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El documento proporciona recomendaciones para el uso y mantenimiento adecuados de un espectrofotómetro y sus accesorios. Se enfatiza la importancia de la calibración, el uso de cubetas limpias y de alta calidad, y seguir buenas prácticas de limpieza para obtener resultados precisos.
El documento proporciona recomendaciones para el uso y mantenimiento adecuados de un espectrofotómetro y sus accesorios. Se enfatiza la importancia de la calibración, el uso de cubetas limpias y de alta calidad, y seguir buenas prácticas de limpieza para obtener resultados precisos.
El documento proporciona recomendaciones para el uso y mantenimiento adecuados de un espectrofotómetro y sus accesorios. Se enfatiza la importancia de la calibración, el uso de cubetas limpias y de alta calidad, y seguir buenas prácticas de limpieza para obtener resultados precisos.
BUENAS PRÁCTICAS DE USO DEL ESPECTROFOTÓMETRO [1].
Efectuar la calibración del espectrofotómetro, cada vez que se realiza el análisis
de un grupo de muestras. Mantener cerrada la tapa del portamuestras durante el proceso de medición, para asegurar una lectura adecuada. Evitar reutilizar las cubetas desechables. Utilizar únicamente cubetas de cuarzo, para efectuar análisis por debajo de los 310 nm. Evitar el uso de cubetas plásticas, si se utilizan solventes orgánicos. Utilizar cristalería de boro silicato de alta calidad para preparar los estándares.
Evitar el uso de cristalería de sodio, óxido de sodio,siempre que sea posible,
debido a que el contacto prolongado con los estándares puede permearla y, en consecuencia, producir resultados erróneos. Limpiar cuidadosamente las cubetas de vidrio después de utilizarlas. Desechar aquellas que presenten rayones en la superficie pulida. Utilizar en lo posible reactivos de alta calidad. Reactivos de baja calidad pueden causar contaminación incluso en concentraciones muy bajas. Los diluyentes utilizados –agua o solventes– deberán estar libres de impurezas. Verificar que las muestras o estándares no se han desgasificado dentro de las cubetas. Este fenómeno produce burbujas sobre la superficie interna de las cubetas y errores en las lecturas. Tener en cuenta, cuando se pretenda utilizar nuevos procedimientos, que no todas las sustancias cumplen con la ley de Beer. Efectuar pruebas de linealidad sobre el rango de concentraciones a ser utilizadas. Se recomienda preparar un grupo de soluciones fuertes conocidas, y verificar los resultados. Los fenómenos que afectan la ley de Lambert-Beer son los siguientes: a) Las altas concentraciones por asociación molecular de especies iónicas. b) Variaciones en la hidratación a bajas concentraciones producen cambios en la naturaleza de los iones complejos. c) Absorciones que no obedezcan la ley requieren dibujar una gráfica de estándares conocidos, que indicará lectura versus concentración, de forma que la lectura de las incógnitas pueda ser relacionada a las concentraciones desde la gráfica. MANTENIMIENTO GENERAL LIMPIEZA DE DERRAMES. En caso de que se produzca un derrame en el sistema portamuestras, debe limpiarse el derrame mediante el siguiente procedimiento:
Apagar el espectrofotómetro y desconectar el cable de alimentación eléctrica.
Usar una jeringa para limpiar el portamuestras. Absorber la mayor cantidad de líquido que pueda extraerse. Secar el portamuestras con un hisopo de algodón tipo medicinal. Utilizar papel especial para la limpieza de lentes o un trozo de tela limpia de textura suave, libre de hilazas, para limpiar la ventana de la fotocelda. Limpiar el exterior del instrumento con una pieza de tela humedecida con agua destilada. Incluir la pantalla, los controles y el teclado.
MANTENIMIENTO DE LAS CUBETAS [2].
Las cubetas para espectrofotometría son objetos de gran precisión y deben ser manipulados con sumo cuidado, por lo que:
Recomendamos su limpieza y secado inmediatamente después de su uso.
No guarde las cubetas al aire libre en una atmósfera corrosiva ni deje las paredes en contacto con líquidos durante largos períodos de tiempo, ya que se pueden formar sedimentos o manchas que pueden inutilizar las cubetas. Para evitar ralladuras las paredes de las cubetas no deben tener contacto con objetos realizados en materiales duros como metal o cristal. Para evitar la rotura llene solamente la cubeta para que el haz de luz pase a través del líquido y de esta manera cuando el líquido se caliente podrá expandirse hacia el espacio restante.
LIMPIEZA DE LAS CUBETAS
Al igual que el vidrio óptico, el cuarzo es altamente resistente a los compuestos químicos, solo el fluoruro de hidrógeno puede corroer sus superficies en un breve espacio de tiempo. De esta manera, y salvo algunas excepciones, los disolventes ácidos y alcalinos, incluyendo los orgánicos, pueden utilizarse en la limpieza de las cubetas. Por ende, para mantener en buenas condiciones las cubetas de cuarzo, se recomienda realizar el siguiente procedimiento [1,2]:
Recomendamos usar baños termostáticos para la limpieza de las cubetas.
No es recomendable usar baños por ultrasonidos, si bien acelerarían la limpieza, podrían causar danos en las paredes pulidas por medio de la cavitación. Tras su limpieza las cubetas deben ser aclaradas minuciosamente con agua y a ser posible desmineralizada. Para el secado de las cubetas recomendamos utilizar una unidad de secado limpio, un enjuague con un disolvente volátil como etanol y esperar su evaporación. Lavar las cubetas utilizando una solución alcalina diluida como NaOH, 0,1 M y un ácido diluido tal como HCl, 0,1 M. Enjuagar las cubetas varias veces con agua destilada. Usar siempre cubetas limpias cuando se requiere tomar medidas de absorbancia. Efectuar procedimientos de limpieza rigurosos y cuidadosos a las cubetas, siempre que se utilicen muestras que pudieran depositar películas. Algunos fabricantes recomiendan utilizar detergentes especiales para limpiar las cubetas.