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Term Odin Am I Cay Cre Cimiento
Term Odin Am I Cay Cre Cimiento
microbiano
<Po
H2O
<I> H2O
°2
Producto ~
<l>s <l>p
CHa30b3Nc3
Biomasa
<l>N <l>x
CHal0blNcl
CO2
<l>H 0
2
<I>C0
2
<1>x
<1>s
<1>p
<1>= <1>N
<1>0
<1>C02
<1>H20
1 al b1 Cl
1 a2 b2 C2
1 a3 b3 C3
E= d4 a4 b4 C4
0 0 2 0
1 0 2 0
0 2 1 0
La ecuacion 10.1 considera cuatro ecuaciones lineales entre los siete flujos. Solamente
tres flujos pueden variar independientemente y los restantes deben ser definidos por medio
de un balance elemental.
En un caso general, los flujos de biomasa (<1>x),sustrato (<1>s)y producto (<1>p)resultan
conocidos. EI sistema de ecuaciones, hasta este punto, no puede ser resuelto, haciendose
necesario plantear una serie de ecuaciones para este efecto. Los sistemas de crecimiento de
microorganismos pueden analizarse como una serie de reacciones de oxidorreduccion. Por
tal motivo es posible hacer un balance electronico del sistema.
EI concepto de grados de reduccion (a) fue introducido por Minkevich y Eroshin en 1973, y
mejorado por Erickson y colaboradores durante 1978. Este concepto puede definirse como el
numero de electrones disponibles para ser transferidos al oxigeno en la combustion del
compuesto. Este concepto de grado de reduccion resulta estrictamente una convencion.
Debemos recordar que el crecimiento aerobio implica una combustion del sustrato, siendo el
oxigeno el aceptor final de electrones. Los electrones disponibles para ser transferidos al oxi-
geno durante un cultivo aerobio, de cada elemento considerado aqui son:
Etanol = 4 + 3 + 1/2(-2)
Bi6xido de carbono = 4 + (2)(-2)
Glucosa = 4 + 2 + (-2)
Saccharomyces cerevisiae
(biomasa)
Carbon
.<1>x = Biomasa
<Px
Rendimiento biomasa / sustrato = Yx/s = --;;;;
<Px
Rendimiento biomasa / producto = Yx/P = ¢;
A. -~
't'P -
Yx/P
<Do = Oxigeno
La ecuaci6n 10.15 es un balance general del grado de reducci6n. Este grado aparece
como una cantidad conservada y no hay consumo ni producci6n de grados de reducci6n. Es
importante hacer notar que el grado de reducci6n resulta aqui puramente una convenci6n de
calculo y tiene poco que ver con las valencias. Es una opci6n de combinaciones lineales
de balances elementales.
-4<D0=<JX<DX-<JS[:X xIS
]+Op[:X] xlP
-4<D0 =<Dx
Os ---+--Op]
[ Ox YxlS '(xiP
1
Yxis =-- =0.235
4.26
1
Yx/P =--=0.521
1.92
1 [ 4 6] moles O2
¢o = ---4- + -0-.5-2-1= 0.34-m-o-I---C-bi-o-m-a-sa-
4.17 - -0-.2-3-5
Cuando se conocen 105 flujos de bi6xido de carbono y oxigeno, en lugar de 105 flujos de
producto y biomasa, el sistema puede resolverse aplicando el mismo procedimiento. Paraeste
efecto podemos utilizar los siguientes cocientes:
CO 2 ¢c02
Coeficiente respiratorio= QR= ----0- = -",--
2 '1'02
02 ¢o,
Consumo de oxigeno= Ro= -S- =--;p;-
EI coeficiente respiratorio es un valor que relaciona el flujo de C02 que sale del
fermentador y el flujo de oxigeno que entra al sistema. EIconsumo de oxigeno relaciona el
flujo de oxigeno con el consumo de sustrato. Todos estos valores estan dados en mol-C.
Los flujos de biomasa <Pxy de producto <pppueden determinarse facilmente de la siguiente
manera:
Velocidad de
crecimiento
(h-1)
Otra consideraci6n importante que debe hacerse, es el hecho que si bien la biomasa seca
esta constituida principalmente de C, H, 0 Y N como materia combustible, la biomasa contiene
tambien cantidades significativas de cenizas. EI contenido de cenizas puede variar de 5.25% a
13.75% de la biomasa seca con un valor promedio de alrededor de 8%. Las cenizas deben ser
consideradas para convertir la composici6n elemental en f1ujo de biomasa seca.
Crecimiento sin formacion de producto y
con una fuente simple de nitrogeno
En esta parte, analizaremos un caso restringido, en donde no hay formaci6n de producto (<I>p=
0) y el sustrato no contiene nitr6geno. Ademas, en este caso la fuente de nitr6geno puede ser
NH3, HN03 0 N2. En esta situaci6n s610se consideran seis flujos y s610 se requiere conocer a
dos de ellos para definir al sistema. Tambien, el balance elemental es posible para los cuatro
elementos.
Realizando un balance general de grade de reducci6n se puede calcular el flujo de
oxigeno <1>0= <1>5, quedando definido por la ecuaci6n siguiente:
1
¢o=-¢x ( --- as ]
4 Ys/x - ax
La ecuaci6n 10.32 puede simplificarse, si usamos el termino lIamado eficiencia del
oxigeno, llO:
De las ecuaciones 10.32 Y 10.33 resulta claro que si la eficiencia del oxigeno es igual a
uno (llo = 1) el flujo desde y hacia el sistema sera igual a cero (<1>0
= 0). Sin embargo, si el valor
de la eficiencia del oxigeno es menor a uno (llO < 1), habra un suministro 0 consumo de
oxigeno en el sistema. La combinaci6n de las ecuaciones 10.31 Y 10.32 nos permite determinar
el rendimiento del de la biomasa con respecto al oxigeno:
Ejemplo 10.2 Una levadura esta creciendo con metanol como fuente de carb6n yenergia.
Durante el crecimiento se producen 0.4 g de biomasa seca por cada gramo de metanol
consumido. La composici6n de la biomasa es CH1.800.5No.2y contiene 5% de cenizas.
Calcular el consumo de oxigeno.
EI rendimiento biomasa/sustrato se puede calcular convirtiendo a cantidades molares:
(0.4)(0.95)(32)
Yx/s = ( )() - 0.494
24.6 1
ax= 4 + (1.8) (1) + (-2) (0.5) + (-3) (0.2) =.L2
as= 4 + (4) (1) + (-2) (1) = 6
Ejemplo 10.3 Enun cultivo continuo de levadura, se utiliza glucosa como fuente de carbon
y energia. La fuente de nitrogeno es NH3. EIconsumo de glucosa es de 2.24 moles-C par
mol-C de biomasa formada y el consumo de oxigeno en base mol-C de biomasa es de
0.69 moles. Determinar si hay formacion de producto.
Se tiene un consumo de oxigeno medido de:
1 1
Yx/o =--=--=145
Yo/x 0.69
1 1
Yx/s = -- = -- = 0.446
Ys/x 224
Y (_4_) (
/
XO
(J x
110
1-110
) = _4_(
4.16
0.464 ) = 0.832 moles - C biomasa
1- 0.464 moles 02
Como el valor medido es mayor que el calculado, se supone que posiblemente hay
formacion de algun producto.
La medicion del carbono orgimico total (COT) del f1uido a la salida del fermentador del
ejemplo anterior mostro que, adem as de la biomasa y el C02, se tenia el equivalente a 0.34
moles de carbon por mol-C de biomasa producida. La diferencia en el consumo de oxigeno
entre 10 determinado y 10 calculado es de 0.512 moles de 02 por mol-C de biomasa seca. Si
sabemos que cada mol de oxigeno tiene cuatro electrones disponibles, sabemos que esta
diferencia implica una disponibilidad de, 0.512 x 4 = 2.05 electrones. De donde, 105 electrones
disponibles 0 el grade de reducci6n del producto puede ser estimado de la manera siguiente:
2.05
(Jp =--=6.03
0.34
Sabemos que el etanol tiene un grade de reducci6n de seis, as! que probablemente este
sea el producto de la fermentaci6n.
Una gran variedad de procesos formadores de productos no requieren del aporte de un aceptor
externo de electrones. En estes casas el sustrato tiene funciones tanto como donador como
aceptor de electrones. Para este caso tam bien se aplican sin ninguna restricci6n 105 balan-
ces elemental y de grade de reducci6n. EI sistema se muestra en la figura 10.2. La ecuaci6n
general de balance de grade de reducci6n queda como sigue:
H2O
<I> H2O
Producto
CHa30b3Nc3
<I>p cr3=crp
Biomasa
<I>X crJ=crX
CHa,Ob,Nc,
Figura 10.2 Sistema de flujos para el ana/isis macrosc6pico del crecimiento microbiano anaerobio sin aceptor de
electrones.
EIvalor de llO se calcula de la ecuacion 10.33 Y esta relacion es muy util para el analisis de
estos procesos.
Otro factor importante en el crecimiento anaerobio es la produccion de C02. Este flujo
puede deducirse a partir de un balance de carbon y de la ecuacion 10.34, quedando:
Yx/ =(:x
e )(,~~oJ
donde K es una constante que depende del numero de moles de electrones que son transferidos
por mol de aceptor de electrones y YX/e es el rendimiento de biomasa en terminos de aceptor
de electrones (mol-C/mol). Para el oxigeno, el valor de K es de cuatro, pero existe una gran
variedad de aceptores de electrones (tabla 10.2).
02 + e- -+ 2 02- 4 moles/mol 02
C02 + 4 H2 -+ CH4 + H20 8 moles/mol C02
504 -+ $2- 8 moles/mol sulfato
N03 -+ NH3 8 moles/mol nitrato
N03 -+ N02 2 moles/mol nitrato
1
N02 -+ 2N2
2 1
CH2 -+ "3 CH30,j, + "3 C02
Ejemplo 10.3 Un organismo con composicion elemental de CH l.S00SNO.2 crece
anaerobicamente usando glucosa como fuente de carbon y amonio como fuente de
nitrogeno. EI nitrato es el aceptor de electrones y se producen 0.6 moles-C de biomasa
por cada mol-C de sustrato. EI nitrato es reducido a nitrogeno gaseoso. lCuanto nitrato
es reducido por mol de biomasa producida?
La eficiencia de oxigeno se determina con la ecuacion 10.33:
Entonces por cada mol de biomasa producida se reducen 0.49 moles de nitrato.
Los principios de la termodinamica revisados en 105 primeros capitulos del presente libro,
pueden aplicarse al crecimiento microbiano. Los cambios de ental pia 0 calor, asi como 105
cambios de energia libre durante el crecimiento de los microbios pueden ser determinados
realizando una serie de calculos numericos. Suponiendo la idealidad, podemos decir que la
entalpia 0 la energia libre de Gibbs del sistema sera igual a la suma de las entalpias 0 energias
libres parciales molares de 105 componentes, Estos valores parciales molares dependeran
unicamente de las condiciones de temperatura, presion y concentracion del componente en
cuestion. Asi por ejemplo, la energia libre de Gibbs parcial molar (potencial quimico) sera
funcion de la concentracion del componente en cuestion.
c
-=fli ° +RTln .()
=fli Ci
n
donde f.!i es el potencial quimico 0 energia libre molar del compuesto i y donde f.!? es la
energia libre molar del compuesto a una concentracion de 1 M. Para efectuar esta estimacion
es necesario hacer dos consideraciones: La ental pia y la energia libre deben ser tratadas como
energias estandares, 0 sea a concentraciones de 1 M, a presion atmosferica y a 298 oK de
temperatura. La segunda consideracion concierne al hecho de que en crecimientos aerobios
la combustion del sustrato produce C02 y H20, de donde el bioxido de carbona, el agua y el
mitrogeno elemental no pueden suministrar energia para 105 sistemas vivos. Entonces, podemos
decir que el contenido energetico disponible sera equivalente a la entalpia de combustion
(llH°cl y energia libre de combustion (llGod del sustrato.
Lasentalpias y las energias libres de combustion pueden ser referidas a mol-C y relacionadas
al grado de reduccion. Un analisis estadistico (tabla 10.3) nos muestra de la existencia de las
siguientes relaciones:
llHg= 775 a [KJ/mol-C] [10.41]
KJ/mol
Grado de
Compuesto Formula
reduccion ~Hg ~Gg ~Hg;O' ~Gg;O'
KJ/mol
Grado de
Compuesto Formula
reduccion ~Hg ~Gg ~Hg /a ~Gg /a
Grafito C 4 394 394 98.5 98.5
Mon6xido de carbono CO 2 257 283 128.5 141.5
Amonio NH3 3 329 383 109.7 127.7
Acido nitrico HN03 -5 7.3 -30 -1.5 6.0
Hidrazina N2H4 4 602.4 622 150.6 155.5
Acido sulfhidrico H2S 2 323 247 161.5 123.5
Acido sulfuroso H2S03 -4 -249.4 -329 62.4 82.3
Acido sulfurico H2SO4 -6 -507.4 -602 84.6 100.3
Biomasa CH1.800.SNO.2 4.8 541.2 560 112.8 116.7
La figura 10.3 muestra los valores de entropia de combustion calculados por medio de
la ecuacion 10.43 Y correlacionados al grado de reduccion de todos los compuestos de la
u
° aI
III
<aE
1- .
-:>
~
2.5 5.0
Grado de reduccion, cr
Figura 10.3 Contribucion de la en tropia, TDoS (KJ/mol·C), a la entalpia de combustion, en condiciones estandar, en
funcion del grado de reduccion, cr, de los compuestos de la tabla 10.2.
tabla 10.3. Hay una clara tendencia y la contribuci6n entr6pica se aumenta cuando
incrementa el grado de reducci6n.
Existen compuestos en los cuales sus calores de combusti6n no siguen la ecuaci6n 10.41,
Por ejemplo, el oxigeno y el acido dtrico que presentan grados de reduccion de -4 y
-5, respectivamente, siendo calores de combustion cercanos a cero. Por esta razon, estos
compuestos son aceptores de electrones efectivos.
Debido al incremento de la entropia en los sistemas, la energia libre que ingresa a un sistema
nunca es menor de la energia libre que deja al sistema. De esta situacion, podemos definir a
la eficiencia termodinamica del proceso, en relacion al balance de la energia libre entrante y
saliente. Sin embargo, existe el problema de que la energia libre no puede ser definida por si
sola y requiere para esto ser definida por medio de un valor de referencia. Si nosotros escogemos
arbitrariamente un valor basal, entonces pod em os calcular facilmente la eficiencia termo-
dinamica de la manera ilustrada en la figura 10.4. La relacion entre la energia libre saliente del
sistema y la energia libre entrante es la eficiencia termodinamica,
~C2
77th = ~C
1
6CX
1]c =
6Cs + (~) 6CN [10.48)
Yx/s c4
Si referimos nuestro analisis termodinamico a la ental pia de combustion podremos definir
la eficiencia entalpica,
6Hx
1]H = (
6Hs + ~)6HN
Yx/s c4
en donde C1 y C4 son 105 contenidos de nitrogeno de la biomasa y de la fuente de nitrogeno,
respectivamente.
En un sistema de cultivo sin aporte de p.nergia mecanica, 0 sea sin agitacion, el balance de
entalpia (figura 10.5) estara dado por la siguiente igualdad:
donde cDo es el f1ujo de calor del sistema 0 calor disipado durante el cultivo.
<1> CO
2
Figura 10.5 Diagrama de f1ujo de enta/pia en un sistema de crecimiento microbiano sin agitacion.
La ecuaci6n 10.52 nos permite estimar la producci6n de calor durante el crecimiento, si se
conocen el calor de combusti6n de la biomasa y la eficiencia entalpica del cultivo.
Regresemos a la ecuaci6n 10.41, la cual nos relaciona a la entalpia de combusti6n y el
grado de reducci6n:
!'..Hx = 115 ax [10.53]
!'..Hs = 115 as [10.54]
!'..HN = 115 d4aN [10.55]
1150"x
1JH =
1150"s
Yx/s
+115( C~~4 )O"N
1150" X
<1>Q= 4<1>0 460 <1>0
o"x
La ecuaci6n 10.58 nos indica el valor constante del calor producido durante el crecimiento
con respecto al consumo de oxigeno. Esta proporcionalidad tiene un valor de 460 Kl/mol 02.
Dicha relaci6n puede ser facilmente generalizada para todos 105 cultivos aerobios.
La relaci6n del flujo de calor y del flujo de oxigeno (ecuaci6n 10.58) se deriv6 para un
proceso aerobio, sin formaci6n de producto y usando una fuente de carb6n que no contiene
nitr6geno. Ahora, haremos el analisis para un proceso de crecimiento microbiano aerobio, con
la formaci6n de producto. Comenzando con un balance del grado de reducci6n, tenemos:
tlHj
(Y. =--
I 115
<1>stlHs + <1>NtlHN
= <1>xtlHx+ <1>ptlHp
+ 4<1>0
Con esto queda demostrado que la relacion es general y su validez depende de que
sea valida la igualdad tlH; = 115 OJ.Una clara excepcion es cuando se usa acido nitrico
(HN03) como fuente de nitrogeno, debido a que este compuesto no obedece ala ecuacion
anterior, tlHj = 6oj.
Ejemplo 10.4 Un organismo crece en acido acetico como (mica fuente de carbon yenergia.
La fuente de nitrogeno es el amonio y no hay formacion de productos durante el crecimien-
to. La composicion elemental de la biomasa es CH1.800.sNo.2.Calcular la produccion de
calor si el rendimiento biomasa/sustrato es de 0.4.
Existen dos maneras de solucionar este problema.
a) Calculando Tjo por medio de la ecuacion 10.33:
ryo = Yx/s( :: )
4
1]0 = 0.4(4.2 ) = 0.42
<1>s
~Hs + <1>N
~HN = <1>x
~Hx + <1>Q
en donde el flujo de nitrogeno puede estimarse a partir del balance de este elemento:
<1>0
= <1>s
( 1150s) + <1>N
( 1150N) - <1>x
( 11 50x)
<1>0=115 [(2.5) (4) + (0.2) (0) - (1) (4.2)] = 667 KJ/ mol-C biomasa seca
(0.096)(25.13)
f/Js= - 2.622f/Jx
0.92
(0.0141)(25.13)
f/Jp=-----=0.385f/Jx
0.92
(C1)
f/JN= (C )f/Jx=0.17f/Jx
4
t/Jo = ( ~~ )[4.16 + (0.385)(6) - (2.622)(4)] = 1.0045t/Jx
Para producir una biomasa con la misma composici6n elemental a partir del mismo
sustrato se requiere la transferencia de la misma cantidad de energia libre de Gibbs. Por
10 que la producci6n de biomasa en el cultivo con nitrato estara dado por la siguiente
ecuaci6n:
(t.C
Yx/s =
O
]
N~J (0.55) (3446)
= --'- (0.55) = 0.52 mol- C biomasa / mol- C sustrato
L1CN, 365
Tabla 10.4 Ganancia de energia libre de Gibbs durante la transferencia de una mol de
electrones de la glucosa a diferentes aceptores de electrones