GANGLIOSIDOS Y GANGLIOSIDOSIS: PRINCIPIOS DE PATOGENIA MOLECULAR Y METABLICA

Gangliosides haba sido descubierto por Ernst Klenk en los aos 30 ( Klenk, 1937 , 1939)
cuando analiz los tejidos cerebrales postmortem de pacientes con enfermedad de Tay-Sachs,
una forma fatal infantil de idiotez amaurtica. Los ganglisidos son componentes tpicos de las
membranas plasmticas neuronales. La primera estructura de ganglisidos, la del ganglisido
GM1 ( figura 1 ), fue elucidada por Kuhn y Wiegand (1963) . Seis especies de gangliosidos
mayores y muchas de menor importancia han sido identificadas en cerebros de mamferos ( Yu
et al., 2011 ).

Biosntesis de gangliosidos y sus defectos en ratones

manipulados genticamente

Sus anclajes de membrana hidrfobos, los restos de ceramida, se forman en el retculo

endoplsmico (ER), la glicosilacin de ceramida tiene lugar en la red de Golgi y Trans -Golgi
(TGN) y su degradacin constitutiva principalmente en el compartimento endolysosomal
( Kolter y Sandhoff, 1999). Un defecto combinado de GM3-sintasa y GM2-sintasa causa una
enfermedad mortal temprana. En este caso, la ausencia de todos los ganglisidos de la serie a y
de la serie b desencadena la formacin de ganglisidos de la serie O, que no se observan en el
cerebro de tipo salvaje. Sin embargo, su sntesis adicional no puede compensar la prdida de
todas las estructuras principales de los ganglisidos neuronales.

El bloque omnipresente de la sntesis de GlcCer, el precursor de los principales

glicoesfingolpidos (GSL), es letal en ratones en el embrionario da 6 ( Yamashita et al., 1999 ).
Sin embargo, su knock out especfico de tipo celular en neuronas ( Jennemann et al., 2005 ),
hepatocitos ( Jennemann et al., 2010 ), o queratinocitos ( Jennemann et al., 2007 ), todava
permitan la embriognesis completa pero con el nacimiento de animales fatalmente
enfermos.

Los ganglisidos han sido descubiertos como GSLs de las membranas neuronales por el anlisis
de los lpidos de la enfermedad de Tay-Sachs ( Klenk, 1937 , 1939 ), pero su compleja estructura
qumica fue dilucidada slo ms tarde en la dcada de 1960 ( Kuhn y Wiegandt, 1963 ). Su
almacenamiento en los lisosomas neuronales abri el camino para el anlisis de su
metabolismo celular y catabolismo lisosmico ( Sandhoff et al., 1969 , Sandhoff, 1977 )

Fenotipos clnicos, correlaciones con fenotipos patolgicos y

bioqumicos

La degeneracin cerebral est marcada por el almacenamiento lipdico presente en las

neuronas con los "cuerpos citoplasmticos membranosos" ultrastructuralmente caractersticos,
que son lisosomas secundarios de "almacenamiento" ( Fig. 2 B ). Estos cuerpos de
almacenamiento distenden las neuronas ( Fig. 2C), que eventualmente se pierden, pero la
razn exacta no est clara (por ejemplo, se discute la inactividad celular por gangliosida
inducida por el deterioro de la transmisin sinptica).
Adems de la afectacin neuronal, una afectacin extraneural ( Tabla 1 ) es sorprendente en
pacientes infantiles y parcialmente presente en pacientes juveniles con gangliosidosis GM1;
incluso una manifestacin intrauterina con hidrops fetalis es posible, y una cara dismrfica
(tipo grgola) es regular en los pacientes infantiles tempranos. Los pacientes juveniles y adultos
con gangliosidosis GM1 tienen un cuadro neurolgico predominante o casi puro ( Suzuki et al.,
2001 ). Las manifestaciones extraneurales estn ausentes en la gangliosidosis GM2, con
excepcin de la variante 0, tambin llamada enfermedad de Sandhoff, en la que es frecuente la
visceromegalia leve ( Gravel et al., 2001 ) y puede ocurrir alguna afectacin de los huesos e
incluso del corazn ( Venugopalan y Joshi, 2002 ).

Los sustratos de las hidrolasas cidas cuyas deficiencias definen las enfermedades son
ganglisidos, asialoganglisidos, otros glicolpidos, oligosacridos especficos y, en el caso de la
-galactosidasa cida, mucopolisacridos. En las deficiencias, los patrones de los sustratos
acumulados se pueden explicar en un formato simplificado como sigue. Los principales
sustratos de la -galactosidasa cida, que son deficientes en GM1-gangliosidosis, son GM1-
ganglisido ( Fig. 1, oligosacridos especficos y sulfato de queratn, por lo que esta
enfermedad se caracteriza no slo por el almacenamiento de ganglisidos (cuyo principal
correlato patolgico es la degeneracin neuronal), sino tambin por oligosacaridosis y
mucopolisacaridosis, con la afectacin clnica extraneuronal debida a esta ltima. El principal
sustrato de la -hexosaminidasa A deficitaria en GM2-gangliosidosis variante B (tambin
llamada enfermedad de Tay-Sachs) o suprimido en el GM2-activador deficiente variante AB, es
GM2-ganglisido, por lo que la enfermedad es "slo" un ganglisido almacenando el desorden.
Los principales sustratos de las -hexosaminidasas A y B deficientes en GM2-gangliosidosis
variante 0 son GM2-ganglisidos y oligosacridos, por lo que la enfermedad incluye
gangliosidosis y oligosacaridosis, con alguna afectacin visceral debida a esta ltima.

Esta "hiptesis de la actividad residual" postula funciones residuales ms altas para el inicio
tardo / manifestacin o formas crnicas de gangliosidosis que para las formas tempranas de la
enfermedad (infantil) (vanse las formas clnicas prolongadas de las gangliosidosis y la teora
del umbral). Aunque las actividades poco residuales, probablemente fisiopatolgicamente
relevantes de las hidrolasas defectuosas, no siempre se pueden evaluar confiablemente en
condiciones de laboratorio in vitro, esa hiptesis pareca ser aceptable para muchos pacientes
que fueron estudiados enzimticamente.

Una enfermedad especial de almacenamiento de ganglisidos de GM1 (asociada con el

almacenamiento de oligosacridos) resulta de una deficiencia indirecta de -galactosidasa
cida (y sialidasa, y una sulfatasa especfica) en galactosialidosis, causada por la deficiencia
gentica del denominada protena protectora (idntica a la carboxipeptidasa A) ( d'Azzo et al.,
2001). Cuando esta protena es defectuosa, no puede formarse el complejo funcional de la
protena normal con -galactosidasa y sialidasa (y la sulfatasa), y estas enzimas, aunque tienen
una estructura normal, estn sujetas a una rpida decaimiento.

Esquema resumen de la sintomatologa clnica

El diagnstico prenatal y postnatal de gangliosidosis se hace generalmente enzimticamente

bioqumicamente (por ejemplo, en muestras de sangre), y / o molecularmente. Muchos
aspectos de la correlacin genotipo-fenotipo en estas enfermedades fueron descritos en la
literatura especial.
Camino de degradacin de ganglisidos

Debido al problema de la fase lipdica, las glicosidasas solubles en agua apenas atacan a las GSL
anfiflicas como componentes de las membranas vesiculares, pero necesitan la ayuda de
protenas perturbadoras de la membrana y de unin a los lpidos, las protenas activadoras
esfingolpidas.

Nuestra visin de la topologa de la digestin de ganglisidos lisosmicos

Para su digestin, los ganglisidos de las superficies celulares llegan a vesculas intra-
endolysosomales luminales o membranas intra-endosmicas (IM) ( Fig. 3 , Burkhardt et al.,
1997 , Mbius et al., 1999 ), que se generan durante la endocitosis. Las vesculas luminales se
forman por etapas sucesivas de brotacin de vesculas y fisin controladas por las protenas
complejas de clasificacin endosomal ( Wollert y Hurley, 2010 ). Las vesculas se preparan para
la digestin lisosmica mediante un proceso de clasificacin de lpidos comenzando a nivel de
endosomas ( Kolter y Sandhoff, 2005 ; Gallala et al., 2011 ). El colesterol se clasifica por dos
protenas de unin al esterol, NPC-2 y NPC-1 ( Abdul-Hammed et al., 2010), y la esfingomielina
se degrada por esfingomielinasa cida (ASM, V. Oninla, B. Breiden, K. Sandhoff, observaciones
no publicadas). El fosfato de bis (monoacilglicero) aninico (BMP) que estimula los pasos
catablicos de ganglisido se forma sustancialmente a partir de fosfatidil glicerol en los IM
( Gallala y Sandhoff, 2011 ; Gallala et al., 2011 ). Mientras que la membrana perimetral
lisosomal parece ser bastante resistente frente a la degradacin lisosomal, los IM se digieren
con la ayuda de protenas de unin a lpidos (SAPs) y enzimas hidrolticas. Las membranas
perimetrales estn protegidas por un glicoclisis grueso enriquecido en estructuras de
polilactosamina, y por un nivel alto de colesterol ( Haye, 1989 ; Appelqvist et al., 2012 ), el
chapern HSP70 ( Kirkegaard et al., 2010) y presumiblemente tambin por una alta presin
lateral que atena la interaccin con GM2AP, una protena de unin a lpidos esencial para el
catabolismo de ganglisido ( Giehl et al., 1999 ).

El catabolismo gangliosdico procede en un procedimiento escalonado ( Fig. 1 ) en la superficie

de las vesculas luminal intralysosomal y estructuras de membrana. Estos estn enriquecidos
con BMP aninico, que atrae las protenas policatinicas, glicosidasas y SAPs, a las superficies
de la membrana que contienen ganglisidos en el medio intralisosmico cido. Mientras que
GM1 hidrolizando -galactosidasa y GM2 divisin HexA se unen a estas superficies aninicas,
que no atacan los sustratos de ganglisidos unidos a la membrana en ausencia de la membrana
que perturban las protenas de unin y transferencia de lpidos. El primer caso de
almacenamiento de GM1 se describi en 1963 como una forma especial de idiotez amaurotica
infantil ( Jatzkewitz y Sandhoff, 1963). La hidrlisis de GM1 unida a vesculas por ganglisido -
galactosidasa lisosomal necesita la presencia de GM2AP o saposina B (Sap-B, Wilkening et al.,
2000 ). Los lpidos aninicos como la BMP en las vesculas portadoras de GM1 estimulan
eficientemente la hidrlisis de GM1. Los defectos heredados de la -galactosidasa degradante
GM1 producen gangliosidosis GM1 ( Okada y O'Brien, 1968 ).

La -galactosidasa degradante GM1 no especfica y verstil se presenta como parte de un

complejo multi-enzimtico lisosmico que contiene sialidasa, catepsina A (la llamada protena
protectora) ( d'Azzo et al., 2001 ) y N -acetilaminogalacto-6 -sulfato -sulfatasa ( Pshezhetsky y
Ashmarina, 2001 ). Debido a cambios en la especificidad del sustrato de variantes de enzimas
del paciente, un defecto heredado de GM1--galactosidasa tambin puede conducir a una
acumulacin mayor de galactosa que contiene sulfato de keratn y oligosacridos, un fenotipo
llamado sndrome de Morquio, tipo B (mucopolisacaridosis IV B) Neufeld y Muenzer, 2001 ,
Okumiya et al., 2003 ).
La hidrlisis de GM2 se facilita en las superficies vesiculares aninicas mediante la cooperacin
de dos protenas, HexA (, ) y la perturbacin de la membrana y la protena de unin a los
lpidos GM2AP ( Figura 4 ) ( Kolter y Sandhoff, 2006 ). A valores de pH cido, este ltimo es una
protena anfiflica catinica protonada y puede unirse a las superficies de membrana aninicas
ricas en BMP, y levantar una molcula de ganglisido ( Figura 4 ). Una hlice de unin a HexA
del GM2AP facilita la formacin del complejo Michaelis-Menten para la degradacin de GM2,
el ganglisido Tay-Sachs y el glicolpido GA2. Los defectos hereditarios de cualquiera de las
protenas producen enfermedades neurodegenerativas mortales ( Kolter y Sandhoff, 2006). La
enfermedad de Tay-Sachs es causada por mutaciones en el gen HexA con prdida de la
actividad de HexA (, ) y S (, ). Las mutaciones de HexA que todava permiten la formacin
del HexA heterodimrico (, ) y afectan solamente su actividad contra sustratos aninicos dan
lugar a la variante B1 de la gangliosidosis GM2 ( Kytzia et al., 1983 ; Kytzia y Sandhoff, 1985 ).
Por otro lado, los defectos heredados en el gen HexB causan la prdida de las actividades HexA
(, ) y HexB (, ) en la enfermedad de Sandhoff.

Las formas clnicas prolongadas de las gangliosidosis y la teora del umbral

La prdida completa o casi completa de las actividades catablicas GM1 o GM2 da lugar a
formas infantiles fatales de enfermedades de almacenamiento. Sin embargo, las mutaciones
allicas, que producen protenas con algunas actividades catablicas residuales, dan lugar a
formas clnicas prolongadas a menudo descritas como enfermedades infantiles, juveniles o
crnicas tardas ( Sandhoff et al., 1989 ) con una amplia gama de sintomatologa clnica.