LABORATORIO DE AISLAMIENTO DE HONGOS AMBIENTALES

PRESENTADO POR:

PACHECO JANETH

ARAGON SOFIA

GIL ANA MARCELA

CASTRO GLORISMARTH

SUAREZ LUZ STEFANY

LEAL AROCA CINDY

PROFESORA:

ADRIANA SANDON

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE MICROBIOLOGIA

MICOLOGIA

VALLEDUPAR

2014
 INTRODUCCION

Los hongos son organismos cosmopolitas que pueden desarrollarse en los

sustratos más variados, en todos los climas de la tierra e incluso en
condiciones extremas. Su ámbito es tan amplio, que sus esporas incluso
sobrepasan la atmósfera (Aira et al., 2003). El desarrollo fúngico está
supeditado a ciertas condiciones ambientales tales como la humedad relativa,
temperatura, precipitación, inversiones térmicas, contaminación, disponibilidad
de sustrato y actividades humanas, las que influyen de manera determinante
en la proliferación y propagación de las partículas fúngicas hacia los espacios
interiores (Guerrero et al., 2003).

La mayoría de los hongos viven libres en el suelo o en el agua y obtienen su

energía por respiración o fermentación de materiales orgánicos solubles
presentes en estos ambientes. El aire no es un medio en el que pueden
desarrollarse los microorganismos pero es el portador de aerosoles biológicos
como polvo, gotitas de agua y otros, que pueden estar cargados de los
diversos grupos de microorganismos. De las capas de aire se han encontrado
esporas de hongos que proceden principalmente del suelo, de la vegetación y
del mar. Algunos de los géneros más comúnmente aislados del aire son
Penicillium, Aspergillus, Rhizopus, Mucor y Cladosporium, entre otros. Todos
los hongos se reproducen por esporulación. Las esporas fúngicas son
componentes normales de ambientes externos y pueden ser la fuente
contaminante de los ambientes internos y muchos de estos pueden servir como
sitios de amplificación para el crecimiento de los hongos (Bueno et al., 2003).
La inhalación sistémica de esporas y fragmentos de micelio de hongos puede
inducir una afección alérgica respiratoria, tanto en las vías aéreas superiores
como en las inferiores. Los componentes alergénicos de hongos contienen
moléculas, como glucoproteínas, proteínas y polisacáridos, que pueden
desencadenar reacciones de hipersensibilidad tipo I (Ruiz et al., 2006).

A continuación en esta práctica daremos a conocer los hongos ambientales que

se encuentran en los laboratorios de microbiología de la universidad popular
del cesar.

 HONGOS AMBIENTALES EN UNA BIBLIOTECA: UNA AÑO DE

ESTUDIO

Dante J. bueno. JulioO. Silva Guillermo Olive_2003

 OBJETIVOS

 Demostrar la presencia y distribución de los hongos que se encuentran

en el medio ambiente.

 analizar la morfología delos hongos que se han obtenido de diversas fuentes

 Diferenciar las estructuras fúngicas de cada uno de los hongos

encontrados en las muestra a analizar usando técnicas de cultivo y
coloraciones sencillas. Observar las características macroscópicas y
microscópicas de cada morfotipo.

 Conocer los importantes roles que cumplen los microorganismos en el

medio ambiente.
 MARCO TEORICO

HONGOS AMBIENTALES

www.fotciencia06.fecyt.es/macro/nmerosvivos.html/13/11/2013/6:10 pm
http://www.revistaciencias.com/publicaciones/EElEZylkAypNyfdfUV.php

Los hongos se encuentra tanto al aire libre como en interiores. Nadie sabe
cuántas especies de hongos existen, pero se calcula que puede haber desde
decenas de miles hasta quizá trescientas mil o más. Estos crecen mejor en
condiciones cálidas, mojadas o húmedas, y se propaga y reproduce mediante
esporas que pueden sobrevivir en condiciones ambientales, como la
resequedad, que no favorecen el crecimiento normal del hongo.

Los hongos en el ambiente/http://www.cdc.gov/mold/es/pdfs/faqs.pdf/13/11/2013/05:20

pm

Los hongos que pueden causar alergia no son los hongos comestibles. La
alergia a la humedad corresponde a una hipersensibilidad a los llamados
mohos u hongos ambientales, fundamentalmente a sus esporas. A diferencia
de los pólenes, las esporas fúngicas no aparecen en determinadas épocas,
sino en función de las condiciones de temperatura y humedad ambiental. En
un medio ambiente idóneo las esporas aparecen con extraordinaria facilidad y
rapidez.

En viviendas húmedas, oscuras, poco soleadas y/o ventiladas, así como en

sótanos o habitaciones con infiltraciones, pueden encontrarse elevadas
concentraciones de esporas de hongos. En el ambiente domestico, la ropa,
zapatos y otros objetos de piel, depositados en armarios cerrados son zonas
decrecimiento ideal. Cuando son muy abundantes producen “manchas de
humedad”. Son asimismo fuentes de hongos la tierra humeda de macetas,
humidificadores, aparatos de aires acondicionados mal mantenidos, cubos de
basura, etc. En zonas agrícolas, crecen en establos, graneros y donde haya
restos vegetales. Fuera del ambiente domestico, se encuentran poblaciones
importantes de mohos en industrias que utilizan la fermentación (lácteos,
cervezas, medicamentos, etc), silos y almacenes de frutas-verduras.

Se han identificado en todos los lugares en que se han puesto los medios de
cultivo para detectarlos, reconociendo mas de 100000 especies. Se han
recogido esporas en alturas superiores a 3000 metros, encontrándose altas
concentraciones en las nubes, el aire y bajo la mayoría de las condiciones
climatológicas. Pueden encontrarse tanto dentro como fuera de los domicilios,
dependiendo de las condiciones higiénicas del hogar y climatológicas del
exterior. La mayoría de las alergias son producidas por los hongos
anteriormente llamados imperfectos, los cuales necesitan para su crecimiento
un alto grado de humedad relativa, y la mayor parte de las especies, una
temperatura superior a 10º C. Sobreviven en condiciones adversas,
produciendo un gran número de esporas, que en ocasiones exceden al número
de granos de polen que hay en el aire. Las esporas de estos son muy
resistentes y suelen ser de tamaño pequeño, entre 3 y 10 micras.

Hay un cierto nivel de los hongos ambientales que puede ser considerado
como seguro. Esto depende de la concentración fúngica en los ambientes
externos y de los tipos de esporas presentes en el ambiente interno. Cada
oficina, cada edificio o cada casa deben ser considerados como un caso
separado y único. Generalmente, la concentración fúngica de los ambientes
internos es menor que la presente en los externos

Estableció que la concentración de hongos en ambientes internos por encima

de 2.000 UFC/m3 puede ser considerada como un factor de riesgo serio para la
salud de los ocupantes. Muchas esporas fúngicas son alérgicas, con capacidad
de producir respuestas alérgicas en individuos susceptibles. Un pequeño grupo
de hongos son patógenos y algunos producen micotoxinas, que pueden estar
presentes dentro de las esporas y pueden ser inhalados con ellas 2,6. De esta
manera, las bibliotecas, como un ambiente interno, son lugares aptos para el
desarrollo y mantenimiento de estos microorganismos que pueden causar daño
sobre los libros y las personas que trabajan y usan la misma.
Los hongos anemófilos se encuentran ampliamente distribuidos en la
naturaleza y generalmente se desarrollan sobre materia orgánica muerta; sin
embargo, al crecer en el interior de casas o edificios, lo pueden hacer sobre
cualquier substrato y contaminar alimentos, textiles, pisos, aparatos
electrónicos, etc.
Alergia a hongos/http://alergomurcia.com/pdf/Alergia_a_hongos.pdf/13/11/2013/03:52pm

Los principales hongos ambientales son:

Cladosporium sp. Penicillium sp. Mucor sp Aspergillus sp.

MATERIALES

 Asa micológica
 Asa redonda
 Azul de lactofenol
 Laminas
 Laminillas
 Caja de Petri con agar ogy
 Microscopio
 PROCEDIMIENTO

1. Tomamos cinco (5) cajas de petri con agar OGY, y las colocamos 15
minutos expuestas al ambiente de:

 Laboratorio microbiología : caja 1

 Cuarto del laboratorio: caja 2
 Laboratorio microbiología clínica : caja 3
 Área de lavado caja 4

Luego las incubamos a temperatura ambiente por 8 días.

2. A los 8 días de incubados, observamos características macroscópicas y

microscópicas de cada uno de los diferentes morfotipos presentados en
las distintas cajas.

3. Estos resultados fueron comparados con los diferentes grupos de

laboratorio
 BIBLIOGRAFIA

 http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp12.pdf

 Hongos ambientales en una biblioteca: un año de estudio

http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=63500602

 La sensibilización a hongos ambientales y su relación con

enfermedades atópicas en escolares http://scielo.sld.cu/scielo.php?
pid=S0864-21252010000400007&script=sci_arttext
 CUESTIONARIO

TECNICAS DE CUANTIFICACION DE MICROORGANISMOS

AMBIENTALES.

Método de exposición de placas

 Se toma una caja de petri previamente hidratada y Agar nutritivo.

 Se expone en un ambiente cerrado, durante quince minutos.

 Se lleva a incubación durante cinco días a temperatura ambiente la caja

de petri.

 La caja de Agar nutritivo se incuba durante 48 horas a 37 grados

centígrados.

 Se hace un recuento reportando en UFC

 Se identifican características macroscópicas de las colonias formadas

 Sobre una lámina desengrasada y limpia se coloca una gota de azul de

Lactofenol.

 Con una asa previamente esterilizada al mechero se toma Una pequeña

porción del hongo.

 Se pone la muestra en contacto con el azul de lactofenol.

 Sobre el portaobjetos se coloco un cubre objetos y se observa al

microscopio.

 Se observo con 10 y 40X en el microscopio

Método SAS compact

Fundamento del método

El método se basa en el muestreo del aire problema mediante el aparato SAS

(Surface Aire System) compact. De los muestreadores descritos en la, se
escogió éste por ser de fácil manejo, portátil y que permite elegir el medio de
cultivo adecuado a cada requerimiento.El aire muestreado se hace incidir sobre
un medio de cultivo determinado, según se pretendan valorar bacterias u
hongos. Posteriormente se procede a la incubación a una temperatura
adecuada y finalmente se efectúa el contaje de colonias expresando el
resultado en ufc/m3 (unidades formadoras de colonias por metro cúbico).

Toma de muestra

 Antes de empezar a tomar la muestra con el "SAS compact" ha de

esterilizarse la cubierta del aparato. Ésta puede llevarse a cabo por
medio del autoclave durante 20 minutos a 21 atmósferas. También se
puede efectuar limpiando la cubierta del aparato con una solución
desinfectante.

 A continuación se coloca la cápsula de Petri en el lugar indicado del

aparato de muestreo. Para manejar las cápsulas de Petri (conteniendo
ya el medio de cultivo) y el muestreador se recomienda hacerlo con
guantes estériles desechables. Después de cada bloque de toma de
muestras, limpiar la cubierta del muestreador con una solución
desinfectante, teniendo la precaución de que se haya secado totalmente
antes de tomar una nueva muestra.

 El aparato dispone de un conector de control de tiempo, dividido en

unidades que van de 1 a 15, representando cada una de ellas un tiempo
de 20 segundos. El volumen de aire muestreado en cada unidad es
equivalente a 30 litros, lo que implica que se pueden realizar muestreos
de una duración de 20 segundos hasta 5 minutos y con unos volúmenes
de 30 a 450 litros de aire.

 El tiempo y el volumen de muestreo dependen de la contaminación

ambiental que se sospeche. Cuanto mayor sea ésta, menor es el tiempo
de muestreo que se debe aplicar y viceversa.
http://www.catlab.com.ar/notas.php?
idm=528&accion1=notas&PHPSESSID=b8f00ec70c6b7241702438ce7a
522dbd

KIT DE 1 TEST COMPLETO de rastreo de bacterias perjudiciales y

esporas de mohos, por personal no especializado.

Incluye todo lo necesario (7 DESINFECTEST ® y 2 P/A) para detectarlas

en:

 Las cocinas: 1 D-STAPH, 1 D-ARCPC y 1 D-LM para detectar la

presencia de Estafilococos, Listeria, Bacterias totales,
Enterobacterias y Hongos
 Los aseos: 1 D-LM y 1 D-EC para detectar Hongos (incluidos
Dermatofitos), Coliformes, E.coli, Enterobacterias y Salmonella.
 Los dormitorios, pasillos, salas...: 1 D-MIX para detectar Bacterias y
Hongos 1
 El aire acondicionado: 1 D-MIX para detectar Bacterias y Hongos
 El agua que bebe su familia, compañeros o clientes: 1 MICROKIT®
P/A MCC, 1 MICROKIT® P/A ENTEROCULT para detectar
Coliformes, E.coli y Enterococos.
 2 PARES de guantes estériles para la toma de todas las muestras, 10
etiquetas para escribir dónde realizó cada toma, todo ello en maletín.
 Incluye el posterior análisis en nuestro laboratorio y el informe
completo de diagnóstico que le enviaremos a su casa
 Incluye el porte de envío del kit y de su devolución con el kit utilizado
 RESULTADOS

CAJA 1: LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

1 COLONIA

MORFOTIPO
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS

MEDIO DE CULTIVO: TO DE INCUBACION TIEMPÓ DE INCUBACION

Agar OGY Ambiente 8 días
DIAMETRO DE LA COLONIA COLOR DE ANVERSO COLOR DEL REVERSO
No se puede medir por que se Colonia blancas Colonias blancas
presento invasión de colonias
blancas.
PRESENTA PLEGAMIENTOS TEXTURA MARGEN
O SURCOS: algodonosa definido
No presento
CRECIMIENTO: no concéntrico, invadia un poco por una colonia blanca

CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
 TIPO DE HONGO DESCRIPCION MICROSCOPICA

Hifas aseptada gruesas,

conidioforo grueso, en las puntas
se observa conidias de color cafe.
Se considera que es Mucor sp.

CAJA 2: CUARTO DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

8 COLONIAS

MORFOTIPO 1
CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS

MEDIO DE CULTIVO: TO DE INCUBACION TIEMPÓ DE INCUBACION

Agar OGY ambiente 8 días
DIAMETRO DE LA COLONIA COLOR DE ANVERSO COLOR DEL REVERSO
No se puede medir Colonias negras con Colonias negras
borde blanco
PRESENTA PLEGAMIENTOS TEXTURA MARGEN
O SURCOS: algodonosa irregular
No presento
CRECIMIENTO: no concéntrico, se disperso por toda la caja

CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
 TIPO DE HONGO DESCRIPCION MICROSCOPICA

Hifas septadas gruesas, conidióforo

grueso, fialides y en las puntas se
observa conidias de color negro. Se
considera que es Aspergillus niger.

CAJA : LABORATORIO CLINICO

11 COLONIAS

MORFOTIPO 1

CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS

MEDIO DE CULTIVO: TO DE INCUBACION TIEMPÓ DE INCUBACION

Agar OGY ambiente 8 días
DIAMETRO DE LA COLONIA COLOR DE ANVERSO COLOR DEL REVERSO
No se puede medir por que se Colonia mostasa Colonia mostasa
presento invasión de colonias
PRESENTA PLEGAMIENTOS TEXTURA MARGEN
O SURCOS: algodonosa Irregular, invadiendo las
No presento colonias grises.
CRECIMIENTO: no concéntrico.

CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
 TIPO DE HONGO DESCRIPCION MICROSCOPICA

no hubo una identificación de una

No se identifico especie exacta.

CAJA 4: AREA DE LAVADO

5 COLONIAS

MORFOTIPO 1

CARACTERISTICAS MACROSCOPICAS

MEDIO DE CULTIVO: TO DE INCUBACION TIEMPÓ DE INCUBACION

Agar OGY ambiente 8 días
DIAMETRO DE LA COLONIA COLOR DE ANVERSO COLOR DEL REVERSO
No se puede medir por que se Colonia blanco Colonia blanco
presento invasión de colonias
PRESENTA PLEGAMIENTOS TEXTURA MARGEN
O SURCOS: algodonosa Irregular.
No presento
CRECIMIENTO: no concéntrico.

CARACTERISTICAS MICROSCOPICAS
 TIPO DE HONGO DESCRIPCION MICROSCOPICA

Dematiaceos no hubo una identificación de una

No se identifico especie exacta.

ANALISIS DE RESULTADO

Durante el laboratorio de hongos ambientales logramos identificar con respecto

a la información de todos los grupos que:

Denatiaceos, Fusarium sp y Penicillium sp son las especies dominantes en el

ambiente de los laboratorios, esto es debido a que contienen esporas que son
Con relacion a otros laboratorios específicamente clínicos encontramos que el
80% de las especies que habitan en estos lugares pertenecen a él genero
Aspergillus sp. Como alternativas de solución para el control de la diseminación
de las esporas encontramos algo muy novedoso como el ANTAGON WP este
es un mecanismo del efecto inhibidor lo cumple mediante la emisión de
sustancias o componentes volátiles como el dióxido de carbono, etanol,
acetaldehído, acetona, propanol, isobutanol e isopentanol, sustancias que
impiden el crecimiento de otros hongos, efecto conocido con fungistasis, que
consiste en un menor crecimiento micelial del patógeno e interferencia en la
biosíntesis de melanina, sustancia esencial para el crecimiento de los hongos.

CUESTIONARIO

1. Métodos que se utilicen para el rastreo de los hongos ambientales.

Para la captación del polen y esporas presentes en el aire existen

diferentes procedimientos agrupables en procedimientos pasivos y
activos o volumétricos.

CAPTACION POR IMPACTO ACTIVO “SAS COMPACT ”

El método se basa en el muestreo del aire problema mediante el aparato SAS
(Surface Aire System) compact. De los muestreadores descritos en la NTP-203,
se escogió éste por ser de fácil manejo, portátil y que permite elegir el medio de
cultivo adecuado a cada requerimiento.

El aire muestreado se hace incidir sobre un medio de cultivo determinado,

según se pretendan valorar bacterias u hongos. Posteriormente se procede a la
incubación a una temperatura adecuada y finalmente se efectúa el contaje de
colonias expresando el resultado en ufc/m3 (unidades formadoras de colonias
por metro cúbico).

Un volumen de aire es aspirado y conducido a traves de una superficie

perforada sobre una placa conteniendo un medio de cultivo adecuado. Este
metodo es útil para la captación de bacterias y hongos y es el que se ha venido
empleando en el INSHT para estos microoganismos, pero no es valido para la
captacion de granos de polen y solamente permite captaciones puntuales.

Reactivos y productos
Todos los reactivos deben tener como mínimo la especificación "para análisis".
El agua utilizada ha de ser bidestilada o de calidad equivalente.

Medios de cultivo
Triptisoy Agar (TSA)
Es un medio de cultivo sólido compuesto por:
Peptona de caseína...............15,0 g/l
Peptona de soja.......................5,0 g/l
Cloruro sódico.........................5,0 g/l
Agar-Agar.............................15,0 g/l
pH del medio a punto de uso: 7,3 aproximadamente
Preparación del medio:

Añadir 40 g de esta mezcla a un litro de agua destilada. Dejar embeber y llevar

a ebullición hasta disolver totalmente el agar. Esterilizar al autoclave durante 15
minutos a 121 ºC. Con esta preparación llenar las cápsulas de Petri, haciéndolo
en el ambiente estéril de la cámara de bioseguridad, dejar enfriar y una vez
solidificado el medio colocar las cápsulas 24 horas en la estufa de cultivo a
37ºC. Pasado este tiempo se observan las placas desechando las que
presenten contaminación.
Agar de sabouraud con cloranfenicol
Es un medio de cultivo sólido, específico para hongos, compuesto por:
Peptona de caseína............ 5,0 g/l
Peptona de carne............... 5,0 g/l
D (+) Glucosa................... 40,0 g/l
Cioranfenicol...................... 0,5 g/l
Agar - agar...................... 15,0 g/l
pH del medio a punto de uso: 5,6, aproximadamente
Preparación del medio:

Suspender 65,5 g de la mezcla en un litro de agua destilada y llevar a

ebullición. Esterilizar al autoclave durante 10 minutos a 121ºC. Evitar el
sobrecalentamiento que afectaría a la gelificación. Una vez distribuido en
placas de Petri hacer la prueba de esterilidad como se ha explicado en el punto
anterior.
Solución de Armil al 1/1000
Se disuelve 1 ml. de Armil en 1 litro de agua.

Aparatos y material
Muestreador de aire . "SAS compact"
Tal como se describe en el punto 5 de la Nota Técnica de Prevención nº 203,
existen diferentes tipos de muestreadores de aire para contaminantes
biológicos. En la presente NTP se expone el procedimiento a emplear con el
equipo "SAS compact" (ver la figura 1, cuyas características son las siguientes:
El aire a examinar es aspirado a una velocidad fijada durante un tiempo
variable,a través de una cubierta de protección perforada con múltiples
agujeros pequeños de diseño especial.
El flujo de aire es dirigido sobre la superficie de una cápsula de Petri del tipo
"Rodac", que contiene el medio de cultivo adecuado para el examen
microbiológico que se desee hacer.
El aparato es transportable, funciona con bateria recargable y el control del
tiempo de funcionamiento es programable.

Placas de cultivo
Se utilizan las placas tipo "Rodac", útiles también para análisis de superficies.
Estufas de cultivo
Estufa de cultivo a 37ºC de temperatura, para el cultivo de bacterias.
Estufa de cultivo a 28ºC de temperatura, para el cultivo de los hongos.
Contador de colonias

Procedimiento de análisis

Toma de muestra

Antes de empezar a tomar la muestra con el "SAS compact" ha de esterilizarse

la cubierta del aparato. Ésta puede llevarse a cabo por medio de la autoclave
durante 20 minutos a 21 atmósferas. También se puede efectuar limpiando la
cubierta del aparato con una solución desinfectante.
A continuación se coloca la cápsula de Petri en el lugar indicado del aparato de
muestreo. Para manejar las cápsulas de Petri (conteniendo ya el medio de
cultivo) y el muestreador se recomienda hacerlo con guantes estériles
desechables. Después de cada bloque de toma de muestras, limpiar la cubierta
del muestreador con una solución desinfectante, teniendo la precaución de que
se haya secado totalmente antes de tomar una nueva muestra.
El aparato dispone de un conector de control de tiempo, dividido en unidades
que van de 1 a 15, representando cada una de ellas un tiempo de 20
segundos. El volumen de aire muestreado en cada unidad es equivalente a 30
litros, lo que implica que se pueden realizar muestreos de una duración de 20
segundos hasta 5 minutos y con unos volúmenes de 30 a 450 litros de aire.
El tiempo y el volumen de muestreo dependen de la contaminación ambiental
que se sospeche. Cuanto mayor sea ésta, menor es el tiempo de muestreo que
se debe aplicar y viceversa.

Medios de cultivo

Triptisoy-agar
Se utiliza este medio de cultivo para efectuar el contaje de bacterias. Una vez
tomada la muestra, se trasladan las cápsulas de Petri al laboratorio, dejándolas
en la estufa de cultivo a 37ºC durante 48 horas.
Agar-Sabouraud con cloranfenicol
Se utiliza este medio de cultivo para efectuar el contaje de hongos. Una vez
tomada la muestra, se trasladan las cápsulas de Petri al laboratorio dejándolas
en la estufa de cultivo a 28ºC durante 5 días.
Recuento de colonias
Pasado el tiempo de incubación, se observa el crecimiento de las colonias y se
procede al recuento de las mismas mediante un contador de colonias que
proporciona el número de colonias formadas por placa.
Cálculos
Una vez determinado el número de colonias, y sabiendo el flujo de aire y el
tiempo de muestreo que se ha aplicado, se puede calcular el número de
unidades formadoras de colonias por metro cúbico de aire, aplicando la fórmula
siguiente:
siendo:
NC: número de colonias por placa
NU: número de unidades de tiempo empleadas en el muestreo
Las cápsulas de Petri una vez llevado a cabo el recuento se retiran del
laboratorio empleando un contenedor de residuos biológicos.
Campo de aplicación
En lugares que, por el tipo de trabajo que se realiza en ellos, no precisan ser
estériles, se recomienda llevar a cabo el recuento de hongos y bacterias en aire
cuando exista una sintomatología en la población expuesta que sugiera una
posible contaminación biológica causada por estos microorganismos.

Cuando el nº de ufc/m3 hallado sea superior a 500 se recomienda efectuar la

identificación de los gérmenes existentes en el aire muestreado. En ambientes
considerados estériles el nº de ufc/m3 debe ser 0.

CAPTACION POR IMPACTO ACTIVO: CAPTADOR BURKARD

Este método se basa en el impacto de una masa de aire sobre una superficie
captadora, que se desplaza con lentitud. La corriente de aire, en este caso, es
activa gracias a una bomba de aire colocada debajo del colector. El aire entra
por un orificio anterior e impacta sobre una superficie dispuesta verticalmente,
constituida por una cinta transparente, impregnada por sustancias adhesivas.

Este método es útil porque la cinta puede permanecer durante una semana
expuesta al aire. Gracias a los dispositivos mecánicos del aparato, el
movimiento lento de la misma permite separar las capturas diarias y, también,
hacer una aproximación horaria de las mismas. Por contra, debe tenerse
especial cuidado en el montaje de la cinta para la observación microscópica,
evitando la formación de burbujas y preparando montajes no demasiado
gruesos.
NTP 335: Calidad de aire interior: evaluación de la presencia de polen y espora
fúngicashttp://www.jmcprl.net/NTPs/@Datos/ntp_335.htm/13/11/2013/7:18 pm

CAPTACIÓN POR FILTRACIÓN ACTIVA. CAPTADOR MCV

El aire a examinar es aspirado, a través de un filtro de acetato de celulosa

(Millipore). Este tipo de filtro permite la identificación inmediata de las partículas
ya que se transparenta con aceite de inmersión. Consta de una cámara
filtradora con dispositivo de veleta, una bomba electromagnética de membrana
para la aspiración de aire a bajo volumen, un contador y un temporizador
horario. Este método fue diseñado por Suárez-Cervera & Seoane-Camba en
1983.

SAS ISO SUPER: SU COMPAÑERO EN LA MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

El muy conocido "SAS amarillo (Surface Air System)" se considera el estándar internacional
para los muestreadores de aire portátiles microbiológicos. Más de 25 años de experiencia se ha
adquirido en los cinco continentes ayudando a los microbiólogos en el sector hospitalario,
industria farmacéutica y alimentaria, y los campos de calidad del aire en interiores. La
experiencia también ha sido adquirida en la exploración del espacio como el SAS (Surface Air
System) se utiliza a bordo de la Estación Espacial Internacional. Este conocimiento ha
resultado en el desarrollo de la nueva "SAS-ISO 100" y "SAS-ISO 180".

La idea básica
• Para utilizar una simple placa para el aire y la superficie de muestreo
• Para tener la mayor flexibilidad de elección, ya sea placas de contacto o placas de Petri
• Para aplicar cGLP y cGMP a las operaciones de muestreo de aire
• Para establecer datos sobre el nivel microbiano en ambientes seleccionados
• Organizar el muestreo secuencial para obtener una muestra más representativa del aire en
condiciones reales de funcionamiento del

El "SAS - ISO" tiene las siguientes características nuevas:

• Rendimiento en el cumplimiento de la norma ISO 14698-1
• Pantalla LCD iluminada grande con pantalla táctil
• Todos los comandos de operador a través de teclado táctil para facilitar la limpieza
• Más de 70.000 litros de aire / 8 horas de autonomía
• Transferencia por infrarrojos de toma de muestras de datos a PC o impresora
• Hasta 300 ciclos de muestreo memorizada
• capítulo USP <1116> y 21 CFR 11 Cumplimiento
• Frecuencia de muestreo con precisión gestionada por el sensor de velocidad incorrecta anula
la aspiración de ciclo
• diseño evita la turbulencia en el flujo de aire unidireccional y re-aspiración de aire probado de
acuerdo con las especificaciones de la norma ISO

http://www.internationalpbi.it/docs/Minisiti/SAS/Vers.Inglese/saspcr.html/13-11-2013/7:45
PM

EL DECHADO DE AIRE DE SAS-PCR

recoger los microorganismos patógenos dispersos en el bioaerosoles para "casi en tiempo real"
de detección de pruebas de biología molecular o las pruebas tradicionales de cultivo
microbiológico.

Las características SAS PCR:

Aéreo y que el flujo de fluidos estériles entre sí a través de una boquilla y se vierte en un
recipiente con una bobina. El líquido se distribuye continuamente para prolongar el tiempo de
contacto entre bioaerosoles y la recolección de líquido.

http://www.internationalpbi.it/docs/Minisiti/SAS/Vers.Inglese/saspcr.html/13/11/2013/7:45p
m
CAPTADOR DE ALTO VOLUMEN MCV CAV-A/MB
Captador de alto volumen para determinación de partículas en
suspensión en inmisión, con recogida de muestra sobre filtro y
determinación gravimétrica en laboratorio.

Sistema de captación formado por un conjunto de

aspiración con bomba centrífuga y circuitería
de control electrónico del sistema montado en
caja de poliester-fibra de vidrio apta para
trabajo en intemperie, con bastidor de
sustentación del equipo. Funcionamiento,
medida y regulación del caudal controlado por
microprocesador. Regulación automática del
caudal programado con compensación
automática de la pérdida de carga por
colmatación del filtro o fluctuaciones de la red.
Normalización del caudal aspirado por
corrección de presión y temperatura. Interfaz
de comunicación con el usuario a través de
pantalla gráfica LCD de 240 x 128 puntos y
teclado.

http://www.internationalpbi.it/docs/Minisiti/SAS/Vers.Inglese/saspcr.html/13 /
11/2010/8:00 pm
 CONCLUSION

Los autores de este laboratorio finalizamos subrayando algo muy importante y

que debe quedar claro; los métodos de impacto activo nos permiten la
captación de microorganismos en el aire mediante una relación volumétrica
permitiendo expresar cuantitativamente las unidades formadoras de colonias
bacterianas o fungicidas, llegando en ciertos métodos separar capturas de aire
inclusive la identificación inmediata de las partículas siendo importantes en el
control y estudio de la contaminación ambiental.