UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN

ALIMENTOS
INGENIERÍA BIOQUÍMICA
INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

TEMA: SIEMBRA DE DILUCIONES SERIAL

DATOS INFORMATIVOS:
CARRERA: Ing. Bioquímica
CICLO ACADÉMICO: Septiembre 2017- Febrero 2018
ASIGNATURA: Microbiología 2
NIVEL: Cuarto
PARALELO: Único
PROFESOR: Doctor Carlos Rodríguez
AYUDANTE: Maura Fiallos
PRÁCTICA DE LABORATORIO N°: 2
FECHA DE REALIZACIÓN: 20/10/2017
FECHA DE PRESENTACIÓN: 30/10/2017
NOMBRE: Raquel Jurado

1. Objetivos
1.1 Objetivo General
Establecer las diferencias entre los tipos de siembra tanto en vertido como en
superficie, además de determinar las unidades formadoras de colonias de las
diluciones realizadas

1.2 Objetivos Específicos

 Determinar las unidades formadoras de colonias de cada una de las
diluciones realizadas además del porcentaje de humedad de la muestra
de suelo utilizada
 Diferenciar los tipos de siembra tanto en vertido como en superficie, así
como las funciones e importancia de cada una
2. Cálculos y Resultados
2.1 Cálculos
Cálculo de la humedad de la muestra de suelo
Tabla 1. Datos recogidos de la muestra de suelo
Peso en gramos
Peso del crisol (m1) 46.97
Peso del crisol más la muestra de suelo (m2) 57.01
Peso del crisol más la muestra de suelo
54.15
después de ser sometido a la estufa (m3)

𝑚2 − 𝑚3
% Humedad = × 100
𝑚2 − 𝑚1

57.01𝑔 − 54.15𝑔
% Humedad = × 100
57.01𝑔 − 46.97𝑔

% Humedad = 28.486%

Cálculo de Unidades formadoras de colonia (vertido 𝟏𝟎−𝟒 A.N)

UFC Nc ∗ FD ∗ VT
=
g Vi ∗ Wm
4
𝑈𝐹𝐶 141 ∗ 10 ∗ 90𝑚𝑙
=
𝑔 1𝑚𝑙 ∗ 10𝑔𝑟

UFC
= 12690000
g
2.2 Resultados
Tabla 2. Características del suelo
pH 7.24
Conductividad 18.4
Humedad 28.486%

Tabla 3. Cálculo de UFC/g de cada dilución (Vertido)

Vertido
Diluciones Agar Nutritivo Agar Sintético
# Colonias UFC/g # Colonias UFC/g
−3 26,55x105
10 Mayor de 300 ___________ 295

10−4 141 12,69x106 106 9,54x106

10−5 Menor de 30 __________ Menor de __________

30
10−6 Menor de 30 __________ Menor de __________
30
 Tabla 3. Cálculo de UFC/g de cada dilución (Difusión)
Difusión
Diluciones Agar Nutritivo Agar Sintético
# Colonias UFC/g # Colonias UFC/g
10−3 291 26,19x106 Mayor a ____________
300
10−4 122 10,98x107 106 9,54x107

10−5 Menor a 30 ____________ Menor a 30 _____________

10−6 Menor a 30 ____________ Menor a 30 ____________

Tabla 4. Gráficos de cada uno de los tipos de siembra

Difusión
Dilución Agar Nutritivo Agar Sintético

10-3

10-4
 10-5

10-6

Dilución Vertido
Agar Nutritivo Agar Sintético

10-3
10-4

10-5

10-6
3. Discusión
En la tabla 3 y 4 se puede observar las unidades formadoras de colonias por ambos
métodos: vertido y difusión. Se observa la existencia de una diferencia entre los
datos de ambas tablas, sin embargo no son diferencias significativas, las dos
técnicas de siembra por dilución presentan la ventaja o función de que permiten
obtener un mayor número de colonias aisladas, y la diferencia entre ambas siembras
es que, en el vertido las muestras diluidas se mezclan con agar fundido y se vierten
en placa por lo que algunas colonias quedarán embebidas en el agar y otras crecerán
en la superficie, mientras que en la difusión crecerán las colonias únicamente en la
superficie. Otras diferencias o errores que permitieron esa pequeña desviación entre
los valores obtenidos pudo deberse a que es recomendable homogenizar las
diluciones y hacer la adecuada inoculación de las muestras para evitar resultados
erróneos ya que si no se separan bien las células, se obtendrán valores bajos y los
valores serán elevados si la toma de muestra se hace del fondo del tubo donde se
concentran los microorganismos por gravedad, en la práctica no se homogenizó
completamente ya que las tapas se encontraban flojas lo cual impedía lo
homogenización correcta de la solución (Aquiahuatl, y otros, 2012).

4. Conclusiones y Recomendaciones
4.1 Conclusiones
4.2 Recomendaciones

5. Cuestionario

 ¿Por qué se pesa 10 gramos para la primera dilución y no se usa 1 gramos en 9

ml de diluyente?

 ¿Por qué se utiliza agua de llave para las diluciones y no agua destilada o agua
ultra pura?

 ¿Porque no se siembra la dilución 1/10?

 ¿Porque se utilizan solamente las placas que contengan entre 30 y 300 colonias
para el cálculo de UFC?

 ¿Porque se siembra 100 micro litros en superficie y 1000 micro litros en

profundidad?