Mol.
Células 32, 445-450 30 de noviembre, 2011 DOI /
10.1007 / s10059-011-0132-5
S100A2 Nivel cambios están relacionados con periodontitis
Humanos
Sun-Hee Heo 1, Young-Jin Choi 1, Ji-Hyun Lee 1, Lee Jae-Mok 2, *, y Je-Yoel Cho 1, *
La periodontitis es una enfermedad inflamatoria, la cual, cuando es grave, puede
resultar en la pérdida de dientes, que afecta a la calidad de vida. S100A2 fue
previamente identificado como un componente de fluido crevicular gingival (GCF) vía
el análisis del proteoma, pero no se ha investigado si S100A2 juega un papel en la
periodontitis. En este estudio, hemos analizado la expresión de ARNm de S100A2
en los tejidos gingivales de pacientes con enfermedad periodontal normales y de
anuncios y se comparó con la de S100A8 y S100A9. Quantitative Real-Time PCR
reveló que los niveles de expresión de ARNm de S100A2, S100A8, S100A9 y se
upregulated significativamente en los tejidos gingivales con gingivitis, periodontitis
moderada y periodontitis grave en comparación con los tejidos normales. Además,
las proteínas S100A2 en GCF y medios de comunicación de lipopolisacárido (LPS)
acondicionado tratados con células Jurkat se confirmaron por ELISA. los niveles de
proteína S100A2 fueron significativamente mayores en GCF en grupos gingivitis y
periodontitis moderada que en los grupos normales. expresión S100A2 ARNm y la
secreción de proteínas también se incrementaron por la estimulación de LPS.
Sobre la base de la sobre regulación de S100A2 en las células inmunes
estimuladas con LPS, tejidos gingivales y GCF de grupos de enfermedades
periodontales, se concluye que S100A2 es un componente funcional en la
respuesta inmune durante la periodontitis y puede servir como un biomarcador
potencial para la periodontitis.
INTRODUCCIÓN
La periodontitis es una enfermedad inflamatoria crónica que resulta en la destrucción del
periodonto, que es la causa más común de pérdida de dientes en el mundo. La
periodontitis también se relaciona con enfermedades sistémicas, tales como la
enfermedad cardiovascular (Suzuki et al., 2010) y la diabetes (Nagasawa et al., 2010). La
periodontitis se ve afectada por factores genéticos y ambientales. Los factores genéticos
incluyen polimorfismos del gen de la interleucina-1, interleucina-10 y el receptor de
Fc-gamma, rasgos de antígeno leucocitario humano y agregación familiar. Los factores
ambientales incluyen el tabaquismo, la higiene bucal, el estrés y las enfermedades
sistémicas (Stabholz et al., 2010). Además, periodontitis se caracteriza por un cambio en
las bacterias orales de principalmente Gram-positiva a las especies principalmente
Gram-negativos, que incluyen Porphyromonas gingivalis, forsythia Tannerella y dentícola
Treponema ( Darveau, 2010).
1 Departamento de Bioquímica, Facultad de Odontología de la Universidad Nacional de Kyungpook, Daegu 700-422, Corea, 2 Departamento de Periodontología, Facultad de Odontología de la Universidad Nacional de
Kyungpook, Daegu 700-412, Corea
* Correspondencia: jeycho@knu.ac.kr (JYC); leejm@knu.ac.kr (JML)
Recibido el 21 de junio de del 2011; Revisado el 12 de de agosto de del 2011; aceptado el 25 de de agosto de del 2011; publicado en línea el 9 de septiembre de, 2011
palabras clave: el fluido crevicular gingival, el tejido gingival, lipopolisacárido, periodontitis, S100A2
Moléculas
y
células
© 2011 KSMCB
proteína S100 se identificó como una proteína de cerebro por Moore en
1965, y estrechamente relacionados moléculas, S100A1 y S100B, se aislaron de la
misma fracción del cerebro (Donato, 1999; Zimmer et al., 1995). Veintiún proteínas
S100 humanos son conocidos en la actualidad, con similitud que van desde 22% a
57%. El clúster S100A1 a S100A16 se encuentra en la región cromosómica 1q21,
S100B se encuentra en el cromosoma 21, y S100P y S100Z están en los
cromosomas 4 y 5, respectivamente (Fritz et al., 2010). proteína S100 es una
proteína de bajo peso molecular (9-13 kDa) que se modula por Ca 2+ la unión a
través de los motivos de mano EF (Donato, 2003; Han et al, 2011;. Schafer y
Heizmann, 1996). La expresión de miembros de la familia S100 está restringido en
la célula y / o tipo de tejido. Por ejemplo, S100A2 se expresa en pulmón, riñón y
células lisas y del músculo del corazón; S100A4 se expresa en fibroblastos,
células mioepiteliales, células musculares lisas y corazón, y células tumorales;
S100A6 se expresa en fibroblastos, células tumorales, y células lisas y del
músculo del corazón; S100A8 y S100A9 se expresan en células epiteliales,
granulocitos y monocitos; y S100P se expresa en la placenta (Donato, 1999). Cada
miembro de la familia S100 se asocia con una enfermedad específica en base a su
patrón de expresión. Por ejemplo, S100A1 está asociada con cardiomiopatías;
S100A2 a S100A6, S100A10, S100B y S100P están asociados con el cáncer;
S100A7 está asociado con la psoriasis; S100A8, S100A9 y S100A12 con están
asociadas con trastornos inflamatorios; y S100B se asocia con la
neurodegeneración (Donato, 2003;. Marenholz et al,
2004). modelos de ratones knockout de diversas proteínas S100 han revelado que las
funciones de S100A1 en la contractilidad cardíaca, S100A4 está implicado en la
tumorigénesis y metástasis tumoral, y S100B juega un papel en el sistema nervioso.
Sin embargo, los modelos knockout han sido menos útil en la determinación de la
función de otras proteínas S100. Por ejemplo, un modelo knockout S100A8 es
embriones letal, y knockout de cualquiera de S100A9 o s100a11 no tienen anomalías
obvias (Marenholz et al., 2004).
Varios miembros de la familia S100 están relacionados con la periodontitis. Varios
estudios han sugerido que un heterodímero de S100A8 o S100A9, llamado calprotectina /
relacionados con la mieloide-proteína (MRP), podría ser un marcador de la periodontitis. La
calprotectina se correlaciona significativamente con ambos indicadores clínicos de la
periodontitis, índice gingival y la profundidad de sondeo, y los biomarcadores actuales de
periodontitis, tales como colagenasa, la interleucina-1 β y la prostaglandina E2 (Kido et al,
1999;.. Nakamura et al, 2000). Además de-
446 S100A2 en periodontitis
ción, S100A8 fue identificado como una de las principales proteínas de respuesta en la
periodontitis crónica (Lundy et al., 2000) y los niveles de S100A8 fueron
significativamente más altos en el tejido gingival inflamatoria que en el tejido normal
(Lundy et al., 2001). S100A8 y S100A9 se identificaron en GCF de un paciente
periodontitis en comparación con las proteínas del suero del mismo paciente (Kojima et
al., 2000). Se analizaron los datos recientemente proteoma gingivales fluido crevicular
(GCF) para identificar biomarcadores periodontitis. Entre las proteínas identificadas en
este estudio fueron varias proteínas S100 incluyendo S100A2, S100A6, S100A8,
S100A9, s100a11, S100A12 y S100P (manuscrito presentado). Curiosamente, a
diferencia de las otras proteínas mencionadas, S100A2 no había sido detectada
previamente en la saliva o el proteoma GCF en condiciones normales o enfermas.
El objetivo de este estudio fue comparar los niveles de expresión y secreción de
S100A2 en los tejidos gingivales y GCF de pacientes con periodontitis e individuos
sanos. S100A2 ARNm se detectó en los tejidos gingivales en diferentes etapas de la
enfermedad periodontal y en comparación con los niveles de ARNm de S100A8 y
S1009 que previamente fueron sugeridos como biomarcadores candidato
periodontitis. La expresión y secreción niveles de S100A2 fueron más altos en el
tejido gingival y GCF de los pacientes gingivitis y periodontitis moderada que en
pacientes normales. La expresión de mRNA y proteínas secretadas de S100A2 se
incrementaron en lipopolisacárido (LPS) inducida por las células inmunes. Nuestros
resultados sugieren que S100A2 podría ser un biomarcador potencial para la
enfermedad periodontal.
MATERIALES Y MÉTODOS
Los tejidos gingivales y de fluido crevicular gingival
muestras de tejido gingival se obtuvieron de pacientes sometidos a cirugía
periodontal. muestras de fluido crevicular gingival (GCF) se recogieron de pacientes
con periodontitis e individuos sanos en el Departamento de Periodontología, Facultad
de Odontología de la Universidad Nacional de Kyungpook. El protocolo estándar fue
aprobado por el IRB del Hospital Universitario Nacional de Kyungpook (. IRB NO
74005-830). El consentimiento informado se obtuvo de todos los donantes. Los
tejidos gingivales se clasificaron como normal, gingivitis, periodontitis moderada, y la
periodontitis severa de acuerdo con criterios tales como el índice gingival
considerado reacción inmune, la profundidad de sondaje, pérdida adjunta clínica y la
pérdida de hueso en la radiografía. Para el análisis cuantitativo usando PCR en
tiempo real, los tejidos gingivales se aislaron a partir de 14 individuos sanos
(normales), 13 pacientes con gingivitis crónica, 48 pacientes con periodontitis
moderada, y 27 pacientes con periodontitis severa. los niveles de proteína S100A2
en el GCF se determinaron por ELISA en muestras de GCF recogidos de 19
individuos sanos, 39 pacientes con gingivitis crónica, 48 pacientes con periodontitis
moderados y 33 pacientes con periodontitis grave.
Cultivo de células
células Jurkat (línea celular de linfoblastos como de células T humanas), THP1 (línea
celular de leucemia monocítica aguda humana) y células HL-60 (células de leucemia
promielocítica humana) se cultivaron en medio RPMI suplementado con 10% FBS en
presencia de 5% de CO 2
a 37 ° C. Para la estimulación de lipopolisacárido (LPS), se incubaron las células en
medio RPMI sin FBS durante 1 h, y se reemplazó el medio con o sin LPS en los
gingivales
tiempos y las concentraciones indicadas. por Streptococcus mutans (S. mutans) y Streptococcus
mitis (S. mitis) estimulación, 5 × 10 5 las células se incubaron en medio RPMI con 1%
de FBS y S. mutans o S. mitis durante 3 h.
Extracción de ARN y PCR en tiempo real
El ARN celular total se aisló de tejido gingival o Jurkat
células usando el reactivo TRIzol (Invitrogen) siguiendo las instrucciones del fabricante.
El ARN total (2 μ g) se utilizó para sintetizar cDNA de hebra sencilla utilizando oligo (dT) 18 como
cebador y el Omniscript transcriptasa inversa (Qiagen, Alemania). cebadores específicos
de genes fueron diseñados utilizando Primer 3, una herramienta de diseño de cebadores
basados ​en la web. Los niveles de expresión de ARNm de 3 genes S100 y un gen de
referencia (GAPDH) se determinaron mediante PCR en tiempo real usando los siguientes
cebadores: Sentido S100A2 5 '-
GGCTGTGCTGGTCACTACCT-3 ', S100A2 antisentido 5 '- CCT
GCTGGTCACTGTTCTCA-3 ', S100A8 sentido 5 '- ATGCCGTCT
ACAGGGATGAC-3 ', S100A8 antisentido 5 '- ACGCCCATCTT TATCACCAG-3 ', S100A9
sentido 5 '- CAGCTGGAACGCAACA TAGA-3 ', S100A9 antisentido 5 '- TCAGCTGCTTGTCTGCATT
', sentido GAPDH 5 '- GAGTCAACGGATTTGGTCGT-3 ', y antisentido GAPDH 5 '- GACAA
GCTTCCCGTTCTCAG-3 '. tiempo real basada en Florescence PCR se llevó a
cabo en un OPTICON DNA Engine ® 2 sistema (MJ Research, EE.UU.), utilizando
SYBR Green I (Molecular Probes, USA). La reacción consistió en 40 ciclos de 95
° C durante 30 s, 50 ° C durante 40 s y 72 ° C durante 60 s. GAPDH humana se
amplificó como un control interno y se usó una referencia para normalizar cada
muestra.
aislamiento de proteínas
La proteína total se recogió de GCF, los medios de células cultivadas Jurkat y de los
medios de células cultivadas HL-60. muestras de GCF se diluyeron en 20 μ l de NaCl al
0,9% y se centrifugó para eliminar los contaminantes tales como residuos de tejido, y el
sobrenadante se transfirió a un nuevo tubo. medios cultivadas se recogieron a partir del
sobrenadante por centrifugación durante 3 min a 100 × sol. Los medios de comunicación se
concentraron por ácido tricloroacético (TCA) / precipitación con acetona. Las
concentraciones de proteína en el GCF y medios condicionados se midieron usando el
método de Bradford.
ELISA
los niveles de proteína S100A2 se cuantificaron por ELISA (Cusabio) según las
instrucciones del fabricante. Brevemente, se añadió cada muestra a un pocillo y
se incubaron durante 2 h a 37 ° C. El líquido se retiró de cada pocillo, 100 μ Se
añadió la solución de trabajo de detección de reactivo A, y las muestras se
incubaron durante 1 h a 37 ° C. Se retiró la mezcla, y se lavaron los pocillos con
tampón de lavado (400 μ l) usando una pipeta multicanal. Después del lavado, se
añadió una solución de trabajo de detección de reactivo B a cada pocillo, y las
muestras se incubaron durante 1 h a 37 ° C. Los pocillos se lavaron, se añadió la
solución de sustrato, y las muestras se incubaron durante 30 min a 37 ° C. La
reacción se detuvo mediante la adición de 50 μ l de solución de paro a cada
pocillo. La densidad óptica a 450 nm de cada pocillo se midió usando un lector de
microplacas.
análisis estadístico
Los datos se presentan como la media ± SE. La significación estadística se realizó
mediante ANOVA de una vía seguido por el estudiante de t- test para muestras no
apareadas. Probabilidad (valor de p) de menos de 0,05 se consideró significativo.
RESULTADOS
la expresión de ARNm de S100A2, S100A8, S100A9 y en los tejidos
muestras de tejido gingival se recogieron de 42,4 ± individuos sanos de 16,4 yearold
(normal), 50.6 ± pacientes gingivitis 14,7 años, 47,2 ± 7.7 años de edad, pacientes con
periodontitis moderada y 47.5 ± 7,2 años de edad, pacientes con periodontitis grave
(Fig. 1A). El grupo normal consistió de 9 mujeres y 5 individuos de sexo masculino, el
grupo gingivitis constaba de 7 mujeres y 6 pacientes de sexo masculino;
 Sun-Hee Heo et al.
UNA
segundo do
re mi
el grupo periodontitis moderada consistió de 21 mujeres y 27 pacientes
masculinos, y el grupo periodontitis severa consistió en 10 mujeres y 17 varones
(Fig. 1A). Los niveles de expresión de ARNm de GAPDH se utilizaron como
referencia y no difirieron entre los 4 grupos (Fig. 1b).
Los niveles de expresión de ARNm de genes S100A2, S100A8 y S100A9
fueron más altos en los tejidos gingivales de grupos gingivitis y la periodontitis
que en el grupo normal; sin embargo, los 3 genes S100 muestran diferentes
perfiles de expresión de ARNm entre la gingivitis, periodontitis moderados y
grupos periodontitis severa (Figs. 1C, 1D, y 1E). La expresión de S100A2 no
difirió entre la gingivitis, periodontitis moderada y grupos periodontitis severa (Fig.
1C), mientras que la expresión de S100A8 fue ligeramente superior en el grupo
de gingivitis que en los dos grupos periodontitis (Fig. 1D), y la expresión de
S100A9 fue mayor en el grupo periodontitis moderada que en la gingivitis y la
periodontitis severa grupos (Fig. 1E).
expresión de la proteína S100A2 en el fluido crevicular gingival (GCF)
Se evaluaron S100A2 expresiones de proteínas en GCF para determinar si
S100A2 podría ser un indicador o biomarcador de la gingivitis y / o periodontitis,
similar a la S100A8. muestras de GCF se obtuvieron de 34,7 ± individuos sanos
11,1 años (9 mujeres y 10 varones, normal); muestras gingivitis eran COL-
447
Figura 1. La expresión de S100A2, S100A8 y S100A9
ARNm en los tejidos gingivales de lo normal, la
gingivitis, la periodontitis moderada, y los pacientes
con periodontitis severa. (A) información de la muestra
de tejido. Para la cuantificación de la expresión de
ARNm de 3 genes S100, los tejidos gingivales se
recogieron de normal (n = 14), gingivitis (n = 13),
periodontitis moderada (n = 48) y pacientes con
periodontitis grave (n = 27). valores ciclos (B) umbral
(Ct) de GAPDH para las muestras en tiempo real,
PCR. Para la normalización de cada muestra de
control interno PCR, GAPDH, se utilizó. El valor Ct de
GAPDH en muestras no difirió entre los grupos. (C, D,
y E) Las expresiones de ARNm de S100A2, S100A8,
S100A9 y en los tejidos gingivales utilizando PCR en
tiempo real. ARN total fue extraído de los tejidos
gingivales en normal, gingivitis, periodontitis
moderada, y los pacientes con periodontitis severas.
Para la cuantificación, el control PCR interno, GAPDH,
se usó como una referencia para normalizar cada
muestra. La barra horizontal indica los medios de
cantidad relativa contra GAPDH en cada grupo.
cionado del 44,3 ± pacientes 13.6 años (19 mujeres y 20 varones); muestras
periodontitis moderadas se recogieron de
51.4 ± pacientes 9,3 años (23 mujeres y 25 hombres); y graves muestras
periodontitis se recogieron de 51,5 ± pacientes 9,3 años de edad (10 hembras y 23
machos) (Fig. 2A). Las muestras de GCF se ensayaron para determinar la cantidad
de GCF requerido para la detección de S100A2 (datos no mostrados). Para el
análisis actual ELISA, las muestras de GCF deben combinarse para contener 40 μ g
de proteínas. Los niveles medios de S100A2 en el GCF eran 130,3, 173,5, 201,0 y
125,4 pg / ml en normal, gingivitis, periodontitis moderada y muestras periodontitis
severa, respectivamente (Fig. 2B). los niveles de S100A2 en GCF fueron mayores
en las muestras de gingivitis y periodontitis moderada que en las muestras normales
con la gran variación entre todos los grupos ensayados. niveles S100A2 no se
correlacionaron con el género o la edad (datos no mostrados).
LPS aumenta la expresión de ARNm y la secreción de S100A2 en las células
inmunes
La expresión de mRNA de S100A2 en células Jurkat, THP1 y células HL-60 se midió
usando PCR en tiempo real después del tratamiento con 30 a 1000 ng / ml de
lipopolisacárido (LPS) durante 6 h. expresión S100A2 ARNm se aumentó de una
manera dependiente de la dosis después de la estimulación LPS excepto en 300 ng /
ml en células Jurkat y 200 ng / ml en células THP1, aunque S100A2 ARNm fue también
448 S100A2 en periodontitis

UNA Figura 2. expresiones de proteínas de S100A2 en el fluido crevicular gingival

(GCF) de lo normal, la gingivitis, la periodontitis moderada, y los pacientes con
periodontitis severa. (A) Información sobre muestras de fluido crevicular gingival.
expresiones de proteína (B) S100A2 en el fluido crevicular gingival analizados
mediante un ensayo de ELISA S100A2. Las proteínas se aislaron a partir de
fluido crevicular gingival en normal (n = 19), gingivitis (n =

39), periodontitis moderada (n = 48) y pacientes con periodontitis grave (n =

33). De cuatro a ocho muestras se agruparon para detectar S100A2 en el
segundo fluido crevicular gingival por ELISA. Un total 40 μ se utilizó g de proteínas
para cuantificar la expresión S100A2 por el ELISA. Las barras horizontales
indican la media de los niveles de S100A2 en cada grupo.

UNA

segundo

Fig. 3. niveles S100A2 aumentaron por la estimulación LPS en las células inmunes. (A) La expresión de mRNA de S100A2 en las células inmunes estimuladas con LPS. mRNAs fueron extraídos de las
células Jurkat después del tratamiento LPS a la concentración indicada durante 6 h. Los niveles de expresión de S100A2 mRNA fueron evaluados por el valor Ct de S100A2 sobre el valor Ct de GAPDH
como patrón interno. expresión S100A2 se regulaba positivamente por el tratamiento LPS (30 a 1000 ng / ml) en células Jurkat (a), células THP1 (B) y células HL-60 (c). (B) secretadas niveles de
proteína de S100A2 en células Jurkat y células HL-60 después del tratamiento LPS. las células Jurkat se incubaron con o sin LPS (100, 300, o 1000 ng / ml) durante 3 h o 24 h (a) y células HL-60 fueron
incubadas con o sin LPS (30 o 100 ng / ml) durante 24 h (segundo). Un total 25 μ g de proteínas extraídas de los medios de comunicación se utiliza para medir los niveles de proteína S100A2 mediante un
ELISA.
 Sun-Hee Heo et al.
UNA
segundo
elevada en 300 ng / ml o 200 células ng / ml de LPS tratados en comparación con las células
no tratadas (Figs. 3A (a) y (b)). Sin embargo, la expresión de S100A2 ARNm se redujo de
una manera Depen-dosis-abolladura después de la estimulación LPS en células HL-60 (Fig.
3A (c)).
Además, los niveles de secreción S100A2 también se evaluaron en células Jurkat y
células HL-60 después de la estimulación LPS. Nuestro estudio proteómica identificó la
S100A2 en el proteoma GCF, y su presencia en GCF se confirmó en este estudio (Fig.
2B). La secreción de la proteína S100A2 fue ligeramente mayor en las células tratadas con
LPS en comparación con las células no tratadas a las 3 h y 24 h, como se determina por
ELISA (Fig. 3B). La secreción de S100A2 en dos tipos de células se aumentó mediante el
tratamiento LPS.
expresión S100A2 ARNm por Streptococcus mutans y
Streptococcus mitis tratamiento
Dado que la expresión S100A2 ARNm puede ser diferente dependiendo de los
estimulantes y tipos de células inmunes, la expresión de S100A2 ARNm se confirmó
en otras células inmunes HL-60 mediante la introducción de microorganismos que
habitan en la boca. Aunque la expresión S100A2 ARNm no se vio afectada por la
introducción de
S. mitis en las células HL-60, la expresión de S100A2 ARNm se incrementó
significativamente por S. mutans a las 2 y 4 × 10 7 tratamiento CFU (Fig. 4A). Por el contrario,
en las células Jurkat, la expresión de S100A2 mRNA fue significativamente mayor a los 2 y
4 × 10 7 tratamiento CFU de
S. mitis que en el grupo no tratado (Fig. 4B). Estos resultados mostraron que las expresiones
S100A2 ARNm son diferentes dependiendo de los tipos de células y tipos de
microorganismos.
DISCUSIÓN
En los EE.UU., la mitad de los adultos sufren de periodontitis crónica, y alrededor del 10%
de la población está en riesgo de desarrollar periodontitis destructiva grave (Albandar,
2002). En Corea, la prevalencia de la enfermedad periodontal se reportó alrededor del 50%
de las personas mayores de 50 años (2009 estadísticas nacionales de salud, Ministerio de
Salud y
449
Fig. 4. niveles S100A2 aumentaron Streptococcus
mutans y Streptococcus mitis la estimulación en
las células HL60 (A) y células Jurkat (B). La
expresión de mRNA de S100A2 en Streptococcus
mutans ( a) y
mitis Streptococcus ( b) las células estimuladas.
Los ARNm se extrajeron de las células inmunes
después de S. mutans
tratamiento o S. mitis a las concentraciones
indicadas (1, 2, 4 × 10 7
CFU) durante 3 h. los niveles de expresión de
ARNm de S100A2 fueron evaluados por el
valor Ct de S100A2 sobre el valor Ct de
GAPDH como patrón interno.
Bienestar, República de Corea, ISSN desde 2005 hasta 6362). A pesar de la prevalencia
de la enfermedad periodontal en Corea ha disminuido gradualmente desde 2007 a 2009,
todavía es más alta que en el Reino Unido (2009 adulto Dental Health) y Estados Unidos
(NHANES 2005-2008). Hay varios biomarcadores periodontitis que podrían ayudar en el
diagnóstico, tratamiento y seguimiento de la periodontitis. Nuestro estudio identificó la
proteómica S100A2 en el GCF, que no ha sido previamente vinculado a la periodontitis.
En este estudio, hemos demostrado la proteína y los niveles de ARNm de S100A2 en
tanto GCF y tejidos gingivales relacionadas con enfermedades periodontales de
anuncios, y demostraron que la expresión de ARNm y proteína secretada niveles de
S100A2 fueron elevados por LPS y microorganismo.
S100A2 se designa como S100L y CaN19. S100A2 se aisló originalmente a partir
de pulmón bovino y se ha sabido que se expresa principalmente en los tejidos del
riñón y pulmón bovino (Glenney et al, 1989;. Marenholz et al., 2004). S100A2 se une
2 Ca 2+ y 2 Zn 2+ iones; Zn 2+ la unión a S100A2 disminuye su Ca 2+ afinidad. S100A2
también interactúa con p53 en un Ca 2 + - de manera dependiente, que afecta a la
estabilidad de la interacción S100A2-p53 (Mueller et al.,
2005). Además, la interacción de S100A2 con tropomiosina regula la interacción entre
F-actina y tropomiosina en microvellosidades (Gimona et al, 1997;.. Mandinova et al,
1998), y las funciones de S100A2 como un quimioatrayente de eosinófilos (Komada
et al,. 1996). Aunque S100A2 se regula por incremento en no pequeñas carcinomas
de pulmón de células y carcinoma escamoso esofágico, se considera un supresor de
tumor, ya que es el regulado en muchos cánceres, incluyendo el melanoma maligno,
cáncer de próstata, cánceres de mama, cánceres de pulmón y cánceres orales
(Salama et Alabama.,
2008). En este estudio, mostramos que S100A2 se expresó en los tejidos gingivales,
fluido crevicular (GCF) y inmunes células gingivales. Además, S100A2 se expresó
diferencialmente en grupos periodontitis de anuncios (. Figs 1 y 2), y S100A2
expresión se regula por incremento en células Jurkat estimuladas con LPS y THP1
células (Fig. 3) y en células HL-60 de microorganismos estimuladas y células Jurkat
(Fig. 4). Estos resultados sugieren que juega un S100A2
450
papel en la respuesta inmune relacionada con la periodontitis.
A diferencia de S100A1 y S100A4, que están predominantemente localizado en el
citosol, S100A2 se conoce principalmente para ser situado en el núcleo de la célula y
también se ha demostrado para ser secretada (Komada et al, 1996 (Mandinova et al.,
1998);. Nagy et al., 2001). En este estudio, se detectó secreción de S100A2 en el GCF y
en las células inmunes (células Jurkat) también por ELISA (Figs. 2B y 3B). expresión
S100A2 ARNm también se confirmó en 14 normal y 88 muestras periodontitis
clasificados. Los niveles de expresión de S100A2 mRNA fueron significativamente
mayores en los grupos de enfermedades periodontales que en el grupo normal, lo que
sugiere que S100A2 podría ser un biomarcador potencial para la enfermedad
periodontal, similar a la S100A8 (Fig. 1). Sin embargo, los niveles de secreción de
S100A2 en GCF debe investigarse más con un tamaño de muestra más grande para
validar esta proteína como un biomarcador útil para periodontitis.
En conclusión, nuestros resultados muestran los patrones de expresión de S100A2 en
los tejidos gingivales y GCF en la enfermedad periodontal clasificada y la regulación positiva
de S100A2 en células Jurkat estimuladas con LPS. La expresión de mRNA de S100A2 fue
significativamente mayor en los grupos de enfermedades periodontales que en el grupo
normal. Además, la expresión S100A2 se regulaba positivamente por LPS y de
microorganismos que habitan en la boca. Estos resultados sugieren que las funciones de
S100A2 en la respuesta inflamatoria relacionada con periodontitis, similar a S100A8 y
S100A9, y pueden servir como un potencial biomarcador periodontitis.
EXPRESIONES DE GRATITUD
Agradecemos al Dr. Jung Min Kim y el Dr. Kim Shukho en el Departamento de
Microbiología, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Kyungpook por
brindarnos Streptococcus mutans y mitis Streptococcus. Este trabajo fue apoyado por
una beca del Instituto de Investigación Biomédica del Hospital Universitario Nacional
de Kyungpook (2009).
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