ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

Instituto Politécnico Nacional

Departamento de Bioquímica

Laboratorio de Métodos de Análisis

“ANALISIS ESPECTROFOTOMETRICO DE UN SISTEMA MULTIPLE”

Elaboró: Sara Moreno Solís

SECCION 3

Colaboradoras:

-Citlali Carolina Mendieta Pérez

-Beatriz López Marceliano

Docente: Gabriela Edith Olguín Ruiz

Fecha de Realización: 20 de Septiembre de 2018

Fecha de Entrega: 27 de Septiembre de 2018

Ciclo Escolar 2018-2019

OBJETIVOS
-Comprobar la Ley de la Aditividad en un sistema múltiple.
-Determinar constantes fotométricas y aplicarlas en el cálculo de la concentración de los
componentes de un sistema múltiple.
RESULTADOS
DETERMINACION DE LAS LONGITUDES DE ONDA DE TRABAJO ( λ1 Y λ2)
Tabla 1. Valores de absorbancia para construir los espectros de absorción de K2Cr2O7 y de
KMnO4.

Longitud de Absorbancia K2CrO7 Absorbancia

onda(nm) KMnO4
340 1.931 0.391
350 1.867 0.372
360 1.767 0.338
370 1.62 0.293
380 1.425 0.241
390 1.109 0.181
400 0.889 0.118
410 0.694 0.08
420 0.61 0.071
430 0.488 0.072
440 0.592 0.081
450 0.585 0.098
460 0.558 0.12
470 0.514 0.149
480 0.441 0.195
490 0.338 0.277
500 0.251 0.366
510 0.19 0.442
520 0.14 0.498
530 0.101 0.545
540 0.075 0.548
550 0.059 0.519
560 0.051 0.443
570 0.047 0.325
580 0.046 0.26
590 0.045 0.185
600 0.045 0.143
 2.5
λ1 de trabajo λ2 de trabajo
para K2Cr2O7 para KMnO4
2
Absorbancia

1.5

0.5

0
330 380 430 480 530 580
Longitud de onda(nm)
A K2Cr2O7 KMnO4

Fig 1. Espectro de absorción de K2Cr2O7 y de KMnO4 en un intervalo de longitudes de onda de 340nm

a 600 nm.

¿Por qué se eligen estas longitudes de onda?

La elección de estas longitudes de onda para cada compuesto se debe, a ciertos criterios
establecidos por la Ley de Aditividad, que son: Las dos longitudes de onda presentan
mayor absorción de un compuesto que de otro, además de que a esas longitudes de onda
los dos compuestos son capaces de absorber, las longitudes de onda elegidas están
relativamente separadas, las absorciones de los compuestos no es similar y las absorciones
que se tienen de los compuestos en esas longitudes de onda están dentro del rango del
mínimo error fotométrico.
Tabla 2. Valores de λMÁX para K2Cr2O7 y KMnO4
Compuesto λMÁX

K2Cr2O7 380
KMnO4 500
 OBTENCION DE LAS ABSORTIVIDADES MOLARES DE CADA COMPONENTE A LAS DOS
LONGITUDES DE ONDA SELECCIONADAS (λ1 Y λ2)
Tabla 3.- Curvas de calibración de K2Cr2O7 y KMnO4 a λ380 y λ500.
Compuesto Dilución Concentración A λ380nm A λ 500nm
Molar(Cm)
1:7 0.000228 0.236 0.021
1:6 0.000266 0.278 0.021
1:5 0.00032 0.328 0.027
K2Cr2O7
1:4 0.0004 0.394 0.036
1:3 0.000533 0.546 0.053
1:2 0.00054 0.789 0.088
1:7 0.0000571 0.027 0.047
1:6 0.0000666 0.031 0.073
1:5 0.00008 0.033 0.079
KMnO4
1:4 0.0001 0.036 0.116
1:3 0.000133 0.048 0.147
1:2 0.0002 0.057 0.224

Ejemplo de cálculo para las concentraciones molares:

Formula: 𝑪𝟏 ∗ 𝑽𝟏 = 𝑪𝟐 ∗ 𝑽𝟐 Formula: 𝑪𝟏 ∗ 𝑽𝟏 = 𝑪𝟐 ∗ 𝑽𝟐

Para K2Cr2O7 dil 1:7 Para KMnO4 dil 1:7

𝑪𝟏 ∗𝑽𝟏 𝟎.𝟎𝟎𝟎𝟒𝑴∗𝟏𝒎𝒍
𝑪𝟏 ∗ 𝑽𝟏 𝟎. 𝟎𝟎𝟏𝟔𝑴 ∗ 𝟏𝒎𝒍 𝑪𝟐 = = = 𝟎. 𝟎𝟎𝟎𝟎𝟓𝟕
𝑪𝟐 = = = 𝟎. 𝟎𝟎𝟎𝟐𝟖 𝑽𝟐 𝟕
𝑽𝟐 𝟕

0.9
0.8
Absorbancia λ380 nm

0.7 y = 1430x - 0.1166

0.6 R² = 0.8484
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1 y = 211.75x + 0.0162
R² = 0.97
0
0 0.0001 0.0002 0.0003 0.0004 0.0005 0.0006
Concentracion molar (Cm)

dicromato permanganato Linear (dicromato)

Linear (dicromato) Linear (permanganato) Linear (permanganato)
 0.25 Fig 2.-Curva de calibración de K2Cr2O7 y KMnO4 a λ380 con
y = 1196.9x
valores - 0.0127
de ecuación de la recta y coeficiente de correlación.
0.2 R² = 0.9895
Absorbancia λ500 nm

0.15

0.1
y = 173.02x - 0.0249
0.05 R² = 0.7905

0
0 0.0001 0.0002 0.0003 0.0004 0.0005 0.0006
Concentracion molar (Cm)

dicromato permanganato Linear (dicromato)

Linear (dicromato) Linear (permanganato) Linear (permanganato)

Fig 3.-Curva de calibración de K2Cr2O7 y KMnO4 a λ500 , con valores de ecuación de la

recta y coeficiente de correlación.
Tabla 4.- Valores de am para K2Cr2O7 y KMnO4 a λ470nm y λ510nm.
Sustancia
K2Cr2O7 KMnO4
Absortividad
0.001457 0.0002419
am a λ380nm
0.0001394 0.000719
am a λ500nm
*Resultantes de las pendientes de una ecuación lineal para cada compuesto a diferentes longitudes de
onda.

COMPROBACIÓN DE LA LEY DE LA ADITIVIDAD EN UN SISTEMA MÚLTIPLE.

Tabla 5.- Valores de Cm y absorbancia en las mezclas de K2Cr2O7 y KMnO4

Mezcla Cm Cm A observada
No. K2Cr2O7 KMnO4 λ380nm λ500nm
1 0.00080 0.00004 0.845 0.113
2 0.00040 0.0001 0.489 0.141
3 0.00016 0.0002 0.236 0.234
 Ejemplo de cálculo:
Formula: 𝑪𝟏 ∗ 𝑽𝟏 = 𝑪𝟐 ∗ 𝑽𝟐
Para KMnO4 0.0016M , con volumen total de 10 ml
Tabla 6.- Valores de absorbancia observados y calculados de absorbancia de las mezclas de
𝑪𝟏 ∗ 𝑽𝟏 𝟎. 𝟎𝟎𝟏𝟔𝑴 ∗ 𝟓𝒎𝒍
K2Cr2O7 y KMnO4 a λ380nm y λ500nm
𝑪𝟐 = = = 𝟎. 𝟎𝟎𝟎𝟖
𝑽𝟐 𝟏𝟎
Mezcla A observada A calculada
No. λ380nm λ500nm λ380nm λ500nm
1 0.845 0.113 1.144 0.0692
2 0.489 0.141
3 0.236 0.234

Calculo 1:

Calculo 2:
AT (λ1) = amA(λ1) bcmA + amB(λ1) bcmB

0.25

0.2
Abrosbancias observadas

0.15
y = 0.9689x + 0.0243
R² = 0.9999
0.1

0.05

0
0.05 0.07 0.09 0.11 0.13 0.15 0.17 0.19 0.21
Absorbancias calculadas
Figura 4.- Grafico de dispersión de absrobancias observadas respecto a las calculadas a 470nm
0.35

0.3

Absrobancias observadas
0.25

0.2

0.15
y = 1.1599x - 0.0021
0.1 R² = 0.9981

0.05

0
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3
Absrobancias calculadas

Figura a 4.- Grafico de dispersión de absrobancias observadas respecto a las calculadas

a510nm
Tabla 7.- Valores de r y r de A a 470nm y 510nm

λ1 Λ2
r 0.9999 0.999
r2 0.9999 0.9981

DISCUSION

Esta curva se conoce como "curva de calibración" y tiene una utilidad de tipo analítica, esto es, que si se tiene
una solución de una concentración analítica desconocida de la especie P se puede determinar esta
concentración al medir la absorbancia de la solución y por medio de la curva de calibración asociar la medición
con el valor respectivo de P0X (o al calcular esta concentración de la ecuación experimental que relaciona a A
 con P0X).
CONCLUSIONES

REERENCIAS