Instituto Tecnológico de Acapulco

Prácticas de laboratorio

Ingeniería Bioquímica
Materia
Microbiología de Alimentos
Profesor
M.C. Miguel Ángel Díaz Alday
Diseño experimental
“Sulfito Reductores”
Alumno
Téllez Reza Guadalupe
Número de control
15320628
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Prácticas de laboratorio

Contenido
INTRODUCCION ...................................................................................................................... 3
OBJETIVO ................................................................................................................................ 3
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ......................................................................................... 3
HIPÓTESIS ............................................................................................................................... 4
MARCO TEORICO .................................................................................................................... 4
MATERIALES, SUSTANCIAS Y EQUIPO..................................................................................... 5
Medios de cultivo ................................................................................................................... 5
PROCEDIMIENTO .................................................................................................................... 5
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS............................................................................................... 6
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INTRODUCCION

Los clostridium sulfito reductores son aquellas bacterias de morfología bacilar,

G+, anaerobias estrictas, capaces de formar esporas y con capacidad de reducir
el sulfito a sulfuro.
Se suelen usar para apreciar la calidad higiénica del agua y productos animales
o de origen animal. Su número es escaso en productos frescos. La capacidad
de esporular de los microorganismos pertenecientes a este grupo les confiere
una gran resistencia.
Especies del género clostridium tienen una supervivencia mucho mayor que
cualquier otro indicador bacteriano de contaminación fecal debido a su
capacidad de formadora de esporas.
El recuento de esporas es considerado como el indicardor mas importante de
las bacterias anaerobias capaces de formar esporas. Estas estructuras de
supervivencia suelen presentarse en alimentos enlatados que no han sido
producidos bajo condiciones de calidad en cada proceso y malas condiciones
de almacenamiento.
La técnica se basa en encontrar el número de colonias de bacterias
esporuladas y con capacidad sulfito reductoras desarrolladas en medio de
cultivo solido glucosado con sulfito sódico y una sal de hierro.

OBJETIVO
 Determinar la presencia de clostridium sulfitos reductores.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Las enfermedades transmitidas por los alimentos (ETA), son causadas por el
consumo de alimentos contaminados con microorganismos patógenos o sus
toxinas. La contaminación de los alimentos pueden ser endógena, cuando el agente
etiológico está en los animales mismos, o bien pueden contaminarse con
organismos provenientes del medio ambiente donde se almacena, maneja o
procesa el alimento.
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HIPÓTESIS
El método de sulfito reductores es una alternativa para definir la calidad de alimentos
y determinar si es o no una fuente de infección que ponga en riesgo la salud del ser
humano.

MARCO TEORICO
Clostridium es un género de bacterias anaerobias, bacilos grampositivas, parásitas
y saprófitas algunas de ellas, que esporulan, y son móviles, en general por
intermedio de flagelos peritricos. Toman la forma de fósforo, palillo de tambor o huso
de hilar, de ahí su nombre griego "Klostro", que significa huso de hilar. Las especies
más importantes son el Clostridium botulinum productor del botulismo, el Clostridium
novyi, Clostridium septicum, Clostridium perfringens productor de la gangrena
gaseosa y Clostridium tetani productor del tétanos.

Uno de los microorganismos patógenos para el hombre es Clostridium perfringens,

considerado como causante de infección grave de las herida denominadas
gangrenas gaseosa desde 1892; poco después, en 1895 y en 1899, se le relacionó
con brotes de gastroenteritis en Londres y finalmente, debido a la aparición de
brotes asociados con las comidas de las escuelas y con platos de pollo precocinado
en los EEUU (1945) ratificaron de modo válido a C. perfringens como una causa de
intoxicación alimentaria C. perfringes, es un organismo anaerobio Gram-positivo de
forma bacilar que forma esporas ovales subterminales. Se diferencia de los demás
clostridios en que los bacilos, relativamente grandes, son cápsulados e inmóviles;
crece a temperaturas de 12 a 50ºC, aunque es muy lento a temperaturas inferiores
a 20ºC pero extraordinariamente rápido al rango de temperatura entre 43 y 47ºC,
con un tiempo de generación de sólo 7,1 minutos
Las colonias sospechosas pueden ser confirmadas por la ausencia de movilidad,
por su capacidad de reducir el nitrato a nitrito, por la fermentación de la lactosa y
por la licuación de la gelatina.

La intoxicación alimentaria por C. perfringes es generalmente una enfermedad

autolimitante, no febril, que se manifiesta por náuseas, dolor abdominal, diarrea y
vómito; su comienzo ocurre a las 8 a 24 horas después de la ingestión del alimento
que contenía al microbio en su forma vegetativa: la dosis infectiva ha sido calculada
en 1000000-100000000 ufc por gramo de alimento. Las células vegetativas
ingeridas resisten la acidez del estómago, pasan al intestino delgado donde crecen,
esporulan y liberan una enterotoxina de naturaleza proteica asociada a la envoltura
de la espora, que en ocasiones son resistentes al calor de hasta 100ºC durante una
hora. La mayoría de los casos están relacionados con productos cárnicos tales
como estofados, jugos de carne, articulaciones de la carne asada, empanadas con
carne, porciones grandes de carne rellena, etc. Otros alimentos que pueden estar
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contaminados son las canales de aves de corral, el pescado, las hortalizas, los
productos lácteos, los alimentos deshidratados, etc. que han sido expuestos al sol,
el polvo y la materia fecal en la que se pueden encontrar esporas4.

MATERIALES, SUSTANCIAS Y EQUIPO

 Probeta
 Matraz erlen meyer
 Agua destilada
 Pipetas
 Asa bacteriológica
 Mechero
 Tubos de ensaye
 Gradilla
 Incubadora a 55°C
 Baño maria
 tripode

Medios de cultivo
 Agar sulfito-polimixina-sulfadiazina (SPS)

PROCEDIMIENTO
1. Medir 20 gr de muestra y agregar en 100 ml de agua destilada en un matraz
erlen meyer.
2. Hervir durante 5 minutos en baño maría
3. En 5 tubos de ensayo agregar 10 ml de agar sulfito polimixina sulfadiazina a
55°C
4. Agregar 3.3 ml de la muestra preparada a cada tubo, homogeneizar y
agregar una tachuela(oxidable) a cada tubo
5. Introducir los tubos en baño maria a 55°C durante 20 minutos
6. Enfriar y volver a introducir los tubos en baño maria a 55°C durante 10
minutos.
7. Enfriar e incubar a 55°C de 24 a 48 horas.
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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
http://es.slideshare.net/adriianapaolag/recuento-de-clostridium-sulfito-reductores (1).
http://es.scribd.com/doc/131169716/Recuento-de-Esporas-de-Clostridium-Sulfito-
reductores#scribd (2).