MTODOS DE CUANTIFICACIN DQO DBOU DBO5

Mtodos de cuantificacin de DQO

La demanda qumica de oxgeno, DQO, corresponde a la cantidad de oxigeno requerida para

oxidar completamente por medios qumicos los compuestos orgnicos a CO2 y H2O en una
muestra de agua, bajo condiciones especficas de agente oxidante, temperatura y tiempo.

La DQO es un indicador de la contaminacin en aguas residuales y aguas naturales. En una

muestra de agua los componentes orgnicos e inorgnicos se someten a una oxidacin
qumica. En muchos casos, el componente orgnico predomina y es el de mayor inters.

Los resultados de la prueba dependen, principalmente, de qu tan completa sea la oxidacin,

la cual puede verse afectada por: El tiempo de digestin, la fuerza oxidante del reactivo, la
naturaleza de la muestra y la presencia de sustancias que interfieren con la oxidacin.

Un gran nmero de compuestos orgnicos son oxidados entre el 90% y 100%, y en aquellas
aguas donde estos constituyentes predominan, tales como los efluentes municipales, el valor
de DQO es una medida realista del consumo de oxgeno. Para otro tipo de aguas que
contengan grandes cantidades de substancias que son difciles de oxidar bajo las condiciones
de esta prueba, el valor de DQO es una medida no significativa del consumo de oxgeno;
ste puede ser el caso de algunos efluentes industriales.

A continuacin se describirn los siguientes mtodos de cuantificacin de DQO:

Por reflujo cerrado y volumetra
Mtodo colorimtrico
Mtodo titrimtrico de reflujo abierto

MTODO POR REFLUJO CERRADO Y VOLUMETRA

Las sustancias orgnicas e inorgnicas oxidables presentes en la muestra, se oxidan mediante
reflujo cerrado en solucin fuertemente cida (H2SO4) con un exceso de dicromato de
potasio (K2Cr2O7) en presencia de sulfato de plata (Ag2SO4) que acta como agente
catalizador, y de sulfato mercrico (HgSO4) adicionado para eliminar la interferencia de los
cloruros. Despus de la digestin, el K2Cr2O7 remanente se titula con sulfato ferroso
amoniacal para determinar la cantidad de K2Cr2O7 consumido. La materia orgnica se
calcula en trminos de oxgeno equivalente.

El mtodo es aplicable a aguas superficiales y residuales, usando el dicromato de 0,025 N en

un rango de 2.0 mg O2/L a 100 mg O2/L, usando el dicromato de 0,10 N en un rango de 10
mg O2/L a 450 mg O2/L y con el dicromato de 0,25 N tiene un intervalo de lectura de 10 mg
O2/L a 1000 mg O2/L.

- Limitaciones e interferencias en el mtodo

Los compuestos alifticos voltiles de cadena lineal no se oxidan en cantidad apreciable, en
parte debido a que estn presentes en la fase de vapor y no entran en contacto con el lquido
oxidante; tales compuestos se oxidan ms efectivamente cuando se agrega Ag2SO4 como
catalizador. Sin embargo, ste reacciona con los iones cloruro, bromuro y yoduro
produciendo precipitados que son oxidados parcialmente.

Las dificultades causadas por la presencia de los haluros pueden superarse en buena parte,
aunque no completamente, por acomplejamiento antes del proceso de reflujo con sulfato de
mercurio (HgSO4), que forma el haluro mercrico correspondiente, muy poco soluble en
medio acuoso. Si bien se especifica 1 g de HgSO4 para 50 mL de muestra, se puede usar una
menor cantidad mientras se mantenga una relacin HgSO4:Cl de 10:1, cuando la
concentracin de cloruro sea menor de 2000 mg/L, La tcnica no se debe usar para muestras
que contengan ms de 2000 mg de Cl /L.

El nitrito (NO2 ) tiene una DQO de 1,1 mg de O2/mg de NO2N, y como las concentraciones
de NO2 en aguas rara vez son mayores de 1 o 2 mg NO2N/L, esta interferencia es
considerada insignificante y usualmente se ignora. Para evitar una interferencia significante
debida al NO2 , hay que agregar 10 mg de cido sulfmico por cada mg de NO2-N presente
en el volumen de muestra usado; tambin se agrega la misma cantidad de cido sulfmico al
blanco de agua destilada. Las especies inorgnicas reducidas, tales como in ferroso, sulfuro,
manganoso, etc., se oxidan cuantitativamente bajo las condiciones de la prueba; para
concentraciones altas de estas especies, se pueden hacer las correcciones al valor de DQO
obtenido, segn los clculos estequiomtricos en caso de conocer su concentracin inicial.

- Toma y preservacin de la muestra

Se colectan las muestras en botellas de plstico o de vidrio. La muestra se preserva en campo
por adicin de H2SO4 conc. (2 mL de H2SO4 conc./L de muestra) y se mantiene refrigerada
hasta el momento del anlisis. El tiempo mximo de vida til de la muestra es de veintiocho
das. Las muestras que contengan slidos sedimentables deben mezclarse muy bien para
homogenizar y obtener una muestra representativa.

- Aparatos
*Bureta digital marca Metrohm, modelo Dosimat 775, con una capacidad de 20 ml y una
resolucin de 0.002 mL, y un agitador magntico complementario.
*Bureta de vidrio marca Kimax, con una capacidad de 10 mL y una resolucin 0.02 mL.
*Bureta de vidrio dispensadora, con una capacidad de 50 mL y una resolucin 0.1 mL.
*Balanza analtica con aproximacin de 0.0001 g.
*Microdigestor para micro DQO marca Bioscience, Inc., diseado para mantener una
temperatura constante de operacin de 150C.
*Termoreactor para DQO marca E & Q., diseado para mantener una temperatura constante
de operacin de 150C.

- Reactivos
*Agua Ultrapura, obtenida en la pistola del purificador Labconco WaterPro PS.
*Solucin de digestin, 0,0167M 0.1 N: Poner a secar a 150C durante 2 horas, Dicromato
de potasio (K2Cr2O7 ) con pureza superior al 99.5%. En un vaso de 1000 mL disolver 4,913
g del Dicromato de potasio anhidro, en 500 mL de agua desionizada filtrada, adicionar muy
lentamente 167 mL de cido sulfrico (H2SO4) concentrado y 33,3 g de Sulfato mercrico
(HgSO4) grado reactivo, esperar a que se disolver y se enfre a temperatura ambiente,
completar en baln volumtrico de 1000 mL. Almacenar en botella mbar a temperatura
ambiente.
*Reactivo de cido sulfrico: Preparar con una semana de anticipacin. Agregar sulfato de
plata (Ag2SO4), grado reactivo o tcnico, en cristales o en polvo, a una cantidad de H2SO4
concentrado en proporcin de 5,5 g de Ag2SO4/kg H2SO4. (aproximadamente 545 mL de
cido), tomar una botella de 2500 mL de cido sulfrico concentrado (como viene en la
presentacin del 98%) y adicionar 25.2294 g de Ag2SO4. Dejar en reposo una semana para
que se disolver el Ag2SO4. Una vez disuelto, transfierir cuidadosamente y almacenar en la
bureta de vidrio dispensadora, con una capacidad de 50 mL, a temperatura ambiente.
*Solucin indicadora de ferroina: Disolver 1,485 g de 1,10-fenantrolina monohidratada y
0,695 g de Sulfato ferroso heptahidratado (FeSO4.7H2O) en agua desionizada filtrada y diluir
en baln de 100 mL. Almacenar en frasco con dispensador gota a gota y a temperatura
ambiente.
*Ftalato cido de potasio (KHP) estndar: Triturar ligeramente y poner a secar Biftalato de
potasio (HOOCC6H4COOK) a 110C hasta peso constante. Disolver 0,2125 g de biftalato de
potasio en agua ultrapura y llevar a volumen en un baln volumtrico de 500 mL. El biftalato
tiene una DQO terica de 1,176 mg O2/mg y la solucin tiene una DQO terica de 500 mg
O2/L. La solucin es estable hasta tres meses si se conserva refrigerada; se debe verificar la
presencia o ausencia de crecimiento biolgico, y en caso afirmativo descartarla.
*Solucin titulante de Sulfato ferroso amoniacal hexahidratado (Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O)
FAS, aproximadamente 0.04 N: Disolver 15,6856 g de FAS en agua desionizada filtrada.
Adicionar 20 mL de H2SO4 concentrado, grado reactivo lentamente, dejar enfriar y
completar en baln volumtrico de 1000 mL. Valorar la solucin diariamente con la solucin
de digestin de K2Cr2O7.
*Solucin titulante de Sulfato ferroso amoniacal hexahidratado (Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O)
FAS, aproximadamente 0.1 N: Disolver 39,2140 g de FAS en agua desionizada filtrada.
Adicionar 20 mL de H2SO4 concentrado, grado reactivo lentamente, deje enfriar y complete
en baln volumtrico de 1000 mL. Valorar la solucin diariamente con la solucin de
digestin de K2Cr2O7.
*Solucin de digestin, 0,04175 M 0.25 N: Secar a 150C durante 2 horas, Dicromato de
potasio (K2Cr2O7) con pureza superior al 99.5%. En un vaso de 1000 mL disolver 12.2825 g
del Dicromato de potasio anhidro, en 500 mL de agua desionizada filtrada, adicionar muy
lentamente 167 mL de cido sulfrico (H2SO4) concentrado y 33,3 g de Sulfato mercrico
(HgSO4) grado reactivo, esperar a que se disuelva y se enfre a temperatura ambiente,
completar en baln volumtrico de 1000 mL. Almacenar en botella mbar a temperatura
ambiente.
*Solucin de digestin, 0,004175 M 0.025 N: Secar a 150C durante 2 horas, Dicromato
de potasio (K2Cr2O7 ) con pureza superior al 99.5%. En un vaso de 1000 mL disolver 1.2283
g del Dicromato de potasio anhidro, en 500 mL de agua desionizada filtrada, adicionar muy
lentamente 167 mL de cido sulfrico (H2SO4) concentrado y 33,3 g de Sulfato mercrico
(HgSO4) grado reactivo, espere a que se disuelva y se enfre a temperatura ambiente,
completar en baln volumtrico de 1000 mL. Almacenar en botella mbar a temperatura
ambiente.

- Materiales
*Balones aforados clase A de 50 mL. *Micropipeta de 1000 L
*Erlenmeyers de 125 mL. *Tubos de digestin, de vidrio
*Pipetas aforadas clase A, de 2, 2.5, 5, 6, borosilicato, de 16 100 mm, con tapa
10, 20 y 25 mL. rosca con empaque de Tefln y que
*Pipetas graduadas de 5 y 10 mL. soporten temperaturas hasta de 200C.
*Probetas vidrio de 50 mL. *Tubos de digestin, de vidrio
*Transferpipeta de 10 mL borosilicato, de 25 150 mm, con tapa
*Pipeta Pasteur. rosca con empaque de Tefln y que
*Microesptula. soporten temperaturas hasta de 200C.

- Procedimiento de limpieza de vidriera

Lavar toda la vidriera con jabn alcalino o con soda al 10%, enjuagar con agua de la llave,
posteriormente dejar en cido sulfrico al 10% y enjuagar con agua destilada. Utilizar la
vidriera a la que se le haya efectuado control de calidad y resrvela nicamente para las
determinaciones de DQO. Los tubos se lavan entre ensayo y ensayo con agua ultrapura se
someten a lavado general cuando presentan pelcula de grasa.

- Procedimiento de preparacin de estndares

*A partir de la solucin patrn de Biftalato de potasio con una DQO igual a 500 mgO2/L,
preparar estndares de las siguientes concentraciones 50; 100; 200 mgO2/L.
*Preparar un estndar de 50 mgO2/L de DQO a partir de la solucin de 500 mgO2/L de
DQO, tomar 5 mL de sta solucin y llevar a volumen en un baln aforado clase A de 50
mL, con agua ultrapura.
*Preparar un estndar de 100 mgO2/L de DQO a partir de la solucin de 500 mgO2/L de
DQO, tome 10 mL de sta solucin y llevar a volumen en un baln aforado clase A de 50
mL, con agua ultrapura.
*Preparar un estndar de 200 mgO2/L de DQO a partir de la solucin de 500 mgO2/L de
DQO, tomar 20 mL de sta solucin y llevar a volumen en un baln aforado clase A de 50
mL, con agua ultrapura.
*Preparar un estndar de 5.0 mgO2/L de DQO a partir de la solucin estndar de 50 mgO2/L
de DQO, tomar 5 mL de sta solucin y llevar a volumen en un baln aforado clase A de 50
mL, con agua ultrapura.
*Cada vez que se pase un lote de muestras incluir estndares de control de concentraciones
50 y 200 mgO2/L, para muestras que se procesen con Dicromato 0,10 N. Estndares de
control de concentraciones 100 y 500 mgO2/L, para muestras que se procesen con Dicromato
0,25 N. Estndar de control de concentracin 5.0 mgO2/L, para muestras que se procesen
con Dicromato 0,025 N.

- Procedimiento de anlisis

Digestin de la muestra
*Precalentar conectando el digestor una hora antes de colocar las muestras para que ste
alcance los 150 C.
*Preparacin de blancos: Transferir una alcuota de 2,5 mL de agua ultrapura en un tubo de
digestin, adicionar 1,5 mL de solucin de digestin y 3,5 mL de reactivo de cido sulfrico
(este reactivo debe ser dispensado gota a gota por la pared del tubo). Tapar hermticamente
los tubos, agitar varias veces, sin invertir.

*Preparar 6 tubos como blancos, 3 de ellos colquelos en digestin junto con las muestras y
los otros 3 dejarlos sin digerir, para valorar la concentracin del FAS.

*Tratamiento de la muestra: Agitar vigorosamente la muestra, transferir a un tubo de

digestin, 2,5 mL de muestra, agregar cuidadosamente 1.5 mL de solucin de digestin y 3,5
mL de reactivo de cido sulfrico por la pared del tubo de tal manera que se forme una capa
de cido debajo de la mezcla de muestra y solucin digestora. Tapar hermticamente y agitar,
si la muestra presenta coloracin verdosa o azul, indica que se encuentra fuera de rango de
lectura, repetir el procedimiento utilizando dicromato de potasio 0,25 N, titular con sulfato
ferroso amoniacal. Tener en cuenta las precauciones.

*Verificar el tipo de muestra, cuando sta corresponda a un adicionado medir el volumen

antes de iniciar el anlisis y registrar en el formato y en el envase.

*Colocar los tubos con las muestras, los blancos para digestin y los estndares de control
(distribuir aleatoriamente en cada uno de los bloque los blancos y los estndares de control),
en el microdigestor precalentado a 150C. Esperar a que se estabilice la temperatura en 150C
y dejar en digestin por 2 horas, despus de este tiempo sacar los tubos y colocarlos en una
gradilla a enfriar.

*Transferir cuantitativamente el contenido de cada tubo a un erlenmeyer marcado con el

nmero de muestra, blanco o control.

Valoracin del Titulante.

*Valoracin del FAS: Tomar cada uno de los blancos no digeridos, transferir
cuantitativamente a un erlenmeyer de 125 mL, enjuagar varias veces con agua ultrapura y
verter el contenido en el erlenmeyer. Adicionar 2 gotas de indicador de ferroina, mezclar
rpidamente con el agitador magntico.
*Titular con el FAS aprox 0,04 N (si se usa dicromato 0.025 N 0.10 N) o aprox. 0.10 N (si
se usa dicromato 0.25N). El punto final de la titulacin es un cambio de color de azul verdoso
a caf rojizo permanente.

Volumen de Dicromato = 1,5 6 mL.

Concentracin del Dicromato de potasio: 0.025, 0.10 N 0.25 N

Titulacin de muestras.
*Titulacin de Blancos, Medicin de la reduccin del dicromato: Tomar los tubos de los
blancos digeridos y realizar el mismo procedimiento de titulacin que el efectuado para la
valoracin del FAS.

*Titulacin de las muestras: Tomar los tubos de las muestras y estndares y realizar el mismo
procedimiento de titulacin que el efectuado para la valoracin del FAS.

NOTA: Si en la etapa de titulacin de las muestras al adicionar ferrona, toman color rojizo
permanente, significa que todo el dicromato ha sido consumido, por lo tanto es necesario
utilizar el dicromato ms concentrado. Si este tambin es consumido diluir la muestra.
Desechar los residuos en la caneca rotulada Desechos de DQO ubicada debajo del mesn del
rea de DQO.

- Procesamiento de datos y clculo de resultados

Rechazo de datos para los 3 blancos con digestin: calcular el estadstico T para los valores
extremos de cada grupo (mximo y mnimo), calcular el promedio y la desviacin estndar.

Calcular el T como: T = (Xalto Xpromedio)/s para un valor alto.

T = (Xpromedio Xbajo)/s para un valor bajo.
Si el T calculado es mayor que el T de tablas que es igual a 1,15 para 3 datos y para un nivel
de confianza del 95%, el dato se rechaza. Para mayor informacin revise el TP0131
Procedimiento estndar de operacin de estandarizacin de mtodos analticos.

Donde:
A= Promedio de mL de FAS utilizado para los blancos digeridos.
B= mL de FAS utilizado para la muestra
N= Normalidad del FAS
8= Peso equivalente del Oxgeno.

Cuando el resultado de un anlisis sea menor que 10 mg O2/L, realizar el mismo

procedimiento de anlisis pero usando los tubos de 50 mL de capacidad y las siguientes
condiciones:

Volumen de Blanco, Estndar de control de 5.0 mg O2/L o Muestra: 10 mL

Volumen de Reactivo de Digestin 0.025 N: 6 mL
Volumen de Reactivo de cido Sulfrico 14 mL
Temperatura de Digestin 150 C
Tiempo de Digestin 2 Horas
Normalidad de la solucin Titulante, aproximadamente 0.04 N

Cuando el resultado de un anlisis sea menor que 2.0 mg O2/L, registrar en el formato el
valor como < 2.0 mg/L.

Reportar el resultado con 2 cifras significativas.

Registrar los resultados de los controles con 3 cifras significativas en la carta de control,
verificar que los valores se encuentren dentro de los lmites de alarma y/o control de la carta.
MTODO COLORIMTRICO
Cuando una muestra es digerida, el ion dicromato (Cr2O72-) oxida el material de DQO en la
muestra. Esto da como resultado un cambio en el estado de oxidacin del cromo, de
hexavalente (VI) a trivalente (III). Ambas especies de cromo son coloreadas y absorben en
la regin visible del espectro. El Cr2O72- absorbe fuertemente en la regin de los 400 nm,
donde la absorcin del ion crmico (Cr3+) es mucho menor. El Cr3+ absorbe fuertemente en
la regin de los 600 nm, donde el Cr2O72- tiene casi cero de absorcin. En solucin de H2SO4
9 M, los coeficientes de extincin molares aproximados para estas especies del cromo son
como sigue: Cr3+ 50 L/mol-cm a 604 nm; Cr2O72- 380 L/mol-cm a 444 nm; Cr3+ 25 L/mol-
cm a 426 nm. El ion Cr3+ tiene un mnimo en la regin de los 400 nm. Adems, tiene una
absorcin mxima a 420 nm.

Para valores de DQO entre 100 y 900 mg/L, se determina el aumento del Cr3+ en la regin
de los 600 nm. Valores ms altos pueden ser obtenidos por medio de la dilucin de la muestra.
Los valores de DQO de 90 mg/L o menos pueden ser determinados siguiendo la disminucin
en el Cr2O72- a 420 nm. La correspondiente generacin de Cr3+ da un pequeo aumento en la
absorcin a 420 nm, pero esto es compensado en el procedimiento de calibracin.

- Reactivos
*Solucin estndar para digestin: pesar 10.216 g de K2Cr2O7 grado estndar primario,
previamente secado a 150 C durante 2 h, o a la temperatura que indique las especificaciones
tcnicas del reactivo. Agregar 100 mL de agua destilada, 167 mL de H2SO4 concentrado
(precaucin) y 33.3 g de HgSO4, disolver, enfriar a temperatura ambiente y diluir con agua
destilada a 1 L en un baln aforado clase A.
*Reactivo sulfato de plata-cido sulfrico.
*cido sulfmico.
*Ftalato cido de potasio estndar.
NOTA: Estas soluciones pueden adquirirse comercialmente.

- Aparatos y materiales
*Recipientes de digestin, vase el numeral 6.4.1.
*Plancha de calentamiento, vase el numeral 6.4.2.
*Sellador de ampollas, vase el numeral 6.4.3.
*Careta protectora y guantes resistentes al calor.
*Espectrofotmetro. Para ser usado a 600 nm y 420 nm, con acceso a adaptador abierto para
los recipientes de reaccin.

- Procedimiento

Tratamiento de las muestras:

a) Determinar el volumen de muestra y de reactivos necesarios.
b) Preparar, digerir y enfriar las muestras, el blanco y uno o ms de los estndares.

Nota: Estas soluciones pueden adquirirse comercialmente.

Medicin de la reduccin del ion Cr2O72-:

a) Enfriar lentamente las muestras a temperatura ambiente para evitar la formacin de
precipitado. Mezclar suavemente el contenido de los recipientes de reaccin para combinar
el agua condensada y la materia insoluble. Dejar que la materia suspendida sedimente y
asegurarse de que las vas pticas estn claras.

b) Introducir dentro del espectrofotmetro, a travs de la ventana de acceso, las ampollas o

los tubos de reaccin sin abrir, teniendo cuidado de que estn colocados en la trayectoria de
la luz.

c) Leer la absorbancia de las muestras en un espectrofotmetro a la longitud de onda

seleccionada (420 nm 600 nm). A 600 nm usar un blanco no digerido como solucin de
referencia. Analizar un blanco digerido para confirmar que los reactivos analticos estn bien
y para determinar la DQO del blanco. Alternativamente, usar el blanco digerido como
solucin de referencia una vez establecido que tiene una baja DQO.

A 420 nm, usar agua como solucin de referencia. Medir todas las muestras, blancos y
estndares contra esta solucin. Las mediciones de absorcin de un blanco no digerido que
contenga dicromato, con agua destilada en lugar de la muestra, dar la absorcin de
dicromato inicial; cualquier muestra digerida, blanco o estndar que tenga un valor de DQO
dar una absorcin menor debido a la disminucin del ion dicromato. Analizar un blanco
digerido con agua en lugar de la muestra para asegurarse de la calidad del reactivo y para
determinar la contribucin de los reactivos a la disminucin de la absorcin durante una
digestin dada. La diferencia entre las absorbancias de una muestra digerida dada y el blanco
digerido es una medida de la DQO de la muestra. Cuando se corren los estndares, graficar
las diferencias entre las absorbancias de los blancos digeridos y de los estndares digeridos
versus los valores de DQO para cada estndar.

Nota: Para tener una mayor sensibilidad, deben utilizarse tubos de reaccin o ampollas
ajustados pticamente; deben descartarse recipientes que estn rayados o defectuosos.

Preparacin de la curva de calibracin.

Se utilizan los mismos volmenes de reactivos, tamao de los tubos de reaccin o de las
ampollas y el mismo procedimiento de digestin utilizado con las muestras:

a) Preparar al menos cinco estndares de solucin de C8H5KO4 con equivalentes de DQO

para cubrir cada rango de concentracin, dependiendo de la longitud de onda de trabajo.

b) Se deben preparar curvas de calibracin para cada lote nuevo de tubos de reaccin o
ampollas, o cuando los estndares preparados difieren en 5 % de la curva de calibracin.

Nota: Las curvas deben ser lineales. Sin embargo, puede ocurrir alguna no linealidad,
dependiendo de los instrumentos utilizados y de toda la exactitud necesaria.
 - Clculos

Calcular la DQO en la muestra con la frmula siguiente:

M 1 000
DQO (mg/L O2 )
V
En donde:

M = Masa de oxgeno en el volumen final, en miligramos

V = Volumen de muestra, en mililitros
1000 = Factor de conversin de mililitros a litros.

MTODO TITRIMTRICO DE REFLUJO ABIERTO

La mayor parte de materia orgnica es oxidada por una mezcla de cidos crmico y sulfrico
en ebullicin. Las muestras de agua residual se llevan a reflujo en una solucin cida con un
exceso conocido de K2Cr2O7; despus de la digestin, el remanente no reducido de K2Cr2O7
es titulado con solucin de sulfato amnico ferroso [Fe(NH4)2(SO4)2], para determinar la
cantidad de K2Cr2O7 consumido, segn la siguiente reaccin:

Cr2O72- + 6Fe2+ + 14H+ 2Cr3+ + 6Fe3+ + 7H2O

y luego la materia orgnica oxidable se calcula en trminos de equivalente de oxgeno. Un

mol de dicromato (Cr2O72-) es equivalente a 1.5 moles de oxgeno (O2). Las proporciones en
masa, volumen y concentracin de los reactivos deben mantenerse constantes, cuando se
utilizan volmenes de muestra diferentes a 50 mL. El tiempo estndar de reflujo de 2 h,
puede reducirse si se ha comprobado que con un perodo menor se obtienen los mismos
resultados.

Las muestras con muy baja DQO o con un contenido de slidos altamente heterogneo de
preferencia se analizan en duplicado para obtener un resultado ms confiable.

- Reactivos
Todos los reactivos deben ser de calidad analtica reconocida.

*Agua destilada o desmineralizada (de pureza equivalente), baja en materia orgnica. La

calidad del agua es de gran importancia para la precisin de los resultados. Verificar la
calidad del agua corriendo blancos sin llegar a ebullicin, pero exactamente como se analiza
la muestra. Considerar los registros del consumo de la solucin de sulfato de amonio y hierro
(II) en los blancos, si hay una diferencia de ms de 0.5 mL de dicha solucin indica
deficiencia en la calidad del agua. Para determinaciones de DQO en muestras que presentan
valores menores de 100 mg/L la diferencia entre los blancos no debera exceder 0.2 mL. La
calidad del agua destilada puede mejorarse destilndola nuevamente a partir de una solucin
de dicromato de potasio o permanganato de potasio, utilizando equipo para destilacin
totalmente de vidrio.

*cido sulfrico concentrado

*Solucin estndar de dicromato de potasio, 0.0417 M. Disolver 12.259 g de K2Cr2O7 grado

patrn primario, previamente secado a 150 C durante 2 h, o a la temperatura que indique las
especificaciones tcnicas del reactivo, en agua destilada y diluir a 1 000 mL en baln aforado
clase A.

*Reactivo sulfato de plata-cido sulfrico. Adicionar Ag2SO4 grado reactivo, en cristales o

en polvo, a H2SO4 concentrado, en una proporcin de 5.5 g de Ag2SO4 por 1 kg de H2SO4.
Dejar reposar de 1 a 2 das para disolver el Ag2SO4.

*Solucin indicadora de ferrona. Disolver 1.485 g de de 1,10-fenantrolina monohidrato y

695 mg de sulfato ferroso heptahidrato (FeSO47H2O) en agua destilada y diluir a 100 mL.

*Solucin tituladora estndar de sulfato de amonio y hierro (II) [Fe(NH4)2(SO4)26H2O]

(SAF) aproximadamente 0.25 M. Disolver 98 g de Fe(NH4)2(SO4)26H2O en agua destilada.
Adicionar 20 mL de H2SO4 concentrado, enfriar y diluir a 1 000 mL con agua destilada en
un baln aforado clase A. La solucin debe ser estandarizada diariamente con solucin
estndar de K2Cr2O7, siguiendo el procedimiento que se indica a continuacin:

a)Diluir 25.0 mL de solucin estndar de K2Cr2O7 en agua destilada hasta completar 100 mL,
adicionar 30 mL de H2SO4 concentrado, enfriar y titular con solucin valorante SAF, utilizar
de 0.10 mL a 0.15 mL (2 a 3 gotas) de indicador ferrona.
b) La molaridad de la solucin SAF se calcula en la siguiente forma:

6 mol Fe2 1 mol SAF

2-
0.04167 mol Cr2O7
V1
1L 1 mol Cr2O7
2-
1 mol Fe2 V
M 0.25 1 (mol SAF/L)
V2 V2

en donde:

M = Molaridad de la solucin SAF

V1= Volumen de la solucin titulada 0.0417 M de K2Cr2O7, en mililitros

V2= Volumen de la solucin SAF utilizada en la titulacin, en mililitros.

*Sulfato mercrico, HgSO4, en cristales o en polvo.

*cido sulfmico. Utilizar nicamente cuando es necesario eliminar la interferencia de

nitrito.

*Ftalato cido de potasio estndar (C8H5KO4). Pulverizar y secar a 120 C o a la temperatura

que indiquen las especificaciones tcnicas del reactivo, durante 2 h, hasta lograr un peso
constante. Disolver 425 mg de C8H5KO4 en agua destilada y diluir a 1 000 mL en un baln
aforado clase A. El C8H5KO4 tiene una DQO terica de 1.176 mg/mg O2 y esta solucin
tiene una DQO terica de 500 mg/L O2. Esta solucin es estable en refrigeracin a 4 C al
menos una semana, en ausencia de crecimiento biolgico visible.

- Aparatos y materiales

Aparato de reflujo:
a) Erlenmeyer o baln de 250 mL 500 mL, con cuello esmerilado el equipo nuevo se debe
limpiar corriendo un blanco. Para la limpieza del equipo no utilizar detergente, enjuagar con
abundante agua destilada despus de usarlo.
b) Condensador Liebig, West o equivalente con unin esmerilada.
c) Hornilla elctrica, con potencia suficiente para producir una superficie de calentamiento
mnima de 1.4 W/cm2 o equivalente.
d) Ncleos de ebullicin de vidrio.
e) Pipetas clase A.

- Procedimiento

Procedimiento para muestras con una DQO mayor de 50 mg/L O2:

a) Agitar la muestra para homogeneizarla si es necesario. Medir con pipeta exactamente

50.0 mL de muestra y agregarlos a un erlenmeyer o baln de 250 mL 500 mL. Cuando la
muestra tenga una DQO mayor de 900 mg/L O2, preparar una dilucin de la muestra a un
volumen final de 50.0 mL.
b) Agregar 1 g de HgSO4, varios ncleos de ebullicin de vidrio, y muy lentamente 5.0 mL
del reactivo sulfato de plata-cido sulfrico, mezclar hasta disolver el HgSO4. Para evitar
posibles prdidas de material voltil, cuando se est mezclando se debe enfriar el erlenmeyer.
Luego, agregar 25.0 mL de la solucin 0.0417 M de K2Cr2O7 y mezclar.
c) Unir el erlenmeyer al condensador, hacer circular agua, luego agregar 70 mL del reactivo
sulfato de plata-cido sulfrico a travs del extremo abierto del condensador. Agitar
suavemente con movimiento circular al adicionar y homogeneizar la solucin.

Precaucin: La mezcla de reflujo se debe homogeneizar cuidadosamente antes de aplicar

calor, para prevenir un calentamiento localizado en el fondo del erlenmeyer y una posible
reaccin explosiva.

d) Cerrar el extremo abierto del condensador con un vaso de precipitados pequeo, para
prevenir la presencia de materia extraa en la mezcla de reflujo. Conectar la hornilla elctrica
y dejar en reflujo por un perodo de 2 h. La temperatura de la mezcla de reaccin debe ser
148 C 3 C. La reaccin de la mezcla se realiza en una ebullicin suave, no violenta y sin
salpicar. Si la ebullicin es violenta hay indicio de sobrecalentamiento local de la solucin,
lo que puede dar resultados equivocados. La ebullicin violenta puede ocurrir por
sobrecalentamiento o por ineficiencia de los ncleos de ebullicin.
e) Enfriar la mezcla de reflujo, lavar la parte baja del condensador de reflujo con agua
destilada, desconectar el condensador y diluir la mezcla con agua destilada a
aproximadamente el doble de su volumen.
f) Enfriar la mezcla diluida y titular el exceso de K2Cr2O7 con solucin SAF, usando de 0.10
mL a 0.15 mL (2 a 3 gotas) de indicador de ferrona. Aunque la cantidad de indicador de
ferrona no es crtica, se debe utilizar el mismo volumen para todas las titulaciones. Se toma
como punto final de la titulacin el primer cambio bien definido del color azul-verde a caf-
rojizo, que persista por un minuto o ms; el color azul-verde puede reaparecer. Las
determinaciones en duplicado debern concordar dentro de un 5 % de su valor promedio. Las
muestras con slidos suspendidos o componentes que sean lentos para oxidarse pueden
requerir determinaciones adicionales.
g) Siguiendo el procedimiento indicado en los incisos anteriores, refluir y titular un blanco
de agua destilada y una muestra control.

Procedimiento alterno para muestras con una DQO baja. Seguir el procedimiento
anterior, con las excepciones siguientes:
a) Utilizar una solucin estndar de K2Cr2O7 0.00417 M
b) Utilizar una solucin SAF 0.025 M
c) Utilizar en la ecuacin 5.2.6 b la constante 0.025, en lugar de 0.25.

Nota: Con este procedimiento ser muy cuidadoso, pues an trazas de materia orgnica en la
cristalera o provenientes de la atmsfera pueden causar errores considerables.

Si se requiere una mayor sensibilidad, se concentra un volumen mayor de muestra antes de

la digestin con reflujo, de la manera siguiente:

a) A un volumen de muestra mayor de 50 mL, agregar todos los reactivos indicados en el

procedimiento para muestras con una DQO mayor de 50 mg/L O2 y luego reducir el
volumen total a 150 mL, poniendo a ebullir la mezcla en el erlenmeyer (de reflujo), abierto
a la atmsfera y sin el condensador conectado.
Nota: La cantidad de HgSO4 que se utiliza se calcula sobre la base de la relacin en masa de
HgSO4:Cl- en la proporcin de 10:1. Utilizar la cantidad de CI- presente en el volumen
original de la muestra.

b) Despus de concentrar la muestra, analizarla siguiendo el procedimiento para muestras

con una DQO mayor de 50 mg/L O2
c) Siguiendo el procedimiento indicado en los incisos anteriores, concentrar y analizar un
blanco.

- Evaluacin del mtodo.

El mtodo de ensayo y la calidad de los reactivos se evalan a travs de la determinacin de
la DQO de una solucin estndar de C8H5KO4. El procedimiento experimental es
satisfactorio si el resultado de la prueba del control corresponde al menos en un 96 % del
valor terico.

- Clculos.
La DQO en la muestra se calcula empleando la frmula siguiente:
(A - B) M 8 000
DQO (mg/L O2 )
V
En donde:

A = Volumen de solucin SAF usado con el blanco, en mililitros

B = Volumen de solucin SAF usado con la muestra, en mililitros
M = Molaridad de la solucin SAF
V = Volumen de muestra, en mililitros
8 000 = peso miliequivalente de oxgeno x 1 000 mg/L.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

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Albeiro, C. (2009). Estandarizacin y validacin de una tcnica para medicin de la
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oxigeno por el mtodo colorimtrico. Recuperado de: http://repositorio.utp
.edu.co/dspace/bitstream/handle/11059/1780/57253L563.pdf;jsessionid=25E72478508EB4
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COGUANOR. (2014). Aguas. Determinacin de constituyentes orgnicos. Demanda

Qumica de Oxgeno (DQO). Recuperado de: https://www.google.com.co/url?
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WAhWH5SYKHQRkDCEQFghOMAc&url=http%3A%2F%2Fwww.inmetro.gov.br%2Fb
arreirastecnicas%2Fpontofocal%2F..%255Cpontofocal%255Ctextos%255Cregulamentos%
255CGTM_25.doc&usg=AFQjCNE1c-GkJ0zSyluS7q2kWaK7ndm2wA