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Cuantificacion de Azucares Reductores Por DNS PDF
Cuantificacion de Azucares Reductores Por DNS PDF
El reactivo consiste en una disolucin formada por los siguientes compuestos: cido
dinitrosaliclico (cido 2-hidroxi-3,5-dinitrobenzico), que acta como oxidante; Sal de
Rochelle (tartrato sdico-potsico), que impide la disolucin de oxgeno en el reactivo y
hidrxido sdico, que aporta el medio requerido para que se produzca la reaccin
redox. De esta forma, el cido 2-hidroxi-3,5-dinitrobenzico se reduce, en presencia del
grupo reductor de la glucosa, formando el cido 3-amino-5-nitrosaliclico, mientras que
el grupo aldehdo reductor se oxida, para formar un grupo carboxlico. En este mtodo
analtico el DNS est en exceso frente a los grupos reductores y en todas las muestras
se adiciona la misma cantidad, de tal forma que mayores concentraciones de azcares
reductores provocan una mayor coloracin de la muestra. Estas diferencias de
coloracin pueden determinarse por espectrofotometra visible, a la longitud de onda de
mxima absorbancia de 540 nm.
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Preparacin de solucin Buffer Mcilvaine, 0.1 M, pH 5
Preparar una solucin de glucosa con una concentracin de 1 g/L, para la cual se
disuelve 0.1 g de glucosa en 100 mL de solucin tampn Mcllveine, pH 5 (tabla a).
Tabla a. Curva patrn. Volumen de solucin patrn y agua destilada agregados a cada tubo, as como la
concentracin de cada uno.
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*Se prepara un el blanco para lectura en el espectrofotmetro, en un tubo se agrega
1 mL de agua destilada y 1 mL de DNS, se introduce en agua hirviendo 5 min, se
agregan 8mL de agua destilada, se lee en el espectrofotmetro y se registra la
absorbancia a la longitud de onda de 540 nm.