Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Academia de Bioquímica

METODOS DE ANALISIS

Verificación del funcionamiento de un espectrofotómetro

Nombre: González Cervantes Naim

Profesora: Gabriela Edith Olguín Ruiz

Fecha: 03 de mayo de 2023

 Instituto Politécnico Nacional
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
Academia de Bioquímica
Longitud %T
de onda
(nm)
400 101.9
410 100.1
420 89.9 Espectro de transmisión del filtro de didimio
430 46.1
440 12.1 100
450 8.8
460 14.1
80
470 8.3
480 12.6
490 46.7 60
%T

500 39.1
510 4.3 40
520 3.2
530 2.6 20
540 51.5
550 81
0
560 70.7
400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600
570 2.1
Longitud de onda (nm)
580 0.1
590 0.1

Longitud de %T
onda (nm)
400 0.3
410 0.1
420 0.2 Espectro de transmisión de la solución de
430 1.6
440 10.2
Sulfato de Níquel al 20%
450 31.4 120
460 46.4 100
470 57.1
480 69.5 80

490 84.6
%T

60
500 94
40
510 97
520 95.5 20
530 92.1 0
540 87.8 400 450 500 550 600
550 83.1 Longitud de onda (nm)
560 80.5
570 75.7
580 67
590 45.2
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Longitud de Absorbancia
onda Proporcionalidad entre absorbancia y
510 0.0199 longitud de onda para el NiSO46H2O al
520 0.0357
20%
530 0.0565
0.1
540 0.0803
0.08
550 0.0942
Absorbancia

0.06

0.04

0.02

0
510 515 520 525 530 535 540 545 550 555
Longitud de onda (nm)

Tubo Concentración A410

de
a a' NiSO46H2O Serie Serie
a b Linealidad Fotométrica
1 1' 0 0 0 1.2
y = 5.1421x - 0.0176
2 2' 0.0095 0.032 0.032 1 R² = 0.9995

3 3' 0.0285 0.126 0.132 0.8

Absorbancia

4 4' 0.0665 0.333 0.33 0.6

5 5' 0.1045 0.517 0.51 0.4

6 6' 0.1425 0.7 0.702 0.2

7 7' 0.152 0.764 0.737 0

0 0.05 0.1 0.15 0.2
8 8' 0.171 0.875 0.858 Concentración de NiSO46H2O (M)

9 9' 0.1805 0.907 0.896 Serie a Serie b Linea de tendencia

10 10' 0.19 0.961 0.947

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Parámetro estudiado Valores de Valores Conclusión

referencia experimentales
EXACTITUD DE LA ESCALA DE
LLONGITUD DE ONDA 490 – 500 Max: 490nm-46.7%T El monocromador se
Max 2 = 550 550nm - 81%T encuentra en buen estado
1. Filtro de didimio Min 1 = 520 Min: 530nm – 2.6%T ya que hay exactitud en la
Máximos(λ, nm)
longitud de onda
Mínimos (λ, nm)
2. Solución de NiSO46H2O al
20% Max: 500nm
Max: 500nm – 97%T
Máximos(λ, nm) Min:390 y 400 Min: 390 y 400nm –
Mínimos (λ, nm) 0.1%T

PORPORCIONALIDAD Falla en la fuente de

FOTOMÉTRICA ≥ 0.99 0.9967 radiación y en la presencia
de luz dispersa
Datos de regresión de 530 a 570nm

LUZ DISPERSA
No hubo presencia de luz
%T a 400nm (solución de 0.1 %T a 400nm = 0.1 dispersa al colocar el filtro
NiSO46H2O al 20%) %T a 450nm = 0 oscuro
%T a 450nm %T a 500nm = 0
%T a 500nm

ANCHO DE BANDA Acumuló polvo, mover el

82.9 – 92.7%T 500nm – 97%T ancho de banda, verificar
%T a λ de máxima transmitancia y repetir con otro espectro
EXACTITUD FOTOMÉTRICA
No hubo una exactitud
1. Método de la solución de 0.0 – 7.9%T 400nm – 0.1%T fotométrica, verificar bien
NiSO46H2O al 20% 82.9 - 92.9%T nuestros valores
500nm – 97%
%T a 400nm
%T a 500nm

LINEALIDAD FOTOMÉTRICA El equipo funciona de

≥ 0.99 0.9995 buena manera, repetir
Datos de la regresión lineal pruebas y cambiar
Intervalo de concentración patrones
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