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Bioquimica Energia PDF
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El metabolismo
Es definido brevemente, como la suma total de las reacciones enzimticas que tienen
lugar en la clula. Cuatro son las funciones especficas del metabolismo:
Obtener energa qumica del entorno de los elementos orgnicos nutritivos o de la
luz solar
Convertir los elementos nutritivos exgenos en los precursores de los
componentes moleculares de las clulas.
Reunir los precursores para formar protenas, cidos nucleicos, lpidos y otros
componentes celulares.
Formar y degradar aquellas biomolculas necesarias para las funciones celulares
especializadas.
Las secuencias reaccinales del metabolismo son semejantes en todas las formas de
vida especialmente las que se conocen como rutas metablicas centrales.
Catabolismo y anabolismo
1
secuencias anablicas puede utilizarse esa energa del enlace fosfato. Esta fase del
metabolismo se denomina acoplamiento energtico. El metabolismo intermedio y el
acoplamiento de energa estn obligatoriamente interconectados y son
interdependientes. Por ello, cuando examinamos los esquemas metablicos deberemos
analizar:
1. Las etapas de reaccin por las que la estructura covalente del precursor se
altera para formar el producto.
2. Los cambios de energa qumica que acompaan a esta conversin.
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Lpidos Polisacridos Protenas
Fase I
cidos grasos Hexosas
Aminocidos
glicerina Pentosas
Gliceraldehdo
3-fosfato
Fase II
Fosfoenol
piruvato
Piruvato
Acetil - C o A
citrato
oxalacetato
isocitrato
Fase III malato
LA ENERGA EN LA CLULA
Las molculas orgnicas complejas, tales como la glucosa contienen mucha energa
potencial a causa de su elevado grado de ordenacin estructural; poseen una entropa
relativamente pequea. Cuando la molcula de glucosa se oxida y forma seis molculas
de CO 2 y seis de H2 O , sus tomos experimentan un aumento en el desorden. Como
resultado de esta transformacin, la molcula de glucosa experimenta una prdida de
energa libre que es energa til y capaz de realizar trabajo. La energa libre se conserva,
como energa qumica, especficamente como ATP. Dado que el ATP formado puede
difundirse hacia aquellos lugares en la clula en que se necesite su energa, constituye
una forma de transportar la energa. La energa qumica del ATP se libera despus,
durante la transferencia de su grupo o grupos fosfatos terminales, a determinadas
molculas de un aceptor especfico, que adquiere un nivel superior de energa y puede
realizar trabajo. Un segundo camino para transportar la energa qumica de las
reacciones de xido-reduccin del catabolismo a las reacciones anablicas, que
necesita de energa, es en forma de electrones. En las sntesis de algunas biomolculas
ricas en hidrgeno, tales como los cidos grasos y el colesterol, se requieren electrones
e hidrgeno para la reduccin de los enlaces dobles a simples. En La clula los
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electrones son transportados enzimticamente desde las oxidaciones productoras de
electrones tales como los dobles enlaces carbono-carbono o carbono-oxgeno, mediante
coenzimas transportadoras de electrones, la ms importante es la nicotinamida-adenin-
dinucletido fosfato (NADP). El NADP desempea de este modo, el panel de
transportador de electrones ricos en energa desde las reacciones catablicas hasta las
reacciones anablicas que los necesitan.
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TEMA XIII: PRINCIPIOS DE BIOENERGETICA Y CICLO DEL ATP
Localizacin y propiedades del ATP y del ADP. Variacin de energa libre estndar de
las reacciones qumicas. Energa libre estndar de la hidrlisis del ATP. Compuesto con
enlace fosfato de bajo y alto nivel energtico. Vas enzimticas de la transferencia de
fosfato. Principio del intermediario comn. Otros ribonucletidos que participan en la
transferencia de energa en la clula 5' difosfato y 5' trifosfato. Papel del AMP y del
pirofosfato.
El sistema ATP - ADP acta como transportador de energa qumica, ya que el ADP es
capaz de aceptar un grupo fosfato en las reacciones acopladas productoras de energa
del catabolismo, y el ATP as formado puede ceder su grupo fosfato terminal, en otras
reacciones acopladas que requieren energa.
En este captulo examinaremos los principios qumicos y termodinmicos en que se
basa el funcionamiento del sistema ATP - ADP.
El ATP fue aislado por primera vez, en 1.929 por Fiske y Subbarow, de los extractos
cidos de msculo.
Su estructura se dedujo algunos aos despus, mediante experimentos de degradacin
y fue definitivamente confirmada por sntesis qumica total realizada por Todd y sus
colegas en 1948. Desde los inicios del descubrimiento, se sospech que el ATP
desempeaba un papel en la transferencia de energa celular pero recin en 1939-1941
Lipmann propuso que actuaba como medio principal de transferencia de la energa
qumica en la clula.
El ATP, el ADP y el AMP no son sustancias que existen solo en trazas; la suma de sus
concentraciones en la fase acuosa de los diversos tipos de clulas intactas oscila entre 2
y 15 mM. La concentracin de ATP es por lo comn, muy superior a la suma de las otras
dos concentraciones del AMP, habitualmente es la menor de las tres.
Estos nucletidos estn presentes no slo en el citoplasma, sino tambin en organelas
tales como mitocondrias y ncleo. La compartimentacin intracelular del sistema ATP
constituye una caracterstica importante en la regulacin celular del metabolismo.
A pH 7,0 tanto ATP como ADP son aniones muy cargados, el ATP posee cuatro
protones ionizables en su grupo de cido trifosfrico. Tres de los protones poseen
valores de pK (K = constante de disociacin) bajo entre 2 y3; por lo tanto a pH 7,0 estn
completamente disociados; el cuarto protn tiene un pK' de 6,5; por consiguiente a pH
7,0 se halla disociado en un 75%.
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NH2
N
N ATP
N N
O O O
HO P O P O P OH 2 C O
OH OH OH
H H
H
H : hidrgenos que cede en su disociacin
OH OH
El ADP posee tres protones ionizables, dos de ellos estn completamente disociados a
pH 7,0 y el tercero que posee un pK' de 7,2 a pH 7,0 se halla disociado alrededor del
39%.
La elevada concentracin de cargas negativas en torno al grupo trifosfato del ATP
constituye un factor importante en su naturaleza de compuesto de alto contenido
energtico.
En la clula intacta existen muy pocas cantidades de ATP y de ADP en forma de
aniones libres, se hallan presentes en su mayor parte en forma de complejos Mg ATP y
Mg ADP a causa de la gran afinidad de los grupos pirofosfato para enlazar cationes
divalentes y de la elevada concentracin de in Mg en el fluido intracelular. La afinidad
del ATP por el Mg es unas diez veces mayor que la del ADP.
mg
-
O O O
-
Adenina Ribosa O P O P O P O mg-ATP
O O O
mg
O O
-
Adenina Ribosa O P O P O mg-ADP
O O
Una descripcin de las bases fsico-qumicas de la funcin del ATP en el ciclo energtico
de la clula, requiere un breve repaso de algunos principios de la termodinmica. El
anlisis termodinmico de los intercambios energticos se inicia por las siguientes
definiciones:
a. Sistema: Es el conjunto de materia que es objeto de nuestro estudio.
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b. Entorno: Toda materia del universo, aparte del sistema que se considera. En
el transcurso del proceso en estudio la energa puede pasar del sistema al
entorno, o viceversa.
c. Estado inicial: Es el contenido de energa del sistema y del entorno, al iniciar
el proceso que se analiza.
d. Estado final: Contenido de energa de sistema y entorno una vez que se ha
alcanzado el equilibrio.
El contenido de energa de cada estado es una funcin de diversas magnitudes
medibles (temperatura, presin, volumen, masa, etc.) que se formulan mediante una
ecuacin de estado. A partir de las medidas de los cambios de contenido de energa del
sistema y el entorno, a medida que el sistema evoluciona desde su estado inicial hasta
su estado final, puede realizarse un balance de energa.
(Bloques de cobre)
Estado de equilibrio
UN SISTEMA DE EQUILIBRIO
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desorden (arco a bloques al azar).
irreversible
reversible
espontneo
endotrmico
exotrmico
G H - T. S (1)
En los sistemas biolgicos las reacciones qumicas tienen lugar en disoluciones acuosas
diluidas, en las que la temperatura, presin y volumen permanecen constantes. En estas
condiciones, PV es cero, por lo tanto:
H E
Si sustituimos en la ecuacin (1)
G E - T. S
reordenamos la ecuacin:
E G T. S
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Con esta ecuacin vemos que a temperatura y presin constantes la variacin de
energa total del sistema ( E ) (que es equivalente al cambio calrico H) es la suma de
T.. S ms la variacin de la energa libre.
La variacin de energa libre puede definirse como aquella fraccin del cambio de
energa total del sistema disponible para realizar trabajo a medida que el sistema
evoluciona hacia su estado de equilibrio, a T y P constantes. Mientras el sistema se
aproxima al equilibrio, la energa libre disminuye hasta un valor mnimo.
El cambio de energa libre que tiene lugar durante las reacciones qumicas se calcula
empleando una ecuacin que puede derivarse de la ley de equilibrio qumico. Para una
reaccin general del tipo:
aA + bB cC + dD (3)
c d
C .D
G G RT ln a b
(4)
A .B
c d
C .D
0 G RT ln a b
(5)
A .B
De donde:
c d
C .D
G RT ln a b
(6)
A .B
c d
C .D
K' eq a b
(7 )
A .B
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G RT ln (K' eq)
O bien:
G 2.303 RT log10 (K' eq) (8)
Esta ecuacin nos muestra que G , la variacin de energa libre estndar de una
reaccin qumica, puede calcularse a partir de su constante de equilibrio. La G
constituye, por lo tanto, una constante termodinmica para una reaccin qumica dada.
Puede definirse de otro modo, que indica claramente su verdadero significado. La
variacin de energa libre estndar de una reaccin constituye, en realidad, la diferencia
existente entre la energa libre estndar de los reactivos y la energa libre estndar de
los productos, hallndose cada trmino ajustado a la estequiometra de la ecuacin de
reaccin:
G G productos G reaccionantes
Para la reaccin (3) ser:
G (c G C d G D ) (a G A b G B )
La energa libre estndar de un compuesto constituye la medida de la cantidad total de
energa libre que puede proporcionar por descomposicin completa.
Es importante comprender la diferencia que hay entre G , que es la variacin de
energa libre estndar, y G que es la variacin de energa libre medida o real. Esta
diferencia puede explicarse mejor utilizando una analoga. G es un valor constante
para una determinada reaccin a una temperatura tambin determinada.
Por otra parte, G vara con las concentraciones de los reaccionantes y de los
productos.
El valor de G nicamente es igual al de G cuando todos los reactivos y todos los
productos estn presentes a concentracin 1,0M.
El valor de G es el que determina si una reaccin qumica ocurrir en la direccin
escrita, partiendo de unas concentraciones de reaccionantes determinadas.
Recurdese que una reaccin qumica solamente ocurrir si G es negativo, es decir, si
la energa libre del sistema disminuye.
Las reacciones qumicas con un G negativo reciben el nombre de exergnicas; se
realizan espontneamente en la direccin en que estn escritas. Si recordamos el
ejemplo de los bloques:
ordenado
G disminuye, es negativo
exergnica o exotrmica
espontnea
irreversible
desordenado
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Las reacciones con un cambio de energa libre estndar positivo reciben el nombre
de endergnicas o endotrmicas, no se realizan de modo espontneo en la direccin en
que se escriben. Volviendo al ejemplo:
desordenado
G aumenta, es postivo
endergnica o endotrmica
no es espontnea
reversible
ordenado
G R T ln(K' eq)
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grandes valores negativos de G .
Para poder medir el G de la hidrlisis del ATP, se descompone en cierto nmero de
etapas menores, las cuales pueden medirse ms fcilmente.
Veremos un ejemplo: en primer lugar, se deja reaccionar al ATP con la glucosa, en
presencia de hexoquinasa para formar ADP y glucosa-6-fosfato. Se mide la constante de
equilibrio, y a partir de ella se calcula G .
hexoquinasa
ATP + glucosa ADP + glucosa_6_fosfato
K'eq = 661
fosfatasa
glucosa_6_fosfato + H2O glucosa + fosfato Pi
K'eq = 171
fosfatasa
glucosa_6_fosfato + H2O glucosa + fosfato Pi
Puesto que los valores de G de las dos reacciones son aditivas, la G de la hidrlisis
del ATP puede calcularse a partir de ellos:
Sin embargo el nico grupo fosfato del AMP tiene un valor mucho menor:
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AMP + H2O adenosina + Pi G -3.40 kcal
Lo que sucede es que los enlaces entre grupos fosfatos adyacentes son enlaces del tipo
de anhdrido, mientras que el enlace entre el fosfato y la ribosa en el AMP es un enlace
ster.
G (kcal)
Fosfoenol piruvato .
-14.80
1-3 difosfoglicerato ... - 11.80
G ATP
Fosfocreatina .. - 10.30
Acetil-fosfato .. -10,10
Fosfoarginina .. - 7.70
ATP . - 7.30
O sea que la funcin del sistema ATP-ADP, consiste en servir como transportador
obligatorio intermedio de grupos fosfato desde los compuestos con enlaces fosfato de
elevado nivel energtico, situados por encima del ATP en la escala termodinmica,
hasta las molculas aceptoras que forman compuestos con enlaces fosfato de bajo nivel
energtico situados en la escala por debajo del ATP.
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fosfato.
Los dos miembros ms importantes de la primera clase son el 1-3 difosfoglicerato y
el fosfoenol piruvato, los cuales se forman durante la fermentacin anaerobia de la
glucosa (gluclisis).
1-3 difosfoglicerato + ADP 3 fosfoglicerato + ATP G -4.5 kcal
Los compuestos fosfato de elevado nivel energtico, que actan como reservorio de la
energa de enlaces fosfato, reciben con frecuencia el nombre de fosfgenos. Los dos
fosfgenos principales son la fosfocreatina hallada en muchos vertebrados, y la
fosfoarginina, presente en muchos invertebrados. Ambos se forman a partir de la
creatina y de la arginina por transferencia de grupos fosfato desde el ATP en reacciones
catalizadas por la creatin-fosfoquinasa y la arginin-fosfoquinasa, respectivamente.
Ambas reacciones son reversibles pero el equilibrio se halla desplazado hacia la
formacin de ATP.
fosfocreatina + ADP creatina + ATP
Fosfoenol piruvato
Dadores de P de alta energa
P
Reservorio de fosfocreatina
1-3 difosfoglicerato
P
P
ATP
P
Aceptores de P Glucosa_6_fosfato
de baja energa P
Glicerol_3_fosfato
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La figura es un esquema de las reacciones enzimticas de transferencia de fosfato en la
clula. Constituye un rasgo importante que el sistema ATP-ADP sea el nexo de unin
obligado entre los compuestos fosfato de elevado y de bajo nivel energtico. Los grupos
fosfato se transfieren, en primer lugar, mediante la accin de fosfotransferasas
especficas, desde compuestos de alto nivel energtico al ADP, como en el ejemplo:
piruvato -
fosfoenol piruvato + ADP piruvato + ATP
quinasa
A + B C + D
D + E F + G
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ambas reacciones estn ligadas por un intermediario comn, en este caso el
componente D.
El nico camino mediante el cual la energa qumica puede ser transferida desde una
reaccin a otra en condiciones isotrmicas es el de que ambas reacciones posean un
intermediario de reaccin comn. Casi todas las reacciones metablicas de la clula se
realizan mediante secuencias de esta clase.
En las reacciones consecutivas, responsables de la transferencia de energa a travs del
ATP, la energa qumica se transfiere desde un dador fosfato de elevada energa hasta
el ADP, y se conserva en forma de ATP como producto de reaccin. En la reaccin
subsiguiente, el ATP se comporta como un sustrato, y cuando pierde su grupo fosfato
terminal, que cede a la molcula del aceptor, sta ltima aumenta su contenido
energtico. Por lo tanto, el ATP es el intermediario comn.
En realidad, la transferencia de intermediarios comunes constituye un atributo general de
las reacciones qumicas consecutivas y no necesita por fuerza, ni grupos fosfatos, ni
ATP.
En efecto, veremos que muchos grupos funcionales distintos del fosfato, por ejemplo,
tomos de hidrgeno, grupos acetilo, se transfieren enzimticamente mediante
reacciones consecutivas que poseen intermediarios comunes, tales reacciones pueden
analizarse termodinmicamente por los mismos mtodos que se han desarrollado para
el caso especial de las transferencias del grupo fosfato.
ATP
P UTP
Polisacridos
ATP
P GTP
Protenas
ATP
P CTP
Lpidos
ATP
P CTP
P GTP
ARN
P UTP
ATP
P d ATP
P d GTP
ADN
P d TTP
P d CTP
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Todas estas canalizaciones conectan con el ATP mediante la enzima nuclesidos
difosfoquinasa presente en las mitocondrias y en el citoplasma de la clula, cataliza las
reacciones del tipo mostrado en el esquema.
Cada tipo de nuclesido trifosfato posee una funcin especializada. Por ejemplo: el
UTP es el dador de fosfato inmediato, y por lo tanto el donador de energa de reacciones
que conducen a la sntesis de polisacridos.
PPi + H2O 2 Pi
Esta hidrlisis secundaria del pirofosfato constituye una etapa valiosa de liberacin de
energa, la cual se utiliza para asegurar que ciertas reacciones biosintticas se realicen
por completo.
El Pi formado se utiliza para la regeneracin del ATP a partir de ADP. La adenilato-
quinasa cataliza la refosforilacin del AMP a ADP.
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TEMA XIV: GLUCOLISIS
Vamos a considerar los mecanismos por los que las molculas combustibles se
degradan y su energa se conserva en forma de energa de enlace fosfato ATP.
Se estudiarn los procesos conocidos como fermentacin, mediante el cual muchos
organismos extraen energa qumica de la glucosa y otros combustibles en ausencia de
oxgeno molecular.
Nos referimos primeramente el proceso de fermentacin para luego poder hablar de
respiracin.
FERMENTACION Y RESPIRACION
glucosa glucosa
con CO 2
CO2 + H2O
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proceso se denomina gluclisis que significa lisis de la glucosa.
triosas triosas
C C C C C C C C C C C C
En estas reacciones tenemos que hablar de las reacciones de xido reduccin que se
producen en todo organismo donde el agente oxidante recibe los electrones y el agente
reductor entrega electrones.
En este caso de la fermentacin alcohlica el etanol es una molcula relativamente
reducida rica en H 2 , pobre en O 2 . La molcula de CO 2 es relativamente oxidada, pobre
en H 2 .
En el caso de la fermentacin homolctica el grupo metilo se halla ms reducido que el
grupo carbonilo. Veamos la reaccin completa:
O
C
H CH3
HC OH
HO C H + 2 Pi + 2 ADP 2 CH OH + 2 ATP + 2 H2O
HC OH COOH
HC OH
CH2 OH
Etanol
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ANALIZAREMOS LA REACCION ENERGETICA DE LA GLUCOLISIS
ETAPA DE LA GLUCOLISIS:
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glucosa almidn
glucogeno
ATP Pi
FASE I glucosa-1-P
galactosa ADP
manosa glucosa-6-P
Congregacin de azcares sencillos y pentosa
su conversin en fosfato de fructosa-6-P
gliceraldehdo; entrada de ATP ATP ADP
fructosa-1-6-di P
glicealdehdo-3-P (2)
2 NAD+
Pi
fosfoenolpiruvato (2)
2 ADP
2 ATP piruvato (2)
2 NAD+
2 lactato
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1. Fosforilacin de glucosa por el ATP: catalizada por dos enzimas: la
hexoquinasa y glucoquinasa.
Mg++
ATP + glucosa ADP + glucosa-6-P G 4 kcal
O O
H H H H
H H
+ ATP ADP + G -4 kcal
OH H OH H
OH OH OH OH
H OH H OH
glucosa glucosa-6-fosfato
CH2 OPO 3=
CH2 OPO 3=
O O
H H CH2 OH
H
OH H OH H G 0.4 kcal
OH OH OH OH (reaccin reversible)
H OH H OH
glucosa-6-P fructosa-6-P
H OH H OH
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4. Escisin de la fructosa 1 - 6 difosfato por una aldosa (la fructosa-1-6-difosfato
gliceraldehdo 3-liasa) dando fosfato de dihidroxiacetona + gliceraldehdo-3-
fosfato.
1. CH2 OPO 3=
2. C O H
1. CH2 OPO 3= 4. C O
3. HO CH
G 5.73 kcal
2. C O + 5. H COH
4. H COH
3. CH2 OH 6. CH2 OPO 3=
5. H COH
6. CH2 OPO 3=
Solamente uno de los dos fosfatos de triosa, el gliceraldehdo 3-fosfato, puede ser
directamente degradado en las reacciones posteriores de la gluclisis. El otro, el
fosfato de dihidroxiacetona, se convierte reversiblemente en gliceraldehdo-3-fosfato
por accin de la enzima triosa fosfato isomerasa.
O
CH2 OPO 3= C
H
G 1.83 kcal
C O H C OH
SEGUNDA FASE
1. Oxidacin del gliceraldehdo 3 P a 1-3 difosfoglicerato.
La enzima que acta es G_3_fosfato deshidrogenasa, o gliceraldehdo 3 fosfato
deshidrogenasa.
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O
C O PO 3=
H
C O HC OH
CH2 OPO 3=
O
1. C 3. CH2 OPO 3=
O PO 3=
- -
COO COO
3-fosfoglicerato 2-fosfoglicerato
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CH2 OH CH2
enolasa
H COPO 3= C O PO 3= + H2O G 0.44 kcal
- -
COO COO
2-fosfoglicerato fosfoenolpiruvato
CH3
CH2
G 7.5 kcal
C O PO 3= + ADP ATP + C O
(reaccin irreversible)
- -
COO COO
fosfoenolpiruvato piruvato
CH3
CH3
+
C O + NADH + H+ H COH + NAD G 6.0 kcal
-
- COO
COO
piruvato lactato
25
BALANCE GLOBAL
2 ADP
26
TEMA XV: CICLO DE LOS ACIDOS TRICARBOXILICOS Y VIA DEL
FOSFOGLUCONATO
En primer lugar, el producto de la gliclisis, el cido lctico, es una molcula casi tan
compleja como la de glucosa y sus tomos de carbono todava se hallan en un
mismo estado de oxidacin. El CO 2 , producto de la respiracin, es una molcula
mucho ms sencilla y pequea que la glucosa, y su tomo de carbono est
completamente oxidado. En segundo lugar, la cantidad de energa que se libera en
la transferencia de un par de electrones desde una molcula combustible
determinada a un aceptor electrnico, vara con la naturaleza del aceptor. Puede
liberarse mucha ms energa cuando el aceptor electrnico el oxgeno molecular,
como ocurre en la respiracin, que cuando es el piruvato el que acta como aceptor,
que es el caso de la gliclisis.
27
ORGANIGRAMA RESPIRATORIO
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Carbohidrato
Acetil-CoA
oxalacetato citrato
cis-aconitato
Ciclo del cido malato
isocitrato
tricarboxilo CO2
fumarato -oxoglutarato
CO2
succinato
2H 2H 2H 2H
flavoproteina
coenzima Q
Transporte electrnico
y fosforilacin citocromo b
oxidativa ADP + Pi ATP
+ citocromo c
2H
citocromo a + a3
+
ADP A Pi ATP
2 H+ + 1/2 O2 H2O
29
Oxidacin del Piruvato a acetil CoA
O
Piruvato
CH3 C COOH
NAD+ NADH2
HS-CoA CO2 O
CH3 C S CoA + CO 2
Acetil-CoA
G 8.0 kcal
S
CH2
CH
(CH 2)4
30
COOH
La decarboxilacin oxidante del piruvato a acetil CoA CO2 necesita tres enzimas
diferentes y 5 coenzimas que constituyen el:
Piruvato-deshidrogenasa
enzimas dihidrolipoil-transacetilasa
dihidrolipoil-deshidrogenasa
Sistema de la
piruvato-deshidrogenasa Coenzima A
cido lipoico
coenzimas Pirofosfato de tiamina (TPP)
NAD
FAD
COOH
COOH CH2
C O HO C COOH citrato
COOH COOH
En esta reaccin el grupo metilo (CH3 ) de la acetil CoA se condensa con el tomo
de carbono carbonlico del oxalacetato con la hidrlisis del enlace tioster y
formacin de la CoA SH libre.
O
C
OH H2O
COOH COOH
citrato cis-aconitato
31
H2O
COOH CH2 CH CH COOH
COOH OH
isocitrato
CO2 O
COOH CH2 CH CH COOH COOH CH2 CH2 C COOH
COOH OH NAD+
NADH2
isocitrato alfa-cetoglutarato
succinato fumarato
6. Se produce una hidratacin del fumarato dando malato, actuando coma catali-
zador la fumarasa.
OH
COOH CH CH COOH + H2O COOH C CH2 COOH
Fumarato H Malato
7. En la ltima reaccin del ciclo la malato-deshidrogenasa dependiente del NAD
cataliza la oxidacin del malato a oxalacetato.
OH O
+
COOH C CH2 COOH + NAD COOH C CH2 COOH + NADH2
H
Malato Oxalacetato
Podemos ahora resumir los productos producidos en una vuelta del ciclo del cido
tricarboxlico.
Dos tomos de carbono aparecen en forma de CO 2 equivalentes, aunque no
idnticos, a los dos tomos de carbono del grupo acetilo que ingresa en el ciclo. Por
deshidrogenacin enzimtica se producen cuatro pares de tomos de hidrgeno,
tres pares se utilizan para reducir el NAD y uno para reducir el FAD.
En ltimo trmino, estos cuatro pares de tomos de hidrgeno y electrones se
combinan con el oxgeno, una vez realizado su transporte a lo largo de la cadena
respiratoria.
Muchas clulas disponen, adems del ciclo del cido tricarboxlico, de otra ruta de
degradacin de la glucosa cuya primera reaccin es la oxidacin de la glucosa-6-
fosfato a 6-fosfato gluconato.
La ruta del fosfogluconato, conocida como ruta de los fosfatos de pentosa o
desviacin del monofosfato de hexosa, no es una ruta principal de oxidacin de la
glucosa.
Su objetivo primordial, en la mayor parte de las clulas, es obtener NADP reducido
en el citoplasma extramitocondrial.
Una segunda funcin es la produccin de pentosas en especial D-ribosa, que se
emplea en la sntesis de cidos nucleicos.
Otra funcin importante consiste en participar en la formacin de glucosa, a partir del
CO 2 , en las reacciones de fotosntesis.
Las diversas etapas de la ruta del fosfogluconato tienen lugar en la porcin soluble
del citoplasma extramitocondrial de la clula.
33
1. La primera reaccin de la ruta del fosfogluconato es la deshidrogenacin
enzimtica de la glucosa-6-fosfato por la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa
para formar 6-fosfogluconato.
H C OH C O COOH
H C OH H C OH H C OH
O + NADP+ O +NADPH
2
HO C H HO C H HO C H
H C OH H C OH HC OH
H C H C HC OH
COOH C O
H C OH
H COH
H C OH
+ NADP+ H COH + NADPH2 + CO2
HO C H
CH 2OPO 3=
H C OH
CH 2OPO 3=
6-fosfogluconato ribulosa-5-fosfato
34
CH2 OH
C O
HO C H xilulosa-5-fosfato
CH2 OH
HC OH
C O sa
m era
epi CH 2OPO 3=
H C OH
CHO
H C OH
iso HC OH
me
CH 2OPO 3= ras
a
H C OH ribosa-5-fosfato
ribulosa-5-fosfato
H C OH
CH 2OPO 3=
C O HCOH C O
HO C H + H C OH HO C H + CHO
H C OH H C OH HC OH HC OH
HC OH
CH2 O PO 3=
Debe observarse que uno de los productos de la accin de la transcetolasa es el
xilulosa-5-P ribosa-5-P sedoheptulosa-7-P gliceraldehdo-3-P
35
gliceraldehdo-3-P que es un intermediario de la secuencia glicoltica. Su formacin
constituye un lazo de conexin entre la va glicoltica y la del fosfogluconato.
CH2 OH CH2 OH
C O C O
HO C H CHO HO C H CHO
H C OH + H C OH H C OH + HC OH
H C OH CH2 O PO 3= H C OH HC OH
CH2 O PO 3=
H C OH CH2 O PO 3=
CH2 O PO 3=
36
TEMA XVI: TRANSPORTE DE ELECTRONES Y FOSFORILACION OXIDATIVA
Veremos en este captulo que los pares de electrones derivados de los inter-
mediarios del ciclo del cido tricarboxlico fluyen a lo largo de una cadena de varios
eslabones, constituidos por enzimas de transporte electrnico, con niveles de
energa sucesivamente inferiores hasta reducir al oxgeno molecular, que es el
ltimo aceptor electrnico, en la respiracin. Durante este proceso se conserva gran
parte de la energa libre de estos electrones en forma de energa del enlace fosfato
del ATP; el proceso se denomina fosforilacin oxidativa.
El transporte electrnico y la fosforilacin oxidativa suceden en casi todas las clulas
aerobias, las enzimas que catalizan estas reacciones se hallan localizadas en la
membrana interna de las mitocondrias.
Reacciones de oxidacin-reduccin
carga 0 carga 2
carga 2 carga 0
37
Resumiendo:
H H H H
H2O -2H H2O -2H
H C H H C OH H C O H C O CO 2
-2H -2H
H H
cido anhdrido
metano metanol metanal carbnico
metanoico
prdida de oxgeno
reduccin ganancia de electrones
ganancia de hidrgeno
Por dicha razn el agua muestra muy poca tendencia a perder electrones y a formar
oxgeno molecular. Dicho de otro modo, el oxgeno molecular tiene gran afinidad por
los electrones, superior que la de aceptores biolgicos de electrones tales como el
NAD , las flavoprotenas y los citocromos.
Cadena respiratoria:
cit. b c a+ a3
Enzimas de xido-reduccin:
Tres son las clases principales de enzimas que participan de la corriente del
transporte electrnico desde los sustratos orgnicos hasta el oxgeno molecular.
De acuerdo al orden en que participan son los siguientes:
1. Deshidrogenasas ligadas a la piridina que requieren NAD o NADP como coen-
zima. Participan en la primera parte del eslabn:
Sustrato reducido NAD+
FADH + H CoQ
FAD CoQH + H +
cit. b c a+ a3
40
Deshidrogenasa ligada a la piridina:
+ O adenina
HO P O H2C
H H
O OH OH
CONH 2
+ O +
HO P O H2C N
H H
O
OH OH
H H
CONH 2 CONH 2
+ 2H + H+
+
N N
R R
41
Deshidrogenases ligadas a la flavina:
6-7 dimetil-iso-aloxacina
CH2
CH2
CH2
riboflavina CH2
(vitamina B2)
CH2
FDN
O OH
+ O adenina
HO P O P OCH2
H H
O O
H
OH OH
FDN: resulta de la unin pirofosfrica entre el FMN y el AMP. La parte activa del
FAD y del FMN es el anillo de isoaloxacina.
O H O
H N H
N
CH3 N CH3 N
CH3 CH3
N N O N N O
R R H
HC CH
N +++
Fe
++
N Fe HN
N
HC CH
Forman quelatos (literalmente, cuatro dientes) con iones metlicos como el hierro,
por ejemplo. En los citocromos, el tomo de Fe experimenta cambios reversibles
entre las formas Fe (II) y Fe (III); su funcin real es la de desempear el papel de
transportadores electrnicos.
44
Acoplamiento de la fosforilacin oxidativa al transporte electrnico
y de su componente endergnico:
3 ADP + 3 Pi 3 ATP + 3 H2O G 3 7.3 21.9 kcal
2.
2 piruvato 2 acetil CoA
Resumiendo:
a .. 6 ATP
b .. 6 ATP
c .. 6 ATP
d .. 4 ATP
e .. 2 ATP
24 TP
1. .. 2 ATP
2. ... 6 ATP
24 glucosa + 6 O2 + 36 Pi + 36 ADP
3. ..
ATP
6 CO2 + 36 ATP + 42 H2O
4. .. 4 ATP
36
ATP
componente endergnico
36 Pi + 36 ADP 36 ATP + 36 H2O G 263 kcal
46
263
100 39%
680
NADH + H+ NAD+
DIHIDROXICETONA-P GLICEROL-FOSFATO
NAD
FAD
ATP
ATP MITOCONDRIA
O2
47
TEMA XVIII: Oxidacin de los cidos grasos
Los cidos grasos que experimentan oxidacin en los tejidos de los animales
superiores provienen del fluido extracelular o bien de los lpidos intracelulares
endgenos. La sangre de los vertebrados contiene cantidades considerables de
triacilgliceroles y de fosfoglicridos, as como cantidades muy pequeas de cidos
grasos libres unidos a la protena seroalbmina, que acta transportando los cidos
grasos. Estos ltimos son oxidados en tejidos tales como el corazn y el msculo.
La fuente endgena principal de cidos grasos combustibles es grasa de depsito,
en foma de gotitas de grasa del citoplasma, constituido, en su mayor parte por
triacilgliceroles.
Resumiendo lo expuesto:
cidos grasos a
oxidarse provienen 1. grasa de depsito constituida
por triacilgliceroles.
b. fuente endgena
2. fosfoglicridos de las
membranas
A. Hidrlisis intracelular
Los cidos grasos deben hallarse en forma libre, es decir, no esterificados para que
puedan experimentar el proceso de activacin y oxidacin. Para ello, deben en
primer lugar, hidrolizarse por la accin de lipasas intracelulares para rendir cidos
grasos libres y glicerina. Se sabe relativamente poco acerca de la secuencia y
48
detalles de la hidrlisis intracelular de los lpidos. Sin embargo, en general, no tiene
lugar acumulacin significativa de cidos grasos o de otros productos de hidrlisis
que seran txicos para la estructura de la membrana. Evidentemente, la velocidad y
la ruta de hidrlisis de los lpidos intracelulares est ajustada a la velocidad de
utilizacin de los cidos grasos.
Tres enzimas diferentes catalizan la formacin de steres acil-CoA graso; cada una
de ellas se especfica para un determinado intervalo de longitud de cadena de cido
graso.
Las ltimas dos tioquinasas activan tanto los cidos grasos saturados como los no
saturados. Las tres se encuentran en la membrana exterior de la mitocondria. Las
propiedades y mecanismos de las tres tioquinasas, son ms o menos idnticos. La
reaccin global catalizada por las tioquinasas ligadas al ATP es la siguiente:
A medida que el enlace tioster se forma entre el grupo carboxilo del cido graso y el
grupo tiol de la CoA, el ATP experimenta ruptura pirofosfrica y rinde AMP PPi . A
su vez el PPi formado resulta hidrolizado por la pirofosfatasa inorgnica.
49
PPi + H2O 2 Pi
Transferencia de carnitina
Los cidos grasos superiores poseen una capacidad limitada para atravesar la
membrana interior de la mitocondria en forma de steres de CoA; pero su entrada es
estimulada por la carnitina. En el proceso acta una enzima la acil-CoA graso:
carnitin transferasa de cido graso, que cataliza la transferencia del grupo acilo
graso desde su enlace tioster con la CoA, a un enlace ster con la carnitina que es
un enlace de elevada energa.
CH3 O
+
CH3 N CH2 CH CH2 COOH + R C S CoA
CH3 OH
CH3
+
CH3 N CH2 CH CH2 COOH + CoA SH
CH3 O
C O
50
como sustrato para el ciclo de oxidacin del cido graso, que tiene lugar en el
compartimiento interno de la matriz. Las mitocondrias contienen otro tipo de acil-
tioquinasas que participan en la activacin del cido graso. Esta enzima necesita
GTP en lugar de ATP y produce GDP Pi .
2 3
R CH2 CH2 C SCoA acil-graso CoA
E FAD oxi.
H O
D. Etapa de hidratacin
La hidratacin reversible del doble enlace de los steres 2,3 enolicos del CoA
para formar beta-hidroxiacil-CoA es catalizada por la enzima enoil-hidratasa.
51
H O
OH O
H
O O
+
R CH2 C CH2 C SCoA + NADH + H
O
O
R CH2 C SCoA + CH3 C SCoA
Balance de la oxidacin
Ahora podemos escribir la ecuacin para las siete vueltas del espiral necesarias
a fin de convertir una molcula de palmitoil-CoA en 8 molculas de acetil CoA (el
cido palmtico tiene 16 tomos de carbono). Cada molcula de FADH 2 cede un
par de equivalentes electrnicos a la cadena respiratoria a nivel de la CoA y se
generan 2 molculas de ATP. De modo anlogo, la oxidacin de cada molcula
de NADH da por resultado la formacin de 3 molculas de ATP. Por lo tanto, se
forman un total de 5 molculas de ATP por molcula de acetil-CoA escindido.
Podemos escribir ahora la ecuacin que tambin comprende las fosforilaciones:
(1) pamitol CoA + 7 CoA + 7 O2 + 35 Pi + 35 ADP
Las 8 molculas de acetil CoA formadas en el ciclo del cido graso pueden
incorporarse ahora al ciclo de Krebs
(2) 8 acetil CoA + 16 O2 + 96 Pi + 96 ADP
Los cidos grasos no saturados, son oxidados por las mismas rutas generales que
los cidos saturados; pero se plantean dos problemas:
1. Los dobles enlaces de los cidos grasos no saturados existentes en la
naturaleza se hallan en la configuracin geomtrica cis, mientras que los
steres 2,3 insaturados del acil CoA que actan como intermediarios en
la oxidacin de los cidos grasos saturados, son trans.
2. Los dobles enlaces de la mayor parte de los cidos grasos no saturados
aparecen en posiciones tales que la eliminacin sucesiva de fragmentos
de dos tomos de carbono rinde un acil-CoA graso 3,4 en lugar de 2,3 .
53
Se ha resuelto este problema con el descubrimiento de una enzima auxiliar, la 3,4 -
cis- 2,3 -trans-enoil CoA-isomerasa que cataliza el desplazamiento del doble enlace
desde la configuracin 3,4 -cis a la 2,3 -trans que es el sustrato normal de la
siguiente enzima de la secuencia de oxidacin del cido-graso.
Cuerpos cetnicos y su oxidacin
CH3 O
OH
PROTEOLISIS
Antes que las protenas puedan incorporarse a las rutas catablicas deben
experimentar hidrlisis completa hasta transformarse en aminocidos ya que las
molculas proteicas intactas y la mayora de los pptidos no pueden atravesar la
membrana celular, mientras que los aminocidos libres son absorbidos fcilmente.
Los pptidos extracelulares y las protenas con frecuencia son hidrolizados por
accin de enzimas segregadas al entorno, por ejemplo muchos microorganismos
forman y segregan peptidasas y enzimas proteolticas. Sin embargo, la protelisis
extracelular ha sido estudiada con mximo detalle en el tracto digestivo de los
vertebrados (ver proceso en pgina 460 de Lehninger). Por accin combinada de las
enzimas proteolticas segregadas por el estmago, el pncreas y el intestino
delgado, las protenas ingeridas se hidrolizan por completo hasta aminocidos, los
cuales son absorbidos por las clulas epiteliales del intestino delgado, mediante un
transporte activo que requiere energa. Los aminocidos son enviados luego a los
55
tejidos por medio de la sangre. Al entrar en las clulas individuales tambin por
transporte activo, se incorporan a los canales metablicos. Se sabe muy poco de la
protelisis intracelular, que en algunos tejidos como el hgado, tiene lugar a un ritmo
elevado.
Alanina
Arginina
Cistena Glutamato
Piruvato Histidina
Glicocola
Glutamina
Serina
Prolina
Treonina
Oxoglutarato
Isocitrato
Isoleucina
Leucina Isoleucina
Triptfano Succinil-CoA Metionina
Citrato Valina
Acetil-CoA Succinato
Oxalacetato Tirosina
Fumarato
Acetoacetil-CoA
Fenilalamina
Malato
Aspartato
Fenilalanina
Asparagina
Tirosina
Leucina
Lisina
Triptfano
Ejemplo de transaminacin:
R' O O NH2
COOH H
O
C O
CH2 O P OH El fosfato de piridoxal es tambin el
HO C grupo prosttico de cierto nmero de
C C
OH otras enzimas que catalizan
Fosfato de piridoxal 57
C CH
H3C N
reacciones en las que intervienen -aminocidos. En principio el fosfato de piridoxal
acta como un transportador de grupos O, en algunos casos de aminocidos. La
clave de accin es su grupo aldehdo que puede formar una base de Shiff o
cetimina, con amonaco o con diversas aminas.
NH2 O H H
R1 CH COOH + E C H H2O + R1 C N C E
Base de Shiff I
enzima-fosfato de
COOH oxocido piridoxamina
Base de Shiff II
oxocido COOH
aceptor de NH2
Base de Shiff III
H H O NH2
R2 C N C E E C H + R2 CH COOH
DESAMINACION OXIDATIVA
Este proceso ocurre en la mitocondria y los grupos NH2 recogidos de los diferentes
aminocidos por la accin de las transaminasas, aparecen en el ltimo trmino en
forma de grupos -aminos del L-glutamato.
En algunas clulas, particularmente en las bacterias, el glutamato experimenta una
58
desaminacin oxidativa rpida, catalizada por la glutamato-deshidrogenasa ligada a
la piridina.
Glutamato deshidrogenasa
Treonina
Cistina
Glicocola
cido Pirvico
Acetil-CoA
El esquema muestra los portales de entrada por los que penetran en el ciclo de los
cidos carboxlicos, los esqueletos carbonados de los diferentes aminocidos. Las
rutas de los 20 A.A. dependen del punto de entrada. El punto principal de entrada en
el ciclo es por la va del acetil-CoA, diez aminocidos penetran por esta ruta, cinco
de ellos se degradan al acetil-CoA por la va del piruvato y los restantes por la del
acetoacetil-CoA.
59
NH2
CH3 CH CH COOH
OH
Treonina
O
Glicocola H2N CH2 COOH CH3 C
H acetaldehdo
Serin-
hidroximetil
CH OH tranferasa
NH 2 NAD+
ATP
Serina CH2 CH COOH CoA
OH Serina
deshidrasa
O
Acetil CoA
Los cinco aminocidos que penetran por la va del piruvato son la alanina, la
cistena, la glicocola, la serina y la treonina (ejemplo anterior). La alanina rinde
directamente piruvato por transaminacin con el -cetoglutarato. En el ejemplo
puede verse como se degradan hasta piruvato, la treonina, la glicocola y serina.
Arginina Prolina
Semialdehdo
glutmico
Histidina Glutamina
cido Glutmico
cetoglutar ato
60
El esquema muestra las rutas que conducen hasta el -cetoglutarato de los
distintos A.A. para poder entrar al ciclo de Krebs.
METIONINA
cido oxobutrico
Isoileucina
Propionil-CoA
Valina
Metilmalonil-CoA
Succil-CoA
61
FORMACION DE PRODUCTOS DE EXCRECION NITROGENADOS
CICLO DE LA UREA
La formacin de urea tiene lugar casi por completo en el hgado de los organismos
ureotlicos, es catalizada por un mecanismo cclico denominado ciclo de la urea.
Penetran en este ciclo dos grupos aminos que proceden inicialmente de los -
aminocidos por desaminacin, junto con una molcula de CO 2 y forman arginina a
partir de la ornitina, diaminocido homlogo de la lisina. Esta parte del ciclo de la
urea tiene lugar en casi todos los organismos capaces de realizar la biosntesis de la
arginina pero solamente los animales ureotlicos poseen grandes cantidades de
enzima arginasa, que cataliza la hidrlisis irreversible de la arginina para formar urea
regenerando ornitina. La urea molcula neutra soluble en H2 O se excreta con la
orina.
- NH2 arginina
cido
- NH2 asprtico arginasa
- NH2 carbamil-
fosfato
C NH2 ornitina
El primer grupo NH2 que entra al ciclo surge en forma de NH3 libre como
consecuencia de la desaminacin oxidativa ligada al NAD del glutamato en las
mitocondrias.
Entonces el NH3 libre es utilizado junto con el CO 2 para formar fosfato de carbamilo
en una reaccin compleja, catalizada por la carbamil-fosfato sintetasa.
62
-
O O
-
CO2 + NH3 + 2 ATP + H2O H2N C O P O + ADP + Pi
O
Fosfato de carbamilo
EXCRECION DE AMONIACO
Se cree que en los organismos amonotlicos los grupos NH2 derivados a diversos
-aminocidos, se transaminan para formar glutamato, que experimenta despus
una desaminacin oxidativa mediante la glutamato-deshidrogenasa. El NH3 as
formado se convierte despus en N 2 amdico de la glutamina, que es la forma de
transporte del NH3 en la mayor parte de organismos. La glutamina se forma por
accin de la glutamina-sintetasa, a partir de cido glutmico.
NH2 O NH2
Mg++
HOOC CH2 CH2 CH COOH + NH3 + ATP H2N C CH2 CH2 CH COOH + ADP + Pi
63
La glutamina rinde NH3 libre en los tbulos renales de la mayora de los vertebrados,
pero esta reaccin predomina en los organismos amonotlicos. La reaccin es:
OH
C N C N O2
N C C N C
NH2
Amino cidos C H
Xantin
C C C C
N N HO N N oxidasa
H
H
O H
H C N
N C
C O
C C
O N N
H H
Acido Urico
(forma oxo)
64
TEMA XX: BIOSINTESIS DE CARBOHIDRATOS
G 0.5 kcal
G 0.7 kcal
Sumando todas las reacciones, escribimos la ecuacin global, teniendo en cuenta la
suma algebraica de los G .
G 0.2 kcal
Esta reaccin global es reversible, puesto que su variacin de energa libre estndar
es muy pequea. Tender a desplazarse a la derecha siempre que el cociente (ATP)
/ (ADP) tenga un valor elevado y que haya presente un exceso de piruvato. Para
fosforilar una molcula de piruvato se consumen dos enlaces de alto valor
energtico. Practicando le direccin energtica de la ecuacin, se observa que el
proceso endergnico que requiere energa es:
enolasa
fosfoenol-piruvato + H2O 2-fosfoglicerato
(1)
2-fosfoglicerato 3-fosfoglicerato
(2)
ATP + 3-fosfoglicerato ADP + 1,3-difosfoglicerato
(3)
1-3 difosfo-glicerato + NADH2 gliceraldehido-3-fosfato + NAD+ + Pi
(4)
gliceraldehdo-3-P dihidroxiacetona-P
(5)
gliceraldehdo-3-P + dihidroxiacetona-P fructosa-1-6-di P
G 0.4 kcal
Resumiendo:
Por cada molcula de glucosa que se forma se consumen seis enlaces fosfato de
alto valor energtico y se requiere dos molculas de NADH2 como reductor.
67
La reaccin global es exergnica.
glucgeno
UDP-glucosa
UTP
glucosa-1-P
fructosa-1-6 P
gliceraldehdo-3-P
3-P-glicerato
2-P-glicerato
fosfoenolpiruvato
GTP
CO2
oxalacetato
malato
malato
oxalacetato
piruvato
piruvato
68
Gluconeognesis a partir de los intermediarios del ciclo de los cidos
tricarboxlicos
Acido oxalactico.
COOH
CH2
C O
COOH
En los tejidos de los animales superiores no hay formacin neta de nueva glucosa a
partir de los dos tomos de carbono del grupo acetilo del acetil CoA. Lo que s
sucede es que la condensacin de la acetil CoA con el oxalacetato de citrato que al
oxidarse para dar fosfoenol-piruvato pierde 3 tomos de C en forma de CO 2 . Se
deduce que no puede formar ms glucosa que el oxalacetato. En los tejidos
animales la acetil CoA no puede convertirse directamente en piruvato o en succinato.
En los animales superiores no existe senda metablica alguna por lo que los tomos
de carbono de los cidos grasos puedan ser utilizados para producir nueva glucosa.
69
TEMA XXI: BIOSNTESIS DE LPIDOS
Biosntesis de cidos grasos saturados. Formacin de malonil CoA. Pasos en la
sntesis de cidos grasos. Prolongacin de los cidos grasos saturados en la
mitocondria y los microsomas. Biosntesis de triacil-gliceroles. Biosntesis de
colesterol.
La ruta biosinttica que conduce desde la glucosa a los cidos grasos es importante
en la mayora de los organismos. Puesto que la capacidad de los animales
superiores para almacenar polisacridos es bastantes limitada la glucosa ingerida en
exceso, respecto a las necesidades calricas inmediatas y a la capacidad de
almacenaje, se convierte en cidos grasos, y stos a su vez, en triacilgliceroles que
pueden almacenarse en grandes cantidades en el tejido adiposo. Constituye otro
proceso importante la biosntesis de fosfoglicridos de las membranas, puesto que la
mayora de las clulas experimentan un recambio relativamente veloz. Tambin se
ver la biosntesis de colesterol. Aunque desde el punto de vista cuantitativo se trata
de una va secundaria, el gran nmero de esteroles, biolgicamente activos, que
derivan del colesterol le confiere considerable importancia.
Malonil transferasa
Acil transferasa
Palmitil
transferasa
Enzima condensante
( citonil sintetasa)
Deshidrogenasa
(2 reduccin) SH (resto fosfopantotenil
con grupo SH terminal que
enlaza los intermediarios
aclicos)
Deshidrogenasa
Deshidratasa (1 reduccin)
SH
O O
biotina
CH3 C SCoA + CO2 + ATP HOOC CH2 C S CoA
++
Mn
O O
acil
SH + CH3 C SCoA S C CH3 + HSCoA
transferasa
SH SH
O O O
malonil
S C CH3 + COOH CH2 C SCoA S C CH3 + HSCoA
transferasa
SH S
C O
CH2
COO H
71
SH + CO2
condensante
S
C O
CH2
C O
CH3
SH SH SH
SH S
C O
acil
transferasa CH2
S
CH2
C O
SH CH3
CH2
CH2
CH3
butiril-S-ACP
72
La formacin de butiril-S-ACP completa el primer ciclo, el cual se repite seis veces
ms en el cual una molcula de malonil-S-CoA se incorpora a la ACP para dar
malonil-S-ACP la cual experimenta prdida de CO 2 y condensacin con el acilo
graso que se encuentra en el otro brazo. De sta manera el producto es el cido
palmtico de 16 tomos de carbono. Al final del ciclo se libera la ACP por la accin
de una desacilasa hidroltica.
cido palmitico
SH
El cido palmtico que es el producto final normal del sistema de la sintetasa de los
cidos grasos del citoplasma, puede prolongarse mediante dos tipos diferentes de
sistema enzimticos: el de las mitocondrias y del retculo endoplasmtico.
En las mitocondrias los cidos grasos saturados de 12 a 16 tomos de carbono, en
forma de steres de la CoA, se alargan por adiciones sucesivas de acetil-CoA. La
ruta mitocondrial se realiza por inversin de las mismas etapas implicadas en la
oxidacin, con excepcin de la reduccin del doble enlace que conduce al cido
graso saturado, que se verifica a expensas del NADHP como reductor, y no de la
flavoprotena. El sistema mitocondrial es capaz de alargar tambin los cidos grasos
no saturados.
En los microsomas tanto los steres de cidos grasos saturados, como los de los no
saturados pueden prolongarse, pero en este caso es la malonil-CoA la fuente de
grupos acetilos.
73
Acido palmtico (C16) Acido Esterico (C18)
1 par 1 par
Los cuales sufren ulterior alargamiento y/o desaturizacin. Los cidos linoleicos y
linolnicos no pueden ser sintetizados por los mamferos quienes tienen que
tomarlos de fuentes vegetales por esta razn se denominan cidos grasos
esenciales.
ETAPAS DE LA BIOSINTESIS
- Primera etapa: Acilacin de los grupos oxidrilos libres del glicerol-3-fosfato por
dos molculas de acil-CoA graso, produciendo un cido fosfatdico.
O
CH2 O C R
CH2 OH
O O
+ 2 R C S CoA CH O C R' + 2 HSCoA
CH OH
CH2 O PO 3H2
CH2 O PO 3H2
- Segunda etapa: El cido fosfatdico experimenta una hidrlisis por accin de una
fosfatasa especfica formando diacilglicrido.
O O
CH2 O C R CH2 O C R
O O
CH O C R' + H2O CH O C R' + Pi
BIOSINTESIS DE FOSFOGLICERIDOS
75
Su porcin CMP puede considerarse la portadora del cido fosfatdico. En las
reacciones subsiguientes, cada una de las cuales es catalizada por una enzima
especfica la porcin CMP es desplazada por los alcoholes: serina, inositol, fosfato
de glicerilo.
O
CH2 O C R
O
CH O C R'
CH2
HO P O
HO P O
CH2 O citosina
H H
H
OH OH
76
Acido fosfatdico
CTP
CO2 Pi
Fosfatidil-etanolamina Fosfatidil-glicerina
3 CH3- + CDP-diacilglicrido
Cardiolipina
Fosfatidil-colina
BIOSINTESIS DE COLESTEROL
El cido mevalnico tiene seis tomos de carbono por lo que se forma por
condensacin de tres molculas de acetil-CoA.
NADPH2
hidroxi - metil - glutaril CoA cido mevalnico + NADP + HSCoA
CH3 OH OH
COO H CH2 C CH2 CH2 O P O P OH
O O
O
HO P OH
O
77
El compuesto es muy inestable pierde H3PO 4 y se descarboxila dando
isopentenil-pirofosfato que se isomeriza y d el 3-3'-dimetil-alil-pirofosfato.
CH2
OH OH
C CH2 CH2 O P O P OH
O O
CH3
CH3
OH OH
C CH CH2 O P O P OH
O O
CH3
El escualeno sufre un ataque del oxgeno formando el 2-3 epxido, el cual sufre
una ciclizacin a lanosterol en el cual se producen desplazamientos electrnicos
con el cierre de los cuatro anillos y formacin de colesterol.-
78
TEMA XXII: BIOSNTESIS DE LOS AMINOACIDOS
Se definen a stos como aquellos aminocidos que pueden ser sintetizados por la
rata albina. Conviene considerar en primer lugar este grupo de aminocidos, porque
la mayora de los organismos pueden realizar su sntesis. Adems este grupo se
distingue porque sus rutas biosintticas son ms bien cortas y muestran variaciones
relativamente pequeas de unas especies a otras.
79
BIOSINTESIS DE ACIDO GLUTAMICO, GLUTAMINA Y PROLINA:
O OH
C O P OH
CH2 O
CH2
cido glutamil-fosfrico
H C NH2
COOH
NH2
O
H2C CH2
inhibicin
H
HC C Acido 1~pirroln
N COOH 5 carboxlico
NADH 2
H2C CH2
H
H2C C
N COOH
H
Prolina
ALANINA
O NH2 NH2 O
CH3 C COOH + HOOC CH2 CH2 C COOH CH3 C COOH + HOOC CH2 CH2 C COOH
H H
cetoglutarato
Acido pirvico Acido glutmico Alanina
ACIDO ASPARTICO
O NH2
HOOC CH2 C COOH + Acido glutmico HOOC CH2 C COOH + Acido -oxoglutmico
Acido oxalactico H
Acido Asprtico
NH2 NH2
NH2
HOOC CH2 C COOH + NH3 + ATP C CH2 C COOH + ADP + Pi
O H
H
Acido Asprtico Asparagina
TIROSINA
SINTESIS DE TREONINA
O OH
H
NAD+ C CH2 OH
COOH ATP ADP C O P OH NADH NADH NAD+
O
CH2 CH2
CH2 CH2 O
apartil H C NH2
H C NH2 quinasa H C NH2 H C NH2
COOH COOH
COOH COOH
Acido aspartil Semialdehdo Homoserina
asprtico fosfato asprtico
OH CH2
ATP ADP H+
CH2 O P OH - Pi CH
CH2 O C N CH ENZ.
Complejo enzimtico
C N CH ENZ. -homoserin-fosfato COOH
COOH
Se cree que la secuencia completa tiene lugar con el grupo NH2 del sustrato
unido al grupo aldehdo del fosfato de piridoxal de la enzima como una base de
Schiff, en ste complejo el tomo de H2 es lbil.
El producto final de la secuencia, la treonina, es un inhibidor modulador de la
primera enzima del sistema que es la enzima regulador aspartil-quinasa.
METIONINA
83
O
CH2 OH Succinil CoA CH2 O C CH2 S CH
Cistena
CH2 CH2 CH2 CH2 H C NH2
H C NH2 H C NH2 CH2 H C NH2 COOH
COOH COOH COOH COOH
CH3
SH S
CH2 CH2
Piruvato DA ~ Cobalanina
CH2 CH2
5
N ~ Metil
+ NH2 H C NH2 H C NH2
tetrahidroflorato
COOH COOH
Homocisteina Metionina
84
Mg++
Acido glutmico + Cistena + ATP Glutamilcistena + ADP +P i
HSCoA COOH
CH2 CH2 NH2 CH2 CH2
+
CH2 COOH CH2 CH2
C S CoA C O C O
Glicina
O
H C NH2 CH2
Succinil~CoA
COO H NH2
Acido amino
Acido amino levulnico
oxoadpico
COOH COOH
HOOC CH2 COOH
CH2 CH2
2 H2O CH2 CH2
H C H + CH2
C C
C O C O
CH2 C C H
CH2 H C H N
NH2
NH2 N H H
Porfobilingeno
H
85
Como precursores de la Protoporfirina actan cuatro molculas de porfobilingeno, a
travs de una serie compleja de reacciones, la primera de las cuales la cataliza la
porfobilingeno~desaminasa. Algunas de las etapas de la serie permanecen an
oscuras.
El hierro no se incorpora hasta que se ha completado la molcula de la
protoporfirina. Esta incorporacin requiere una enzima, la hemo-sintetasa o
Ferroquelatasa que est localizada en las mitocondrias.
CH3 CH CH2
C C
HOOC CH2 COOH
CH C C CH
CH2 CH2
H
CH3 C C C C CH3
C C
N H H N
CH2 C C H
N CH2 C C C C CH CH2
NH2 CH2 H
H HC C C CH
COOH
Porfobilingeno
C C
CH2 CH3
CH2
COOH
Protoporfirina IX
86
TEMA XXIII: BIOSINTESIS DE LOS MONONUCLEOTIDOS
Biosntesis de los nucletidos de purina. Vas del cido inosnico hacia los cidos
adenlico y guanlico. Biosntesis de los nucletidos de pirimidina.
C Formiato
8
Formiato C C
2 4
N N
3 9
amida de la glutamina
N9
NH2 de la glutamina glicina
ATP
aminotransferasa
ADP + P
NH 2
PP cido glutmico
R P
O fosforibosilamina
P P O CH2 OH
H H
H H
OH OH 87
fosforibosilpirofosfato (FRPP)
C4 y C5 N7
C8
NH2 NH
CH "CHO" CH2 glutamina
CHO
CoF cido glutamnico
C C
NH NH
O O
R P R P
N3 O C6
N1
N C N
CH CO2 NH2 CH "CHO"
CH CH
C Acido asprtico CoF
NH2 N NH2 N
R P R P
C2
O
C N
NH
CH
CH
N N
R P
Inosina 5' - fosfato
Acido Inosnico IMP
88
Vas del cido inosnico hacia los cidos adenlico y guanlico
H N N
IMP (H+ inosnico)
N N
R P
NAD aspartato
[O]
NADH2 GTP GDP + Pi
O H
N N H N N
O
H R P
N N aspartato
AMP
glutamina H+ glutmico H+ Xntico
R P
O
NH2
H N N
H N N
N N
NH2
N N
R P
R P
89
Vas de la biosntesis de nucletidos purnicos:
En este caso el exceso de ATP, ADP o AMP o de GTP, GDP o GMP producen una
inhibicin a nivel de la enzima que cataliza la reaccin entre el fosforibosilpirofosfato
y la 5 fosforibosilamina, por lo tanto se frena la secuencia metablica y se inhibe la
biosntesis. Es un caso de retroalimentacin negativa.
Es una ruta similar a la de los nucletidos purnicos, pues las bases libres no son
productos intermedios.
Esta ruta es ms simple y se diferencia en que la D-Ribosa se acopla despus que
se ha formado el anillo pirimidnico. El precursor es el cido Ortico.
O
C
H N C H
C C COOH
O N
90
cido ortico
H2O
carbamil PO4
Acido Asprtico Acido Carbamil Asprtico
PO4 Dihidrotasa
NAD PRPP PP
Acido Dihidrtico Acido Ortico Acido Orotidlico
NADH2 fosforibosil-tr OMP
ansferasa
CO2
Acido Uridlico
OMP
descarboxilasa UMP (uridin monofosfato)
O NH2
C C
H N C H ATP ADP + Pi N C H
+ NH3
C C H C C H
O N O N
R P P P R P P P
En Escherichia Coli (bacteria) el que dona el grupo NH2 es el NH3 libre. En los
mamferos es el grupo amino de la glutamina.
91
Acido Asprtico
UMP
UTP
CTP
O O
C C
N5; N10.Metilen FH2
H N CH H H N C CH3
Tetrahidrofolato Dihidrofolato
C CH H C C H
O N O N
Reacciones fosfotransfersicas:
92
TEMA XXIV: NATURALEZA, ESTRUCTURA Y REPLICACION DEL MATERIAL
GENETICO
93
Como las propiedades de la clula estn controladas por genes los caracteres
pueden cambiar por mutacin. De esta manera se pudo conocer la secuencia de
los genes en los cromosomas y saber que los genes poseen un gran nmero de
locus que pueden experimentar mutacin; y que qumicamente estn constituidos
por cido desoxiribonuclico.
Pero el desarrollo ms importante en el campo de le gentica fue:
La enunciacin de la hiptesis de "un gen - una enzima", por Beadle y
Tatum que dice que los genes se expresan a travs de protenas, por lo
tanto, las mutaciones darn origen a protenas alteradas.
El descubrimiento de Avery y Col, que demostraron que el ADN contiene
la informacin gentica.
A-T y G-C
N N
ncleo de ncleo de
AyG TyC
N N N
O sea que ste dogma defini tres procesos fundamentales de los cuales el primero
es el de REPLICA, es decir la "copia" del ADN con formacin de molculas hijas.
Veremos como sucede ste proceso a nivel molecular. La caracterstica ms
sorprendente de la hiptesis de Watson y Crick, desde el punto de vista gentico, en
su postulado de que las dos hebras del ADN duplohelicoidales son complementarias.
La rplica de cada una de ellas conduce a dos molculas hijas de ADN; cada una
contiene una hebra del ADN progenitor. Este proceso se denomina rplica
semiconservadora.
Pero Cmo pueden replicarse simultneamente las dos hebras del ADN de modo
que se formen al mismo tiempo.
ste mecanismo requiere tres enzimas:
ADN - polimerasa dependiente del ADN
ADN - ligasa
Endodesoxiribonucleasa
ADN polimerasa
97
hebra patrn hebra cebadora
2. O bien podra ser utilizado como patrn sobre el cual la enzima podra
construir una hebra complementaria al ADN preformado.
ADN
|
nd ATP
d AMP
nd GTP ADN preformado |
d GMP + 4 PPi
nd CTP Mg++ |
nd TTP d CMP
|
d TMP
OH
HO P H2C
O Base
O
H H
H
O H
O Base
HO P O
H H
H
H2C
OH + PPi
O O H
Base
H H O P OH
H
OH H PPi H2C
OH
O Base
O O P
H H
H
O P O P O P OH
OH H
OH OH OH
H2C
O Base
98
H H
H OH
OH H
Hay un ataque al tomo de fsforo alfa del nucletido trifosforado entrante y provoca
el desplazamiento de su grupo pirofosfato, con formacin de enlace internucletido.
El PPi formado es rpidamente hidrolizado por una pirofosfatasa por lo cual la
reaccin es muy exergnica. La direccin de la sntesis es por lo tanto 5 --- 3'.
ADN ligasa
1. Enlaza extremos de molculas de ADN produciendo formas circulares. Ej.:
bacterias.
2. Cataliza la reparacin de roturas de una cadena de ADN.
O
NMN
Dinucletido
Base CH2 O P OH NAD constitudo
NMN y AMP
5' AMP
OH
H OH
3'
H
Base O
99
OH
O O
OH OH Adenina HO P O
O
OH
Base O
Base O
Mecanismo de replicacin
P 3'
T
A T
5' 3' 5'
cebadora 3' P
P 3' 5' 3'
5'
T A
T
3'
P
P
Kornberg: postul que la rplica comienza con la produccin de una mella o una
rotura en una hebra por accin de una endonucleasa. Unidades de MN adicionadas
por la ADN polimerasa:
5'
5'
101
TEMA XXV: LA TRASCRIPCION DE LA INFORMACION GENTICA
ARN mensajero: teora y propiedades del mensajero. La polimerasa del ARN
dependiente del ADN. Mecanismo de accin: unin, iniciacin, elongacin y
terminacin de la trascripcin. La rplica del ARN.
Para obtener esta enzima en forma pura, Richard Burgen realizaron una
electroforesis en gel de poliacrilamida. As se pudo detectar 4 bandas por tincin de
los polipptidos.
Lo que interesaba saber era si los 4 polipptidos intervenan en la actividad de la
enzima. Para ello eliminaron uno de los polipptidos que denominaron factor
(sigma).
La eliminacin de este factor cambi las propiedades de la enzima ya que perdi su
capacidad de usar como matriz al ADN. La adicin de factor restauraba la
propiedad de la enzima de usar ADN como matriz.
102
Mecanismo de accin de la ARN polimerasa
A T C T G A G A C T A T C T G A G A C T
T A G A T A G A
G T G T
A A
C T C C T C
G G A
3'
P P P OH P P P OH
OH
P
5'
P
103
P
A T C T G A G A C T
T A G A
G T
Se forma el primer enlace
internucletido A
C T C
G A
P P P P OH + P P
5'
A T C T G A G A C T
T A G A
G T
A La enzima se desplaza
por la hebra del ADN
C T C
G A G A
P P P P P P OH
104
Cuando el producto de la elongacin llega a un tamao crtico el factor se libera.
Las cadenas nucleotdicas crecen por adicin secuencial de ribonucletidos al
extremo 3' del dinucletido iniciador.
La entrada de los diferentes sustratos depende de la complementariedad con las
bases de la hebra del ADN que sirve de matriz.
Terminacin de la transcripcin:
1.
secuencia terminadora
reconocida por la enzima
2.
factor de terminacin
Ro
105
TEMA XXVI: EL CODIGO GENETICO
Por ejemplo:
fenilalanina es cofificada por UUU UUC
106
Caractersticas generales del cdigo
107
TEMA XXVII: LA TRADUCCION DE LA INFORMACION GENETICA
Estructura ribosmica
A
| Locus de enlace aminocido
C
|
G C
108
O
H O
P O P O P O CH2
O
R C C OH +
OH
NH2 Adenina
H O O
R C C O P O CH2 + PPi
O Adenina
NH2 OH 109
Segunda fase de activacin
30 S
LP LA
50 S
El ribosoma para que puedan unirse el ARN m y el ARN t AA debe disociarse en sus
dos subunidades. Participan en este proceso factores proteicos F1 F2 F3 (llamados
tambin disociasaribosomal) y GTP. Estos factores permiten la disociacin de los
ribosomas y adems la unin del ARN m en el lugar donde se inicia el mensaje.
110
30 S 30 S 30 S
50 S
AA AA
50 S
LP LA
(metionina) AA AA
2.- En la segunda fase se forma el enlace peptdico por reaccin entre el grupo
amino del nuevo aminoacil - ARN t captado con el grupo carboxilo del AA ya
existente en el LP.
111
NH NH
R CH
R CH
C O LP HO LP descargado
O C
O
NH
NH2
R C H
R CH
C O
C O LA LA
O O
ARNm
O CH
NH
R C H
C O LP
O
LA
112
Cuarto Estado: Terminacin de la cadena polipeptdica
113
TEMA XXVIII: REGULACION DE LA SNTESIS PROTEICA
Las clulas vivas disponen de mecanismos que regulan la cantidad de protenas que
se sintetizan.
Estos mecanismos de regulacin fueron estudiados en clulas bacterianas y se
observ que la cantidad de enzimas que se acumula en el medio depende de la
naturaleza de los nutrientes. En base a todos estos estudios se distingui dos tipos
de respuestas:
De induccin enzimtica
De represin enzimtica
INDUCCION
REPRESIN ENZIMATICA
Regulador
Estructural
114
Cmo funciona el gen regulador tanto en la represin como en la induccin?
Jacob y Monod formularon una hiptesis general respecto a la funcin de los genes
estructural y regulador) en los 2 procesos.
Induccin
El gen regulador transcribe un ARN mensajero que codifica una protena
denominada represor.
ARNm
regulador
operador
estructural represor
Este represor tiene un locus de unin especfico prximo al gen estructural. Este
locus se denomina operador.
Qu sucede en una induccin, es decir, cuando se agrega al medio un sustrato que
debe degradarse? El sustrato, que sera el inductor, se combina con el represor
formando un complejo inductor-represor inactivo, que no puede unirse al operador.
represor
inductor
Represin
Si agregamos al medio un aminocido por ej. histidina, la clula no necesita utilizar
las enzimas que lo sintetizan.
ARNm
regulador
operador
estructural represor
115
En este caso, la histidina se une al represor y forma un complejo represor-
correpresor que se combina al operador; el gen estructural no se transcribe y por lo
tanto no se sintetiza histidina.
Regulacin coordinada
operador z x a b
116
BIBLIOGRAFIA
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3. Murray, R., Darylk, Granner, Meyer, P, & Rotewell, V., (1994) Bioqumica de
4. Kuchel, P., & Ralston, G., (1994) Bioqumica General. Editorial Mac Graw Hill
Interamericana. Mxico.
6. MC Keen, T., 2003. Bioqumica. La base molecular de la vida. Mac Graw Hill
Interamericana.
7. Smith, C., & Wood, E., (1998) Biosntesis. Tercera Edicin. Editorial Addison.
Wesley Ibero
8. americana. USA.
9. Strayer, L., (1990) Bioqumica. Tomo I y II. Tercera Edicin. Editorial Revert.
Buenos Aires.
USA.
11. Torres, H., Carminatti, H & Cardini, C., (1983) Bioqumica. Editorial El Ateneo.
Buenos Aires.
12. Watson, J., (1978) Biologa molecular del gen. Fondo Educativo
Interamericano. Espaa.
117