METODO DE CONCENTRACION POR FLOTACION WILLIS

MATERIAL

· Vaso de precipitado

· Embudo

· Tubo de ensaye

· Portaobjetos

· Cubreobjetos

· abate lenguas

REACTIVOS
· Sol. Saturada de NaCl

· Sol. De yodo lugol

PROCEDIMIENTO
1.- Tomar aproximadamente 1gr de heces fecales con un abate lenguas y mezclar
con 10ml de solución saturada de cloruro de sodio.
2.-En un tubo de ensaye filtre la mezclar con una gasa, llenando completamente el
tubo.

4.-Coloque un portaobjetos sobre el tubo de manera que el líquido haga contacto

con el portaobjetos.
5.-Los quistes o huevos flotaran y quedaran adheridos a la cara del portaobjetos
que esta en contacto con la mezcla, posteriormente se coloca una gota de yodo
lugol en el porta objetos y colocar el cubreobjetos.

6.-Examinar la muestra al microscopio con el objetivo 40x, buscamos quistes o

huevecillos de parásitos.
 MÉTODO DE CONCENTRACIÓN POR SEDIMENTACIÓN RITCHIE

MATERIAL Y EQUIPO
Microscopio
Centrífuga
Tubos de ensaye cónicos de 15 ml
Gasa cortada en cuadros de 15 cm por lado
Embudos de polietileno
Vasos de precipitado de 50 ml
Aplicadores de madera
Pipetas Pasteur con bulbo
Portaobjetos de 26 X 76 mm
Cubreobjetos de 22 X 22 mm
Solución salina isotónica
Solución de formaldehído al 10%
Éter etílico comercial

METODO
1.- Con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr. de la materia fecal
en el vaso de precipitado, se añaden 10 ml de solución salina y se homogeniza.
2.- Se filtra la suspensión a través de la gasa colocada en el embudo, recogiendo el
filtrado en el tubo cónico.

3.- Se centrífuga la suspensión y se decanta el sobrenadante y se resuspende el

sedimento con solución salina, centrifugando, decantando y resuspendiendo las
veces necesarias hasta que el sobrenadante sea claro.
5.- Al último sedimento se agregan 5 ml de solución de formaldehído al 10%, se
mezcla y se deja reposar durante 10 min.

6.- Se añaden después 2.5 ml de éter, se tapan los tubos

con tapones de caucho y se agitan enérgicamente
durante 30 segundos y se centrífuga durante 5 minutos a
1500 rpm, después de centrifugar se observan 4 capas:
a) éter en la superficial,
b) un tapón de restos fecales,
c) formaldehído,
d) sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los
elementos parasitarios.
7.- Se introduce la pipeta Pasteur hasta la capa d, se extrae con cuidado una gota
del sedimento y se coloca en un portaobjetos, se le añade una gota de lugol y con
uno de los ángulos del cubreobjetos, se homogeniza, cubriéndolo con el mismo.

8.-Se observa la preparación en el microscopio con objetivos de 10X y 40X.