios.
+ Hymenolepis nana
• Forma infectante: Huevo (Ciclo directo)

• Huevo: 40 x 60 pm, ovales o subesféricas. La cascara se compone de dos
membranas, la externa es relativamente delgada y tiene una superficie lisa; la
interna tiene dos polos opuesto de los que nacen 4 — 8 filamentos polares, que se
extienden entre las dos membranas (características diferenciales de H. diminuta
que carece de filamentos polares). Dentro de la membrana interna se encuentra la
oncósfera con tres pares de ganchos (huevo hexacanto)
• Gusano adulto: Rara vez se encuentra en muestras fecales, donde puede
confundirse con hilos delgados de moco. Mide menos de 40 mm de largo y tiene
proglótides imprecisos. Mas anchos que largos, y un pequeño escólex con cuatro
ventosas y un rostelo saliente con un anillo de 20 — 30 ganchos.
45
+ Hymenolepis diminuta (accidental en el hombre)
• Forma infectante: Larva cisticercoide presente en varias especies de pulgas,

cucarachas y gorgojos, que son inadvertidamente ingeridas por el hombre (Ciclo
Indirecto).
• Huevo: 70 - 85 pm de longitud, 60 — 80 pm de ancho, redondos o vales. Tiene
apariencia semejante a los huevos de H . nana. No posee filamentos polares.
• Gusano adulto: Rara vez se encuentra en muestras fecales. Los proglótides no
son precisos. El escolex es pequeño y esférico, tiene cuatro ventosas esféricas
profundas y un rostelo redondeado sin ganchos.
+ Dipylidium caninum (accidental en el hombre)
• Forma infectante: Larva cisticercoide que desarrollan en la cavidad corporal de

las pulgas del perro o el gato, que son inadvertidamente ingeridas por el hombre
(Ciclo Indirecto).
• Huevo: En general se observa paquetes de huevos, que son sacos que
contienen 5 — 15 huevos esféricos (Cápsula ovigera). Cada huevo mide 35 x 40
pm, son esféricos y encierran una oncosfera interna con seis ganchos delicados.
• Proglótide: Mas largos que anchos, con forma de barril, con un doble juego de
estructuras reproductoras que tienen dos poros genitales para cada segmento,
uno a cada lado (otras especies de Taenia sp. tienen solo un poro genital).
• Escólex: Rostelo cónico u ovoide con 30 — 150 ganchos pequeños, semejantes a
espinas, dispuestas en varias hileras. El rostro puede retraerse en una depresión
en la porción superior del escólex (Figura 16).
II. MATERIAL
• Heces formoleadas con huevos de Taenia sp., Diphyllobothrium sp,
Hymenolepis nana.
• Láminas y laminillas.
• Escolex coloreado con carmin de: Taenia solium, Taenia saginata,
Diphyllobothrium pacificum, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta,
Dipylidium caninum.
• Proglótides grávidos de Taenia solium, Taenia saginata, Diphyllobothrium
pacificum, Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta, Dipylidium caninum,
coloreados con carmin.
• Adulto de Echinococcus granulosus, coloreado con carmin.
• Arenilla hidatidica coloreada con H-E.
• Capsula ovigera de Dipylidium caninum coloreado con carmin.
• Corte histológico de Cisticercus celullosae (H-E) y quiste hidatidico.
• Material preservado en formol 10% de especimenes adultos de: Taenia solium,
Taenia saginata, Diphyllobothrium pacificum, Hymenolepis nana, Hymenolepis
diminuta, Dipylidium caninum, quiste hidatidico.
• Pipetas, baguetas, lugol.
• Aceite de inmersión.
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ESQUEMAS (PRACTICA 10-11)
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48
PRACTICA 12- 13
IDENTIFICACION DE NEMATODOS INTESTINALES
I. INTRODUCCION
Los nematodos son gusanos de sexos separados, de simetría bilateral, cilíndricos

y vermiformes. Su cuerpo no se divide en regiones. En su extremo anterior algunas
especies poseen papilas, ganchos, placas o dientes. Presentan aparato digestivo
completo. Su ciclo biológico incluye estadios de huevo, larva que después de cuatro
mudas dan lugar al adulto. Su fecundación es interna. Presentan dimorfismo sexual y la
gran mayoría son ovíparos aunque también pueden ser vivíparos (Uncinarias) u
ovoviviparos (Strongyloides).
En los nematodos intestinales (Ascaris, Trichuris y Enterobius) la forma infectante

es el huevo larvado (Figura 17) y la forma diagnostica es la observación de huevos o del
adulto. En otro grupo de nematodos (Ancylostoma, Necator y Strongyloides) la forma
infectante es la larva filariforme mientras que la forma diagnostica es la larva rabditiforme
(Strongyloides) y huevos (Uncinarias). La vía de infección de la mayoría de los
nematodos es la oral y el mecanismo de transmisión es la ingestión de agua o alimentos
contaminados con el estadio infectante del parasito.
Ascaris lumbricoides
Son nematodos que se caracterizan por presentar una boca con tres labios
provistos de papilas sensoriales. Presentan una longevidad aproximada de 1-2 años.
Huevos:
a. Tamaño: Alrededor de 45 a 75 pm de longitud por 35 a 50 pm de diámetro.
b. Forma: Redondos u ovoides, color amarillo oscuro.
c. Membrana envolvente: Una externa festoneada, una media y otra interna lisa. Cuando
los huevos son infecundos estan deformados y tienen un aspecto vacuolar.
Especímenes
a. Tamaño: las hembras miden 20 a 35 cm. de largo y los machos 10 a 15 cm. De
longitud, rara vez sobrepasan los 30 cm. y se caracterizan por la presencia de un par de
espículas copulatorias.
b. Cuerpo: De color rosado al ser expulsado, Las características de identificación ú tiles
son rayas longitudinales blancas sobre ambos lados del cuerpo y la falta de segmentos
musculares.
c. Extremidad anterior: La boca presenta 3 labios (uno dorsal y dos ventral laterales)
d. Extremidad posterior: En la hembra es recto y cónico con ano sub-terminal. En el
macho enrollada, cloaca ano genital con 2 espículas copulatorias.
e. Vulva: en el cinturón genital, estrechez que es transversal al cuerpo (localización: tercio
anterior).
49
• La demostración microscópica de los huevos es la base del diagnóstico. Se

concentración (técnica de Faust o de Ritchie).
• Se puede estimar la intensidad de la infección (numero de huevos por gramo de
heces) utilizando las técnicas de Stoll o Kato-Katz.
• Si la muestra fecal resulta negativa, se pueden buscar los parásitos por aspirado
duodenal o se pueden realizar estudios radiológicos.
Trichuris trichiura
• Son nematodos que se caracterizan por presentar una boca sin labios provista de
un estilete bucal. Presentan una longevidad aproximada de 6-8 años.
• Presentan forma de “látigo", con el tercio anterior mas delgado. Las hembras
miden entre 3-5 cm. mientras que los machos miden entre 3- 4,5 cm. y se
caracterizan por la presencia de una espícula copulatoria.
• Los huevos tienen forma de “barril” en cuyos extremos se distinguen un par de
tapones polares (albuminoides), miden 50-55 pm por 22-23 pm y tienen cascara
gruesa. Necesitan de 10-14 días a 20”-30 0 C para completar su desarrollo.
• Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 3-7 mil huevos diarios. Presentan
una viabilidad aproximada de 1 año.

duodenal o se pueden realizar estudios radiológicos. Las técnicas serológicas y
moleculares no son de mucha utilidad.
+ Enterobius vermicularis
• Son nematodos que se caracterizan por presentar una boca con tres labios
provistos de papilas sensoriales y una par de aletas cervicales. Presentan una
longevidad aproximada de 2-3 meses.
• Las hembras miden entre 8-12 mm mientras que los machos miden entre 3-5 mm
y se caracterizan por la presencia de un par de espículas copulatorias.
• Los huevos son de forma oval, miden 50-60 pm por 20-30 pm y tienen cascara
delgada.
• Necesitan de 4-6 horas a 20-30°C para completar su desarrollo.
• Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 10 mil huevos durante su vida.
Presentan una viabilidad aproximada de 30-50 días.
50
• La demostración microscópica de los huevos es la base del diagnóstico. Los

exámenes seriados de heces y los métodos de concentración son de poca
utilidad.
• Se deben buscar los parásitos utilizando la técnica de Graham (“cinta engomada”)
por cinco días sucesivos. También se puede recurrir al uso de hisopados anales.
Las técnicas serológicas y moleculares no son de mucha utilidad.
Toxocara canis / Toxocara felis
• Son nematodos, su hábitat es el intestino delgado. El hospedero definitivo es el

perro y gato, hospedero accidental el hombre.
• El adulto macho puede medir hasta 10 cm. y la hembra hasta 12 cm.
• Producen la larva migrans visceral, síndrome clínico que resulta de la invasión de
vísceras humanas por larvas de nematodos, cuyos adultos son por lo general
parásitos de animales inferiores
• Forma infectante huevos embrionados
• La demostración microscópica de los huevos es la base del diagnóstico en el

hospedero definitivo.
• En el humano se puede diagnosticar por técnicas serológicas: ELISA, Western
Blot
Ancylostoma duodenale y Necator americanus
• Ancylostoma es un nematodo que se caracteriza por presentar una cápsula

bucal con dos pares de dientes. Presentan una longevidad aproximada de 6-8
años.
• Las hembras miden entre 10-13 mm, los machos miden entre 8-11 mm y se
caracterizan por la presencia de un par de espículas copulatorias y una bolsa
copulatriz.
• Los huevos son de forma ovoide, miden 56-60 pm y tienen cascara delgada.
Necesitan de 1-2 días a 20-30°C para completar su desarrollo.
• Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 20-30 mil huevos diarios. No se
conocen datos acerca de su viabilidad.
• Necator es un nematodo que se caracteriza por presentar una cápsula bucal con
un par de placas cortantes. Presentan una longevidad aproximada de 4-5 años.
Las hembras miden entre 9-11 mm, los machos miden entre 7-9 mm y se
caracterizan por la presencia de un par de espículas copulatorias y una bolsa
copulatriz.
• Los huevos son de forma ovoide, miden 64-76 pm y tienen cascara delgada.
Necesitan de 1-2 días a 20 – 30°C para completar su desarrollo.
• Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 6-11 mil huevos diarios. No se
• Las larvas rabditiformes son de forma alargada y miden 250-350 um de longitud.
Se caracterizan por la presencia de un bulbo esofágico. Las larvas filariformes
51
son de forma alargada y miden 600-700 um de longitud. Se caracterizan por la
ausencia del bulbo esofágico. Tienen una viabilidad de 6-9 semanas.

• Para identificar y diferenciar las larvas rabditiformes se requiere de su cultivo a
través de la técnica de Harada-Mon.
duodenal o se pueden realizar estudios radiológicos. Las técnicas serológicas y
+ Strongyloides stercoralis
• Son nematodos que se caracterizan por presentar una boca con tres labios
provistos de papilas sensoriales. No se conocen datos acerca de su longevidad.
• Las hembras miden entre 2,1-2,7 mm. No se ha logrado hallar a los machos, por
to que se considera que la hembra se reproduce por partenogénesis.
• Los huevos son de forma oval, miden 55-60 pm por 28-32 pm y tienen cascara
delgada (normalmente NO se eliminan con las heces). Necesitan de 12 horas a
20° - 30°C para completar su desarrollo.
• Cada hembra llega a ovipositar un promedio de 15-50 huevecillos diarios. No se
• Las larvas rabditiformes (Forma diagnóstica) son alargadas y miden 180-380
pm de longitud. Se caracterizan por la presencia de un bulbo esofágico. Las
larvas filariformes (Forma infectante) son alargadas y miden 500-700 um de
longitud. Se caracterizan por la ausencia del bulbo esofágico. Tienen una
viabilidad de 45-50 días.
• La demostración microscópica de larvas rabditiformes es la base del

diagnóstico. Se recomienda realizar exámenes seriados de heces y utilizar
métodos de concentración (técnica de Ritchie o de Baermann).
• Para identificar y diferenciar las larvas rabditiformes se requiere de su cultivo a
través de la técnica de Harada-Mon.
• También puede utilizarse el diagnóstico indirecto para detectar coproantígenos
con la ayuda de la técnica de inmunoensayo enzimático (ELISA). Las técnicas
Trichinella spiralis
Características morfológicas:
• El adulto de este gusano parasita el intestino delgado del hombre, cerdo y otros
mamíferos. Mide de 2-5 mm. EI hábitat de la larva es el músculo esquelético.
Hospedero accidental es el Hombre.
52
• La forma infectante son las larvas contenidas en carnes real cocidas.
• Los machos miden hasta 1.5 mm y las hembras hasta 3 mm
• Clínicamente es necesario hacer el diagnóstico diferencial con otros síndromes

Infecciosos que produzcan sintomas generates y mialgias.
• Las pruebas de mayor sensibilidad y especificidad son ELISA y hemaglutinación
indirecta.
II. MATERIAL
• Heces formoladas con huevos de A scaris lumbricoides, Trichuris trichiura,
Uncinarias, Enterobius vermicularis
• Adultos de Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura, Uncinarias, Enterobius
vermicularis.
• Capsula bucal Ancylostoma duodenalis y Necator americanus
• Bursa copulatriz de ejemplar macho de Uncinarias
• Heces formoladas con larvas rabditoides de Strongyloides stercoralis
• Heces formoladas con huevos de Toxocara canis
• Lámina coloreada con Trichinella spiralis
• Corte histológico de Ascaris lumbricoides y Enterobius vermicularis (H-E)
• Láminas y laminillas, Pipetas, baguetas, suero fisiológico y lugol.
• Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol)
• Aceite de inmersión.
53
54
PRACTICA 14-15
IDENTIFICACION MORFOLOGICA DE ARTROPODOS
I. INTRODUCCION
El Phylum Artrópodo comprende el mayor número de especies del Reino Animal,
caracterizadas por tener básicamente un exoesqueleto quitinoso, cuerpo y apéndices
segmentados. A este Phylum pertenecen los ectoparásitos.
Los artrópodos presentan una cabeza, tórax y abdomen. La anatomía interna de
los artrópodos es un espacio lleno de hemolinfa, llamado hemocele. Los artrópodos
juegan el papel de vectores en la transmisión de enfermedades. El vector es el portador
viviente, por diseminación o inoculación o ambas a la vez del agente causal de la
enfermedad.
II. CLASE INSECTA
Comprende a todos los insectos. Cuerpo dividido en tres regiones: cabeza, tórax y
abdomen.
• Cabeza: sus apéndices principales son un par de antenas, los ojos compuestos y
los ojos simples u ocelos, las piezas bucales.
• Tórax: formado por tres segmentos, cada uno con un par de patas y dos pares de
alas.
• Abdomen: se compone por un numero variable de segmentos, el 8vo y 9no.

Llevan los órganos sexuales externos usados para la copula en el macho el
oviscato o pieza para poner huevos en las hembras.
Los insectos respiran por tráqueas que llevan aire a los tejidos por medio de unas
traqueolas finamente ramificadas.
A. ORDEN SIPHONAPTERA
Las pulgas son insectos hematófagos que presentan el cuerpo aplanado

lateralmente, carecen de alas, un cuerpo recubierto de una gruesa capa de quitina, con
un color marrón oscuro. Son holometabolos. Cabeza: estrecha y cuneiforme. Las antenas
son cortas y gruesas. Los ojos ausentes con frecuencia presentan 2 ocelos. Aparato bucal
picador-chupador. Con un peine o ctenidios (peine genal o pronotal). Algunas especies no
presentan. Tórax: presenta tres segmentos, cada uno con un estigma y un par de patas.
Abdomen: presenta 10 segmentos, 8 con un par de espiráculos. En un espécimen
hembra vea la espermateca situada en el 7mo esternito de forma variable, según las
especies. Observe en la parte posterior, una placa porosa con numerosas cerda llamada
Pygidium, es una estructura sensorial. La genitalia del macho es mas compleja (Figura
17).
Mide de 1 a 7 mm de largo. Tunga penetrans es la mas pequeña (1 mm). Los
machos son mas pequeños que las hembras. Son transmisores de enfermedades
infecciosas. Otras especies; Xenopsylla cheopis (ratas), Ctenocephalides canis (perro),
Pulex irritans (humano) (Figura 18).
55
Con ayuda de pinzas se deben desprender las pulgas del hospedador y
preservarlo en alcohol de 96° para su identificación.
• Xenopsylla cheopis. carecen de ctenidias. Cerda ocular delante del ojo.
Mesopleura dividida. Pulex irritans. carecen de ctenidias, Cerda ocular
debajo del ojo. Mesopleura entera. Tunga penetrans. no presenta peines.
Su cabeza es angular. (Figura 19).
• Ctenocephalides canis. ctenidias genales y pronotales. Cabeza corta y alta.
Primer diente genal es corto.
• Ctenocephalides felis. cabeza baja y alargada. Primer y segundo diente
genal tienen la misma altura. (Figura 20).
B. ORDEN ANOPLURA
Los piojos son insectos que miden 2 y 4 mm de longitud, siendo las hembras de
mayor tamaño que los machos. Tienen el cuerpo achatado en sentido dorsoventral, el
color grisáceo, son hemimetabolos, eminentemente hematófagos específicos. Son
transmisores de enfermedades infecciosas.
Cabeza: Ojos simples laterales. Piezas bucales retractales tipo sucto picador. Tórax: Pro,
meso y metatórax. Phthirus pubis no presenta la característica constricción toracica-
abdominal que si esta presente en Pediculus. Estigma respiratorio torácico. Tres
pares de patas: coxa, trocanter, fémur, tibia, la cual presenta un apéndice terminal, el
tarso de un solo segmento que termina en una garra opuesta a la tibia, funcionando como
una pinza que facilita su adherencia a pelos y ropa. Abdomen: Con 8 segmentos visibles
y 6 pares de estigmas respiratorios. Diferencie hembra y machos con extremidad
abdominal bilocada, en el macho redondeada y se observa la espícula. Los huevos
llamados liendres son blancos, ovoides, de 0.8 mm y presentan en el polo libre un
opérculo mamelonado. Especies representativas: Pediculus humanus variedad capitis,
Pediculus humanus variedad corporis, Phthirus pubis (“piojo cangrejo, ladilla”) (Figura
21).
Para remover piojos es utilizando peines especiales para desprenderlos del

hospedador. Preservarlo en alcohol de 96° para su identificación.
III. CLASE ARACNIDA

Formado por artrópodos que poseen 4 pares de patas, cabeza y tórax están
unidos formando el cefalotórax, carecen de alas y antenas. La taxonomía de los acarina
es compleja y no esta aun resuelta. De manera tradicional, los acarina han sido
considerados un orden de la clase aracnidos, orden Acarina o Acari, pero en la mayoría
de estudios recientes, los acarina se consideran una subclase que puede dividirse en 3
superordenes que incluyen diversos o rdenes.
+ Sarcoptes scabiei
Presenta cefalotórax y abdomen unido, sin segmentación externa. De forma oval,

aplanado dorso ventralmente, no tiene ojos y en su tegumento blando y delgado se
dibujan líneas ondulantes paralelas y presentan cerdas o pelos salientes. En su parte
anterior sobresale el capitulo o aparato bucal semejando una falsa cabeza. En su cara
dorsal presenta espinas y pelos dirigidos hacia atrás que determinan que el parasito no
pueda retroceder en su caminar. La cara ventral soporta cuatro pares de patas.
56
Tanto en hembras como en machos los dos pares anteriores presentan ventosa y
unas, las dos posteriores terminas en cerdas, salvo el cuarto par del macho que también
presenta ventosas. La hembra mide de 330 a 450 um de largo y el macho de 200 a 240
um. Es un organismo aerobio, intercambia gases a través del exoesqueleto. Su aparato
bucal posee fuertes queliceros que Ie permiten masticar el estrato corneo y alimentarse
de estas células (Figura 22).
Debe sospecharse ante una dermatosis muy pruriginosa. La visualización de
surcos de 5 a 20 mm de longitud, es diagnostica, pero a menudo la dificultan las
polimorfas lesiones superpuestas. Puede facilitarse mediante su tinción con azul de
metileno. En caso de duda, el examen microscópico del material obtenido por raspado de
surcos intactos es confirmatorio.
Demodex
Los Demodex son ácaros microscópicos implicados en el desarrollo de varias
enfermedades oculares y dérmicas. Atendiendo a su localización Demodex folliculorum
se localiza en el folículo piloso y Demodex brevis en las glándulas sebáceas.
Es un acaro de la familia Demodicidae. Presenta un cuerpo fusionado,
pudiéndose diferenciar dos partes, el gnatosoma o parte anterior donde se localizan las
piezas bucales, y el idiosoma que se corresponde con la porción posterior del cuerpo.
Esta se divide en podosoma (4 pares de patas cortas) y opistosoma la cual presenta una
estriación transversal característica. El tamaño es de 250-300 pm, siendo la hembra de
mayor tamaño que el macho (Figura 23).Los huevos de Demodex poseen una morfología
en punta de flecha.
Para su diagnostico se han de arrancar unas 8-10 pestanas del parpado afecto, o
extraer la materia grasa de los folículos por compresión del borde palpebral y sebáceo de
la piel, colocarlos sobre un portaobjeto, con una gota de xilol en el segundo caso y
observarlos al microscopio, 100 X, 400 X.
+ Garrapatas
Ectoparásitos que se alimentan de sangre de sus hospederos. Son las formas
gigantes de los ácaros, en ayunas pueden ser pequeñas sin embrago cuando se
encuentran repletas de sangre succionada, alcanza un mayor tamaño.
Las garrapatas se diferencian de los demás Acari por poseer en el dorso de la
primera pata un visible poro sensorial, conocido como órganos de Halle, y la mayoría
presenta un prominente hipostoma dentado. Las garrapatas estan en dos familias: los
argasidos (Argasidae, garrapatas blandas, hipostoma cubierto) y los ixédidos (Ixodidae,
garrapatas duras, hipostoma libre).
Los adultos miden entre 2 y 30 mm de largo, dependiendo de la especie, y del
grado de ingesta de sangre en su alimentación (Figura 24).
Garrapatas blandas: Argas persicus, Otobuis megnini

Garrapatas duras: Ixodes ricinus, Boophilus microplus, Rhipicephalus sanguimeus
57
Para remover garrapatas es utilizando pinzas finas de acero y tirar firmemente
para desprenderla del hospedador. Preservarlo en alcohol de 96° para su identificación.
El diagnóstico de las especies de garrapatas dependera de varios factores, como lugar
de colecta, hospedador, nombre vulgar del parasito, por to que se recomienda solicitar
asesoramiento de expertos en el tema para estos casos.
• Loxosceles laeta.” “Araña casera”. Tamaño: 8-15 mm
Cefalotórax: Ligeramente aplanado dorso ventralmente, con un surco longitudinal.
De color marrón claro. Quelicero, formados por dos segmentos: uno basal y otro distal en
forma de garra encorvada, con un orificio subterminal, para la salida del veneno.
Pedipalpos, de la misma estructura que una pata, en los machos se modifican y
constituyen Organos de copula. Seis ojos y su disposición en tres filas. Cuatro pares de
patas: coxa, trocanter, fémur, patella, tibia y tarso. Abdomen: De forma ovoide, de color
grisáceo, con pelos. En la parte posterior y ventral, observe una hilera de seis estructuras
por donde salen los hilos secretados por las glándulas de seda.
Accidente por loxocelismo

El veneno de L. laeta posee un fuerte poder citotóxico y proteolitico, causa severa
alteración de los endotelios vasculares, hemolisis y puede matar a un ser humano.
Caracteristicas morfológicas
• Latrodectus mactans.“Viuda negra” o “Lucacha”. Tamaño: Adultos 1.5 cm. Todo
el cuerpo aterciopelado.
Cefalotórax: Quelicero, Pedipalpos, Ocho ojos y su disposición en dos hileras
horizontales. Cuatro pares de patas: coxa, trocanter, fémur, patella, tibia y tarso.
Abdomen En especímenes vivos, se observa, en la parte ventral una mancha de color
rojizo, reloj de arena.
Accidente latrodéctico
El veneno de Latrodectus posee potente acción neurotóxica, no causa lesión local
cutánea y, clásicamente, hay dolor intenso, contracturas musculares, sudoración,
salivación y puede Ilevar a la parálisis respiratoria y la muerte.
II. MATERIAL DE PRACTICA

• Laminas montadas de Xenopsylla cheopis, Pulex irritans, Ctenocephalides
canis / felis, Tunga penetrans.
• Láminas montadas de Pediculus humanus, Phthirus pubis, Huevos o liendres de
piojos.
• Láminas montadas de Sarcoptes scabiei, Garrapatas.
• Adulto de Loxoceles laeta
• Adulto Latrodectus mactans
• Papel lente. Microscopio de luz.
Miasis
Características
Es la infestación de animales vertebrados y humanos por larvas de dípteros
(moscas). Las larvas se alimentan de los tejidos vivos o muertos del hospedero.
Especificas: Larvas biontófagas
Cochliomyia hominivorax
Dermatobia hominis
58
Oestrus ovis
Semiespecificas: Larvas necrobiontófaga
Sarcophaga haemorrhoidalis
No especifica: Accidentales
Musca domestica.
Ante la sospecha de la infestación por larvas de mosca (personas o animales)
observar con una lupa, que la larva ingresa y sale parcialmente de las lesiones de la piel
o de algún ó rgano afectado. Las larvas pueden ser extraídas en forma mecánica o
quirúrgica para que no continúen dañando los tejidos. Larvas de moscas extraídas de
pacientes conservadas en alcohol de 70% para su posterior identificación.
MATERIAL DE PRACTICA
• Larvas de moscas: Cochliomyia hominivorax y Dermatobia hominis.
• Estereoscopio.
59
60
APENDICE
Figura 3. Amebas intestinales
64
truphozoi!c
1tj
Figura 4. Amebas de vida libre
65
Figura 5. Flagelados intestinales
66
Figura 6. Leishmania (amastigote)
Flagelo anterior
Cinetoplasto granda
Membrana ondulante
Cinetoplasto
Membrana Flagelo
ondulante
Trypanosoma cruzi Trypansoma brucei
Figura 7. Trypanosoma
67
Figura 8. Cabezas de Panstrongylus, Triatoma y Rhodnius
68
Ie
roph ite
hi
seq estered
Figura 9. Diferencias morfolégicas de Plasmodium en sangre periférica
69
ciego intestinal
bolsa del cirro
ventosa ventral
§léfldlJl8S Vit6ld§6fl8S condudo vitelino
vaso deferente
boca
poro genital
ventosa oral
Cirr0 metratermo
bolsa
del cirro
ventosa iitero
ventral
vaso
deferente vaso
deferente
Figura 10. Esquema de Fasciola hepatica
70
TREMATODES
Schistosoma
Figura 11. Huevo de Trematodos
http:IIwww.cdc.gov/ncidod/dpd/
71
ventosa oral boca

farirge
ciego intestinal
t
ventosa ventral
reservorio
Figura 12. Esquema de Paragonimus sp
ventosa oral
macho
ventosa ventral
hembra
ventosa oral
canal ginec6foro
Figura 13. Esquema de Schistosoma sp.
72
HUMAN BRAIN COW HEART PIG LIVER
i o in a d o d e F I i s s e r A . V n i e g r a A E A g u r - Ve g a L n o d rig u z /• ‹2004
Po r o I IIu ina n TJ p '‹vo r in o u•n Pa r i I Io No 4 pp
Figura 14. Esquema de Taenia solium, Taenia saginata y Taenia asiatica
73
Figura 15. Esquema de Echinococcus granulosus
Figura 16. Esquema de Dipylidium caninum.

A. Capsula ovigera B. Escolex C. Proglotido maduro D. Proglotido gravido
74
CESTODES
Figura 17. Huevos de helmintos
75
Figura 18. Esquema general de la Pulga
76
Espermateca
Figura 19. 1. Pu/ex irr/fans 2. Xenopsi/la

3. Tunga pentrans
77
Figura 20. Ctenocephalides be/is.

Vista lateral de la cabeza
Figura 21. Esquema de Piojos
A. Pediculus humanus B. Phthirus pubis
78
Queliceros
PalDoS Gnatosoma
Cerdas
Idiosoma
Figura 22. Esquema de Sarcoptes scabiei
Figura 23. Esquema de Demodex
79
cheliccro
I ri tos tcrnum
trochontcr
sternol plote
pen I r cane
spiroclc
mctapodol
corunclc
gen i tovcntr0 I
Figura 24. Esquema de Garrapata

GLOSARIO
• AGENTE INFECCIOSO: Organismo (bacteriano, rickettsioso, viral, micético,
protozoario o helmíntico) capaz de producir una infección o una enfermedad
infecciosa.
• ARTROPODOS: Invertebrado con patas articuladas y esqueleto quitinoso.
• AXOSTILO: Estructura rígida de posición axial que constituye el sostén de
algunos protozoos flagelados.
• BOTRIUM: Surco longitudinal que sirve como elemento de fijación en el escólex
de cestodos pseudofilideos. Plural: botria.
• COMENSALISMO: Relación simbiótica en la cual una especie, el comensal, vive a
expensas de otra especie, el hospedero, sin ocasionarle ningún daño.
• CRUSTACEO: Artrópodo con 5 pares de patas.
• CTENIDIO: Peine característico de la cabeza y porción anterior del tórax en las
pulgas.
• CONTACTO: Individuo (humano o animal) que ha estado en asociación con un
individuo infectado, teniendo la oportunidad de adquirir la infección.
• CONTAGIO: Transferencia directa del agente infeccioso desde la fuente de
infección al nuevo huésped.
• ECTOPARASITO: Parasito que vive en la superficie externa del hospedero.
• EMBRIOFORO: Cubierta que rodea a la oncosfera de los platelmintos.
• ENDOPAFL/\SITO: Parasito que vive en el interior del hospedero.
• ENFERMEDAD: Conjunto de fenómenos que se producen en un organismo a
consecuencia de la acción de una causa patógena, reaccionando contra ella.
• ESCOLEX: órgano de fijación o "cabeza" de un cestodo.
• ESTR©BILA: Conjunto de proglótides de un cestodo.
• EXUVIA: Muda resultante de las ecdisis.
• ENDEMIA: Prevalencia elevada y mantenida de una enfermedad humana
determinada dentro de un área geográfica.
• EPIDEMIA: Producción, en una comunidad o región, de casos similares en un
determinado periodo, en número claramente superior a la frecuencia habitual y
derivados de una fuente común o por diseminación.
• EPIZOOTIA: Lo mismo que epidemia, pero referido a animales.
• INESPECIFICIDAD. Porcentaje de casos en que la reacción resulta falsamente
positiva.
• ESPOROZOO: Protozoo parasito que se reproduce por esporogonia.
81
• ESPOROZOITO: Elemento resultante de la esporogonia de los esporozoos.

• ESQUIZOGONIA: Ciclo de reproducción asexuada de los esporozoos.
• ESQUIZONTE: Elemento resultante del ciclo esquizogénico.
• ESTROBILA: Conjunto total de proglótides que constituyen el cuerpo de un
cestodo.
• FOMITE: Objeto (agua, aire, toalla, etc.) que contiene elementos infectantes y
pasivamente puede ser vehículo mecánico en su transmisión indirecta.
• FORMA INFECTANTE: Fase del parasito capaz de infectar el huésped.
• GAMETOGONIA: proceso de reproducción sexuada de los esporozoos.
• HABITAT: Lugar donde en forma natural vive un ser biológico.
• HUESPED DEFINITIVO: Hospedero en el cual el parasito alcanza su madurez
sexual.
• HUESPED INTERMEDIARIO: Hospedero en el cual el parasito desarrolla parte de
su ciclo evolutivo, sin alcanzar su madurez sexual.
• IMAGO: Artrópodo adulto. Se usa especialmente en el caso de insectos.
• INFECCION: Entrada y desarrollo o multiplicación de un agente infeccioso en el
organismo de una persona o animal.
• INFESTACI©N: Alojamiento, desarrollo y reproducción de artrópodos en la
superficie del cuerpo, pelos, ropas objetos e incluso ambientes. Se emplea
también en el caso de roedores.
• INSECTO: Artrópodo con 3 pares de patas.
• INCIDENCIA: Número de casos nuevos de una enfermedad que se presentan
durante un periodo determinado, en relación con la población donde ocurren.
Generalmente se expresa en forma de tasa.
• INSECTICIDA: Sustancia química, natural o sintética, utilizada en el exterminio de
artrépodos. Se puede aplicar en forma de polvo, liquido, pulverizado, o aerosol.
• LARVA: Forma inmadura en el ciclo evolutivo de helmintos y artrópodos.
• MEROZOITO: Célula resultante del proceso de esquizogonia o división múltiple
que presentan algunos protozoos.
• METAZOO: Animal Pluricelular.
• MORBILIDAD: Relación entre el número de afectados de una enfermedad
determinada y la población total de una zona.
• MORTALIDAD: Relación entre el número de muertos por todas las causas y la
población total de una zona.
• MUDA: (ECDISIS): Vaina o tegumento que envuelve a artrópodos y a algunos
gusanos (nematodos) y que en las etapas juveniles, de crecimiento, se desprende
82
dando lugar a una nueva envoltura que puede desprenderse a su vez o ser
definitiva.
• MUTUALISMO: Tipo de simbiosis en la cual se benefician recíprocamente
hospedero y simbionte.
• MIASIS: Parasitación de Órganos o tejidos humanos o animales por larvas de
mosca.
• NINFA: Estadios juveniles tanto de insectos con metamorfosis incompleta como
de ácaros y garrapatas.
• ONCOSFERA: Larva con seis ganchitos que emerge de los huevos de los
eucestodos. También se llama hexacanto.
• OOQUISTE: Forma quística que contiene el cigoto resultante de la esporogonia
en los Apicomplexa y los cuales pueden estar cubiertos por una envoltura
translúcida (Cystoisospora) o estar desnudos (Plasmodium).
• PARASITO ACCIDENTAL: Parasito que se encuentra en un huésped no habitual.
• PARASITO FACULTATIVO: Es aquel que desarrolla algunos protozoarios y
hongos que viven sobre materias orgánicas en descomposición, pero en
ocasiones parasitan sobre heridas, ulceraciones, etc.
• PARASITO OBLIGADO: Es aquel que necesariamente en alguna etapa o
permanentemente ejerce su acción parasitaria.
• PARASITO PERIODICO: Parasito que cumple parte de su ciclo en el ambiente y
en el huésped.
• PARASITO PERMANENTE: Parasito que vive toda su existencia en o sobre su
hospedero.
• PARASITO TEMPORAL: Parasito que intermitentemente depende de un
hospedero para subsistir y luego lo abandona.
• PERIODO PREPATENTE: Etapa de la infección parasitaria comprendida desde el
momento de la infección hasta la aparición de la sintomatología o la presencia del
parasito.
• PROGL©TIDO: Segmento de la estróbilo de los cestodos, la cual contiene los
órganos reproductores masculinos y femeninos.
• PERIODO DE INCUBACIÓN: lntervalo que transcurre entre la infección de un
sujeto susceptible (persona o animal) y el momento que presenta las primeras
manifestaciones de la respectiva enfermedad.
• PUPA: Etapa en la metamorfosis de los dípteros, caracterizada por la existencia
de un pupario en cuyo interior se producen importantes cambios que culminan con
la formación del imago o insecto adulto.
FMH-USMP-Parasitología 2019
II
• QUISTE: Forma inmóvil de resistencia y de multiplicación, envuelta por una doble
membrana formada por los protozoos.
• SP: Término usado cuando se diagnóstica el género de un parasito y no se puede
identificar la especie.
• SUSCEPTIBLE: Persona o animal que carece de resistencia contra un agente
patógeno y que en consecuencia puede contraer la enfermedad si se expone a la
infección por dicho agente.
• TROFOZOITO: Forma vegetativa activa y que se alimenta, entre los protozoos.
• VECTOR: organismo animal, generalmente artrópodo, que puede transportar
activamente un agente desde la fuente infectante hasta un susceptible.
• VECTOR MECANICO: Es el vector que lleva en el exterior de su cuerpo o en
interior agentes patógenos.
• VIA DE INFECCION: Sitio (s) a través de los cuales se introduce el agente
etiológico en el organismo del huésped.
• XENO: Huésped.
• ZOONOSIS: Infección que se transmite en forma natural entre el hombre y
animales vertebrados y viceversa.
84
FMH-USMP-Parasitología 2019
II
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1. Botero, D. y Restrepo, M. 2012. Parasitosis Humanas. Texto y Atlas.

Quinta Edicién. Colombia.
2. Córdova, E., Neira, M., Liu, M., Vásquez, L., Martinez, E., Ayaqui, R., y
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Independencia. Segunda edición.
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auxiliares para el diagnóstico de las parasitosis intestinales.
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laboratorio para el diagnóstico de los parásitos intestinales del hombre.
Serie de normas técnicas N” 37. Lima — 2003.
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Buenos Aires 1991.
DIRECCIONES DE CORREOS ELECTRONICOS
1. American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. USA.

2. DPDx-CDC:
3. Atlas of Medical Parasitology:
4. SciELO (Brasil):
5. Journal of Medical Entomology:
6. Revista: Memorias do lnstituto Oswaldo Cruz (Brasil):
7. Revista: Annals of Tropical Medicine & Parasiytology.”
8. Organización Mundial de la Salud (OMS):
REVISTAS
American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. USA.

Atlas de la Sociedad de Biología de Rio de Janeiro. Rio de Janeiro. Brazil
Boletín Chileno de Parasitología. Santiago. Chile
Revista Peruana da Biología. Lima, Perú.
Revista Peruana de Medicina Tropical de la UNMSM. Lima. Perú

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FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

DEPARTAMENTO ACADEMICO DE CIENCIAS BASICAS

PROFESOR:................................................ GRUPO: ………...

PROPIEDAD INTELECTUAL: Departamento Académico de Ciencias Bésicas-USMP

II. AGENTES DE RIESGO

III. PRINCIPIOS BÁSICOS DE BIOSEGURIDAD

El término contención se utiliza para describir métodos seguros para manejar

IV. NIVELES DE CONTENCIÓN

El elemento mas importante de la contención es el cumplimiento estricto de las

Constituyen la primera línea de defensa cuando se manipulan materiales biológicos,

Las barreras de contención primaria son:

Es la protección del personal y del medio ambiente inmediato contra la exposición a

Se refiere al diseño y construcción de un laboratorio, lo que en seguridad biológica se

Los modos de transmisión en el laboratorio pueden ser insidiosos y algunas veces

El personal de Laboratorio está frecuentemente expuesto a niveles muy altos de los

TIPOS DE LABORATORIO CON RELACION AL NIVEL DE BIOSEGURIDAD

El personal de laboratorio cuenta con una capacitación especifica acerca de los

Es aplicable a las instalaciones clínicas, de diagnóstico, enseñanza, investigación o

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CLASIFICACION DE LOS MICROORGANISMOS POR GRUPO DE RIESGO

Agente biológico del grupo 1

Agente biológico del grupo 2

Agente biológico del grupo 3

El laboratorio debe tener características de diseño e ingeniería especiales. Sin embargo, se

En esta circunstancia, se puede lograr un nivel de seguridad aceptable para la practica de

Agente biológico del grupo 4

Son factores que interfieren en el examen, la ingestión de medicamentos previa a

Elementos normales: En un examen microscópico suelen encontrarse como

1. Recolecte la muestra de heces en un envase limpio y tapela. Asegúrese de no

Este método permite concentrar quistes de protozoarios, larvas y huevos de

B. MÉTODO DE CENTRIFUGACIÓN Y FLOTACIÓN

Técnica de Faust modificada

C. MÉTODO DE CONCENTRACIÉN: RITCHIE

Se basa en la concentración de quistes y huevos por sedimentación mediante la

1. Se mezcla 1 g de heces con 8 ml. de solución salina en un tubo. Homogenizar.

En el laboratorio, se desprende la cinta engomada del frotis pen anal por un

3. Métodos diagnósticos de hemo e histoparásitos

Después de las heces, la sangre es la muestra mas estudiada. La presencia de

METODOS DE EXÁMENES PARA INVESTIGACIÓN DE PARÁSITOS HEMÁTICOS

Secado al aire y eventualmente en estufa 37º C.

Coloración de frotis con colorante Wright

Coloración de gota gruesa

Los protozoos intestinales se presentan generalmente bajo tres formas de vida:

1. El trofozoíto o forma vegetativa, que generalmente es el que produce la patología.

2. El quiste o forma de resistencia que desarrolla el parasito para poder sobrevivir en

3. El prequiste que es una forma intermedia.

En el intestino humano se pueden encontrar protozoos patógenos y protozoos

• Heces frescas/fijadas en formol 10%

III. CARACTERISTICAS DE ALGUNOS PARASITOS INTESTINALES

Conocer microscopicamente las características morfológicas de los principales

1. Quiste de Entamoeba coli

Observación a 100X y 400X de aumento (Figura 1 y 2).

1. Entamoeba coli.“ en los quistes, de mayor tamaño de 10 a 35 micras (pm) de

2. Endolimax nana.“ El quiste oval o redondeado de 8-10 pm de tamaño,

3. lodamoeba butschlii.“ El trofozoíto mide de 8 a 20 micras y el quiste de 5 a 14 pm.

4. Giardia intestinalis”. El quiste es ovalado y mide de 10 a 12 pm en su diámetro

7. Ascaris lumbricoides.” Huevo: forma ovalada con cubierta mamelonada. Identificar

Trichuris trichiura.” Huevo: de forma elíptica, de color parduzco cuya dimensión

9 Enterobius vermicularis.“ Huevos: distinga la forma plana-convexa a cada lado y el

10. UNCINARIOSIS: infección intestinal producida por los nematodos Ancylostoma

12. Diphyllobotrium sp.” Huevo: de forma ovalada y distinga en ellos la cubierta