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RELACIONADOS
Introduccin
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de complicaciones a largo plazo, lo que origina una gran morbilidad y
mortalidad.
1.1.1. Clasificacin:
Actualmente la diabetes se clasifica en:
Diabetes tipo I (dficit total de insulina).
Diabetes tipo II (resistencia a la insulina o defecto secretor con
resistencia a la insulina, los enfermos al principio no requieren la
administracin de insulina).
Diabetes secundaria (enfermedades pancreticas, tumores
endocrinos).
Diabetes gestacional (se detecta durante el embarazo).
1.1.2. Sntomas
La diabetes cursa con polifagia, polidipsia, poliuria, disminucin del peso
corporal, hiperglucemia y en ocasiones glucosuria.
1.1.3. Diagnstico
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3.1. Curva de glucemia
Esta prueba se realiza para comprobar definitivamente el diagnstico de la
diabetes y es obligatoria cuando la glucemia basal es dudosa.
Consiste en la medicin de la glucemia en ayuno y a intervalos regulares
tras una sobrecarga de glucosa.
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3.2. Test de OSullivan
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b.2.) Mtodo de la glucosa oxidasa: Al igual que el anterior consiste
en dos reacciones acopladas
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La glucosilacin depende de la concentracin de glucosa y de la vida media
de las protenas. Puesto que la hiperglucemia es caracterstica de la
diabetes, la determinacin de protenas glucosiladas se utiliza como
indicador restrospectivo del control de la diabetes.
En el laboratorio clnico se suelen analizar la glucohemoglobina y
fructosamina.
5.1.1. Glucohemoglobina
La glucohemoglobina es una fracci n de hemoglobina A (principalmente
A1C ) unida, de forma irreversible a la glucosa, que representa, en
condiciones fisiolgicas un 6-8% de la hemoglobina total.
5.1.2. Fructosamina
Las protenas plasmticas tambin se glican y, puesto que la vida media
de la albmina y protenas plasmticas oscila entre 17 y 30 das, su
determinacin nos informa de la tasa de glucemia del paciente en las 2-3
semanas previas a la determinacin (perodo ms corto que la
glucohemoglobina).
Puesto que la albmina es, con diferencia, la protena srica ms
abundante realmente se evala la albmina glucosilada.
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Mtodo de determinacin: mtodo colorimtrico (espectrofotomtrico)
basado en la reduccin del colorante nitroazul de tetrazolio (por accin
de la fructosamina).
5.2. Pptido C
5.3. Insulinemia
La determinacin de insulina no suele hacerse de forma habitual puesto
que su presencia no asegura que sta sea funcional. Sin embargo, s es
til en las hipoglucemias (ej. insulinemia elevada cuando la glucemia es
baja puede indicar la existencia de un tumor productor de insulina).
Cetonemia
Diabetes Liplisis Acidos grasos Cetognesis
Cetonuria
Determinacin:
Aunque existen otros mtodos (ej. enzimticos), el ms empleado es su
determinacin colorimtrica mediante la prueba del nitrofrerricianuro de
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sodio. Este procedimiento no detecta -hidroxibutirato y es mucho menos
sensible para la acetona que para acetoactico.
El fundamento de este mtodo consiste la aparicin de un color rosado o
purpreo al reaccionar, fundamentalmente el acetoactico, con ferricianuro
de sodio en medio alcalino. La prueba se puede llevar a cabo con una tira
reactiva o una tableta slida.
5.5. Glucosuria
La glucosa se filtra en el glomrulo pero es reabsorbida en los tmulos
renales con lo que vuelve de nuevo a la sangre y no debe aparecer en orina.
Sin embargo, si la glucemia es superior a 160mg/dL se supera el umbral
renal para la glucosa y sta aparece en la orina (glucosuria).
La glucosuria tiene escaso valor puesto que es poco especfica ej. tambin
aparece en patologas cardiacas o renales
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Apndice
CROMATOGRAFA
MECANISMOS IMPLICADOS
1. Adsorcin
2. Reparto
3. Intercambio inico
4. Exclusin molecular
5. Afinidad
Cromatografa de adsorcin: poco usada en clnica
Cromatografia de reparto: basada en las diferencias de solubilidad de las
distintos analitos en dos fases inmiscibles Ejemplo: cromatografa en capa
fina (ver la figura):
Sobre un cristal u otra superficie se deposita una suspensin
uniforme de partculas (ej gel de slice) que ms tarde se seca y activa. En
dicha placa se aplica la muestra y se deja secar.
Se introduce la placa en una cmara en cuyo fondo hay un disolvente
que va subiendo por capilaridad y arrastrar a los componentes de la
mezcla en funcin de la solubilidad de los mismos en la fase mvil.
Se deja hasta que el frente llegue al final
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Los resultados se visualizan por ejemplo por tincin con colorantes.
Aparecern unas manchas que se pueden identificar mediante el uso de
patrones o cuantificar mediante densitometra o raspado de las manchas,
disolucin y determinacin espectrofotomtrica.
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Cromatografia de afinidad: basada en mecanismos que implican
interacciones especficas entre dos molculas como uniones enzima-
sustrato, hormona-receptor, antgeno-anticuerpo.
Preguntas de revisin
a) Espectrofotometra
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2. Para trabajar en la zona UV por debajo de 320 nm se precisan
cubetas de:
a) Vidrio
b) Poliestireno
c) Polietileno
d) Cuarzo
e) Plstico
3. Un blanco de suero se emplea:
a) Cuando tenemos prisa
b) Cuando queremos eliminar interferencias por el reactivo
c) Cuando queremos eliminar interferencias por el suero
d) Cuando queremos eliminar interferencias de la fuente de luz
e) Cuando hay que hacer una curva de calibracin
4. Un blanco de reactivo se emplea:
a) Cuando tenemos prisa
b) Cuando queremos eliminar interferencias por el reactivo
c) Cuando queremos eliminar interferencias por el suero
d) Cuando queremos eliminar interferencias de la fuente de luz
e) Cuando hay que hacer una curva de calibracin
5. Desviaciones de la ley de Beer (desviaciones en la relacin lineal
entre concentracin de una solucin y absorbancia) se producen cuando:
a) Se miden concentraciones muy elevadas de cromgeno
b) La radiacin incidente no es monocromtica
c) La luz es transmitida por otros mecanismos
d) La cubeta est sucia
e) Todos los anteriores
6. La curva de calibracin:
a) Describe la relacin entre transmitancia y absorbancia
b) Describe la relacin entre absorbancia y concentracin
c) Describe la relacin absorbancia y velocidad de reaccin
d) b y c son correctas
7. La longitud de onda a la que se mide una reaccin es:
a) Aquella a la que el cromgeno tienen menos absorcin
b) Aquella a la que el cromgeno tiene el mximo de absorcin.
c) Aquella a la que la lmpara da ms luz.
d) Aquella a la que se lee ms deprisa
8. Construya una curva de calibracin para una tcnica de
determinacin de glucosa en suero con los siguientes datos:
A Concentracin (mg/dl)
0.05 50
0.1 100
0.150 150
0.250 250
0.500 500
0.600 800
A partir de ella:
a) Calcule la concentracin de glucosa en un suero que da una lectura de
0.125
b)Qu hara con un suero que diera una lectura de 0.7? Interpolara la
lectura sin ms o lo diluiras?
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c) Cul se considerara el limite de linealidad con arreglo a esta curva de
calibracin? Por qu?
9. Vamos a hacer una determinacin de glucosa en sangre, y para ello
recurrimos al empleo de una solucin estndar de glucosa de concentracin
100mg/dl. Una vez llevada a cabo la lectura obtenemos los siguientes
datos:
Absorbancia del estndar: 0,2
Absobancia del problema-1: 0,4
Absorbancia del problema-2: 0,8
Absorbancia del problema-3: 1,5
a) Con estos datos, calcular las concentraciones que tendran los tres
sueros problema.
b) Sabiendo que el lmite de linealidad de la tcnica es de 600mg/dl
habra que diluir alguna muestra y repetir la determinacin? Cules
diluira y qu factores de dilucin empleara? Por qu?
c) Diluimos la muestra nmero tres al 1/5, y repetimos la
determinacin. Ahora, la lectura que obtenemos es de 0,320 Cul ser la
concentracin real de glucosa en ese suero?
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12. A un paciente le han solicitado una determinacin de hemoglobina
glicada para averiguar si tiene diabetes Es correcta la peticin? Por qu?
13. A las cinco de la tarde llega una muestra de sangre al laboratorio que se
extrajo a las ocho de la maana, para determinar la glucosa, y que se haba
dejado olvidada encima de la mesa desde entonces. Qu debemos hacer?
Por qu?
14. Un paciente viene al laboratorio para hacerse un anlisis de glucosa, y
nos explica que ha desayunado hace 20 minutos Qu debemos hacer? Por
qu?
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