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BUENAS PRÁCTICAS DE USO DEL ESPECTROFOTÓMETRO [1].

 Efectuar la calibración del espectrofotómetro, cada vez que se realiza el análisis


de un grupo de muestras.
 Mantener cerrada la tapa del portamuestras durante el proceso de medición, para
asegurar una lectura adecuada.
 Evitar reutilizar las cubetas desechables.
 Utilizar únicamente cubetas de cuarzo, para efectuar análisis por debajo de los
310 nm.
 Evitar el uso de cubetas plásticas, si se utilizan solventes orgánicos.
 Utilizar cristalería de boro silicato de alta calidad para preparar los estándares.

 Evitar el uso de cristalería de sodio, óxido de sodio,siempre que sea posible,


debido a que el contacto prolongado con los estándares puede permearla y, en
consecuencia, producir resultados erróneos.
 Limpiar cuidadosamente las cubetas de vidrio después de utilizarlas. Desechar
aquellas que presenten rayones en la superficie pulida.
 Utilizar en lo posible reactivos de alta calidad. Reactivos de baja calidad pueden
causar contaminación incluso en concentraciones muy bajas. Los diluyentes
utilizados –agua o solventes– deberán estar libres de impurezas.
 Verificar que las muestras o estándares no se han desgasificado dentro de las
cubetas. Este fenómeno produce burbujas sobre la superficie interna de las cubetas
y errores en las lecturas.
 Tener en cuenta, cuando se pretenda utilizar nuevos procedimientos, que no todas
las sustancias cumplen con la ley de Beer. Efectuar pruebas de linealidad sobre el
rango de concentraciones a ser utilizadas. Se recomienda preparar un grupo de
soluciones fuertes conocidas, y verificar los resultados. Los fenómenos que
afectan la ley de Lambert-Beer son los siguientes:
a) Las altas concentraciones por asociación molecular de especies iónicas.
b) Variaciones en la hidratación a bajas concentraciones producen cambios
en la naturaleza de los iones complejos.
c) Absorciones que no obedezcan la ley requieren dibujar una gráfica de
estándares conocidos, que indicará lectura versus concentración, de forma
que la lectura de las incógnitas pueda ser relacionada a las concentraciones
desde la gráfica.
MANTENIMIENTO GENERAL LIMPIEZA DE DERRAMES.
En caso de que se produzca un derrame en el sistema portamuestras, debe limpiarse el
derrame mediante el siguiente procedimiento:

 Apagar el espectrofotómetro y desconectar el cable de alimentación eléctrica.


 Usar una jeringa para limpiar el portamuestras. Absorber la mayor cantidad de
líquido que pueda extraerse.
 Secar el portamuestras con un hisopo de algodón tipo medicinal.
 Utilizar papel especial para la limpieza de lentes o un trozo de tela limpia de
textura suave, libre de hilazas, para limpiar la ventana de la fotocelda.
 Limpiar el exterior del instrumento con una pieza de tela humedecida con agua
destilada. Incluir la pantalla, los controles y el teclado.

MANTENIMIENTO DE LAS CUBETAS [2].


Las cubetas para espectrofotometría son objetos de gran precisión y deben ser
manipulados con sumo cuidado, por lo que:

 Recomendamos su limpieza y secado inmediatamente después de su uso.


 No guarde las cubetas al aire libre en una atmósfera corrosiva ni deje las paredes
en contacto con líquidos durante largos períodos de tiempo, ya que se pueden
formar sedimentos o manchas que pueden inutilizar las cubetas.
 Para evitar ralladuras las paredes de las cubetas no deben tener contacto con
objetos realizados en materiales duros como metal o cristal.
 Para evitar la rotura llene solamente la cubeta para que el haz de luz pase a través
del líquido y de esta manera cuando el líquido se caliente podrá expandirse hacia
el espacio restante.

LIMPIEZA DE LAS CUBETAS


Al igual que el vidrio óptico, el cuarzo es altamente resistente a los compuestos químicos,
solo el fluoruro de hidrógeno puede corroer sus superficies en un breve espacio de tiempo.
De esta manera, y salvo algunas excepciones, los disolventes ácidos y alcalinos,
incluyendo los orgánicos, pueden utilizarse en la limpieza de las cubetas. Por ende, para
mantener en buenas condiciones las cubetas de cuarzo, se recomienda realizar el siguiente
procedimiento [1,2]:

 Recomendamos usar baños termostáticos para la limpieza de las cubetas.


 No es recomendable usar baños por ultrasonidos, si bien acelerarían la limpieza,
podrían causar danos en las paredes pulidas por medio de la cavitación.
 Tras su limpieza las cubetas deben ser aclaradas minuciosamente con agua y a ser
posible desmineralizada.
 Para el secado de las cubetas recomendamos utilizar una unidad de secado limpio,
un enjuague con un disolvente volátil como etanol y esperar su evaporación.
 Lavar las cubetas utilizando una solución alcalina diluida como NaOH, 0,1 M y
un ácido diluido tal como HCl, 0,1 M.
 Enjuagar las cubetas varias veces con agua destilada. Usar siempre cubetas
limpias cuando se requiere tomar medidas de absorbancia.
 Efectuar procedimientos de limpieza rigurosos y cuidadosos a las cubetas,
siempre que se utilicen muestras que pudieran depositar películas. Algunos
fabricantes recomiendan utilizar detergentes especiales para limpiar las cubetas.

BIBLIOGRAFIA
[1] http://www.bvsde.paho.org/bvsacd/cd29/laboratorio/cap11.pdf
[2] https://comerciallabor.com/documents/cubetas.pdf

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