IFAT

(inmunofluorescencia directa e indirecta)

Universidad de la Salle Colombia
Facultad de ciencias agropecuarias
Medicina Veterinaria
Bogot-Colombia
Luis G. Perez
Yeili lvarez Nio
Andrs Ricardo Avellaneda

CONCEPTOS CLAVES
ANTGENO (Ag): Un antgeno es aquella
sustancia que siendo reconocida como extraa
por el sistema inmune, es capaz de inducir en
este una respuesta especfica encaminada a
su neutralizacin.
ANTICUERPO (Ac):Sustancia segregada por
los linfocitos de la sangre para combatir una
infeccin de virus o bacterias que afecta al
organismo.

QU ES ?
La inmunofluorescencia es una tcnica
utilizada para visualizar la distribucin de
una protena o antgeno especfico en
clulas o secciones de tejido utilizando la
especificidad de los anticuerpos por su
antgeno
para
dirigir
marcadores
fluorescentes a las biomolculas dianas de
forma especfica.

Tomado de
http://goo.gl/YCMIkK

TIPOS DE
INMUNOFLUORESCENCIA

INMUNOFLUERESCENCIA DIRECTA:
el marcaje directo en el que el anticuerpo primario est
marcado con un marcador fluorescente.

INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA:
el marcaje indirecto en el que un anticuerpo secundario
marcado con un fluorocromo se utiliza para reconocer un
anticuerpo primario.

NOTA: Las muestras marcadas inmunofluorescentemente se

examinan bajo un microscopio de fluorescencia o un
microscopio confocal.

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA
Usa una unin covalente entre fluorforo
con el anticuerpo primario.
Requiere de una etapa de incubacin con
el antgeno y una sola etapa de lavado.
PROCEDIMIENTO
El marcador fluorescente produce una
sustancia colorada que identifica si el
antgeno est presente. (En caso de no
estar presente el antgeno, la fluorescencia
no identificara nada.).

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA

Tomado de http://goo.gl/jgO6TO

INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA
Se divide en dos etapas:
1. El anticuerpo primario no marcado,
se une con el antgeno diana.
2. El anticuerpo secundario, lleva el
fluorforo, identifica al anticuerpo
primario y se une a l.
Nota: varios anticuerpos se pueden
unir al anticuerpo primario y la seal
aumentara.

INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA

Tomado de http://goo.gl/jgO6TO

Tomado de http://goo.gl/jgO6TO

APLICACIONES CLNICAS:
La prueba IFAT, ayuda a reconocer el
diagnstico de sfilis por medio de la
bacteria Treponema pallidum.
La prueba de IFAT se puede utilizar en:
Renibacterium Salmonirarum.
Vibrio Ordalii
Ehrlichia Canis

Introduccin. El diagnstico de la leptospirosis es difcil debido al amplio espectro

de sntomas clnicos que presenta. Varias pruebas diagnsticas serolgicas se han
desarrollado, pero su aplicacin y utilidad en Colombia no han sido determinadas.
Objetivos. Evaluar la prueba de inmunofluorescencia indirecta para el diagnstico
de leptospirosis humana y determinar as los anticuerpos de las clases
inmunoglobulina G y M producidos contra Leptospira.
Materiales y mtodos. Se establecieron tres grupos de estudio. El primero incluy
19 muestras positivas para leptospirosis de pacientes con diagnstico clnico y
prueba de microaglutinacin positiva; el segundo, 40 muestras de personas sin
antecedentes de leptospirosis y con microaglutinacin negativa, y el tercero con 96
muestras de pacientes con otras enfermedades diferentes a leptospirosis. Todas las
muestras fueron procesadas por inmunofluorescencia indirecta.
Resultados. Se determin que la inmunofluorescencia indirecta tiene sensibilidad de
89,47%, especificidad de 100%, valor predictivo negativo de 95,2% (IC95%82,6 a
99,2) y valor predictivo positivo de 100%. En forma paralela, un estudio exploratorio
en 27 muestras de suero que haban sido remitidas para diagnstico de diferentes
sndromes febriles encontr que 11% de ellas fueron positivas por
inmunofluorescencia indirecta para anticuerpos IgM contra Leptospira.
Conclusiones. La inmunofluorescencia indirecta es una alternativa que
complementa el diagnstico de leptospirosis y los estudios seroepidemiolgicos. La
presencia de anticuerpos dirigidos contra Leptospira en las muestras de sndrome
febril del estudio indica que la leptospirosis es una de las causas de este sndrome
que el clnico debe explorar.

BIBLIOGRAFA
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EVALUACIN DE PRUEBAS DE ELISA E INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA PARA
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