PRACTICA DE LABORATORIO No 1

RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

RAFAEL ARLEY VIEDA

20131181034

MARIA DEL PILAR SANTACRUZ GIL

20131181017

BIOQUIMICA

DAYSI MARGOTH BELTRAN CEPEDA

UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JSE DE CALDAS

FACULTAD DEL MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERIA SANITARIA

BOGOT D.C

2014
 RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

RESUMEN
ABSTRACT
Los carbohidratos son biomolculas, que
Carbohydrates are biomolecules that
contienen es sus estructuras grupos
contain functional groups are structures as
funcionales como aldehdos o cetonas
polyhydroxy aldehydes or ketones.
polihidroxilados. Los carbohidratos al
Carbohydrates to contain carbonyl and
contener grupos carbonilo e hidroxilo
hydroxyl groups present typical chemical
presentan propiedades y comportamiento
properties and behavior of these two
qumico tpico de estos dos grupos
functional groups, carbohydrates are
funcionales, los carbohidratos se
generally classified into monosaccharides
clasifican generalmente en monosacridos
y polisacridos (simples y complejos), los and polysaccharides (simple and
monosacridos son carbohidratos que no complex), monosaccharides are
se pueden descomponer a compuestos carbohydrates that can not be
ms simples por medio de hidrolisis, estos decomposed into simpler compounds by
a su vez se subdividen por el nmero de hydrolysis, these in turn are divided by
tomos de carbono y grupo que the number of carbon atoms in the group
contengan en: aldosas (aldehdo) y containing aldoses (aldehyde) and ketoses
cetosas (cetona). Un polisacrido es un (ketone); a polysaccharide is a
carbohidrato que al hidrolizarse da dos o carbohydrate which upon hydrolysis
ms unidades de monosacridos .Los gives two or more monosaccharide units.
monosacridos presentan reacciones The monosaccharides present
caractersticas de xido-reduccin como characteristic reactions as redox reactions
las reacciones con los reactivos de with reagents Tollens and Fehling,
Tollens y Fehling, la formacin de osazones formation and training of
osazonas y la formacin de furfurales. furfural.

Palabras claves: carbohidratos, Keywords: carbohydrates, chemical

propiedades qumicas, clasificacin, properties, classification, characteristic
reacciones caractersticas. reactions.
OBJETIVOS convierten en aqullos, un carbohidrato
que no es hidrolizable a compuestos ms
Objetivo general
simples, se denomina monoscarido. Un
Identificar mediante reacciones carbohidrato que por hidrlisis da dos
caractersticas el comportamiento molculas de monosacrido se llama
qumico de los carbohidratos, disacrido, mientras que el que da muchas
caracterizndolos en monosacridos molculas de monosacrido por hidrlisis
(aldosas o cetosas), en disacridos o es un polisacrido.
polisacridos.
Un monosacrido se puede clasificar ms
Objetivos especficos precisamente: si contiene un grupo
Diferenciar mediante reacciones aldehdo se le conoce como aldosa; si

cualitativas los monosacridos de los contiene una funcin cetona es una

disacridos y polisacridos. cetosa. Segn el nmero de tomos de

carbono que contenga, se conoce el
Reconocer y analizar las reacciones que
monosacrido como triosa, tetrosa,
se llevan en cada una de las pruebas de
pentosa, hexosa, y as sucesivamente.
Molish, Azcares reductores, Barfoed,
Bial, Seliwanoff, Prueba del cido Los carbohidratos que reducen los

msico, Formacin de osazonas y Prueba reactivos de Fehling (o Benedict) y

de Wolhk en los carbohidratos. Tollens, se conocen como azcares

Reconocer la capacidad oxido-reductora
de los monosacridos.
Identificar los carbohidratos en una
muestra problema.
reductores. Todos los monosacridos,
sean aldosas o cetosas, son azcares
reductores, como lo son tambin la
mayora de los disacridos, siendo una
excepcin importante la sacarosa (azcar
de mesa comn), la que no es reductora.

MARCO TEORICO
MATERIALES Y REACTIVOS
Los carbohidratos son Una gradilla para tubos de ensayo
polihidroxialdehdos, polihidrixicetonas o Tubos de ensayo (1= Blanco-
compuestos que por hidrolisis se Glucosa- y 2= Patrn-Fructosa)
Alfa Naftol 10%. Formula: C10H7O
 cido sulfrico concentrado. Galactosa 1%. Formula: C6H12O6
Formula : H2SO4 Reactivo de Benedict. Formula:
Solucin de almidn. CuSO4.5H2O/ CNa2O3/ CKNS
Formula: C6H10O5 Sacarosa. Formula : C12H22O11
cido clorhdrico. Formula: HCl Fructosa. Formula: C6H12O6
Reactivo de lugol. Formula: I2 (1%) Lactosa. Formula: C12H22O11
en equilibrio con KI (2%) en agua Reactivo de Fehling.
destilada.
 RESULTADOS

Tabla 1 Reconocimiento de Carbohidratos Prueba de Molish

PRUEBA DE MOLISH ( C10H7O/ H2SO4 )
Compuesto Caractersticas Resultado
Sacarosa
C12H22O11

Se observ la aparicin de dos capas, la

primera de color violeta y un precipitado de Positivo
color rojo

Fructosa
C6H12O6
Se observ la aparicin de dos capas, la
primera de color violeta, el precipitado de
color rojo pero en mayor cantidad que la Positivo
presentada por la sacarosa

Tabla 2 Reconocimiento de Carbohidratos Prueba de Fehling

PRUEBA DE FEHLING

Compuesto Caracterstica Resultado

Fructosa Precipitado rojo
Positivo
C6H12O6

Sacarosa Precipitado rojo

Negativo
C12H22O11
Tabla 3 Reconocimiento de carbohidratos prueba de lugol o yodo
PRUEBA DE LUGOL : I2 (1%) en equilibrio con KI (2%) en agua destilada
Compuesto Caracterstica Resultado

Almidn Coloracin caf-rojiza oscura Positivo

C6H10O5

Tabla 4 Reconocimiento de carbohidratos reactivo de Tollens

PRUEBA CON EL REACTIVO DE TOLLENS
Compuesto Caractersticas Resultado
Fructosa Coloracin rojiza
Positivo
C6H12O6

Sacarosa
se mantiene la coloracin Negativo
C12H22O11
azul
Tabla 5 Reconocimiento de carbohidratos reactivo de Benedict

PRUEBA CON EL REACTIVO DE BENEDICT

Compuesto Caractersticas resultado

Sacarosa No se produjo ningn Negativo

cambio de coloracin
C12H22O11

Galactosa Se produjo un cambio de Positivo

coloracin del azul claro a
C6H12O6
rosado evidenciando el
proceso de reduccin

Tabla 6 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Barfoed

PRUEBA DE BARFOED

Compuesto Caractersticas Resultado

Sacarosa Coloracin azul Negativo

C12H22O11

Fructosa Coloracin azul Negativo

C6H12O6

Tabla 7 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Seliwanoff

PRUEBA DE SELIWANOFF
Compuesto Caractersticas Resultado
Sacarosa Coloracin rosada clara Positivo
C12H22O11

Fructosa Coloracin rosada intensa Positivo

C6H12O6

Tabla 8 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Bial

PRUEBA DE BIAL
Compuesto Caractersticas Resultados

Sacarosa Coloracin anaranjado claro Negativo

C12H22O11

Fructosa Coloracin anaranjado oscuro Negativo

C6H12O6
Tabla 9 Reconocimiento de carbohidratos- prueba del cido Msico
PRUEBA DEL CIDO MSICO
Compuesto Caractersticas Resultado

Galactosa Se forman los cristales Positivo

C6H12O6

Sacarosa No se forman cristales Negativo

C12H22O11

Tabla 10 Reconocimiento de carbohidratos- formacin de osazonas

FORMACION DE OSAZONAS
Compuesto Caractersticas Resultado

Galactosa Coloracin amarilla y cristales Positivo

del mismo color
C6H12O6

Fructosa Coloracin amarilla pero no Negativo

aparecen cristales
C6H12O6
Tabla 11 Reconocimiento de carbohidratos- Prueba para disacridos
PRUEBA PARA DISCARIDOS SACAROSA
Tubo con Caractersticas Resultado
HCl Coloracin amarilla Positivo

NaOH Coloracin ligera rosada Negativo

H2O Traslucido Negativo

Tabla 12 Reconocimiento de carbohidratos- Prueba para disacridos

PRUEBA DE WOLHK
Compuesto Caractersticas Resultado
Lactosa Ligera capa superior rojiza Positiva
C12H22O11

Fructosa Traslucido Negativo

C6H12O6
ANALISIS DE RESULTADOS

Ensayo
Prueba de La reaccin de la fructosa con el H2SO4 concentrado, forma un furfural o
Molisch un derivado del furfural, que se reconoce con el alfa naftol por formacin
de un color purpura violeta, el H2SO4 concentrado descompone el
carbohidrato presentndose una hidrolisis en los enlaces glucosidicos.

Este tipo de reaccin es de adiccin nucleofilica y de tipo SN1, en el cual

el H2SO4 concentrado presenta una hidrolisis de los enlaces glucosidicos y
con el alfa naftol se precipitan para dar una coloracin violeta que es el
positivo para los hidratos de carbono.

Ilustracin 1. Reaccin del Monmero con el 2 4 concentrado

Ilustracin 2 Reaccin del derivado furfural con el Alfa naftol

Reactivo de En este ensayo se identifican los azucares reductores, todos los monmeros
Benedict contienen en sus extremos funciones qumicas (Aldehdos y Cetonas) que pueden
reducir otras sustancias.

En la reaccin con el reactivo de Benedict, la galactosa al ser una aldosa reduce

 el complejo cprico, desapareciendo el color azul intenso, por un color rojo
ladrillo que el cual es positivo para este ensayo.

La sacarosa es la unin por los dos extremos reductores de la glucosa y la

fructosa, por lo consiguiente no podr efectuar esta reduccin del ion cprico.

Ilustracin 3 Reaccin de la glucosa con el Reactivo de Benedict

Reactivo de En presencia de agentes oxidantes, iones metlicos como el +2, los

Fehling monosacridos presentan varias reacciones de oxidacin. Presentndose un
cambio de coloracin a rojo ladrillo indicando la presencia de un azcar reductor,
Para el ensayo con la sacarosa al ser esta la unin de los extremos nucleofilicos
de la glucosa y la fructosa no posee iones libres para formar la reaccin de
reduccin.

Ilustracin 4 Reaccin de los Carbohidratos con el Reactivo de Fehling

Reactivo de El ensayo con el reactivo de Tollens es una reaccin de oxidacin, en la cual se

Tollens identifica a las aldosas, ya que las cetosas no reaccionan. En la reaccin el
reactivo de Tollens se oxida totalmente, y genera el espejo de plata, ya que el ion
de plata se reduce a plata elemental. Sin embargo la fructosa si reduce el reactivo
de Tollens, esto se debe a que la fructosa se isomeriza fcilmente en una mezcla
de aldosas (glucosa y manosa) en una disolucin bsica por una serie de
 desplazamiento tautomericos ceto-enol1.

Ilustracin 5 Reaccin de los Carbohidratos con el Reactivo de Tollens

Prueba de El reactivo de Barfoed es una prueba para distinguir entre monosacridos y

Barfoed disacridos, en nuestro ensayo el resultado no fue representativo ya que la
sacarosa que trabajamos no era la indicada, para esta prueba.

Tericamente la velocidad de reaccin al reducir el ion +2 , por parte del

monmero debe ser ms rpida que la del disacrido, Esta reaccin est limitada
al tamao de la molcula, siendo la reaccin de los monmeros mucho ms rpida
que los disacridos

Ilustracin 6 Reaccin de los Carbohidratos con el Reactivo de Barfoed

Prueba de El yodo se introduce en las espiras de la molcula del almidona, por lo cual
lugol este toma una coloracin oscura. El almidn es coloreado de azul en
presencia de Lugol, debido a una adsorcin o fijacin del I-3sobre las
unidades de glucosa de la amilosa.

Prueba de Tanto las aldosas como las cetosas en presencia de cidos minerales y en un
Seliwanoff medio caliente sufren procesos de deshidratacin, lo cual da como producto un
anillo pentagonal de furfural o hidroximetilfurfural, segn sea el monosacrido
pentosa o hexosa, los furfurales se condensas dando una coloracin roja. Las
cetosas se deshidratan ms rpido que las aldosas, lo cual permite
 diferenciarlos. En la prueba de Seliwanoff la fructosa al ser una cetohexosa da
un resultado positivo, en cuanto a la sacarosa esta al contener fructosa da
tambin positivo si se deja correr el tiempo adecuado para que se efectu la
hidrolisis acida en donde la sacarosa libera fructosa.

Ilustracin 7. Reaccin de las cetohexosas con el reactivo de Seliwanoff

Prueba de Bial Esta prueba se basa en la formacin de furfural, al hacer reaccionar pentosas
con HCl y posteriormente con orcinol. El furfural es un aldehdo electrofilico, en
presencia de cido, adiciona fenoles (con prdida de agua) produciendo
sustancias altamente coloreadas, las pentosas originan una coloracin azul-
verde. En la prueba de Bial no se cont con la ribosa, procedimos a realizar la
prueba con fructosa y sacarosa. Tanto la fructosa como la sacarosa al no ser
pentosas no dan una coloracin positiva, sin embargo las hexosas al reaccionar
con el reactivo de Bial originan una coloracin verde, caf o caf-rojiza, razn
por lo cual en la fructosa se observ una coloracin caf rojiza oscura y en la
sacarosa una coloracin similar pero clara. Para la pentosas la reaccin es:
 Ilustracin 8. Reaccin de las pentosas con reactivo de Bial

Prueba del La prueba de cido msico permite identificar la galactosa. El HNO3 oxida tanto
cido msico al grupo aldehdo como al alcohlico primario para formar cidos dicarboxilico,
el cido msico insoluble se forma gracias a la oxidacin de la galactosa, este
cido dicarboxilico al ser insoluble precipita en forma de cristales.

Ilustracin 9. Reaccin de la galactosa con HNO3

Formacin de Las aldosas y las cetosas al poseer un grupo aldehdo y cetona respectivamente
osazonas pueden reaccionar con la fenilhidrazina para formar fenilhidrazonas, si se utiliza
un exceso de fenildidrazina se forma una osazona que contiene dos residuos de
fenilhidrazina por molcula, mientras que una tercera molcula del reactivo se
convierte en anilina y amoniaco1. La osazona formada por la galactosa (aldosa)
es insoluble y se presenta en forma de cristales amarillos.
 Ilustracin 9 . Formacin de osazonas
Prueba para La sacarosa es un disacrido que carece de poder reductor, esto se debe a que
disacridos no posee en la molcula un grupo aldehdo o cetona en forma de
hemiacetlitica, el HCl hidroliza la sacarosa dando lugar a la glucosa y la
Sacarosa
fructosa, sus monosacridos integrantes. Al aplicar la prueba de Benedict y la de
Seliwanoff estas dan positivo. La hidrolisis acida de su enlace glicosidico permite
que sus mono sacridos glucosa y fructosa (azucares reductores) reaccionen
con el reactivo de Benedict, por otro lado la glucosa y la fructosa en la prueba
de Seliwanoff tambin arroja un resultado positivo, a causa de las razones
anteriormente expuestas (ver prueba de Seliwanoff).

La prueba de Wolhk permite identificar la lactosa. Lactosa es un azcar

reductor, forma una osazona y existe en formas alfa y beta que mutarrotan., se
Prueba de
toma como resultado positivo la aparicin de una coloracin rojiza; en nuestra
Wolhk
muestra de lactosa se observ una ligera capa superior rojiza mientras que en
nuestro blanco no hubo ningn cambio.

CUESTIONARIO

1. Qu diferencia existe entre azucares no reductores el grupo

azucares reductores
reductores?
Los azucares reductores poseen un
grupo carbonilo libre, lo cual les
permite reducirse, en cambio en los
y no carbonilo se encuentra combinado en
unin glicosidica, haciendo que estos
carezcan de capacidad reductora.
2. cmo puede justificar el hecho de
que la glucosa, al igual que la
 fructosa de prueba positiva para La manosa se encuentra en las gomas
azucares reductores? vegetales y es constituyente de muchas
Tanto la glucosa como la fructosa son protenas.
considerados azucares reductores, es
b) Galactosa
decir se oxidan fcilmente con
oxidantes suaves, los dos poseen
carbonos libres en forma de
hemiacetales otorgndoles la
capacidad de reducir.

3. Consulte las estructuras en forma

abierta o cerrada de los
siguientes azucares y consulte de
donde se extraen o en donde
abundan y para que se emplean
cada una de ellas:
a) Manosa La galactosa es sintetizada por las
glndulas mamarias para producir lactosa,
que es un disacrido formado por la unin
de glucosa y galactosa, por tanto el mayor
aporte de galactosa en la nutricin
proviene de la ingesta de lactosa de la
leche. Es un monosacrido que se obtiene
en el intestino, por medio de la accin de
la enzima lactasa. se convierte en glucosa
en el hgado como aporte energtico,
forma parte de los glucolpidos y
glucoprotenas de las membranas
Forma abierta Forma
celulares de las clulas sobre todo de las
cerrada
neuronas
c) Lactosa e) Almidn

Est presente en todas las leches de los Es un homopolisacrido de reserva

mamferos. La lactosa representa una energtica predominante en las plantas,

fuente energtica de fcil utilizacin y constituido por la unin de grandes

cantidades de monmeros de glucosa.El
favorece la absorcin de calcio y
almidn se encuentra en los amiloplastos de
magnesio.
las clulas vegetales, sobre todo en las
semillas, las races y los tallos, incluidos
d) Fructosa
los tubrculos.

f) Sacarosa

Abundante en la frutas y vegetales, es

usado por la abejas para hacer miel, es
usada como edulcorante, fuente de
energa y conservante.

Se encuentra en los vegetales, las g) maltosa

frutas, la miel, la hidrolisis del azcar
de caa y de la inulina. El hgado la
almacena en forma de glucgeno
tambin es convertida en glucosa y
utilizada por el organismo.
Se encuentra en la cerveza, en los reacciones permiten diferenciar
granos de cebada, se puede obtener monosacridos de disacridos como la
por hidrolisis de almidn y sacarosa.
glucgeno. Se usa como edulcorante y
Los monosacridos se diferencia de
en jarabes.
los disacridos (sacarosa) por su
h) Ribosa poder reductor, poder que es otorgado
por el carbono libre que posee, los
monosacridos a su vez se subdividen
en aldosas y cetosas, y en pentosas o
hexosas, estos fueron identificados y
diferenciados mediante la prueba de
Tollens, de Seliwanoff y de Bial, en
las que se evidencio la velocidad de
La fuente principal de la ribosa son deshidratacin de las aldosas y
los cidos nucleicos, es vital para los cetosas, y la formacin de furfural o
elementos estructurales de los cidos hidroximetil furfural, segn provenga
nucleicos y de las coenzimas como una pentosa o hexosa.
ATO, NAD+, NADP+,
flavoproteinas, intermediario en la via La sacarosa al hidrolizarse libera a sus

de las pentosas. monosacridos constituyentes: la

glucosa y la fructosa, debido a esto la
CONCLUSIONES sacarosa presento resultados positivos
en la prueba para disacridos y en la
Los carbohidratos al poseer en su
prueba de Seliwanoff.
estructura aldehdos o cetonas,
presentan un comportamiento qumico BIBLIOGRAFIA
ligado a los grupos funcionales de
estos, como por ejemplo la capacidad
1. Morrison, J.Boyd, R. (1976). Qumica
de oxidarse con agentes oxidantes
orgnica: Bioqumica. Estados Unidos
suaves como el reactivo de fehling o
de Tollens o la capacidad de formar 2. Morales. (2005)Reconocimiento de los

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Callao, Lima-Per
J. Ernesto Luquet. (2010). Bioqumica:
Carbohidratos, San Juan de Pasto

3. Teijn, J.Garrido, A, Villaverde, C.

Blanco, M. Mendoza, C. Ramirez, J. (2005).
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Hidratos de Carbono. Mxico, D.F.

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(2008) .CengageLearning Editores, S.A.