TEMA 6

INTRODUCCIN

LA

ESPECTROMETRA

DE

MASAS

SUS

APLICACIONES EN ANLISIS AMBIENTAL

1. INTRODUCCIN: ESPECTROS DE MASAS.
Los espectros de masas se obtienen convirtiendo los componentes de
una muestra en iones gaseosos, que se mueven rpidamente en presencia de
un campo magntico y se separan en funcin su relacin masa/carga. Un
espectro de masas (Figura 1) representa la abundancia relativa de los distintos
iones en funcin de su relacin masa/carga (m/z).

La espectrometra de masas es una herramienta analtica muy poderosa y

de aplicacin muy general. Los espectros de masas suministran informacin
sobre la estructura de especies moleculares complejas, las relaciones
isotpicas de los tomos en las muestras, y la composicin cualitativa y
cuantitativa de analitos orgnicos e inorgnicos en muestras complejas.

2. INSTRUMENTACIN EN ESPECTROMETRA DE MASAS

El fundamento de la medida de los espectros de masas es muy sencillo,
sin embargo la instrumentacin es extraordinariamente compleja. Las etapas
necesarias en una determinacin de masas son:

a) generacin de molculas (y fragmentos moleculares y/o tomos) en

fase gaseosa
b) ionizacin de los mismos
c) separacin en funcin de su relacin m/z
d) deteccin de los iones
En el diagrama de bloques de la Figura 2, se muestran de forma muy
simplificada los componentes principales de un espectrmetro de masas.

1. Sistema de entrada su objetivo es introducir una pequea cantidad de

muestra (un micromol o menos) en el espectrmetro de masas. A menudo el
sistema de entrada contiene un medio que permite la volatilizacin de
muestras slidas o lquidas.
2. Fuente de ionizacin: convierte los componentes de la muestra en iones.
Esto puede conseguirse por bombardeo con electrones, molculas o fotones.
Alternativamente tambin puede lograrse la ionizacin mediante energa
trmica o elctrica. En muchos casos la fuente de ionizacin y el sistema de
entrada estn combinados en un nico componente. Si se emplean fuentes de
fase gas la muestra es primero volatilizada y despus ionizada, si se emplean
fuentes de desorcin la energa se transmite directamente a la fase slida o
lquida, producindose la ionizacin y la transferencia de los iones al estado
gaseoso.

Existen diversos tipos de fuentes de ionizacin segn los distintos tipos de

muestras y para diferentes aplicaciones. De forma general se distinguen dos
tipos: duras y blandas.
a) Las fuentes duras comunican elevadas energas a los iones formados, de
esta forma estos iones se encuentran en niveles vibracionales y rotacionales
muy elevados. La relajacin de estos iones produce gran cantidad de
fragmentacin, resultando espectros de masas de gran complejidad, nicos
para cada compuesto como una "huella dactilar" y que permiten la
identificacin inequvoca del mismo. Un ejemplo muy representativo de
fuente dura es la de impacto de electrones, en la que la muestra se
bombardea con un haz de electrones de elevada energa.
b) Las fuentes blandas por el contrario, producen relativamente poca
excitacin de los iones de modo que tiene lugar poca fragmentacin y los
espectros son sencillos. Estos espectros suelen permitir la determinacin
exacta del peso molecular de un compuesto. Entre las fuentes blandas ms
empleadas estn la de ionizacin qumica, que emplea un iones gaseosos
reactivos y la de electroaspersin (o electronebulizacin).
En la Figura 3 se muestra la diferencia que presenta un espectro obtenido con
una fuente dura y otro con una fuente blanda.

Existen numerosas fuentes de ionizacin , adems de las mencionadas. Las

principales se resumen en la Tabla 1.

3. Analizador de masas. La funcin del analizador de masas es la separacin

de los iones en funcin de su relacin masa/carga (m/z). La capacidad de un

espectrmetro de masas para distinguir entre masas prximas se expresa

normalmente en trminos de resolucin (R), que se define como:
R = m/m
Siendo m la diferencia de masas entre dos picos adyacentes y m la masa
nominal del primer pico (o la masa media de los dos). Dos picos se consideran
separados si la altura del valle entre los mismos no es superior a un cierto
porcentaje (generalemente un 10%) de la altura de los mismos. La resolucin
que se necesita en un espectrmetro de masas depende de la aplicacin.
Los espectrmetros de masas se suelen clasificar en funcin del principio de
operacin

del

analizador

de

masas.

Una

descripcin

detallada

del

funcionamiento de los diferentes analizadores de masas excede por completo

el alcance de este tema, pero puede encontrase en cualquier libro de Qumica
Analtica Instrumental. Solamente diremos que los ms frecuentes son los de
sector magntico y los de cuadrupolo. Una representacin esquematica de los
mismos se encuentra en las Figuras 4 y 5.

Los

de

sector

magntico

utilizan

un

electroimn

para

dispersar

simultneamente todos los iones en funcin de su relacin m/z.

Los de cuadrupolo en cambio, en determinadas condiciones slo dispersan una
banda estrecha. El corazn del espectrmetro son cuatro barras cilndricas

paralelas que actan como electrodos. Los iones se aceleran en el espacio

entre las barras. La mayor parte de ellos inciden en las barras, solo los que
tienen un determinado valor de m/z

alcanzan el detector. Variando las

condiciones puede hacerse un barrido ms amplio. Estos analizadores son ms

simples, robustos y rpidos que los primeros.
4. Detector. El detector convierte el haz de iones en una seal elctrica que
puede ser procesada y almacenada. El detector ms empleado es el
multiplicador de electrones (Figura 6). El haz de iones incide sobre un ctodo,
arrancando electrones. Despus una serie de dnodos colocados a potenciales
cada vez ms altos amplifican la corriente de electrones.

5. Almacenamiento y procesado de datos. Los espectros de masas se

almacenan y procesan en un ordenador. Es muy frecuente la construccin de
bibliotecas de espectros de masas que permiten la identificacin casi
inequvoca de cualquier compuesto por comparacin.

3. APLICACIONES DE LA ESPECTROMETRA DE MASAS

Las principales aplicaciones de la espectrometra de masas pueden
resumirse en:

a) Identificacin y determinacin estructural de compuestos puros.

A partir del espectro de masas de un compuesto pueden determinarse su masa
molecular y su estructura.
La determinacin de la masa molecular requiere la identificacin del pico del
in molecular. Cuando se emplea la ionizacin electrnica el fragmento inicial
suele ser un in radical positivo (M+), pues a la molcula se le arranca un
electrn. En fuentes de impacto de electrones a veces es dificil identificarlo,
pues suele ser muy pequeo o incluso estar ausente debido a la intensa
fragmentacin. Cuando se emplea la ionizacin qumica se obtienen especies
llamadas quasimoleculares, generalmente en el proceso de ionizacin qumica
se produce una transferencia de protones del gas reactivo a la especie de
inters, obtenindose fundamentalmente el pico a (M+1)+. A veces se produce
transferencia de hidruro de la especie de inters al gas reactivo y se obtiene
el pico (M-1)+.

La determinacin de la frmula estructural es ms compleja. La asignacin de

una nica frmula molecular para un compuesto requiere que el pico del ion
molecular pueda ser identificado y su masa exacta determinada. La
determinacin de la masa exacta del in molecular solo es posible con
instrumentos de alta resolucin, capaces de detectar diferencias de masas de
unas pocas milsimas de unidad de masa. Una unidad de masa atmica es la
doceava parte de la masa del tomo de Carbono 12. La masa atmica
promedio de un elemento viene dada por la suma de las masas de los distintos
istopos multiplicada por su abundancia relativa:
A = A1p1 + A2p2 +....+ An pn

Con un instrumento de baja resolucin solo podran discriminarse tomos con

una unidad de masa de diferencia (1 u.m.a.). Por ejemplo, para diferenciar
iones de igual masa nominal tales como C2H4+, CH2N+, N3+ y CO+ , todos ellos
con 28 u.m.a. de masa nominal pero con masas exactas de 28.0313, 28.0187,
28.0061, y 27.9949, respectivamente, se necesita un espectrmetro de muy
alta resolucin.
Sin embargo, con un instrumento de baja resolucin que solo puede distinguir
entre iones cuyas masas difieren en un nmero entero, puede obtenerse
informacin til sobre la frmula molecular con tal de que el pico del in
molecular sea suficientemente alto y los picos de los istopos se puedan
determinar con precisin. Es los que se conoce como estudio de los patrones
de distribucin isotpica. Nunca aparece un slo pico del in molecular sino
un conjunto caracterstico de picos con intensidades fijas propio de la
presencia de ciertos elementos. As por ejemplo, es muy caracterstico en
compuestos con cloro (ver Figura 7 ).

En compuestos con un atomo de Cl aparecen dos picos debidos al

35

pico de m/z= 35 tiene tres veces la altura del m/z= 37, pues el

Cl y

35

37

Cl. El

Cl es tres

veces ms abundante que el

hay ms posibilidades:

35

37

Cl. Para un compuesto con dos tomos de Cl

Cl-R-35Cl

35

Cl-R-37Cl y

37

Cl-R-37Cl. Aparecen entonces

tres picos. Cuando hay ms tomos de Cl el patrn de dilucin isotpica se va

complicando, pero es siempre identificable.
La determinacin de la estructura molecular puede hacerse a travs del
estudio de los patrones de fragmentacin. El conjunto de los picos con valor
de m/z inferior al del in molecular y su abundancia relativa constituye el
patrn de fragmentacin. Dichos patrones dependen de la estructura y la
qumica de la molcula, as como de la tcnica empleada para la vaporizacin
e ionizacin de la muestra. Aunque rara vez es posible explicar todos los picos
si que es muy frecuente identificar las masas de algunos fragmentos neutros
que comnmente se separan del in molecular. Por ejemplo, suele
identificarse la prdida de agua en las molculas de alcoholes, apareciendo un
pico correspondiente al in (M-18)+.
Los patrones de fragmentacin son extremadamente tiles en la identificacin
de compuestos por comparacin con la informacin contenida en bibliotecas
espectrales, pues constituyen una verdadera "huella dactilar" de cada
compuesto.
b) Anlisis de compuestos orgnicos en muestras complejas: acoplamiento
cromatografa-espectrometra de masas
Aunque la espectrometra de masas es una poderosa herramienta para la
identificacin de compuestos puros, la complejidad de los espectros de masas
dificulta enormemente el anlisis de mezclas, incluso simples. Por ello para el
anlisis de muestras complejas se emplean acoplamientos de esta tcnica con
tcnicas potentes de separacin, como es la cromatografa.
As, el acoplamiento Cromatografa de gases-Espectrometra de masas (GC-MS)
es una de las herramientas ms poderosas al alcance de los qumicos para el
anlisis de muestras complejas. En este caso se efectan los espectros de
masas de los compuestos que salen de la columna cromatogrfica. Es

necesaria una interfase entre ambos instrumentos que tiene como misin
fundamental pasar de la alta presin a la que sale el efluente cromatogrfico
al vaco necesario en el espectrmetro de masas. El acoplamiento tambin es
posible con la cromatografa lquida, solo cambia el tipo de interfase
necesario entre los instrumentos. En general hay que eliminar el eluyente
(fase mvil) antes de la introduccin de los analitos en el espectrmetro.
Estos acoplamientos permiten reunir las ventajas de una tcnica poderosa de
separacin con una herramienta poderosa de identificacin. Pueden
registrarse

espectros

de

masas

lo

largo

de

toda

la

separacin

cromatogrfica. As pueden identificarse inequvocamente los picos y

comprobar incluso su pureza, es decir si la separacin ha sido completa o se
ha producido en algun momento la co-elucin de dos compuestos.
Estas tcnicas resultan extremadamente tiles en el anlisis de ultratrazas
(ng/Kg) de compuestos orgnicos. El anlisis de tan bajos niveles de
concentracin (ultratrazas) puede resultar necesario cuando se trata de
especies de muy alta toxicidad y que se acumulan en los organsimos vivos. Es
el caso de las dibenzoparadioxinas policlorinadas (PCDDs), los dibenzofuranos
policlorinados (PCDFs) o los bifenilos policlorinados. Se analizan en suelos y
organismos vivos principalmente. Se acumulan en la materia orgnica del
suelo.

Tambin se emplean estas tcnicas en anlisis de herbicidas y pesticidas

(Figura 8).

c) Anlisis elemental
La espectrometra de masas es tambin muy usada en la determinacin de
concentraciones

de

elementos

en

materiales

diversos:

minerales,

combustibles fsiles, suelos, partculas atmosfricas, as como aguas y

muestras lquidas.
En estas aplicaciones la muestra se expone a una fuente de alta energa que
atomiza la muestra y convierte el vapor atmico resultante en iones cuya
abundancia relativa se determina mediante un espectrmetro de masas. La

fuente ms conveniente para el anlisis elemental de trazas y ultratrazas

mediante espectrometra de masas es la antorcha de plasma acoplado por
induccin (ICP). Se obtiene as la tcnica acoplada IPC-Masas (ICP-MS).
En la Figura se muestra un ejemplo del espectro de masas de una roca.

El acoplamiento ICP-MS es uno de los mtodos ms avanzados y tiles de

anlisis elemental. Alrededor del 90% de los elementos de la tabla peridica
se han determinado con pocas interferencias. En general los lmites de
deteccin son mejores que los de emisin ptica con ICP y compiten con los
de absorcin atmica electrotrmica, encontrndose lmites de deteccin
entre 0.1-10 ppb para la mayora de los elementos. El anlisis es adems muy
rpido y multielemental.

QUMICA ANALTICA AMBIENTAL

AUTOEVALUACIN

TEMAS 6 y 7

1. Responde razonadamente si las siguientes afirmaciones son verdaderas o

falsas:
a) En cromatografa de lquidos en fase inversa los solutos ms polares son eluidos
de la columna antes que los menos polares
b) Un detector frecuente en cromatografa inica es el detector de ionizacin de
llama
c) En cromatografa de gases para una serie de compuestos de estructura
semejante (ej: Hidrocarburos saturados) el ms voltil es que presenta mayor
tiempo de retencin
d) En cromatografa inica pueden determinarse simultneamente aniones y
cationes en el mismo cromatograma
2. Dibuja un esquema de un cromatgrafo de gases indicando en nombre y
funcin de cada uno de los componentes esenciales.
3. Indica si las siguientes variables influyen decisivamente o no en la separacin
en cromatografa de gases:
a) la velocidad del gas portador
b) la naturaleza de la fase mvil
c) la temperatura
d) la naturaleza de la fase estacionaria
e) el sistema detector empleado
4. En las siguientes determinaciones mediante cromatografa de gases cul es el
detector ms idneo y por qu?
a) determinacin de hidrocarburos
b) determinacin de pesticidas organoclorados
c) determinacin de gases inorgnicos como SO2, CO2...
d) si se quiere demostrar la presencia en una muestra de un
determinado compuesto orgnico (ej. un pesticida) de forma
inequvoca
5. Indica tres detectores que puedan ser empleados en HPLC.
6. En cromatografa de lquidos en fase inversa cundo se producir ms
rpidamente la elucin de los solutos de la columna?
a) empleando una fase mvil de alta polaridad
b) empleando una fase mvil de polaridad moderada
c) es indiferente
7

A qu hacen referencia los trminos blandas y duras que se aplican a

las fuentes de ionizacin en espectrometra de masas?

Qu beneficio aporta el empleo de un espectrmetro de masas como detector

en cromatografa frente a los detectores convencionales?

Qu son los patrones de distribucin isotpica?