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Agar selectivo para aislamiento y diferenciación de Salmonella typhi y otras Salmonellas a partir de
material clínico, alimentos y agua según WILSON y BLAIR (1927). Corresponde a las
recomendaciones de la United States Pharmacopeia
Principio
Método microbiológico.
Modo de acción
El Verde brillante y el bismuto-sulfito inhiben considerablemente los gérmenes de acompañamiento.
El sulfato de hierro (III) es un indicador del sulfuro de hidrógeno que producen las colonias de
Salmonella H2S-positivas. Habitualmente, esta reacción produce una precipitación marrón o negra en
el medio de cultivo así como colonias de color negro o verde con brillo metálico.
Preparación y almacenamiento
Guardado en un lugar seco y estando bien cerrado, es utilizable hasta la fecha de caducidad si se
conserva entre +15 y +25 °C. Proteger de la luz.
Una vez abierto el frasco por primera vez, es utilizable hasta la fecha de caducidad si se conserva
entre +15 y +25 °C en un lugar seco y bien cerrado.
Disolver 47,5 g en 1 litro de agua desmineralizada. Mezclar bien y calentar hasta la ebullición
agitando continuamente. Dejar enfriar a 45 - 50 °C.
Remover y vaciar realizando placas de capa gruesa (25 ml).
No tratar en autoclave.
Las placas de cultivo preparadas son turbias y presentan una precipitación coposa así como
un color gris verdoso.
El medio de cultivo fresco es fuertemente inhibitorio, por lo que se recomienda su uso
especialmente para muestras con una contaminación importante (p. ej. heces).
Según la FDA-BAM, los medios de cultivo deberían ser preparados 1 día antes de su uso y
guardados en un lugar oscuro. Después de 48 horas se reduce el efecto selectivo.
Uso y evaluación
Sembrar finamente la superficie de las placas con el material objeto de prueba o con material
procedente de un cultivo de enriquecimiento.
Incubación: hasta aprox. 48 horas a 35 °C, ambiente aerobio.
Colonias Microorganismos
Colonias negras con brillo Salmonella typhi
metálico, rodeadas de zonas
parduzcas-negras
Colonias Microorganismos
Colonias negras o verdosas- Salmonella spp.
grises, algunas veces con brillo
metálico, con o sin
ennegrecimiento del medio de
cultivo rodeante
Pequeñas, verdes hasta marrones, Bacterias coliformes,
algunas veces mucosas Proteus y otras
Restricciones
1. Es importante extender de tal manera que se produzcan colonias bien aisladas.
2. Si se presentan solapamientos de las colonias, no se desarrollarán las características de
colonia típicas de Salmonella spp.
3. Algunas cepas de Salmonella son inhibidas con especial rigor, p. ej. Salmonella gallinarum, S.
sendai, S. berta, S. abortus-equi. (Hajna 1951, Pub. Hlth. Rep. 9, 48-51)
Por consiguiente, se debería someter en caso de duda casi todo crecimiento en el medio de cultivo a
más pruebas, p. ej. producir un subcultivo en un medio menos selectivo para obtener colonias bien
aisladas.
Utilizar cultivos puros para la confirmación bioquímica y serológica.
Bibliografía
American Public Health Association: Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods. 3ª Edición, 1992.
McCOY, J.H.: The isolation of Salmonellae. - J. Appl. Bact., 25; 213-224 (1962).
WILSON, W.J., a. BLAIR, E.M. McV.: Use of glucose bismuth sulfite iron medium for the isolation of Bacillus typhosus and
Bacillus proteus. - J. Hyg., 26; 374-391 (1927).
WILSON, W.J., a. BLAIR, E.M. McV.: Further experience of the bismuth sulfite media in the isolation of Bacillus typhosus and
Bacillus paratyphosus B from faeces, sewage and water. - J. Hyg., 31; 138-161 (1931).
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