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Introduccin:
Un hongo es en general, un organismo eucarionte hetertrofo unicelular,
pluricelular o multicelular cuyas clulas se distinguen por tener una pared celular
con el polisacrido quitina.
Los hongos constituyen un
grupo muy amplio de organismos y suelen clasificarse en 2 reinos. Los llamados
hongos verdaderos son aquellos que constituyen el reino Fungi y que tienen las
caractersticas antes descritas, otros hongos se clasifican entre los protoctistas y
tienen caractersticas especiales.
Entre los hongos verdaderos podemos distinguir tres grandes grupos segn su
morfologa; a saber:
-Hongos filamentosos
-Levaduras
-Setas
Aunque esta clasificacin no tiene valor taxonmico resulta prctica para agrupar
distintos tipos de hongos por sus caractersticas afines.
Los hongos filamentosos estn ampliamente distribuidos en la naturaleza y se
caracterizan por presentar como unidad estructural unos filamentos formados por
una o ms clulas llamados hifas, que al reunirse dan lugar a un conglomerado de
nombre micelio. Por su parte las levaduras son hongos unicelulares de clulas
ovales o cilndricas normalmente.
Tanto los hongos filamentosos como las levaduras son microscpicos, pero al
formar colonias grandes (las cuales en un cultivo descienden de una sola clula)
pueden apreciarse la simple vista. Las setas por su parte son hongos filamentosos
que forman cuerpos fructferos macroscpicos. Los hongos filamentosos, setas
incluidas, se consideran organismos talofticos por que tienen un nivel de
organizacin ms sencillo que los tejidos, pero ms complejo que las colonias, en
la que sus clulas se agrupan sin diferenciarse, pero algunas de ellas si se
diferencian, especializndose para la reproduccin, otros organismos talofticos son
las algas.
Los hongos revisten gran inters cientfico puesto que muchos de ellos producen o
participan en la produccin de muchas substancias y bienes tiles al hombre
aunque muchos son tambin importantes agentes infecciosos del hombre.
Agar
Dox
NaNO 3
2g
Agar
Papa
Dextrosa
Agar Extracto
de LevaduraMalta
Agar Extracto
de Malta
Agar
Sabouraud
Dextrosa
NaNO 3
2g
Infusin
de
papa
200 g
KCl
0,5 g
KCl
0,5 g
Dextrosa
20g
Extracto
de
malta
20
g
Extracto
de
levadura 2 g
Extracto
de
Malta
30
g
Peptona
Micolgica 5 g
Peptona
micolgica
g
Dextrosa
40g
Fe 2(SO 4)3
0,05 g
Fe 2(SO 4)3
0,05 g
Agar 15 g
Agar
Agar 15 g
K2HPO 4
1g
K2HPO 4
1g
Sacarosa
30 g
Sacarosa
30 g
MgSO 4.7H2O
0,5 g
MgSO 4.7H2O
0,5 g
Agar 15 g
CuSO 4
1 mL.
de una solucin
al 10% en agua
ZnSO 4
1
mL.
de
una
solucin al 10%
en agua
Agar 15 g
H2O destilada 1
L
H2O destilada 1
L
H2O destilada
1L
H2O destilada
1L
H2O destilada
1L
H2O destilada
1L
pH 5,6
pH 5,6
Esterilizar a 1
atmsfera por
15 minutos.
Esterilizar a 1
atmsfera por
15 minutos.
b) Las muestras:
Czapek
pH 5,6
Esterilizar a 1
atmsfera por
15 minutos.
15 g
pH 5,6
Esterilizar a 1
atmsfera por
15 minutos
pH 5,4
Esterilizar a 1
atmsfera por
15 minutos.
10
Agar 15 g
pH 5,6
Esterilizar a 1
atmsfera por
15 minutos.
Para los estudios de hongos se toman muestras que se preparan para su estudio
segn diversos mtodos por lo general el material blando se agita de forma
continua, durante 2 minutos, o ms, en un matraz con perlas de vidrio, o en una
licuadora durante 30 segundos, o en un homogeneizador durante 1 minuto,
empleando como diluyente una solucin de peptona al 0,1% p/v. El material duro
se muele en un molinillo de granos u otros dispositivos adecuados; es comn usar
solucin fisiolgica, solucin reguladora de fosfatos o agua destilada para permitir
la homogenizacin de la muestra.
En los productos secos, o concentrados, debe evitarse el choque osmtico. Para lo
cual fin, se diluyen con una solucin de sacarosa o glucosa al 20% p/v. Si se trata
de productos salados se emplea un diluyente con 5% p/v de NaCl. Cuando la
muestra tiene gran cantidad de azcares y es muy cida, debe diluirse (1+1) con
solucin de peptona al 0,1% p/v y ajustar el pH a 3,5 - 4,0, aunque el tratamiento
especfico de la muestra depender nicamente de los ensayos a realizar.
c) Aislamiento:
Cuando lo que se busca es aislar hongos filamentosos , el pH de los medios
comerciales (5,4) se puede reducir adicionando cido tartrico al 10% (1 mL por
cada 100 mL de medio de cultivo ya estril y a 50 C). Los medios no deben
calentarse luego de esta acidificacin pues provocara la hidrlisis del aga r y por lo
tanto la prdida de su capacidad para gelificar.
Muchos medios adems estn diseados para inhibir el crecimiento de bacterias
por lo que estn adicionados de substancias como el rosa de Bengala (2,6 Dicloro
4-Nitroanilina) o antibiticos como Penicilina (50 UI/mL) y Estreptomicina (100
UI/mL).
Si se desea favorecer el aislamiento de levaduras se debe alcanzar el pH ptimo
mediante adicin de cido clorhdrico o cido fosfrico, no con cidos orgnicos
pues muchos inhiben el crecimiento de las levaduras. Se procede de igual forma a
como se explic para los hongos filamentosos.
Para favorecer el aislamiento de levaduras sobre el de las bacterias se recurre a
las mismas substancias que se usan con el mismo fin, en el cultivo de hongos
filamentosos, aunque no se utiliza la estreptomicina.
Sea cual sea el microorganismo que se desea cultivar se suelen hacer diluciones
decimales en agua (a veces en otros agentes como solucin salina) de la muestra
de inters para luego tomar un mL. de la dilucin correspondiente y mezclarlo con
el medio de cultivo elegido. Para luego incubarlo a 28 C durante 5 das. Aunque
tales condiciones de incubacin son las ms comnmente sugeridas, de acuerdo a
las condiciones del medio, a las caractersticas ambientales del lugar de origen del