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Agar Cetrimida.

Agar King:

Uso

Medio de cultivo selectivo para el aislamiento de


Pseudomonas aeruginosa a partir de diversas
muestras.

Principio

La cetrimida (Bromuro de cetiltrimetilamonio) inhibe


el crecimiento de las bacterias debido a su accin
como un compuesto cuaternario de amonio. La base
de Agar Cetrimida promueve la produccin de piocianina y fluoresceina que se observan con
luz ultravioleta en los cultivos de Pseudomonas aeruginosa, lo que puede considerarse como
prueba presuntiva para su identificacin. Posteriormente se puede realizar la prueba de
oxidasa. Sembrar la muestra de ensayo en la superficie del medio de cultivo por estra cruzada.
Incubar 24 48 h a 35C.

FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA

Agar Cetrimida Cloruro de magnesio 13.6 0.3 1.4 Peptona de gelatina Sulfato de potasio pH
7.2 0.2 20.0 10.0

Preparacin

Rehidratar 45.3 g del medio en un litro de agua destilada. Agregar 10 ml de glicerol. Reposar
10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullicin durante 1
minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121C (15 lbs de presin)
durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45C. Vaciar en cajas de Petri estriles. Si
se requiere el medio para caracterizacin bioqumica, distribuirlo en tubos de ensayo y
despus de esterilizar dejar enfriar en posicin inclinada. Conservar en refrigeracin de 2 a
8C.
Microorganismo
Pseudomonas aeruginosa Escherichia coli Staphylococcus aureus

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Fundamento del medio de cultivo de caldo tioglicolato

Para el cultivo y aislamiento de Anaerobios estrictos y facultativos y de microorganismos


microaeroflicos.

Forma de actuacin

Las sustancias reductoras, Tioglicolato y Cistena, proporcionan una anaerobiosis


suficiente, incluso para anaerobios exigentes. Debido a sus grupos sulfhidrilos, se
inactivan los compuestos de arsnico, mercurio y de otros metales pesados. Los medios
con Tioglicolato son adecuados, por lo tanto, para la investigacin de materiales que
contengan metales pesados o conservantes en cuya composicin participen dichos
metales pesados. La elevada viscosidad del medio de cultivo Tioglicolato impide la
penetracin rpida de Oxgeno. El eventual aumento del contenido en Oxgeno se pone
de manifiesto por un viraje a rojo del Indicador Redox Resazurina Sdica.

Frmula

Peptona de casena 15,0 gr

Extracto de levadura 5.0 gr

Glucosa 5.5 gr

L- Cistena 0.5 gr

Cloruro Sdico 2.5 gr

Tioglicolato Sdico 0.5 gr

Resarzurina sdica (Oxoid) 0.001 gr

pH final 7.1+/-0.2

Procedimiento:

Si el espcimen a analizar es lquido agregue 1 o 2 gotas dentro del tubo, si la muestra


fue tomada en hisopo, introdzcalo en el tubo y tpelo. Los especmenes que son

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tomados con hisopos, son introducidos dentro del caldo despus de haber sembrado en
los medios slidos.

El medio lquido puede ser usado para incubar microorganismos anaerobios; empleando
un sistema eficiente y fcil de sistema de anaerobiosis. Utilizar
la tcnica estandarizada por cada Laboratorio.

Resultados esperados:

El crecimiento en los tubos es indicado por la presencia de


turbidez. Si hay crecimiento evidente examinar el medio por
medio de la coloracin de GRAM y subcultivar sobre los medios apropiados.

Conservacin:

Entre 4 y 12 C en su empaque original hasta la fecha de vencimiento, protegidas de la


luz directa. La Duracin de las placas desde su produccin es de 5 meses.

Gardnerella selective agar with 5% human blood placa de 90


mm

Uso

El Gardnerella Selective Agar con 5% de sangre humana , es un medio parcialmente


selectivo y diferencial para el aislamiento de la Gardnerella vaginalis de muestras
clnicas.

Principio

La Gardnerella vaginalis es uno de los micoorganismos causantes de la vaginitis. Este


germen est presente en la flora vaginal normal en un alto porcentaje de mujeres, siendo
causa de unas vaginitis no especficas o vaginitis bacterianas. La presencia de la G.
Vaginalis suele estar asociada con ciertos anaerobios como Prevotella vivia, Prevotella

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disiens, Mobiluncus , Peptostreptococcus y otros grmenes de origen uretral o intestinal,
pero no de la flora vaginal habitual. En las vaginitis no especficas el Lactobacillus tiene
su presencia reducida o bien est ausente. La G. vaginalis, est considerado como el
microorganismo indicador de una vaginitis no especfica, de hecho se tratara de una
infeccin polimicrobiana. La G. vaginalis puede ser responsable de otras enfermedades
como partos prematuros , infecciones del tracto urinario , infecciones en recin nacidos
e incluso septicemia . Para conseguir la diferenciacin de la G. vaginalis de otros
grmenes, la presencia de sangre humana permite poner de manifiesto la caracterstica
beta hemlisis de la G. vaginalis y al tratarse de una bacteria Gram positiva puede ser
aislada de un medio que contenga Colistina y cido Nalidxico. El agar Gardnerella
Selectiva con un 5% de sangre humana, est basada en un Agar Columbia CNA, donde
la Colistina y el cido Nalidxico inhiben a las bacterias Gram negativas pero no a las
Gram positivas. La inclusin de la Amphotericina B reduce el crecimiento de levaduras
como por ejemplo las Candidas, las cuales son habituales en las muestras vaginales , y
la presencia de la sangre humana pone de manifiesto la caracterstica beta hemlisis
difusa de G. vaginalis 2 COMPOSICION POR LITRO DE MEDIO EN AGUA
PURIFICADA

Hidrolizado pancretico de casena 12.0 g

Hidrolizado pptico de tejidos animales 5.0 g

Proteasa Peptona 10.0 g

Extracto de levadura 3.0 g

Extracto de carne 3.0 g

Almidn de maz 1.0 g

Cloruro sdico 5.0 g

Agar 13.5 g

Colistina 0.01 g

Acido Nalidxico 0.01 g

4
Amphotericina B 0.004 g

Sangre Humana desfibrinada 5%

pH : 7,3 +/- 0,2

Hektoen Entrico Agar.

Este es un medio ideal para el aislamiento selectivo de Salmonella y Shigella spp., a


partir de heces y alimentos.

Fundamento
El medio de cultivo contiene sales biliares que inhiben el desarrollo de la flora
acompaante, y 2 sistemas indicadores: (i) azul de bromotimol y fucsina cida como
indicadores de la fermentacin de carbohidratos, y (ii) el citrato de hierro como un
indicador de la formacin de SH2 a partir del tiosulfato.
El desarrollo de Shigella spp. es adecuado debido a que la inhibicin de estos
microorganismos por las sales biliares est disminuida por la adicin de cantidades
relativamente elevadas de peptona y carbohidratos.
El medio de cultivo, permite una buena diferenciacin de las colonias e inhibe el
desarrollo de algunos coliformes y otras bacterias no fermentadoras de lactosa,
facilitando as la identificacin de Salmonella y Shigella a partir de la muestra.

Frmula (en gramos por litro) Instrucciones

Proteosa peptona 12.0 Suspender 76 g del medio


deshidratado en un litro de agua
Extracto de levadura 3.0 destilada. Dejar reposar de 10 a 15
minutos. Calentar y hervir hasta
Sales biliares 9.0
lograr una disolucin completa.

Lactosa 12.0 NO ESTERILIZAR EN


AUTOCLAVE. Enfriar a 45C y
Sacarosa 12.0 distribuir en cajas de Petri.

5
Salicina 2.0

Cloruro de sodio 5.0

Tiosulfato de sodio 5.0

Citrato de hierro y
1.5
amonio

Agar 14.0

Azul de bromotimol 0.065

Fucsina cida 0.1

pH final: 7.5 0.2

Siembra
Inocular la muestra en superficie, tratando de extender el inculo para obtener colonias
aisladas.

Incubacin
De 18 a 24 horas a 35-37 C en aerobiosis. Para diferenciar mejor entre Salmonella y
Shigella spp., incubar 48 horas.

Resultados

Microorganismos Colonias

Shigella flexneri ATCC


Verdes, elevadas, hmedas
12022

Salmonella typhimurium
Verde-azuladas, con o sin centro negro
ATCC 14028

6
Proteus mirabilis ATCC
Verde-azuladas, con o sin centro negro
43071

Escherichia coli ATCC Rosa salmn rodeadas en algunas ocasiones por un


25922 precipitado biliar

Klebsiella pneumoniae Rosa salmn rodeadas en algunas ocasiones por un


ATCC 700603 precipitado biliar

Caractersticas del medio


Medio preparado: color verde.